专利名称：川芎嗪的协同增效药用酸盐及其制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及一种药物及其制备方法，具体地说是川芎嗪与一种药用酸的复盐化合物及其制备方法，而且这种药用酸与川芎嗪具有协同增效的药理作用。
背景技术：
川芎嗪(Ligustrazine)化学名为2，3，5，6-四甲基吡嗪，分子式C8H12N2，结构式如下 川芎嗪是中药植物川芎的有效成份，现由人工合成，具有抗血小板聚集、扩张小动脉、改善微循环、脑循环及活血化淤等药理作用，临床主要用于缺血性心、脑血管疾病的治疗，川芎嗪是一种生物碱，药物应用中常用其磷酸盐或盐酸盐，如磷酸川芎嗪胶囊，盐酸川芎嗪注射液。
缺血性心、脑血管疾病的发病机理复杂多样，绝大部份缺血性心、脑血管疾病是由于血管栓塞而引起的，研究发现心脑血管缺血、缺氧造成的一系列缺血性连锁反应，是导致心、脑损害的中心环节，称之为缺血瀑布。因此，迅速溶栓复流是心、脑组织梗死急性期治疗成功的前提和基础，而抵抗缺血造成的多种代谢紊乱和再灌流所造成的自由基损伤，则是治疗成功的基本保证，两个治疗环节相辅相成，缺一不可。没有溶栓复流，即使用最有效的脑保护方法和药物，最终也不能挽救持续缺血的心、脑组织；而单靠溶栓复流，没有针对缺血期的可靠心、脑保护，则无法扩大复流治疗时间窗，也不可能抵抗缺血造成的多种代谢紊乱和再灌流损伤。因此，缺血性心、脑血管疾病的治疗不仅需要快速改善其缺血状态，还应当及时保护心脑组织，以恢复心脑功能、提高预后效果、降低致残致死率。
鉴于川芎嗪是碱性化合物，以及其对缺血性心、脑血管疾病良好的复流作用，本发明的目的是提供川芎嗪与药用酸的复盐化合物及其制备方法，而且这种药用酸与川芎嗪具有协同增效的药理作用，尤其具有保护心脑组织的药理作用。
发明内容
为了达到上述目的，本发明所选用的酸性化合物是没食子酸和丹参酸甲，分别与呈碱性的川芎嗪形成复盐，本发明的川芎嗪的复盐化合物有两种，分别是没食子酸川芎嗪盐和丹参酸甲川芎嗪盐。
没食子酸(Gallic acid)又名倍酸、五倍子酸，其化学名称为3，4，5-三羟基苯甲酸，分子式C7H6O5，没食子酸是一种酸性化合物，广泛存在于葡萄、茶叶等植物中，是自然界存在的一种多酚类化合物，对人体的毒性极小，安全性高，大鼠皮下注射致死剂量为4000mg/kg，没食子酸具有较强的抗氧化、抗自由基损伤、抗血小板聚集等药理作用。本发明没食子酸川芎嗪复盐的分子结构式如下
分子式为C8H12N2.aC7H6O5，其中a是与川芎嗪成盐的没食子酸的分子数，亦即没食子酸川芎嗪复盐中两个活性中心没食子酸与川芎嗪的摩尔数之比，a的取值范围为0.1～10，a的值可以是小数，也可以是整数，在制备时，控制没食子酸和川芎嗪的投料反应量，可控制a的值不同，制得不同成盐比例的没食子酸川芎嗪盐。
特别的，优选没食子酸与川芎嗪以1∶1或2∶1的分子数配比成盐，即a＝1或2时的成盐形式，这时其分子结构式如下 或 丹参酸甲(Salvianic acid A)又名丹参酸A、丹参素，其化学名称为β-(3，4-二羟基苯基)乳酸，分子式C9H10O5，丹参酸甲是一种酸性化合物，是中药植物丹参的主要成份，副作用极小，其药物制剂已在临床上广泛应用，丹参酸甲具有抑制血小板聚集及抗凝作用、抗动脉粥样硬化作用、抗氧化及自由基损伤作用、延长心脑组织耐缺氧时间等药理作用。本发明丹参酸甲川芎嗪复盐的分子结构式如下 分子式为C8H12N2.aC9H10O5，其中a是与川芎嗪成盐的丹参酸甲的分子数，亦即丹参酸甲川芎嗪复盐中两个活性中心丹参酸甲与川芎嗪的摩尔数之比，a的取值范围为0.1～10，a的值可以是小数，也可以是整数，在制备时，控制丹参酸甲和川芎嗪的投料反应量，可控制a的值不同，制得不同成盐比例的丹参酸甲川芎嗪盐。
特别的，优选丹参酸甲与川芎嗪以1∶1或2∶1的分子数配比成盐，即a＝1或2时的成盐形式，这时其分子结构式如下 或 本发明提供了两种川芎嗪的复盐化合物，是利用川芎嗪的碱性基团与没食子酸或丹参酸甲的酸性基团之间进行酸碱成盐反应而形成的复盐化合物，其制备方法是将川芎嗪与没食子酸或丹参酸甲在合适的溶剂中充分混合，使川芎嗪与没食子酸或丹参酸甲在液体环境中接触而形成复盐，再将溶剂通过蒸发、过滤、烘干或冷冻干燥等方法而除去，即会得到固体形态的没食子酸川芎嗪盐或丹参酸甲川芎嗪盐。制备时，调控川芎嗪与没食子酸或丹参酸甲的投料反应量，可制得不同成盐比例的复盐。
另外，本发明领域内的技术人员可以理解到的是，没食子酸川芎嗪盐或丹参酸甲川芎嗪盐在成盐制备过程中，为了保持特有的晶体结构，会含有结晶水，因此，本发明川芎嗪的复盐还包括其结晶水合物。
本发明没食子酸川芎嗪盐或丹参酸甲川芎嗪盐，采用恰当的药用辅料和制备方法，可以制成任何药物上可以接受的药物剂型，例如注射使用的粉针剂、注射液；口服用的片剂、口服液、颗粒剂，缓释或速释制剂，等等。
本发明没食子酸川芎嗪盐或丹参酸甲川芎嗪盐化合物具有川芎嗪的抗血小板聚集、扩张小动脉、改善微循环、脑循环及活血化淤等药理作用，也具有没食子酸或丹参酸甲的抗氧化、抗自由基损伤、抗血小板聚集、延长心脑组织耐缺氧时间等药理作用，两种不同的药理作用对于缺血性心、脑血管疾病的治疗不仅能快速改善其缺血状态，还能及时保护心脑组织，以恢复心脑功能、提高预后效果、降低致残致死率，具有良好的协同增效的药理作用。
具体实施例方式
通过下面的实施例来对本发明没食子酸川芎嗪盐或丹参酸甲川芎嗪盐做进一步具体说明，但并不表示实施例对本发明的限制。
实施例1.没食子酸川芎嗪盐(1∶1)的制备取川芎嗪4.00g(0.0233mol)用20ml无水乙醇加热至完全溶解呈澄明溶液，另取没食子酸3.96g(0.023mol)同样用20ml无水乙醇加热至完全溶解呈澄明溶液，趁热将两种溶液混合，保温使混合液呈澄明状态，缓慢搅拌并逐渐降至室温，当有大量稠厚的固体析出后停止搅拌并置于冰箱冷冻2～3小时，将析出的固体过滤后干燥，再用无水乙醇重结晶即得到成盐比例为1∶1的没食子酸川芎嗪复盐，分子式C8H12N2.C7H6O5，呈白色结晶粉末，收率约94.1％。
实施例2.丹参酸甲川芎嗪盐(1∶1)的制备取川芎嗪4.00g(0.0233mol)用20ml无水乙醇加热至完全溶解呈澄明溶液，另取丹参酸甲4.6g(0.0232mol)用25ml无水乙醇加热至完全溶解呈澄明溶液，趁热将两种溶液混合，保温使混合液呈澄明状态，缓慢搅拌并逐渐降至室温，并置于冰箱冷冻过液，过滤，将滤饼干燥后，再用无水乙醇重结晶即得到成盐比例为1∶1的丹参酸甲川芎嗪复盐，分子式C8H12N2.C9H10O5，呈白色结晶粉末，收率约92.7％。
实施例3注射用没食子酸川芎嗪冻干粉针剂处方没食子酸川芎嗪 100g吐温-80 4g甘露醇 150g磷酸盐缓冲剂适量注射用水2000ml取以上处方量的没食子酸川芎嗪和吐温-80用适量注射用水溶解，再加入处方量的甘露醇，充分溶解后用磷酸盐缓冲剂调节pH＝6～8，再加入针用活性炭吸附热原，滤除针用活性炭后，精滤，检测含量合格后，将滤液分装入1000支西林瓶中，按冻干粉针剂制备工艺进行冷冻干燥，即可制备成1000瓶注射用没食子酸川芎嗪冻干粉针剂，每瓶含没食子酸川芎嗪100mg。
实施例4丹参酸甲川芎嗪注射液处方丹参酸甲川芎嗪50g吐温-80 1g乙醇 300ml羧甲基纤维素钠0.5g注射用水 加至2000ml取以上处方量的丹参酸甲川芎嗪、吐温-80、乙醇和羧甲基纤维素钠用适量注射用水混合后充分溶解，再加入针用活性炭吸附热原，滤除针用活性炭后，加注射用水至2000ml，精滤，检测含量合格后，将滤液分装入1000支安瓿瓶，熔封瓶口即可制备成1000瓶丹参酸甲川芎嗪注射液，每瓶注射液2ml，含丹参酸甲川芎嗪50mg。
实施例5.没食子酸川芎嗪胶囊处方没食子酸川芎嗪100g，微晶纤维素100g，羧甲基纤维素钠5g，5％聚维酮(K30)水溶液适量。
将上述处方量的固体物料粉碎后过80目筛，混合均匀后用聚维酮溶液制成软材，用20目筛制粒后烘干，整粒，分装至1000粒空心胶囊中，即得每粒含100mg没食子酸川芎嗪的胶囊制剂。
实施例6.丹参酸甲川芎嗪片处方丹参酸甲川芎嗪100g，乳糖150g，微晶纤维素40g，羧甲基纤维素钠5g，5％聚维酮(K30)水溶液适量，硬脂酸镁5g。
将丹参酸甲川芎嗪、乳糖、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠粉碎后过80目筛，混合均匀后用聚维酮溶液制成软材，用20目筛制粒后烘干，整粒，后加入硬脂酸镁混匀，压制成1000片，即得丹参酸甲川芎嗪片，每片含丹参酸甲川芎嗪100mg。
实施例7.没食子酸川芎嗪缓释胶囊处方没食子酸川芎嗪100g，羟丙基甲基纤维素(K4M)210g，乳糖60g，5％聚维酮(K30)水溶液适量。
将没食子酸川芎嗪、羟丙基甲基纤维素(K4M)、乳糖充分混合均匀，加入适量聚维酮制成软材，用20目筛制粒后烘干，整粒，分装至1000粒空心胶囊中，即得每粒含100mg没食子酸川芎嗪的缓释胶囊制剂。
实施例8.丹参酸甲川芎嗪肠溶片将实施例6制备的丹参酸甲川芎嗪片剂用包肠溶衣溶液包裹，即得丹参酸甲川芎嗪肠溶片。其中，包肠溶衣溶液可选用如下处方的包衣溶液邻苯二甲酸醋酸纤维素10g，十八醇4.0g，苯二甲酸二乙酯1.0ml，异丙醇40ml，丙酮45ml。
实施例9.没食子酸川芎嗪和丹参酸甲川芎嗪对心肌缺血大鼠的药物作用实验以动物实验来验证本发明没食子酸川芎嗪和丹参酸甲川芎嗪药物的疗效优势。
运用结扎大鼠冠脉左束支造成心肌缺血模型，将模型成功大鼠随机分为四组(每组8只)(1).模型对照组按大鼠体重给予注射等体积生理盐水；(2).盐酸川芎嗪组按大鼠体重给予0.1mmol/kg体重；(3).丹参酸甲川芎嗪组按大鼠体重给予注射丹参酸甲川芎嗪(成盐比例为1∶1)药物0.1mmol/kg体重；(4).没食子酸川芎嗪组按大鼠体重给予注射没食子酸川芎嗪(成盐比例为1∶1)药物0.1mmol/kg体重。
以上各组于模型成功后5min通过股静脉分别给予相应药物。
数据测定(1).心肌梗死范围的测定结扎冠脉4小时后，放血处死大鼠，立即取出其心脏，对心肌进行TTC染色，分离心肌片中梗死区，计算梗死心肌湿重量占全心室湿重的百分比；(2).超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的测定结扎冠脉4小时后，放血处死大鼠，取心室肌，制成冰生理盐水组织匀浆，测定SOD酶活性和MDA的含量；测得实验数据如下(n＝8，x±s)表1
由以上数据可以看出，本发明没食子酸川芎嗪和丹参酸甲川芎嗪对结扎冠脉左束支造成心肌缺血的模型大鼠具有良好的保护和治疗作用，与对照组和盐酸川芎嗪组相比，无论是减小心肌梗死范围、提高心肌组织的SOD活性、降低自由基脂质过氧化物的含量，均具有显著的药物作用。
实施例10.没食子酸川芎嗪和丹参酸甲川芎嗪对缺血缺氧脑损伤大鼠的药物作用实验实验动物及分组SD大鼠，体重230±20g，将大鼠随机分为四组，每组8只，分为模型对照组、盐酸川芎嗪组、丹参酸甲川芎嗪组、没食子酸川芎嗪组。
大鼠缺血缺氧脑损伤模型的建立实验大鼠用适度乙醚麻醉后，室温纵向切开颈部皮肤，暴露实验侧颈总动脉，以0号双线结扎，3h后恢复，再将大鼠置于密闭塑料容器中，通入含量为8％氧气和92％氮气的混合气体，灌流2.5h，即获得缺血缺氧的脑损伤大鼠模型。
药物施用方案动物模型建立后30分钟内从大鼠腹腔注射相应药物(1).模型对照组给予动物注射生理盐水；(2).盐酸川芎嗪组给予动物注射0.1mmol/kg体重的盐酸川芎嗪；(3).丹参酸甲川芎嗪组给予动物注射0.1mmo1/kg体重的丹参酸甲川芎嗪；(4).没食子酸川芎嗪组给予动物注射0.1mmol/kg体重的没食子酸川芎嗪。
数据测定以上各组每天一次，连续给药3天后处死大鼠，取实验大脑半球，称重后制成匀浆测定(1).蛋白定量，采用双缩脲法；(2).MDA含量，采用硫代巴比妥酸法；(3).SOD活性，采用黄嘌呤氧化酶法；(4).脑组织含水量，取与之相似的实验侧前大脑约80～100mg，称其湿重及96℃烘干48h后干重，按下式计算脑组织含水量脑组织含水量(％)＝(1-干重/湿重)×100％，表2各组大鼠的脑组织含水量(％)(n＝8，x+s)
*与模型对照组相比，p＜0.05；**与盐酸川芎嗪组相比，p＜0.01表3.各组大鼠的脑组织MDA含量、SOD活性检测(n＝8，x±s)
由表2、表3数据可以看出，本发明没食子酸川芎嗪和丹参酸甲川芎嗪对缺血缺氧脑损伤大鼠具有良好的保护和治疗作用，与对照组和盐酸川芎嗪组相比，无论是减小脑水肿程度(脑组织含水量)、降低自由基脂质过氧化物的含量、提高脑组织的SOD活性，/均具有显著的药物作用。
权利要求
1.川芎嗪的复盐化合物，分别是没食子酸川芎嗪盐和丹参酸甲川芎嗪盐。
2.根据权利要求1所述的没食子酸川芎嗪盐，其特征是具有以下分子结构式 其中a是与川芎嗪成盐的没食子酸的分子数，a的取值范围为0.1～10，优选a＝1或2。
3.根据权利要求1所述的丹参酸甲川芎嗪盐，其特征是具有以下分子结构式 其中a是与川芎嗪成盐的丹参酸甲的分子数，a的取值范围为0.1～10，优选a＝1或2。
4.根据权利要求2和3中任何一项所述的川芎嗪的复盐，其制备方法是将川芎嗪与没食子酸或丹参酸甲在合适的溶剂中充分混合，使川芎嗪与没食子酸或丹参酸甲在液体环境中接触而形成复盐，再将溶剂除去。
5.根据权利要求2和3中任何一项所述，没食子酸川芎嗪盐和丹参酸甲川芎嗪盐还包括其结晶水合物。
6.根据权利要求2和3中任何一项所述的川芎嗪的复盐，其特征是采用恰当的药用辅料和制备方法，可制成任何药物上可以接受的药物剂型。
全文摘要
本发明涉及川芎嗪的协同增效药用酸盐，包括没食子酸川芎嗪盐和丹参酸甲川芎嗪盐及其制备方法。其制备方法是将川芎嗪与没食子酸或丹参酸甲在合适的溶剂中充分混合，使川芎嗪与没食子酸或丹参酸甲在液体环境中接触而形成复盐，再将溶剂除去，调控川芎嗪与没食子酸或丹参酸甲的投料反应量，可制得不同成盐比例的复盐。本发明没食子酸川芎嗪盐或丹参酸甲川芎嗪盐化合物具有川芎嗪的药理作用，也具有没食子酸或丹参酸甲的药理作用，两种不同的药理作用对于缺血性心、脑血管疾病的治疗不仅能快速改善其缺血状态，还能及时保护心、脑组织，具有良好的协同增效的药理作用。
文档编号C07D241/00GK1683345SQ20051005401
公开日2005年10月19日 申请日期2005年2月28日 优先权日2005年2月28日
发明者杨喜鸿 申请人:杨喜鸿