专利名称：六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物及其医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药有效部位提取物，尤其涉及一种发酵中药六神曲的提取物及 其制备方法，本发明还涉及该活性提取物在制备抗菌、抗病毒药物中的用途，属于中药有效 部位提取物领域。
背景技术：
六神曲是由面粉(和/或麦麸)、杏仁、赤小豆，及鲜青蒿、鲜辣蓼、鲜苍耳草汁(或 干品煎汁)，按一定比例经过共同发酵制成的中药材，为传统发酵曲剂中应用最为广泛的一 种。六神曲味甘、辛，性温，归脾、胃经，具有健脾开胃，发表散寒，兼有发散功用，用于感冒、 食滞、食积不化、肠鸣、食积泄泻，尤以治疗时暑暴泻、饮食所伤见长。传统应用中，六神曲需 要经过高温炒制炮制后方可应用。多年以来，关于六神曲药效物质基础研究一直不明确，认 为药效物质基础是活性酶、益生菌的观点一直占主导地位，并且据此主张生用为好，这与传 统用药习惯和临床效应是不符合的。六神曲具有悠久、广泛的临床应用历史和确切的疗效，相对于其它临床治疗消化 道菌群紊乱及病毒感染性疾病使用的化学合成药、抗生素类等更加安全、可靠。迄今为止，尚没有六神曲抗菌或抗病毒有效部位提取物的报道，本发明提供一种 六神曲抗菌或抗病毒有效部位提取物，可以为临床治疗胃肠感冒、消化道菌群紊乱及病毒 感染性疾病提供新方法，对于提升中药的科技含量，实现中药现代化也具有重要意义的。
发明内容
本发明目的之一是提供一种六神曲抗菌、抗病毒活性提取物；本发明目的之二是提供一种上述六神曲抗菌、抗病毒活性提取物的制备方法；本发明目的之三是将提供所述六神曲抗菌、抗病毒活性提取物的医药用途，即用 于治疗胃肠感冒、食积不化，脘腹胀满、腹泻、肠炎、痢疾等消化道菌群失调及感冒等病毒感 染性疾病；本发明目的之四是提供一种六神曲抗菌、抗病毒活性提取物的液质联用指纹图 谱、化学组成特征；本发明目的之五是提供一种六神曲抗菌、抗病毒活性提取物可以直接制成药物或 作为原料药与其他药物配伍制成片剂、颗粒剂、滴丸剂、口服液、软胶囊剂、胶囊剂或其他剂 型的医药用途。本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的一种六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，包括以下步骤制备得到将六神曲粗粉用低分子醇回流提取，得醇提取物；将醇提取物用乙酸乙酯或正丁 醇萃取，或者是依次用乙酸乙酯或正丁醇萃取；将萃取液减压回收溶剂，即得。优选的，一种六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，包括以下步骤制备得到(1)六神曲粗粉用低分子醇回流提取；提取液滤过，滤液减压回收溶剂至稠膏；
(2)稠膏用水稀释，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取至萃取液澄清；(3)将乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液减压回收溶剂，即得。本发明中所述的低分子醇可以是甲醇、乙醇等低分子醇，优选为乙醇，更优选为浓 度为95%的乙醇；为了达到更好的提取效果，优选的，步骤⑴中将六神曲粗粉用4-8倍六神曲体积 的95%乙醇回流提取3-4次，每次2-4小时，过滤，合并滤液；步骤( 中优选采用10-20倍 稠膏体积的水稀释稠膏，再分别依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，每次萃取液用 量为1-3倍体积比的稀释稠膏量，萃取次数需至萃取液澄清。经检测，其中，乙酸乙酯提取 组分的出膏率为0.6 0.8% (优选为0.8%)，正丁醇提取组分出膏率为0.8-1.0% (优 选为1.0% )。本发明所述六神曲可以是生六神曲、焦六神曲、麸炒六神曲，原药材包括但不限于 自然发酵的六神曲或以纯种发酵方式制备的六神曲，以及在发酵原料上增减作为发酵培养 基的组成原料生产的中药发酵曲剂。本发明六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，其特征在于不限于上述的提取或分 离方法，其它各种新型分离填料、技术、制备方法的应用，以制备六神曲微生物发酵产物为 目的的，均落入本发明。六神曲、麸炒六神曲和焦六神曲也可参照以下方法制备得到(1)六神曲的制备方法面粉100kg (或面粉40kg，麦麸60kg)、杏仁粉4kg、赤小豆 粉4kg、青蒿、苍耳草、辣蓼鲜品各也可用干品，用量为1/3)。①鲜青蒿、鲜苍耳草、鲜 辣蓼榨出鲜汁，残渣加水常规法煎汁，合并药液，若用干品则直接煮汁；②将面粉或麦麸与 杏仁、赤小豆混勻；③将药汁与药粉混和，揉搓成握则成团，掷之即散的“软材”；④用模具压 制成一定规格的待发酵曲块；⑤将曲块置于30 37°C，相对湿度70 80%，堆置发酵约7 天；⑥发酵后，切成小块，干燥。在步骤③中可混入纯种菌种，其余步骤相同，即为进行纯种 发酵。(2)麸炒六神曲麸炒(每IOOkg神曲，用麦麸IOkg)至六神曲表面呈棕黄色；或 用清炒法，炒至六神曲呈棕黄色。(3)焦六神曲将六神曲炒至表面呈焦褐色，内部微黄色，有焦香气。本发明六神曲有效部位提取物可以有效抑制、杀灭各种常见的细菌、病毒，尤其是 肠道致病菌、流感病毒。如痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、白葡萄球菌、柠檬 葡萄球菌、伤寒杆菌、乙型溶血性链球菌、乙型副伤寒杆菌等，其中乙酸乙酯提取组分的最 低抑菌浓度为0. 6%ig/ml，最低杀菌浓度为0. 65mg/ml ；正丁醇提取组分最低抑菌浓度为 1.70mg/ml，最低杀菌浓度为1.70mg/ml。本发明六神曲有效部位提取物具有较强的抗流感 病毒A、流感病毒B作用，临床用药安全。本发明还提供了一种六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物的液质联用指纹图谱， 可以阐明其化合物组成、分子量、保留时间、质荷比、离子强度等1.六神曲液质联用正离子流指纹图谱六神曲乙酸乙酯萃取部位以甲醇水=7 3溶解，13000rpm离心5min，取上清 液经0. 22微米滤膜过滤，进样量为3 μ 1 ；Waters ACQUITY UPLC液相系统超高效液相色谱柱HSS T3, 2. 1 X 100mm, 1. 7 μ m，400C ；流速0. 4ml/min ；流动相水、乙腈，梯度洗脱；Waters Xevo QTof质谱系统电喷雾正离子离子化模式；毛细管电压3000V ；锥 孔电压40V ；除溶剂温度450°C ；除溶剂气体800L/Hr ；离子源温度120°C ；采集范围m/ ζ 50-1000 ；碰撞气体氩气。所得正离子全成分扫描液质联用指纹图谱见
图1，对图1中数 据进一步分析，可以得出，六神曲有效部位的化学组成包括由具备以下色谱、质谱特征的化 合物共同组成，见表1。表1六神曲乙酸乙酯提取部位化学组成列表(ES+离子)
权利要求
1.一种中药六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，其特征在于主要由六神曲的以下 生产原料面粉和/或麦麸、杏仁、赤小豆，及鲜青蒿、鲜辣蓼、鲜苍耳草汁或干品煎汁，经过 共同发酵后的发酵产物组成。
2.—种六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，包括以下步骤制备得到(1)将六神曲粗 粉用高浓度的低分子醇回流提取，得醇提取物；( 将醇提取物用乙酸乙酯或正丁醇萃取， 或者是依次用乙酸乙酯或正丁醇萃取；将萃取液减压回收溶剂，得到乙酸乙酯提取物及正 丁醇提取物。
3.一种六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，包括以下步骤制备得到(1)六神曲粗粉用高浓度的低分子醇回流提取；提取液滤过，滤液减压回收溶剂至稠膏；(2)稠膏用水稀释，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取至萃取液澄清；(3)将乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液减压回收溶剂，得到乙酸乙酯提取物及正丁醇提 取物。
4.按照权利要求3所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，其特征在于所述的低 分子醇包括甲醇或乙醇；优选是浓度为95%的乙醇；步骤(1)中将六神曲粗粉用4-8倍六 神曲体积的95%乙醇回流提取3-4次，每次2-4小时；步骤( 中采用10-20倍稠膏体积的 水稀释稠膏，再分别依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取；每次萃取液用量为1-3倍 体积比的稀释稠膏量。
5.按照权利要求1或2所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，其特征在于所述 六神曲是生六神曲、焦六神曲或麸炒六神曲；所述六神曲药材为自然发酵的六神曲或以纯 种发酵方式制备的六神曲，以及在发酵原料上增减作为发酵培养基的组成原料生产的发酵 曲剂。
6.按照权利要求1或2所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，其特征在于其液 质联用指纹图谱正离子流图见图1，ES+离子图中见如下化合物组成
7.按照权利要求1或2所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，其特征在于其液 质联用指纹图谱负离子流图见图2，Es—离子图中见如下化合物组成保留时间质荷比离子强度分子式10.575187.05591.57xe3C3H11N2O720.767515.12436.11xe2C24H23N2O1131.351627.40233.29xe3C29H59N2O1241.491740.48663.16xe3C33H58N17O351.591853.56886.18 xe3C40H85O1861.679966.63212.27xe3C40H88N9O1772.250253.06615.34xe2C14H9N2O382.618545.30015.10xe2C33H4iN2O592.706329.24262.15xe3Ci7H33N2O4102.835401.26468.91xe2C20H37N2O6112.942311.18112.02xe3C17H27O5123.042325.19342.00xe3C18H29O5133.162339.21121.39xe3CwH31O5144.522253.22902.13 xe3C15H29N2O154.582279.24977.57xe3CnH31N2O164.902255.24561.20xe3C15H31N2O174.950281.26021.32xe3CnH33N2O
8.一种抗菌或抗病毒药物组合物，其特征在于由有效量的权利要求1或2所述的六 神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物与药学上可接受的载体或辅料组成；还能作为原料药与 其它药物及辅料共同组成。
9.权利要求1或2所述的六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物作为抗菌剂、抗病毒剂， 用于细菌感染、病毒感染的医药用途。
10.如权利要求1所述的中药六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物，其特征在于不限 于权利要求2、3或4的化学分离技术，其它各种新型分离填料、技术、制备方法的应用，以制 备六神曲微生物发酵产物为目的的，均落入本发明。
全文摘要
本发明公开了六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物及其用作抗菌剂、抗病毒剂的医药用途，包括以下步骤制备得到(1)将六神曲粗粉用低分子醇回流提取，得醇提取物；(2)将醇提取物用乙酸乙酯、正丁醇萃取；将萃取液减压回收溶剂，即得。本发明六神曲抗菌、抗病毒有效部位提取物主要由六神曲发酵后的发酵产物组成；该有效部位提取物具有较强的抗菌、抗病毒活性，尤其对于常见的肠道致病菌和流感病毒作用效果突出，用药安全，无毒副反应。
文档编号A61K36/899GK102068464SQ200910237879
公开日2011年5月25日 申请日期2009年11月20日 优先权日2009年11月20日
发明者付新, 匡海学, 夏永刚, 姜海, 杨炳友, 王秋红, 王长福 申请人:匡海学