专利名称：磷酸川芎嗪和丹参素的组合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的药物组合物及其在心脑血 管方面的药理活性研究。
背景技术：
丹参为常用中药，始载于《神农本草经》，列为上品。中国药典(2005年版)规定丹 参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。丹参具有祛瘀止痛，活 血通经，清心除烦等功能，用于月经不调，经闭痛经，癥瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿 痛，心烦不眠，肝脾肿大，心绞痛。 川芎为常用中药，始载于《神农本草经》，列为中品。中国药典(2005年版)规定川 芎为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎。川芎具有活血行气，祛 风止痛等功能，用于月经不调，经闭痛经，癥瘕腹痛，胸胁刺痛，跌扑肿痛，头痛，风湿痹痛。冠心宁注射液由丹参和川芎组成，具有活血化瘀、通脉养心等功能，用于冠心病心 绞痛[卫生部药品标准，第十七册174页]。丹参素是丹参中的主要活性成份，川芎嗪是川芎中的主要活性成分，二者具有多 方面的药理作用，有相同的药理作用，也有不同的药理作用。由于二者分子结构差异较大， 故药理作用的不同是必然的；即使相同的药理作用，其作用机制也可能是不同的。将二者组 合在一起，能起到互相弥补，取长补短的作用，使药效更好。川芎嗪分为磷酸川芎嗪和盐酸川芎嗪，有人比较了磷酸川芎嗪与盐酸川芎嗪的体 内过程，结果显示，磷酸川芎嗪生物利用度明显地高于盐酸川芎嗪(P < 0. 05) {赵玉清，笔 雪艳.磷酸川芎嗪注射液药理毒理研究综述[J].时珍国医国药，2007，18(7) :1780}，所以 本专利选择磷酸)11芎嗪和丹参素组合。以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的药物组合物及其药理活性或在治疗疾病方 面的应用未见报到。本发明公开了一种以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的药物组合物， 并提供药理实验证明了该药物组合物的药理活性；药理实验表明，磷酸川芎嗪和丹参素组 合物的药理活性好于磷酸川芎嗪的药理活性和丹参素的药理活性，有显著性差异。丹参素的药理作用一、抗动脉粥样硬化作用(1)丹参素有抑制细胞内源性胆固醇(Ch)合成的作用。它具有降低血胆固醇 (Ch)、保护血管屏障、防止脂质沉积及动脉粥样硬化(AS)斑块形成的作用。另外，丹参素还 具有抗脂蛋白氧化作用，从而可防止氧化脂蛋白对细胞的损伤[中草药，1991 ；22(1) :20 23]。(2)近年来，动脉粥样硬化发生的氧化修饰脂蛋白学说受到世界各国学者的广泛关注。 本实验所发现的丹参素具有抑制细胞氧化修饰LDL的作用，为丹参素进一步用于动脉粥样 硬化的防治提供了理论依据[南京医科大学学报，1994 ;14(4) :529 531]。(3)丹参素能 有效保护机体免受过亚硝酸根损伤，防止动脉粥样硬化的形成；丹参素具有抑制细胞氧化 修饰LDL的作用，其抗氧化能力与丹参素的量呈正相关，提示丹参素可用于动脉粥样硬化的防治[中国现代应用药学杂志，2002 ； 19 (2) 132 134]。二、保肝作用(1)丹参素对大鼠免疫性肝纤维化有明显的防治作用。主要机制为丹参素对HSC (肝星状细胞)明显的增殖抑制作用[中华肝脏病杂志，2003;11(5) :288 290]。(2) 氰化钾致肝细胞损伤与自由基毒性作用密切相关，丹参素具有稳定细胞膜、清除自由基的 作用，故对实验性肝细胞损伤具有保护作用[中西医结合肝病杂志，1996 ;6 (3) :29 32]。 (3)丹参素能直接刺激肝细胞增殖，呈剂量依赖关系；丹参素对D-半乳糖胺致肝细胞损伤 和坏死也有保护作用[南京医科大学学报，1996; 16 (4) :346 348]。(4)内毒素可直接导 致肝细胞损伤，丹参素可通过增强SOD活力，减少NO的产生而发挥对内毒素性肝损伤的保 护作用[中西医结合肝病杂志，1999 ；9(2) :30 32]。(5)丹参素具有抗TAA(硫代乙酰胺) 肝损伤和刺激损伤后肝细胞再生的作用，其保护作用高于市场销售的乳猪促肝细胞生长素 (PHGF)[中西医结合肝病杂志，1998，8 (3) :153 155]。(6)多种肝病，特别是严重肝病的情 况下，往往出现肠源性内毒素血症。丹参素通过降低肠源性内毒素水平，改善肝脏微循环障 碍，从而减轻急性重型肝损伤。丹参素可通过降低内皮素(ET)含量减轻肝脏血管收缩，改 善肝脏血液灌注。丹参素可通过抑制iNOS表达减少毒性作用NO产生，而促进eNOS表达诱 生的NO发挥了改善微循环、抑制血小板聚集等保护作用，同时又减少ET的产生，调节血管 活性物质ET、NO平衡，从而改善受损肝脏微循环[山西医药杂志，2006，35 (2) 108 110 ； (6) :507 508]。(7)胰岛素抵抗是引起非酒精性脂肪肝的一个重要因素，导致肝细胞的 糖利用障碍；丹参素可以明显改善脂肪肝细胞对葡萄糖的利用，提高对胰岛素的反应性，降 低胰岛素抵抗的现象[世界华人消化杂志，2005 ；13(15) :1907 1909]。(8)丹参素能明 显的改善非酒精性脂肪肝模型鼠的肝细胞功能，增强肝脏对外源性氧自由基的抵抗力。辛 伐他汀虽能降低血清及组织脂质过氧化水平，但肝内脂质含量却明显增加，ALT、AST较不用 药组显著升高，肝病理检查发现脂肪变明显加重，说明其虽降血脂作用明显，但对高脂血症 性脂肪肝反而增加其脂肪的沉积[江苏医药，2005 ;31 (10) :787 789]。三、抗炎及增强机体免疫功能(1)丹参素能激活单核吞噬细胞分泌TNF- α，IL_1，IL_6及IL_8等4种炎性细胞 因子，同时还能抑制由内毒素诱导的这4种因子的分泌。虽然丹参素能激活单核吞噬细胞 分泌细胞因子，但所产生的量均显著低于由内毒素诱导所产生的量。因此推断丹参素可能 具有两方面的调节作用，一方面能抗炎，另一方面能增强机体的免疫功能[中国免疫学杂 志，1995;11(6) :370 372]。(2)丹参素能显著抑制大鼠腹腔巨噬细胞产生PGE2 (前列腺 素)及TXB2 (血栓素)，它的抗炎作用可能是抑制钙内流[中药药理与临床，1990年04期]。 (3)以往的研究表明，活血化瘀药具有免疫调节等作用。丹参是常用的活血化瘀药，本研究 表明，丹参素对IL-2及IFN-r的分泌有促进作用，而糖皮质激素氢化考地松同时对IL-2及 IFN-r的分泌具有抑制作用。从而进一步证实了丹参素的免疫增强作用及糖皮质激素的免 疫抑制作用[天津中医，1995 ;12 (2) :23 24]。四、对心肌的作用(1)丹参素具有缩小心机梗死范围和减轻病情的作用[中成药研究，1981 ；⑵ 35 37]。(2)丹参素具有对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用[中国病理生理杂志， 1989 ；5 (2) :65 69]。(3) “心肌缺血再灌注损伤”与心肌细胞钙浓度大量增加有关，目前认为“钙超载”是再灌注损伤的一个主要因素，细胞内钙超载是心肌缺血再灌注损伤的重要 病理改变之一，被认为是细胞死亡的最后共同通路。丹参素对细胞内钙超载具有一定的防 治作用，作用优于SOD [中国病理生理杂志，1999 ；15(10) 877 879]。(4)再灌注心律失 常的发生和防治，是心血管领域的研究热点之一；再灌注性心律失常的氧自由基假说，得到 许多临床和动物实验的证实。丹参素能明显地降低再灌注性心律失常和外源性自由基诱导 的心律失常发生率，这与丹参素能清除氧自由基和减轻细胞内钙超载有关[中国中医药科 技，2000 ；7(3) 171 172]。(5)丹参素对大鼠心肌缺血/再灌注时线粒体发生的脂质过 氧化损害有保护作用；采用ESR自旋捕集技术发现丹参素对外源性氧自由基有清除作用， 因而推测，丹参素可能作为一种氧自由基的清除剂保护心肌线粒体免受氧自由基引发的脂 质过氧化损害[中国病理生理杂志，1990 ；6 (6) :420 423]。(6)丹参素能通过抑制血管紧 张素II(Ang II)诱导的心肌细胞凋亡而产生心肌保护作用，具有防止心肌细胞肥大作用， 从而防治心室肥厚[中西医结合心脑血管病杂志，2006 ；4 (6) 494 495]。五、改善微循环及抗凝作用 (1)丹参素具有改善微循环障碍及降低血浆乳酸含量的作用[上海医科大学学 报，1987 ；14(1) :25 29]。(2)丹参素具有提高机体抗凝和纤溶活性的作用[上海第二医 科大学学报，1990; 10 (3) :208 211]。(3)丹参素具有明显的抗凝血及抑制体外血栓形成 的作用[中西医结合杂志，1983 ；3 (5) 297 299]。(4)考察丹参素对血小板、白细胞和血 管内皮细胞表达细胞粘附分子的影响，结果表明丹参素可抑制血管内皮细胞和粒细胞表达 细胞粘附分子，这可能是丹参素发挥抗血栓形成作用的机制之一[中国药理学通报，2000 ； 16(6) 682 685]。六、对血管的作用(1)丹参素能显著舒张猪离体冠状动脉[药学学报，1982 ；17(3) :226 228]。(2) 丹参素具有抑制血小板合成与释放TXA2等前列腺素类血管物质的能力[中西医结合杂志， 1984 ；4(9) :532 565]。(3)丹参素具有扩张动脉的作用，并且可抑制血小板释放收缩物 质；丹参素有拮抗低氧性肺血管收缩作用，表明丹参素可能为肺心病、成人呼吸窘迫综合症 (ARDS)等危重疾病的治疗提供帮助[中华麻醉学杂志，1994 ；14(3) 163 165]。(4)肢体 移植及血管吻合等手术能造成缺血再灌注损伤，在很多离体再灌注的组织中，可观察到有 大量超氧自由基形成。丹参素能减少缺血再灌注血管H2O2的量，对氧自由基损伤有保护作 用[上海医科大学学报，1998 ;25 (2) :115 117]。七、对血细胞的作用(1)丹参素能明显抑制血小板的聚集性，而且在抑制血小板聚集剂量的丹参素作 用下，血小板膜流动性明显增加，表明丹参素治疗冠心病有效，可能与纠正冠心病患者血小 板膜的分子缺陷、增加血小板膜的流动性有关[中药药理与临床，1990 ；6 (4) 31 34]。
(2)丹参素可减少红细胞的破坏，其作用途径是提高红细胞的负电荷、使彼此不易积聚，激 活纤溶酶系统，增加红细胞膜的机械强度[山东医科大学学报，1991 ；29(3) 237 239]。
(3)丹参素具有钙拮抗作用，通过抑制红细胞膜上的电压依赖通道，抑制红细胞的钙内流， 使细胞内钙水平降低。[长治医学院学报，1997;11(2) :106 107]。(4)丹参素能明显抑 制由ADP诱导的大鼠血小板体外聚集活性，延长电刺激大鼠颈总动脉后血栓形成时间，降 低“血瘀”大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、红细胞电泳时间、卡松屈服应力以及红细胞聚集指数，改善机体血液流变性。丹参素能明显降低血液“浓、粘、聚、凝”状态，具有良好 的活血化瘀作用[中成药，2003 ；25 (8) 637 639]。八、保护脑血管(1)丹参素能改善大脑中动脉栓塞所致脑缺血大鼠的行为障碍，减少脑缺血区梗 死面积[中草药，2005 ；36 (7) 1041 1043]。(2)丹参素可抑制缺氧/缺糖损伤所致的线 粒体膜电位和活性的降低，从而具有稳定线粒体膜电位的作用，抑制神经细胞凋亡的发生， 对脑缺血性损伤时的神经细胞具有保护作用[中华中医药杂志，2006 ;21 (6) :329 332]。 (3)脑组织缺血性损伤过程中存在着神经细胞凋亡，细胞内Ca2+超载是缺血性脑损伤的发 病机制之一，被认为是凋亡的始动因素。丹参素能抑制细胞内Ca2+升高，可减轻细胞损伤的 程度，对缺血性损伤的神经细胞具有保护作用[中草药，2004 ;35 (8) :921 924]。川芎嗪的药理作用川芎嗪注射液在我国应用已有三十多年，主要用于冠心病、心绞痛、心肌梗死等缺 血性心脏病，也用于缺血性脑血管疾病，疗效显著，且无明显副作用，深受医患的推崇，成为 目前临床最为常用的中药制剂之一。一、心血管药理作用[中国微循环；2003，7 (4) 257 259]1、药理学研究表明川芎嗪具有确切的抗心肌缺血作用。川芎嗪对家兔注射垂体后 叶素引起的心肌缺血缺氧有明显抵抗作用，对结扎冠状动脉造成犬实验性心肌梗死有缩小 梗死范围、减轻病变程度、减少心肌坏死量的作用。电镜观察对心肌细胞线粒体有一定的保 护作用。随着溶栓疗法、冠脉搭桥术、体外循环下心内直视手术等缺血心肌再灌注医疗技术 的应用，挽救了大量心肌缺血患者的生命，但再灌注本身也可引起心肌损伤而影响疗效。大 量的药理学实验证明川芎嗪可使缺血心肌免受缺血再灌注损伤。川芎嗪能抑制缺血再灌注 损伤所致心律失常、缩短心律失常持续时间、降低室颤和室速的发生率、降低缺血再灌注损 伤后ST段的抬高、缩短窦律恢复时间、改善心脏血流动力学异常、增大左心室室内压峰值 及其最大正负变化速率、抑制缺氧/复氧损伤的心肌细胞挛缩、提高损伤细胞生存率、抑制 心肌细胞内K+/Na+浓度比的降低、减轻缺血再灌注损伤引起的细胞凋亡。2、川芎嗪抗心肌缺血机理有扩张冠脉、保护冠脉内皮、改善微循环、增加心肌营养 血流量、抗血小板聚集和血栓形成、降低血液黏滞度、改善血液流变性、降低心肌耗氧、抑制 氧自由基、抗脂质过氧化、改善心肌细胞的代谢抑制状态、阻滞心肌细胞钙内流，调节钾外 流等方面。(1)扩张冠脉川芎嗪扩张冠状血管，增加冠脉流量，改善心肌供氧而保护心脏。 川芎嗪对内皮素-1所致犬冠脉收缩有明显拮抗作用。(2)保护冠脉内皮血管内皮细胞损 伤不仅是动脉粥样硬化的始动因素，且对冠心病的发展起重要作用，保护血管内皮细胞是 防治这类疾病的新途径。川芎嗪通过保护冠脉内皮，提高机体内NO水平和降低机体内ET 水平，减轻缺血及再灌注损伤。(3)改善微循环川芎嗪能使微循环血流速度和微血管开放 数目增加。对金黄地鼠去甲肾上腺素造成的微循环障碍不论在口径、流速、流量及毛细血管 数等方面均有明显改善，其中对微动脉作用最明显。(4)抗血小板聚集和血栓形成川芎嗪 对冠心病患者已聚集的血小板有解聚作用，并能降低血小板表面活性。其作用机理如下 a 调节TXA2/PGI2系统TXA2/PGI2的平衡调节着血小板功能和血栓形成。川芎嗪具有抑制 血小板花生四烯酸代谢的作用，可通过抑制血小板TXA2产生，同时促进血管内皮细胞产生 PGI2,维持TXA2/PGI2的平衡。b “钙拮抗剂”效应川芎嗪能使血小板cAMP含量升高近一倍，活化细胞膜上的“钙泵”，使血小板内Ca2+浓度降低，阻断Ca2+对血小板激活和前列腺素 代谢。(5)降低血液黏滞度川芎嗪有提高红细胞和血小板表面电荷、提高红细胞变形能 力、促进纤溶活性、降低血液黏度、改善血液流变性作用。(6)降低心肌耗氧降低心肌耗氧 量有利于缺血性冠心病的治疗。川芎嗪有负变频效应，离体窦房结灌流表明，川芎嗪(1 2) X 10_3g/ml浓度能迅速使结周自律纤维的起博频率降低，并呈剂量依赖性负变频效应。川 芎嗪通过这种适度的负性变时性，减少了心肌耗氧量。(7)抑制氧自由基作用川芎嗪通过 减少氧自由基的生成、直接清除氧自由基、提高机体清除氧自由基能力、减少脂质过氧化物 的形成等机制对缺血心肌有保护作用。在多种动物实验及陈旧性心肌梗死、体外循环心内 直视手术的临床研究中均已证实川芎嗪可使缺血心肌组织中MDA明显降低，且伴随超氧化 物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽过氧化物酶/脂质过氧化物(GSH-Px/LPO)明显增高。(8) 改善心肌细胞的代谢抑制状态川芎嗪可提高培养心肌细胞缺氧缺糖时3H-亮氨酸和3H-尿 嘧啶核苷的掺入率，促进蛋白质、RNA合成，诱导一氧化氮合酶mRNA在缺氧缺糖心肌细胞的 表达，从而改善心肌细胞的代谢抑制状态，增强细胞对缺血缺氧的耐受能力。(9)阻滞钙内 流阻滞钙内流可扩张冠脉、减轻缺血心肌“钙超载”损害。采用全细胞膜片钳技术证实川 芎嗪对豚鼠心室肌L-型钙通道电流有浓度依赖性阻滞效应。对成年大鼠心室肌L-型钙通 道电流也具有明显的抑制作用，且呈浓度依赖性和电压依赖性，其机理可能为川芎嗪以高 亲和力与失活状态的钙通道结合而发挥效应。二、脑血管药理作用[现代中西医结合杂志；2006，15(10) 1398 1399] 临床上缺血性脑血管病约占全部脑血管病的70% 80%，川芎嗪对脑神经组织 的保护作用，除了舒张血管、抑制血栓形成外，还包括(1)提高红细胞变形能力，降低血液 黏度。(2)减少大鼠缺血脑组织中脂质过氧化物(LPO)的生成，增加超氧化物歧化酶(SOD) 和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量，从而减轻自由基损伤。(3)抑制c-jim蛋白表达， 下调脑缺血-再灌注时c-fos的表达，上调bcl-2的表达，具有神经保护作用。且川芎嗪能 与Ca2+通道受体可逆地结合，调节Ca2+的细胞内流量，保持神经元线粒体的完整性。川弯 嗪与bcl-2可能均作用于神经元线粒体上，保护脑组织，减轻脑缺血再灌注时的脑损伤，提 高神经元对缺血缺氧的耐受性。(4)能够抑制Ca2+超载，川弯嗪阻断细胞Ca2+内流，解除血 管的痉挛，减少神经元中毒死亡，阻断自由基引起的细胞破坏。川芎嗪还可通过抑制Ca2+超 载，减少自由基的产生等与bcl-2发生协同作用，也可通过抑制促凋亡基因如C-fos、p53等 发挥抗凋亡作用。(5)脑缺血再灌注时白细胞介素-8(IL-8)水平升高，川芎嗪可抑制IL-8 的合成和释放，从而阻断IL-8与炎症反应及氧自由基之间的恶性循环及连锁反应。(6)加 速缺血神经细胞HSP70基因在转录和翻译水平的表达，进而使HSP70合成增多，使神经细胞 对缺血产生耐受，从而起到对神经细胞的保护作用。
发明内容
1、本发明提供了一种以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的药物组合物，其重量比 为 1 10 10 1，优选重量比为 1 3 3 1，1 2 2 1，1 1. 5 1. 5 1， 1 I02、该药物组合物中，丹参素可以以盐的形式存在，优选为钠盐。3、该药物组合物中，磷酸川芎嗪和丹参素的纯度大于或等于80% ；优选磷酸川芎嗪和丹参素的纯度大于或等于90% ；进一步优选磷酸川芎嗪和丹参素的纯度大于或等于 98%。4、该药物组合物可用于治疗冠心病、心绞痛、缺血性脑血栓、动脉粥样硬化、心肌 缺血或心肌梗死，慢性乙肝肝纤维化、脂肪肝、老年痴呆症、癌症等。5、该药物组合物可制成注射剂、口服制剂和外用制剂。注射剂包括水针剂、粉针剂 和输液剂；口服制剂包括片剂、胶囊、软胶囊、滴丸、颗粒剂、口服液、胶丸、水丸；外用制剂 包括透皮吸收制剂；也可制成控释制剂和缓释制剂。6、本发明所述的磷酸川芎嗪和丹 参素可以用任何一种方法制备，对制备方法没有 任何限制。7、本发明进行了药理试验，证明了以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的药物组合 物在治疗心脑血管疾病方面的医药用途。
具体实施例方式下述各实施例仅用于说明本发明而非对本发明的限制实施例一磷酸川芎嗪(合成品)购于北京市燕京药业有限公司；产品批号070707 ；质量标准符合《中国药典》2005年版。实施例二丹参素钠的制备按专利方法制备，丹参素钠纯度大于或等于98%。专利申请号200710166154·8专利名称丹参素钠纯品的制备方法丹参(个子货)3kg，加水煮3次，第一次加水7倍量，煮8小时，后二次各加水5 倍量，各煮4小时，过滤，合并三次滤液；浓缩至适量，冷却至室温，加入95%乙醇，边加边搅 拌，至溶液含醇量为50%;于室温放置12小时后，过滤，滤液浓缩至适量，冷却至室温；加入 95%乙醇，边加边搅拌，至溶液含醇量为80%，于室温放置12小时后，过滤；滤液浓缩至适 量，冷却至室温，加入4倍量的水，边加边搅拌，放置1-2小时，过滤；滤液上大孔吸附树脂 柱(AB-8，800g)，用水洗脱，收集洗脱液，洗脱液上聚酰胺柱(60-100目，250g)，用水洗脱， 收集洗脱液；浓缩洗脱液至适量，拌硅胶IOOOg (100-200目)，至烘箱中烘干(65°C )。硅胶 装柱，用乙酸乙酯甲酸(50 0. 1)洗硅胶柱，收集洗脱液，回收至干，得干膏。取干膏，力口 甲醇溶解，用碳酸氢钠水溶液调PH值至弱碱性，放置，析晶，得丹参素钠结晶(丹参素钠含 量为 98. 85% )。实施例三制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的冻干粉针取磷酸川芎嗪40g，丹参素40g，溶于5000ml注射用水中，加入30g甘露醇，搅拌溶 解，加入氢氧化钠调PH值至4 7之间，超滤，得到无热源的澄清液，冻干，制成每支含磷酸 川芎嗪40mg，丹参素40mg的冻干粉针。实施例四制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪80g，丹参素80g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例五制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的冻干粉针取磷酸川芎嗪13g，丹参素65g，溶于5000ml注射用水中，加入30g甘露醇，搅拌溶 解，加入氢氧化钠调PH值至4 7之间，超滤，得到无热源的澄清液，冻干，制成每支含磷酸 川芎嗪13mg，丹参素65mg的冻干粉针。实施例六
制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的冻干粉针取磷酸川芎嗪65g，丹参素13g，溶于5000ml注射用水中，加入30g甘露醇，搅拌溶 解，加入氢氧化钠调PH值至4 7之间，超滤，得到无热源的澄清液，冻干，制成每支含磷酸 川芎嗪65mg，丹参素13mg的冻干粉针。实施例七制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的冻干粉针取磷酸川芎嗪17g，丹参素68g，溶于5000ml注射用水中，加入30g甘露醇，搅拌溶 解，加入氢氧化钠调PH值至4 7之间，超滤，得到无热源的澄清液，冻干，制成每支含磷酸 川芎嗪17mg，丹参素68mg的冻干粉针。实施例八制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的冻干粉针取磷酸川芎嗪68g，丹参素17g，溶于5000ml注射用水中，加入30g甘露醇，搅拌溶 解，加入氢氧化钠调PH值至4 7之间，超滤，得到无热源的澄清液，冻干，制成每支含磷酸 川芎嗪68mg，丹参素17mg的冻干粉针。实施例九制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪40g，丹参素120g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例十制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪120g，丹参素40g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例i^一制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪46g，丹参素115g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例十二制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪115g，丹参素46g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例十三制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂
取磷酸川芎嗪80g，丹参素88g，淀粉160g，糊精(粉)20g,混勻，制成颗粒，60°C以 下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例十四制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪88g，丹参素80g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C以 下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例十五制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪70g，丹参素91g，淀粉160g，糊精(粉)20g,混勻，制成颗粒，60°C以 下干 燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例十六制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪91g，丹参素70g，淀粉160g，糊精(粉)20g,混勻，制成颗粒，60°C以 下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例十七制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪65g，丹参素91g，淀粉160g，糊精(粉)20g,混勻，制成颗粒，60°C以 下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例十八制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪91g，丹参素65g，淀粉160g，糊精(粉)20g,混勻，制成颗粒，60°C以 下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例十九制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪60g，丹参素96g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C以 下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二十制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪96g，丹参素60g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C以 下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二i^一制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪60g，丹参素102g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二十二制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪102g，丹参素60g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二十三
制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪55g ，丹参素99g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C以 下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二十四制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪99g，丹参素55g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C以 下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二十五制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪60g，丹参素114g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二十六制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪114g，丹参素60g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二十七 制备以磷酸)I丨芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪50g，丹参素105g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二十八制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪105g，丹参素50g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例二十九制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪50g，丹参素110g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例三十制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪110g，丹参素50g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例三i^一制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪50g，丹参素115g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例三十二制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪115g，丹参素50g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。
实施例三十三制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪45g，丹参素108g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例三十四制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪108g，丹参素45g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例三十五制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪45g，丹参素117g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例三十六制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪117g，丹参素45g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例三十七 制备以磷酸)I丨芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪40g，丹参素108g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例三十八制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪108g，丹参素40g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例三十九制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪40g，丹参素112g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例四十制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪112g，丹参素40g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例四i^一制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪40g，丹参素116g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C 以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例四十二制备以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的片剂取磷酸川芎嗪116g，丹参素40g，淀粉160g，糊精(粉)20g，混勻，制成颗粒，60°C以下干燥，加入硬脂酸镁6g，压制成1000片，包糖衣，即得。药理试验药物A是丹参素钠，纯度是98. 85%，由北京科士蓝医药技术有限公司 提供；药物C是磷酸川芎嗪，纯度是100.0%，购于北京市燕京药业有限公司。试验例一 药物C与A不同配比对大鼠离体心脏冠脉流量的影响1.实验材料1.1实验仪器及试剂Powerlab/8sp Langendorff 离体心脏灌流系统，ADInstrument Pty Ltd(澳大 利亚)。Krebs-Henseleit 液，其组成为(mmol/L) =NaCl 118，KCl 4. 7，MgSO4 · 7Η201· 2， CaCl22. 0，NaHC0320, KH2PO4L 2，Glucose 11. 1，PH 值 7. 2-7. 4。1.2受试药物及配制药物磷酸川芎嗪(以C表示)、丹参素钠(以A表示)，由北京科士蓝医药技术有 限公司提供。实验前药物C、A 用 Krebs-Henseleit 液配成 C A 分别为 IOmg 10mg/ml、 6. 66mg ； 13. 33mg/ml、5mg ； 15mg/ml>13. 33mg ； 6. 66mg/ml>15mg ； 5mg/ml、20mg ； Omg/ ml,Omg 20mg/ml 的药液，按 C A 分别为 2mg 2mg、1.33mg 2.66mg、lmg 3mg、 2. 66mg 1.33mg、3mg lmg、4mg Omg,Omg 4mg/心脏给药，给药体积为 0. 2ml。1.3实验动物健康Wistar大鼠，雄性，体重350g士 30g，北京维通利华实验动物技术有限公司提{共。2.实验方法2.1分组方法实验分为药物C组、药物A组和C+A药物组，C+A药物组包括1 1配比组、1 2 配比组、1 3配比组、2 1配比组、3 1配比组。共设7组，每组14只大鼠。分组方法、 药物剂量及给药浓度见表1。表1实验分组方法
组别 药物配比 /^f、、 药物浓度(mg/ml) ___(mgAL·、)__
C 药—~4“_20 0_
A 药 一__4__0 20_C+A 药—1； 14 (2+2) “10 10 C+A 药—1: 2 ~4~( 1.33+2.66) 6.66: 13.33
'C+A 药 ~1 34 (1+3)5 15
C+A 药 2: 1 4 (2.66+1.33)~ 13.33 6.66 'C+A药丨 3: 1 I 4 (3 + 1)15； 52. 2实验操作方法大鼠断头处死，迅速取出心脏，置于4°C K-H液中，轻轻排出残留血液，将心脏连 接到灌流装置并固定，开始灌流，灌流液维持37°C，并通入95%的氧气。待心电平稳后，将 灌注压调节在60-70mmHg进行稳压灌流，稳定后记录给药前冠脉流量，经给药孔缓慢注入0. 2ml/心脏配制好的药液，给药完毕后立即记录上述各项指标，持续观察6分钟。2. 3检测指标灌注压力(mmHg)；心率(次/分)；给药前及给药后即刻、1、2、3、4、5分钟冠脉流 量(ml/min)、冠脉流量变化率(％ )。2. 4统计学处理数据用均数士标准差( ± S)表示，采用SPSS10. 0统计软件，组间变化率比较采 用one-way ANOVA分析，前后实测值采用配对t检验，P < 0. 05为有显著性差异。3.结果3. 1各组药物对大鼠离体心脏心率的影响实验前将灌注压调节在60-70mmHg进行稳压灌流，药物对大鼠离体心脏心率无显 著影响，结果见表2。表2给药前后各组大鼠离体心脏灌注压力、心率
权利要求
一种以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的药物组合物，其特征在于，重量比为1∶10～10∶1。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，优选重量比为1 3 3 1。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，优选重量比为1 1。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，丹参素可以以盐的形式存在。
5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，丹参素盐优选为钠盐。
6.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，磷酸川芎嗪和丹参素的纯度大于或等 于 80%。
7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，磷酸川芎嗪和丹参素的纯度大于或等 于 90%。
8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，磷酸川芎嗪和丹参素的纯度大于或等 于 98%。
9.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，可用于治疗冠心病，心绞痛，缺血性脑 血栓，动脉粥样硬化，心肌缺血或心肌梗死，慢性乙肝肝纤维化，脂肪肝、老年痴呆症和癌症寸。
10.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，可制成药剂学上所说的任何一种剂 型，可制成注射剂、口服制剂和外用制剂；注射剂包括水针剂、粉针剂和输液剂，口服制剂包 括片剂、胶囊、软胶囊、滴丸、颗粒剂、口服液、胶丸，水丸。外用制剂包括透皮吸收制剂。也 可制成控释制剂和缓释制剂。
全文摘要
本发明提供了一种以磷酸川芎嗪和丹参素为活性成分的药物组合物，磷酸川芎嗪和丹参素的纯度大于或等于80％，该药物组合物可用于治疗冠心病、心绞痛、缺血性脑血栓、动脉粥样硬化、心肌缺血或心肌梗死，慢性乙肝肝纤维化、脂肪肝、老年痴呆症和癌症等。
文档编号A61K31/4965GK101940570SQ20091015726
公开日2011年1月12日 申请日期2009年7月6日 优先权日2009年7月6日
发明者魏峰 申请人:北京科士蓝医药技术有限公司