一种药物组合物及其制剂的检测方法

专利名称：一种药物组合物及其制剂的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物的检测方法，特别涉及安脑丸及其制剂的检测方法。
背景技术：
安脑丸是记载于卫生部药品标准中药成方制剂第十三册77页的中药处方，标准 编号为WS3-B-2517-97，标准中记载了安脑丸的处方包括人工牛黄、猪胆粉、朱砂、冰片、 水牛角浓缩粉、珍珠、黄芩、黄连、桅子、雄黄、郁金、石膏、赭石、珍珠母和薄荷脑；专利号为 93100258. 3专利申请公开了安脑丸的处方用量配比关系，及其常规制备工艺；现有资料公 开安脑丸具有清热解毒、醒脑安神、豁痰开窍、镇惊熄风的功效，如今是一种常用的治疗急 性炎症引发的高热不退、神志昏迷的临床用药。部颁标准中记载了安脑丸的质量控制方法为胆酸、猪去氧胆酸的鉴别方法及黄连 中盐酸小檗碱的鉴别方法。上述两种定性检测方法不能全面保证该处方产品的质量，缺乏 定量的检测方法或针对该处方法一套质量检测方法体系，才能全面保证该处方产品的质 量。而且该处方中含有毒性原料，如雄黄、朱砂等，其中毒性成分的含量须有一定限度，这 也将是本处方产品质量检测方法的关键所在，否则将会危及患者的生命。因此，研究一套针 对安脑丸及其其他制剂的质量检测方法体系将是该处方亟待解决的问题。

发明内容
本发明目的在于公开中药安脑丸及其配方原料制成的制剂的检测方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的本发明检测方法包括如下鉴别和含量测定中的一种或几种鉴别包括如下方法中的一种或几种A.胆酸、猪去氧胆酸的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，粉碎，加硅藻土 0. 5-1. 5g，研勻，加乙醇10-30ml，加热回流0. 5-1. 5小时，滤过，滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，加乙醇制成每Iml含 0. 5-1. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 2μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以异辛烷-乙酸乙 酯-冰醋酸为10-20 5-10 2-8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8-12%硫酸乙醇溶液 (即8-12ml硫酸与IOOml乙醇的混合液)，在100-110°C加热至斑点显色清晰，置紫外光灯 365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.黄连的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/3-2/3，粉碎，加甲醇5_15ml， 置水浴上加热回热0. 5-1. 5小时，放冷，滤过，滤液作为供试试品溶液；对照药材溶液的制备另取黄连对照药材30-70mg，加甲醇3_7ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0. 2-0. 7mg的溶 液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各 2μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲 酸-水为8-12 5-10 0.5-1.5 0. 5-1. 5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm 下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光 斑点；C.桅子苷的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，粉碎，加硅藻土 0. 5-1. 5g，研勻，加乙醚10-30ml，超声处理3_7分钟，滤过，弃去乙醚液，残渣挥去乙醚，加 乙酸乙酯20-40ml，加热回流0. 5-1. 5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2_細1使溶 解，作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取桅子苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5-1. 5mg的溶液， 作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 4 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲 酸-水为8-12 5-10 1-3 0.3-0. 7为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8-12%硫酸乙醇 溶液(即8-12ml硫酸与IOOml乙醇的混合液)，在100-110°C加热至斑点显色清晰；供试 品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D.黄芩苷的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，粉碎，加甲醇5_15ml， 超声处理10-30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 1-0. 5mg的溶液， 作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 1 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm 下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗色斑点；含量测定包括如下方法中的一种或几种A.桅子苷的含量测定照高效液相色谱法(附录VI D)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙 腈-水为 10-15 85-90 或正丁醇-甲醇一水-磷酸为 10-15 30-50 30-40 0.3-0.5 或正丁醇-水-磷酸为50—70 30-40 0. 3-0. 5作为流动相；检测波长为238nm ；理论 板数按桅子苷峰计算应不低于1500 ；对照品溶液的制备精密称取桅子苷对照品，加甲醇制成每Iml含20_40μ g的溶 液，即得；供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 20-60%乙醇或丙酮-20-60%乙醇为1 1的混合液80-90ml，加2-3%盐酸调PH2-3，超声 提取10-15分钟，滤过；滤液置IOOml量瓶中，加氢氧化钠调PH = 7，滤过，滤液加乙醇至刻度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得； 每日用制剂量含桅子苷(C17H24Oltl)O. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；B.黄芩苷的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定，以十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水为10-15 85-90或正丁醇-甲醇一水-磷酸为 10-15 30-50 30-40 0. 3-0. 5 或正丁醇-水-磷酸为 50—70 30-40 0. 3-0. 5 或 甲醇-水-磷酸=40-50 50-60 0. 1-0. 3作为流动相；检测波长为^Onm;理论板数按 黄芩苷峰计算应不低于2500 ；对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含40_80μ g的溶 液，即得；供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加 入80-90%乙醇80-90ml，调PH= 7，超声提取10-15分钟，滤过；滤液置IOOml量瓶中，加 2-3%盐酸3-5ml，搅勻，再加入氢氧化钠调PH = 7，静置20-30分钟，滤过；滤液加80-90% 乙醇至刻度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本 品按干燥品计算，净黄芩、酒黄芩含黄芩苷(C21H18O11)不得少于8.0%;本发明每日用制剂量 含黄芩苷不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；C.黄连的含量测定供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 1-3%盐酸60-80ml，超声提取10-15分钟，滤过；滤液加盐酸乙醇溶液(即l_2ml盐 酸与IOOml乙醇的混合液)至刻度，于40-50°C下水浴中加热10-20分钟，滤过；滤液作为 供试品溶液；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0. 02-0. 06mg的溶 液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取供试品溶液Ιμ 、对照品溶液Ιμ 与3μ1，交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水为 5-7 1-3 1-2 1-2 1 或正丁醇-冰乙酸-甲醇-水为 5-7 0.8-1 1-1.5 0.5-1.5 为展开剂，另槽加入等体积的浓氨试液，展开8-15厘米，取出，挥干，照薄层色谱法(附录 VIB薄层扫描法)进行荧光扫描，波长λ = 356-366nm，测量供试品与对照品荧光强度的 积分值，计算，即得；每日用制剂量含小檗碱以盐酸小檗碱(C2tlH17NO4 · HCl)计，不得少于 0. 8mg-8mg或不得少于3. 2mg ；D.薄荷脑和冰片的含量测定照气相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI E)测定；色谱条件与系统适用性 试验色谱柱=HP-INNOWax毛细管色谱柱(30m*0. 32mm*0. 25 μ m)；检测器温度240°C;气化室 温度240°C ；柱温为程序升温，初始温度为150°C，保持4分钟，以每分钟8°C的速率升温至 200 0C ；理论板数按丁香酚峰计算应不低于5000 ；内标溶液的制备取丁香酚，加乙酸乙酯制成每Iml含0. 3-0. 7mg的溶液，摇勻，作 为内标溶液；
校正因子测定另取冰片对照品10_30mg，薄荷脑对照品5_15mg，精密称定，置 25ml量瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇勻，吸取Iy 1，注入气相色谱仪，计算校正 因子；取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，粉碎，精密称定，加硅藻土 2_4g，精密称定， 研勻后，取l-3g，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入内标溶液10-20ml与水0. 5-1. 5ml，密 塞，摇勻，称定重量，浸渍过夜，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇勻，滤过，吸取 Iy 1，注入气相色谱仪，测定，即得；每日用制剂量含冰片(CltlH18O)不得少于8-12mg;含薄 荷脑(C10H20O)不得少于 6. 4-9. 6mg。其中，鉴别优选包括如下方法中的一种或几种A.胆酸、猪去氧胆酸的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，粉碎，加硅藻土 lg，研勻，加 乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，加乙醇制成每Iml含Img的混 合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 2μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以异辛烷-乙酸乙 酯-冰醋酸为15 7 5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液(即10ml 硫酸与IOOml乙醇的混合液)，在105°C加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视；供 试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.黄连的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/2，粉碎，加甲醇10ml，置水浴 上加热回热1小时，放冷，滤过，滤液作为供试试品溶液；对照药材溶液的制备另取黄连对照药材50mg，加甲醇5ml，超声处理15分钟，滤 过，滤液作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作 为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各 2μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲 酸-水为10 7 1 1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色 谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；C.桅子苷的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，粉碎，加硅藻土 lg，研勻，加 乙醚20ml，超声处理5分钟，滤过，弃去乙醚液，残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯30ml，加热回流 1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取桅子苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对 照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 4 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲 酸-水为10 :7:2: 0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液(S卩10ml硫酸与IOOml乙醇的混合液)，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色 谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D.黄芩苷的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，粉碎，加甲醇10ml，超声处 理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 3mg的溶液，作为 对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 1 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm 下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗色斑点。其中，含量测定优选包括如下方法中的一种或几种A.桅子苷的含量测定照高效液相色谱法(附录VI D)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙 腈-水为12 88或正丁醇-甲醇一水-磷酸为12 32 35 0. 4或正丁醇-水-磷 酸为60 35 0.4作为流动相；检测波长为238nm;理论板数按桅子苷峰计算应不低于 1500 ；对照品溶液的制备精密称取桅子苷对照品，加甲醇制成每Iml含30μ g的溶液， 即得；供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，置IOOml量瓶中，加入40% 乙醇或丙酮-40%乙醇为1 1的混合液85ml，加3%盐酸调PH2-3，超声提取12分钟，滤 过；滤液置IOOml量瓶中，加氢氧化钠调PH = 7，滤过，滤液加乙醇至刻度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得； 每日用制剂量含桅子苷(C17H24Oltl)不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；B.黄芩苷的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定，以十八烷基硅烷键 合硅胶为填充剂；以乙腈-水为12 88或正丁醇-甲醇一水-磷酸为12 40 35 0.4 或正丁醇-水-磷酸为60 35 0.4或甲醇-水-磷酸=45 55 0. 2作为流动相； 检测波长为280nm ；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500 ；对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含60μ g的溶液， 即得；供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，置IOOml量瓶中，加入85% 乙醇85ml，调PH = 7，超声提取12分钟，滤过；滤液置IOOml量瓶中，加3 %盐酸細1，搅勻， 再加入氢氧化钠调PH = 7，静置25分钟，滤过；滤液加85%乙醇至刻度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本 品按干燥品计算，净黄芩、酒黄芩含黄芩苷(C21H18O11)不得少于8.0%;本发明每日用制剂量 含黄芩苷不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；C.黄连的含量测定供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，置IOOml量瓶中，加入2%盐 酸70ml，超声提取12分钟，滤过；滤液加1-2%盐酸乙醇溶液(即l_2ml盐酸与IOOml乙醇的混合液)至刻度，于45°C下水浴中加热15分钟，滤过；滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0. 04mg的溶液，作 为对照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取供试品溶液Ιμ 、对照品溶液Ιμ 与3μ1，交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水为 6 2 1.5 1.5 1或正丁醇-冰乙酸-甲醇-水为6 0.9 1.2 1为展开剂， 另槽加入等体积的浓氨试液，展开12厘米，取出，挥干，照薄层色谱法(附录VI B薄层扫描 法)进行荧光扫描，波长λ = 356-366nm，测量供试品与对照品荧光强度的积分值，计算，即 得；每日用制剂量含小檗碱以盐酸小檗碱(C2tlH17NO4 · HCl)计，不得少于0. Smg—Smg或不 得少于3. 2mg ；D.薄荷脑和冰片的含量测定照气相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI E)测定；色谱条件与系统适用性 试验色谱柱=HP-INNOWax毛细管色谱柱(30m*0. 32mm*0. 25 μ m)；检测器温度240°C;气化室 温度240°C ；柱温为程序升温，初始温度为150°C，保持4分钟，以每分钟8°C的速率升温至 200 0C ；理论板数按丁香酚峰计算应不低于5000 ；内标溶液的制备取丁香酚，加乙酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，摇勻，作为内 标溶液；校正因子测定另取冰片对照品20mg，薄荷脑对照品10mg，精密称定，置25ml量瓶 中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇勻，吸取 μ 1，注入气相色谱仪，计算校正因子；取本发明制剂日用制剂量的1/4，粉碎，精密称定，加硅藻土 3g，精密称定，研勻 后，取2g，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入内标溶液15ml与水1ml，密塞，摇勻，称定重 量，浸渍过夜，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇勻，滤过，吸取1 μ 1，注入气相色 谱仪，测定，即得；每日用制剂量含冰片(CltlH18O)不得少于8-12mg ；含薄荷脑(CltlH2tlO)不得 少于 6. 4-9. 6mg。
本发明安脑丸配方制剂的原料药组成为
人工牛黄0. 5-2重量份猪胆粉7-20重量份黄连5-15重量份 黄芩5-15重量份珍珠1-5重量份 桅子5-15重量份 郁金5-15重量份赭石2-6重量份 雄黄3-9重量份 朱砂2-6重量份 薄荷脑0. 5-2重量份石膏5-12重量份 冰片0. 5-4重量份水牛角浓缩粉7-20重量份 珍珠母2-8重量份。
本发明安脑丸配方制剂的原料药组成优选为
人工牛黄1重量 黄芩10重量份 郁金10重量份 朱砂4重量份 冰片2重量份
份猪胆粉13重量份 黄连10重量份 珍珠3重量份桅子10重量份
赭石4重量份雄黄6重量份
薄荷脑1重量份石膏8重量份
水牛角浓缩粉13重量份珍珠母5重量份。 本发明安脑丸配方制剂的原料药组成优选为 人工牛黄0. 7重量份猪胆粉18重量份黄连6重量份桅子14重量份 雄黄4重量份 石膏11重量份 珍珠母3重量份。黄芩14重量份珍珠2重量份郁金6重量份赭石5重量份朱砂5重量份薄荷脑0.7重量份冰片1重量份水牛角浓缩粉18重量份本发明安脑丸配方制剂的原料药组成优选为人工牛黄1.8重量份猪胆粉9重量份黄连14重量份黄芩6重量份珍珠4重量份桅子6重量份郁金14重量份赭石3重量份雄黄8重量份朱砂3重量份薄荷脑1.8重量份 石膏6重量份冰片3. 5重量份 水牛角浓缩粉9重量份珍珠母7重量份。本发明所述的质量检测方法中的安脑丸配方制剂是取上述原料药，加入常规辅 料，按照常规工艺，制成临床接受的剂型，包括但不限于散齐 、颗粒齐 、片齐 、胶囊齐 、分散 片、滴丸剂、水丸剂、蜜丸剂、微丸剂、浓缩丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或注射剂。本发明所述的质量检测方法中的安脑丸配方制剂也可以由如下方法中的一种或 几种制备而成工艺1 由如下步骤A、B、C、D和E组成步骤A 制备中间体IAl 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取2-4次，每次 0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30-80 %乙醇，静置 12-48小时，取上清液回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A2 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取2-4次，每 次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至相对密度1-1. 0 1. 4，离心，上清液过大孔树脂柱， 30-80%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A3 将郁金先加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小时，挥发油备用；郁金药 渣与原料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓 缩至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30% -80%乙醇，静置12-48小时，取上清液回收乙 醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A4 将郁金先加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小时，挥发油备用；郁金药 渣与原料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓 缩至相对密度1-1. 0 1. 4，离心，上清液过大孔树脂柱，30-80%乙醇洗脱，回收乙醇，浓 缩，喷入挥发油，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；步骤B:制备中间体IIBl 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，混合；加入3-10% 稀盐酸，用量为5-15重量倍，使成混悬液，静置12-48小时，过滤，滤液用10-20%氢氧化钠 (或其他碱液)调PH值至3-5 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入8-10重量倍的乙醇， 静置，取上清液，回收乙醇，浓缩，即得中间体II ；或干燥后得中间体II的粉末；或B2:分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，混合；加入 3-10%稀盐酸，用量为5-15重量倍，使成混悬液，静置12-48小时，过滤，滤液用10-20%氢 氧化钠(或其他碱液)调PH值至3-5 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入8-10重量倍的乙醇，静置，取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1-1. 0 1. 4，离心，上清液过大孔树脂 柱，30-80%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，即得中间体II ；或干燥后得中间体II的粉末；或B3 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，分别加入3-10% 稀盐酸，用量为5-15重量倍，使成混悬液，静置12-48小时，过滤，滤液用10-20%氢氧化钠 (或其他碱液)调PH值至3-5 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入8-10重量倍的乙醇， 静置，取上清液，回收乙醇，浓缩，分别得水牛角浓缩粉粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母的提取 物，混合后即得中间体II ；或混合干燥后得中间体II的粉末；或B4:分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，，分别加入 3-10%稀盐酸，用量为5-15重量倍，使成混悬液，静置12-48小时，过滤，滤液用10-20%氢 氧化钠(或其他碱液)调PH值至3-5;滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入8-10重量倍 的乙醇，静置，取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1-1. 0 1. 4，离心，上清液过大孔树脂 柱，30-80%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，分别得水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母的提 取物，混合后即得中间体II ；或混合干燥后得中间体II的粉末；步骤C:制备中间体IIICl 取猪胆粉和雄黄碎成细粉，混合，加入3-5%氢氧化钠4-8重量倍，静置12_48 小时，过滤，滤液调PH值至3-5，浓缩，加入30-80%乙醇8-15重量倍；取上清液，回收乙醇， 浓缩，即得中间体III ；或干燥后得中间体III的粉末；或C2 取猪胆粉碎成细粉，加入3-5%氢氧化钠4-8重量倍，静置12_48小时，过 滤，滤液调PH值至3-5，浓缩，加入30-80 %乙醇8-15重量倍；取上清液，回收乙醇，浓缩， 即得猪胆粉提取物，或干燥后得猪胆粉提取物粉末；取雄黄粉碎成细粉，加入4-8重量倍 5-10%盐酸，静置8- 小时，过滤，滤液调PH值至3-5，浓缩，加入水洗至无色，即得雄黄提 取物，或干燥后得雄黄提取物粉末；将猪胆粉提取物与雄黄提取物混合，得中间体III或得 中间体III的粉末；步骤D 制备药粉Dl 分别将冰片、薄荷脑、朱砂和赭石制备极细粉，混合得药粉；或D2 将冰片、薄荷脑和赭石制备极细粉，将朱砂加5-8重量倍水研至糊状，再按 1 60-70加入水搅拌，静置，倾出混悬液，沉渣再研磨；如上法反复3-6次，合并各次混悬 液，静置，取沉淀于25-45°C凉干，研粉即得朱砂极细粉；将上述四种原料药的极细粉混合 得药粉；步骤EjI^lJ将中间体I、II、III或中间体I、II、III的粉末与药粉混合，按常规工艺，加入常 规辅料制成药学上可接受的剂型，如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、分散片、滴丸剂、水丸剂、 蜜丸剂、微丸剂、浓缩丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或注射剂。其中步骤A优选如下方法Al 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取3次，每次1. 5小 时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加入7重量倍的50%乙醇，静置M小时，取上清液回 收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A2 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取3次，每次1. 5 小时，合并水煎液，浓缩至相对密度1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A3 将郁金先加热水回流提取3次，每次1. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与原 料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏 中加入7重量倍的50%乙醇，静置对小时，取上清液回收乙醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间 体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A4 将郁金先加热水回流提取3次，每次1. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与原 料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小时，合并水煎液，浓缩至相对密度 1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间 体I ；或干燥后得中间体I的粉末。其中步骤B优选如下方法Bl 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，混合；加入6%稀盐 酸，用量为10重量倍，使成混悬液，静置M小时，过滤，滤液用15%氢氧化钠(或其他碱液) 调PH值至4 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入9重量倍的乙醇，静置，取上清液，回收 乙醇，浓缩，即得中间体II ；或干燥后得中间体II的粉末；或B2 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，混合；加入6%稀 盐酸，用量为10重量倍，使成混悬液，静置M小时，过滤，滤液用15%氢氧化钠(或其他碱 液)调PH值至4 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入9重量倍的乙醇，静置，取上清液， 回收乙醇，浓缩至相对密度1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收乙醇，浓 缩，即得中间体II ；或干燥后得中间体II的粉末；或B3:分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，分别加入6%稀 盐酸，用量为10重量倍，使成混悬液，静置M小时，过滤，滤液用15%氢氧化钠(或其他碱 液)调PH值至4 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入9重量倍的乙醇，静置，取上清液， 回收乙醇，浓缩，分别得水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母的提取物，混合后即得中间 体II ；或混合干燥后得中间体II的粉末；或B4:分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，分别加入6%稀 盐酸，用量为10重量倍，使成混悬液，静置M小时，过滤，滤液用15%氢氧化钠(或其他碱 液)调PH值至4 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入9重量倍的乙醇，静置，取上清液， 回收乙醇，浓缩至相对密度1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收乙醇，浓 缩，分别得水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母的提取物，混合后即得中间体II ；或混 合干燥后得中间体Π的粉末。其中步骤C优选如下方法Cl 取猪胆粉和雄黄碎成细粉，混合，加入4%氢氧化钠6重量倍，静置M小时，过 滤，滤液调PH值至4，浓缩，加入50%乙醇12重量倍；取上清液，回收乙醇，浓缩，即得中间 体III ；或干燥后得中间体III的粉末；或C2 取猪胆粉碎成细粉，加入4%氢氧化钠6重量倍，静置M小时，过滤，滤液调 PH值至4，浓缩，加入50%乙醇12重量倍；取上清液，回收乙醇，浓缩，即得猪胆粉提取物， 或干燥后得猪胆粉提取物粉末；取雄黄粉碎成细粉，加入6重量倍8%盐酸，静置M小时， 过滤，滤液调PH值至4，浓缩，加入水洗至无色，即得雄黄提取物，或干燥后得雄黄提取物粉 末；将猪胆粉提取物与雄黄提取物混合，得中间体III或得中间体III的粉末。
其中步骤D优选如下方法Dl 分别将冰片、薄荷脑、朱砂和赭石制备极细粉，混合得药粉；或D2 将冰片、薄荷脑和赭石制备极细粉，将朱砂加6重量倍水研至糊状，再按 1 65加入水搅拌，静置，倾出混悬液，沉渣再研磨；如上法反复4次，合并各次混悬液，静 置，取沉淀于35°C凉干，研粉即得朱砂极细粉；将上述四种原料药的极细粉混合得药粉。其中，上述任何步骤均可由常规方法替代。其中，上述大孔树脂柱型号均为YPR-II，X5,AB-8，HPD-100, DX-5，D101, DA201, DMl30，WLD-3 或 NKA-9。本发明安脑丸及其制剂的制备方法还可以为如下方法工艺2 由如下步骤A、B、C和D组成步骤A 制备中间体IAl 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取2-4次，每次 0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30-80 %乙醇，静置 12-48小时，取上清液回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A2 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取2-4次，每 次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至相对密度1-1. 0 1. 4，离心，上清液过大孔树脂柱， 30-80%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A3 将郁金先加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小时，挥发油备用；郁金药 渣与原料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓 缩至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30% -80%乙醇，静置12-48小时，取上清液回收乙 醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A4 将郁金先加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小时，挥发油备用；郁金药 渣与原料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓 缩至相对密度1-1. 0 1. 4，离心，上清液过大孔树脂柱，30-80 %乙醇洗脱，回收乙醇，浓 缩，喷入挥发油，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；步骤B:制备中间体IIBl 将原料药水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠、珍珠母、猪胆粉和雄黄粉碎成细粉， 混合，加入4-10重量倍的30-80%乙醇，40-60°C温浸12-48小时，过滤，取滤液，回收乙醇， 浓缩，即得中间体II ；或干燥后得中间体II的粉末；步骤C:制备药粉Cl 分别将冰片、薄荷脑、朱砂和赭石制备极细粉，混合得药粉；或C2 将冰片、薄荷脑和赭石制备极细粉，将朱砂加5-8重量倍水研至糊状，再按 1 60-70加入水搅拌，静置，倾出混悬液，沉渣再研磨；如上法反复3-6次，合并各次混悬 液，静置，取沉淀于25-45°C凉干，研粉即得朱砂极细粉；将上述四种原料药的极细粉混合 得药粉；步骤D 制剂将中间体I、II或中间体I、II的粉末与药粉混合，按常规工艺，加入常规辅料制成 药学上可接受的剂型，如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、分散片、滴丸剂、水丸剂、蜜丸剂、微丸 剂、浓缩丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或注射剂。
其中步骤A优选如下方法Al 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取3次，每次1. 5小 时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加入7重量倍的50%乙醇，静置M小时，取上清液回 收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A2 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取3次，每次1. 5 小时，合并水煎液，浓缩至相对密度1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收 乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A3 将郁金先加热水回流提取3次，每次1. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与原 料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏 中加入7重量倍的50%乙醇，静置对小时，取上清液回收乙醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间 体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A4 将郁金先加热水回流提取3次，每次1. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与原 料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小时，合并水煎液，浓缩至相对密度 1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间 体I ；或干燥后得中间体I的粉末。其中步骤B优选如下方法Bl 将原料药水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠、珍珠母、猪胆粉和雄黄粉碎成细粉， 混合，加入7重量倍的50%乙醇，50°C温浸M小时，过滤，取滤液，回收乙醇，浓缩，即得中间 体II ；或干燥后得中间体II的粉末。其中步骤C优选如下方法Cl 分别将冰片、薄荷脑、朱砂和赭石制备极细粉，分别或混合得药粉；或C2 将冰片、薄荷脑和赭石制备极细粉，将朱砂加6重量倍水研至糊状，再按 1 65加入水搅拌，静置，倾出混悬液，沉渣再研磨；如上法反复4次，合并各次混悬液，静 置，取沉淀于35°C凉干，研粉即得朱砂极细粉；将上述四种原料药的极细粉混合得药粉。其中，上述任何步骤均可由常规方法替代。其中，上述大孔树脂柱型号均为YPR-II，X5,AB-8，HPD-100, DX-5，D101, DA201, DMl30，WLD-3 或 NKA-9。本发明药物组合物检测方法可以应用于组合物的各种剂型，如散剂、颗粒剂、片 齐U、胶囊剂、分散片、滴丸剂、水丸剂、蜜丸剂、微丸剂、浓缩丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液 体制剂或注射剂等临床可接受的剂型，由于不同剂型的制剂其中所含的相当生药量是相同 的，因此各个剂型在进行检测时，所选用样品量可统一折算为日用制剂量为计量单位，每单 位制剂可以为每片、每粒、每支或每丸等。


图1 供试品和对照品色谱分离2:标准曲线图3:阴性对照色谱图本发明检测方法经实验表明均表现良好的线性关系、精密度、稳定性、重现性和回 收率。
下述实验例或实施例进一步说明但不限于本发明。实验例1黄芩苷含量测定方法学试验(1)仪器与试药仪器Agilent_1100高效液相色谱仪，包括真空脱气机，四元梯度泵，自动进样 器，二级管陈列检测器(DAD检测器)，AgilenLChemistation数据处理系统。试药正丁醇、甲醇为色谱纯，水为双蒸水，其它试剂均为分析纯，黄芩苷对照品 (中国药品生物制品检定所提供)。(2)色谱条件色谱柱DiamonsilC18，200 X 4. 6mm ID，5 μ m ；流动相分别以乙腈-水为 12 88 或正丁醇-甲醇一水-磷酸为15 35 40 0.4或正丁醇-水-磷酸为60 35 0. 4 或甲醇-水-磷酸=45 58 0.2作为流动相检测波长280nm;柱温室温；流速
1.Oml/min ；进样体积；IOy 1 ；自动进样，数据处理定量方法外标峰面积法。(3)检测波长选定按上述色谱条件对对照品进行光谱分析，乙腈-水或甲醇-水-磷酸流动相时黄 芩苷在280nm处有最大吸收，在正丁醇-甲醇一水-磷酸或正丁醇-水-磷酸为流动相时 在276nm处有最大吸收，故选276nm或280nm为黄芩苷检测波长。样品黄芩苷峰的光谱图
与对照品一致。(4)对照品溶液，供试品溶液与阴性样品溶液的制备对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含60μ g的溶液， 即得；供试品溶液的制备取本发明片剂日用制剂量的1/4，置IOOml量瓶中，加入85% 乙醇85ml，调PH = 7，超声提取12分钟，滤过；滤液置IOOml量瓶中，加3 %盐酸細1，搅勻， 再加入氢氧化钠调PH = 7，静置25分钟，滤过；滤液加85%乙醇至刻度，摇勻，即得；阴性样品溶液的制备取不含黄芩的阴性样品2g，精密称定，同供试品溶液的制 备方法制备阴性样品溶液。(5)空白试验及色谱图分别吸取黄芩苷对照品溶液、本发明片剂供试品溶液及阴性样品溶液，注入高效 液相色谱仪进行分析，实验结果表明阴性样品溶液对黄芩苷的含量测定没有干拢。(6)线性关系考察精密称取在60°C减压干燥4小时的黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含 0. 1248mg 的溶液，再用甲醇分别稀释成 0. 04352mg/ml,0. 07252mg/ml、0. 08703mg/ml、 0. 11604mg/ml的溶液.分别取10 μ 1注入高效液相色谱仪中，按上述色谱条件进行测 定，以浓度(mg/ml)为横坐标，峰面积的积分值(Mau)为纵坐标，绘制标准曲线，Y =
2.689X104X+2. 3264X 10-1，V = 0. 99996.表明黄芩苷浓度在 0. 04352 0. 14500mg/ml 范 围内具有良好的线性关系，结果见表1。表1黄芩苷线性考察
权利要求
1. 一种药物组合物的检测方法，其特征在于该方法包括如下含量测定方法中的一种或 几种A.桅子苷的含量测定照高效液相色谱法(附录VI D)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 为 10-15 85-90 或正丁醇-甲醇一水-磷酸为 10-15 30-50 30-40 0. 3-0. 5 或 正丁醇-水-磷酸为50—70 30-40 0. 3-0. 5作为流动相；检测波长为238nm ；理论板 数按桅子苷峰计算应不低于1500 ；对照品溶液的制备精密称取桅子苷对照品，加甲醇制成每Iml含20-40 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 20-60%乙醇或丙酮-20-60%乙醇为1 1的混合液80-90ml，加2-3%盐酸调PH2-3，超声 提取10-15分钟，滤过；滤液置IOOml量瓶中，加氢氧化钠调PH = 7，滤过，滤液加乙醇至刻 度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；每日 用制剂量含桅子苷(C17H24Oltl)O. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；B.黄芩苷的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定，以十八烷基硅烷 键合硅胶为填充剂；以乙腈-水为10-15 85-90或正丁醇-甲醇一水-磷酸为 10-15 30-50 30-40 0. 3-0. 5 或正丁醇-水-磷酸为 50—70 30-40 0. 3-0. 5 或 甲醇-水-磷酸=40-50 50-60 0. 1-0. 3作为流动相；检测波长为280nm ；理论板数按 黄芩苷峰计算应不低于2500 ；对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含40-80 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 80-90%乙醇80-90ml，调PH = 7，超声提取10-15分钟，滤过；滤液置IOOml量瓶中，加 2-3%盐酸3-5ml，搅勻，再加入氢氧化钠调PH = 7，静置20-30分钟，滤过；滤液加80-90% 乙醇至刻度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本品按 干燥品计算，净黄芩、酒黄芩含黄芩苷(C21H18O11)不得少于8.0%;本发明每日用制剂量含黄 芩苷不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；C.黄连的含量测定供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 盐酸60-80ml，超声提取10-15分钟，滤过；滤液加盐酸乙醇溶液(即l_2ml盐酸与 IOOml乙醇的混合液)至刻度，于40-50°C下水浴中加热10-20分钟，滤过；滤液作为供试品 溶液；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0. 02-0. 06mg的溶液， 作为对照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取供试品溶液1 μ 1、对照品溶液1 μ 1 与3μ1，交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水为5-7 1-3 1-2 1-2 1 或正丁醇-冰乙酸-甲醇-水为 5-7 0.8-1 1-1.5 0.5-1.5 为展开剂，另槽加入等体积的浓氨试液，展开8-15厘米，取出，挥干，照薄层色谱法(附录 VIB薄层扫描法)进行荧光扫描，波长λ = 356-366nm，测量供试品与对照品荧光强度的 积分值，计算，即得；每日用制剂量含小檗碱以盐酸小檗碱(C2tlH17NO4 · HCl)计，不得少于 0. 8mg-8mg或不得少于3. 2mg ； D.薄荷脑和冰片的含量测定照气相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI E)测定；色谱条件与系统适用性试验 色谱柱=HP-INNOWax毛细管色谱柱(30m*0. 32mm*0. 25 μ m)；检测器温度240°C;气化室温度 240°C;柱温为程序升温，初始温度为150°C，保持4分钟，以每分钟8°C的速率升温至200°C; 理论板数按丁香酚峰计算应不低于5000 ；内标溶液的制备取丁香酚，加乙酸乙酯制成每Iml含0. 3-0. 7mg的溶液，摇勻，作为内 标溶液；校正因子测定另取冰片对照品10-30mg，薄荷脑对照品5-15mg，精密称定，置25ml量 瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇勻，吸取 μ 1，注入气相色谱仪，计算校正因子；取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，粉碎，精密称定，加硅藻土 2-4g，精密称定，研 勻后，取l_3g，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入内标溶液10-20ml与水0. 5-1. 5ml，密 塞，摇勻，称定重量，浸渍过夜，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇勻，滤过，吸取 1 μ 1，注入气相色谱仪，测定，即得；每日用制剂量含冰片(CltlH18O)不得少于8-12mg;含薄 荷脑(C10H20O)不得少于 6. 4-9. 6mg。
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于该方法包括如下含量测定方法中的一种 或几种A.桅子苷的含量测定照高效液相色谱法(附录VI D)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 为12 88或正丁醇-甲醇一水-磷酸为12 32 35 0. 4或正丁醇-水-磷酸为 60 35 0.4作为流动相；检测波长为238nm;理论板数按桅子苷峰计算应不低于1500; 对照品溶液的制备精密称取桅子苷对照品，加甲醇制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，置IOOml量瓶中，加入40%乙醇 或丙酮-40%乙醇为1 1的混合液85ml，加3%盐酸调PH2-3，超声提取12分钟，滤过；滤 液置IOOml量瓶中，加氢氧化钠调PH = 7，滤过，滤液加乙醇至刻度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；每日 用制剂量含桅子苷(C17H24Oltl)不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；B.黄芩苷的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定，以十八烷基硅烷键合硅 胶为填充剂；以乙腈-水为12 88或正丁醇-甲醇一水-磷酸为12 40 35 0.4 或正丁醇-水-磷酸为60 35 0.4或甲醇-水-磷酸=45 55 0. 2作为流动相； 检测波长为^Onm ；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500 ；对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含60μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，置IOOml量瓶中，加入85%乙醇 85ml，调PH = 7，超声提取12分钟，滤过；滤液置IOOml量瓶中，加3%盐酸細 1，搅勻，再加 入氢氧化钠调PH = 7，静置25分钟，滤过；滤液加85%乙醇至刻度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本品按 干燥品计算，净黄芩、酒黄芩含黄芩苷(C21H18O11)不得少于8.0%;本发明每日用制剂量含黄 芩苷不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；C.黄连的含量测定供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，置IOOml量瓶中，加入2%盐酸 70ml，超声提取12分钟，滤过；滤液加1-2%盐酸乙醇溶液(即l_2ml盐酸与IOOml乙醇的 混合液)至刻度，于45°C下水浴中加热15分钟，滤过；滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0. (Mmg的溶液，作为对 照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取供试品溶液1 μ 1、对照品溶液1 μ 1与3 μ 1，交叉 点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水为6 2 1.5 1.5 1 或正丁醇-冰乙酸-甲醇-水为6 0.9 1.2 1为展开剂，另槽加入等体积的浓氨试 液，展开12厘米，取出，挥干，照薄层色谱法(附录VI B薄层扫描法)进行荧光扫描，波长 λ = 356-366nm，测量供试品与对照品荧光强度的积分值，计算，即得；每日用制剂量含小 檗碱以盐酸小檗碱(C2tlH17NO4 · HCl)计，不得少于0. 8mg-—8mg或不得少于3. 2mg ；D.薄荷脑和冰片的含量测定照气相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI E)测定；色谱条件与系统适用性试验 色谱柱=HP-INNOWax毛细管色谱柱(30m*0. 32mm*0. 25 μ m)；检测器温度240°C;气化室温度 240°C;柱温为程序升温，初始温度为150°C，保持4分钟，以每分钟8°C的速率升温至200°C; 理论板数按丁香酚峰计算应不低于5000 ；内标溶液的制备取丁香酚，加乙酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，摇勻，作为内标溶液；校正因子测定另取冰片对照品20mg，薄荷脑对照品10mg，精密称定，置25ml量瓶中， 加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇勻，吸取1μ 1，注入气相色谱仪，计算校正因子；取本发明制剂日用制剂量的1/4，粉碎，精密称定，加硅藻土 3g，精密称定，研勻后，取 2g，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入内标溶液15ml与水1ml，密塞，摇勻，称定重量，浸 渍过夜，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇勻，滤过，吸取1 μ 1，注入气相色谱仪， 测定，即得；每日用制剂量含冰片O^H18O)不得少于8-12mg;含薄荷脑(CltlH2tlO)不得少于 6. 4-9. 6mg。
3.如权利要求1-2任一所述的检测方法，其特征在于该方法还包括如下鉴别方法中的 一种或几种A.胆酸、猪去氧胆酸的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，粉碎，加硅藻土 0. 5-1. 5g， 研勻，加乙醇10-30ml，加热回流0. 5-1. 5小时，滤过，滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，加乙醇制成每Iml含0. 5-1. 5mg的 混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分 别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以异辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸 为10-20 5-10 2-8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8-12%硫酸乙醇溶液(即8_12ml 硫酸与IOOml乙醇的混合液)，在100-110°C加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检 视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.黄连的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/3-2/3，粉碎，加甲醇5-15ml，置水 浴上加热回热0. 5-1. 5小时，放冷，滤过，滤液作为供试试品溶液；对照药材溶液的制备另取黄连对照药材30-70mg，加甲醇3-7ml，超声处理10-20分 钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0. 2-0. 7mg的溶液，作 为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2 μ 1，分 别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水为 8-12 5-10 0.5-1.5 0. 5-1. 5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视； 供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；C.桅子苷的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，粉碎，加硅藻土 0. 5-1. 5g， 研勻，加乙醚10-30ml，超声处理3-7分钟，滤过，弃去乙醚液，残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯 20-40ml，加热回流0. 5-1. 5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2_細1使溶解，作为供 试品溶液；对照品溶液的制备另取桅子苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5-1. 5mg的溶液，作为 对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版-部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4 μ 1，分 别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水 为8-12 5-10 1-3 0.3-0. 7为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8-12%硫酸乙醇溶液 (即8-12ml硫酸与IOOml乙醇的混合液)，在100-110°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D.黄芩苷的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/6-1/2，粉碎，加甲醇5-15ml，超声 处理10-30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 1-0. 5mg的溶液，作为 对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1 μ 1，分 别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视； 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗色斑点。
4.如权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于该方法还包括如下鉴别方法中的一 种或几种A.胆酸、猪去氧胆酸的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，粉碎，加硅藻土 lg，研勻，加乙醇 20ml，加热回流1小时，滤过，滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，加乙醇制成每Iml含Img的混合溶 液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分 别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以异辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸 为15 7 5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液(即10ml硫酸与IOOml 乙醇的混合液)，在105°C加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B.黄连的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/2，粉碎，加甲醇10ml，置水浴上加 热回热1小时，放冷，滤过，滤液作为供试试品溶液；对照药材溶液的制备另取黄连对照药材50mg，加甲醇5ml，超声处理15分钟，滤过，滤 液作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对 照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2 μ 1，分 别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水 为10 7 1 1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中， 在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；C.桅子苷的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，粉碎，加硅藻土 lg，研勻，加乙醚 20ml，超声处理5分钟，滤过，弃去乙醚液，残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯30ml，加热回流1小 时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取桅子苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品 溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4 μ 1，分 别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水 为10 7 2 0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液(即10ml硫酸 与IOOml乙醇的混合液)，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同颜色的斑点；D.黄芩苷的鉴别供试品溶液的制备取本发明制剂日用制剂量的1/4，粉碎，加甲醇10ml，超声处理20 分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 3mg的溶液，作为对照 品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1 μ 1，分 别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视； 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗色斑点。
5.如权利要求1-4任 料药组成为人工牛黄1重量份 黄芩10重量份 郁金10重量份 朱砂4重量份 冰片2重量份 或人工牛黄0. 7重量份 黄芩14重量份 郁金6重量份 朱砂5重量份 冰片1重量份 或人工牛黄1. 8重量份 黄芩6重量份 郁金14重量份 朱砂3重量份 冰片3. 5重量份-所述的检测方法，其特征在于该方法中所述的药物组合物的原猪胆粉13重量份 珍珠3重量份 赭石4重量份 薄荷脑1重量份 水牛角浓缩粉13重量份猪胆粉18重量份 珍珠2重量份 赭石5重量份 薄荷脑0. 7重量份 水牛角浓缩粉18重量份黄连10重量份 桅子10重量份 雄黄6重量份 石膏8重量份 珍珠母5重量份；黄连6重量份 桅子14重量份 雄黄4重量份 石膏11重量份 珍珠母3重量份；猪胆粉9重量份 珍珠4重量份 赭石3重量份 薄荷脑1. 8重量份 水牛角浓缩粉9重量份黄连14重量份 桅子6重量份 雄黄8重量份 石膏6重量份 珍珠母7重量份。
6.如权利要求1-4任一所述的检测方法，其特征在于该方法中所述的药物组合物的制 备方法为如下方法中的一种方法1 由如下步骤A、B、C、D和E组成 步骤A 制备中间体IAl 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5 小时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30-80%乙醇，静置12-48小时， 取上清液回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A2 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取2-4次，每次 0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至相对密度1-1. (Tl. 4，离心，上清液过大孔树脂柱， 30-80%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A3 将郁金先加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与 原料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至 稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30% -80%乙醇，静置12-48小时，取上清液回收乙醇，浓 缩，喷入挥发油，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A4 将郁金先加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与 原料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至 相对密度1-1. (Tl. 4，离心，上清液过大孔树脂柱，30-80%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，喷入 挥发油，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末； 步骤B:制备中间体IIBl 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，混合；加入3-10%稀盐酸，用量为5-15重量倍，使成混悬液，静置12-48小时，过滤，滤液用10-20%氢氧化钠(或 其他碱液)调PH值至3-5 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入8-10重量倍的乙醇，静置， 取上清液，回收乙醇，浓缩，即得中间体II ；或干燥后得中间体II的粉末；或B2 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，混合；加入3-10%稀 盐酸，用量为5-15重量倍，使成混悬液，静置12-48小时，过滤，滤液用10-20%氢氧化钠 (或其他碱液)调PH值至3-5 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入8-10重量倍的乙醇，静 置，取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1-1. (Tl. 4，离心，上清液过大孔树脂柱，30-80% 乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，即得中间体II ；或干燥后得中间体II的粉末；或B3 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，分别加入3-10%稀盐 酸，用量为5-15重量倍，使成混悬液，静置12-48小时，过滤，滤液用10-20%氢氧化钠(或 其他碱液)调PH值至3-5 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入8-10重量倍的乙醇，静 置，取上清液，回收乙醇，浓缩，分别得水牛角浓缩粉粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母的提取物， 混合后即得中间体II ；或混合干燥后得中间体II的粉末；或B4 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，，分别加入3-10%稀 盐酸，用量为5-15重量倍，使成混悬液，静置12-48小时，过滤，滤液用10-20%氢氧化钠 (或其他碱液)调PH值至3-5 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入8-10重量倍的乙醇，静 置，取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1-1. (Tl. 4，离心，上清液过大孔树脂柱，30-80 % 乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，分别得水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母的提取物，混合 后即得中间体II ；或混合干燥后得中间体II的粉末； 步骤C:制备中间体IIICl 取猪胆粉和雄黄碎成细粉，混合，加入3-5%氢氧化钠4-8重量倍，静置12-48小 时，过滤，滤液调PH值至3-5，浓缩，加入30-80%乙醇8-15重量倍；取上清液，回收乙醇，浓 缩，即得中间体III ；或干燥后得中间体III的粉末；或C2 取猪胆粉碎成细粉，加入3-5%氢氧化钠4-8重量倍，静置12-48小时，过滤，滤 液调PH值至3-5，浓缩，加入30-80%乙醇8-15重量倍；取上清液，回收乙醇，浓缩，即得猪 胆粉提取物，或干燥后得猪胆粉提取物粉末；取雄黄粉碎成细粉，加入4-8重量倍5-10%盐 酸，静置8-M小时，过滤，滤液调PH值至3-5，浓缩，加入水洗至无色，即得雄黄提取物，或干 燥后得雄黄提取物粉末；将猪胆粉提取物与雄黄提取物混合，得中间体III或得中间体III 的粉末；步骤D 制备药粉Dl 分别将冰片、薄荷脑、朱砂和赭石制备极细粉，混合得药粉； 或D2 将冰片、薄荷脑和赭石制备极细粉，将朱砂加5-8重量倍水研至糊状，再按 1 60-70加入水搅拌，静置，倾出混悬液，沉渣再研磨；如上法反复3-6次，合并各次混悬 液，静置，取沉淀于25-45°C凉干，研粉即得朱砂极细粉；将上述四种原料药的极细粉混合 得药粉；步骤E 制剂将中间体Ι、Π、ΙΙΙ或中间体Ι、Π、ΙΙΙ的粉末与药粉混合，按常规工艺，加入常规辅料 制成药学上可接受的剂型，如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、分散片、滴丸剂、水丸剂、蜜丸剂、 微丸剂、浓缩丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或注射剂；方法2 由如下步骤A、B、C和D组成 步骤A 制备中间体IAl 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5 小时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30-80%乙醇，静置12-48小时， 取上清液回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A2:将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取2-4次，每次 0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至相对密度1-1. (Tl. 4，离心，上清液过大孔树脂柱， 30-80%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A3 将郁金先加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与 原料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至 稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30% -80%乙醇，静置12-48小时，取上清液回收乙醇，浓 缩，喷入挥发油，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A4 将郁金先加热水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与 原料药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小时，合并水煎液，浓缩至 相对密度1-1. (Tl. 4，离心，上清液过大孔树脂柱，30-80 %乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，喷入 挥发油，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末； 步骤B:制备中间体IIBl 将原料药水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠、珍珠母、猪胆粉和雄黄粉碎成细粉，混合， 加入4-10重量倍的30-80%乙醇，40-60°C温浸12-48小时，过滤，取滤液，回收乙醇，浓缩， 即得中间体Π ；或干燥后得中间体II的粉末； 步骤C:制备药粉Cl 分别将冰片、薄荷脑、朱砂和赭石制备极细粉，混合得药粉； 或C2 将冰片、薄荷脑和赭石制备极细粉，将朱砂加5-8重量倍水研至糊状，再按 1 60-70加入水搅拌，静置，倾出混悬液，沉渣再研磨；如上法反复3-6次，合并各次混悬 液，静置，取沉淀于25-45°C凉干，研粉即得朱砂极细粉；将上述四种原料药的极细粉混合 得药粉；步骤D 制剂将中间体I、II或中间体I、II的粉末与药粉混合，按常规工艺，加入常规辅料制成药学 上可接受的剂型，如散齐 、颗粒剂、片齐 、胶囊齐 、分散片、滴丸齐 、水丸齐 、蜜丸齐 、微丸齐U、 浓缩丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或注射剂。
7.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于该方法中所述的药物组合物的制备方法 为如下方法中的一种方法1 由如下步骤Α、B、C、D和E组成 步骤A 制备中间体IAl 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取3次，每次1. 5小时， 合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加入7重量倍的50%乙醇，静置M小时，取上清液回收乙 醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或Α2 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取3次，每次1. 5小 时，合并水煎液，浓缩至相对密度1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A3 将郁金先加热水回流提取3次，每次1. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与原料药 黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加 入7重量倍的50%乙醇，静置M小时，取上清液回收乙醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间体 I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A4 将郁金先加热水回流提取3次，每次1. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与原料 药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小时，合并水煎液，浓缩至相对密度 1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间 体I ；或干燥后得中间体I的粉末； 步骤B 制备中间体IIBl 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，混合；加入6%稀盐酸， 用量为10重量倍，使成混悬液，静置M小时，过滤，滤液用15%氢氧化钠(或其他碱液)调 PH值至4 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入9重量倍的乙醇，静置，取上清液，回收乙 醇，浓缩，即得中间体II ；或干燥后得中间体II的粉末；或B2 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，混合；加入6%稀盐 酸，用量为10重量倍，使成混悬液，静置M小时，过滤，滤液用15%氢氧化钠(或其他碱液) 调PH值至4 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入9重量倍的乙醇，静置，取上清液，回收 乙醇，浓缩至相对密度1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50 %乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩， 即得中间体Π ；或干燥后得中间体II的粉末；或B3 分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，分别加入6%稀盐酸， 用量为10重量倍，使成混悬液，静置M小时，过滤，滤液用15%氢氧化钠(或其他碱液)调 PH值至4 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入9重量倍的乙醇，静置，取上清液，回收乙 醇，浓缩，分别得水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母的提取物，混合后即得中间体II ； 或混合干燥后得中间体II的粉末；或B4:分别将水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母研成细粉，分别加入6%稀盐酸， 用量为10重量倍，使成混悬液，静置M小时，过滤，滤液用15%氢氧化钠(或其他碱液)调 PH值至4 ；滤过，滤液浓缩至稠膏，浓缩液中加入9重量倍的乙醇，静置，取上清液，回收乙 醇，浓缩至相对密度1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50 %乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，分 别得水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠和珍珠母的提取物，混合后即得中间体Π ；或混合干燥 后得中间体II的粉末； 步骤C:制备中间体IIICl 取猪胆粉和雄黄碎成细粉，混合，加入4%氢氧化钠6重量倍，静置M小时，过滤， 滤液调PH值至4，浓缩，加入50%乙醇12重量倍；取上清液，回收乙醇，浓缩，即得中间体 III ；或干燥后得中间体III的粉末；或C2 取猪胆粉碎成细粉，加入4%氢氧化钠6重量倍，静置M小时，过滤，滤液调PH 值至4，浓缩，加入50%乙醇12重量倍；取上清液，回收乙醇，浓缩，即得猪胆粉提取物，或干 燥后得猪胆粉提取物粉末；取雄黄粉碎成细粉，加入6重量倍8%盐酸，静置M小时，过滤， 滤液调PH值至4，浓缩，加入水洗至无色，即得雄黄提取物，或干燥后得雄黄提取物粉末；将 猪胆粉提取物与雄黄提取物混合，得中间体III或得中间体III的粉末；步骤D 制备药粉Dl 分别将冰片、薄荷脑、朱砂和赭石制备极细粉，混合得药粉； 或D2:将冰片、薄荷脑和赭石制备极细粉，将朱砂加6重量倍水研至糊状，再按1 65 加入水搅拌，静置，倾出混悬液，沉渣再研磨；如上法反复4次，合并各次混悬液，静置，取沉 淀于35°C凉干，研粉即得朱砂极细粉；将上述四种原料药的极细粉混合得药粉； 步骤E 制剂将中间体Ι、Π、ΙΙΙ或中间体Ι、Π、ΙΙΙ的粉末与药粉混合，按常规工艺，加入常规辅料 制成药学上可接受的剂型，如散齐 、颗粒剂、片齐 、胶囊齐 、分散片、滴丸齐 、水丸剂、蜜丸齐U、 微丸剂、浓缩丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或注射剂； 方法2 由如下步骤Α、B、C和D组成 步骤A 制备中间体IAl 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取3次，每次1. 5小时， 合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加入7重量倍的50%乙醇，静置M小时，取上清液回收乙 醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或Α2 将原料药黄芩、黄连、桅子、郁金和石膏共同加热水回流提取3次，每次1. 5小 时，合并水煎液，浓缩至相对密度1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收乙 醇，浓缩，即得中间体I ；或干燥后得中间体I的粉末；或A3 将郁金先加热水回流提取3次，每次1. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与原料药 黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小时，合并水煎液，浓缩至稠膏；稠膏中加 入7重量倍的50%乙醇，静置M小时，取上清液回收乙醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间体I；或干燥后得中间体I的粉末；或Α4 将郁金先加热水回流提取3次，每次1. 5小时，挥发油备用；郁金药渣与原料 药黄芩、黄连、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小时，合并水煎液，浓缩至相对密度 1-1. 2，离心，上清液过大孔树脂柱，50%乙醇洗脱，回收乙醇，浓缩，喷入挥发油，即得中间 体I ；或干燥后得中间体I的粉末； 步骤B:制备中间体IIBl 将原料药水牛角浓缩粉、人工牛黄、珍珠、珍珠母、猪胆粉和雄黄粉碎成细粉，混合， 加入7重量倍的50%乙醇，50°C温浸M小时，过滤，取滤液，回收乙醇，浓缩，即得中间体II；或干燥后得中间体II的粉末；步骤C:制备药粉Cl 分别将冰片、薄荷脑、朱砂和赭石制备极细粉，分别或混合得药粉； 或C2:将冰片、薄荷脑和赭石制备极细粉，将朱砂加6重量倍水研至糊状，再按1 65 加入水搅拌，静置，倾出混悬液，沉渣再研磨；如上法反复4次，合并各次混悬液，静置，取沉 淀于35°C凉干，研粉即得朱砂极细粉；将上述四种原料药的极细粉混合得药粉； 步骤D 制剂将中间体I、II或中间体I、II的粉末与药粉混合，按常规工艺，加入常规辅料制成药学 上可接受的剂型，如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、分散片、滴丸剂、水丸剂、蜜丸剂、微丸剂、 浓缩丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或注射剂。
8.如权利要求6-7任一所述的检测方法，其特征在于该方法中所述的药物组合物的制备工艺中的任意步骤由常规方法替代；所述大孔树脂柱型号均为YPR-II，X5，AB-8，HPD-100，DX-5，D101，DA201，DM130，WLD-3 或 NKA-9。
全文摘要
本发明公开了中药安脑丸及其配方原料制成的制剂的检测方法。本发明检测方法包括鉴别和/或含量测定方法，其中鉴别方法为胆酸、猪去氧胆酸的鉴别、黄连的鉴别、栀子苷的鉴别和黄芩苷的鉴别中的一种或几种，含量测定方法为栀子苷、黄芩苷、黄连、薄荷脑和冰片含量测定方法中的一种或几种。本发明所述检测方法均表现良好的线性关系、精密度、稳定性、重现性和回收率，对于严格控制安脑丸及其制剂的质量具有重要意义。
文档编号A61K35/413GK102058827SQ20091023756
公开日2011年5月18日 申请日期2009年11月12日 优先权日2009年11月12日
发明者刘丽颖, 郑松涛 申请人:刘丽颖