专利名称：一种防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及中药提取物组合物，具体涉及一种防治脂代谢紊乱的植物提取物组合 物及其制备方法。
背景技术：
“复方贞术调脂方”(FTZ)，是一种中药组合物，用于治疗高脂血症，取得理想疗效， 临床总有效率达91%。全方由女贞子、白术、佛手、杜仲、大蓟、丹参、黄连、三七8味中药组 成。该组方FTZ已获国家发明专利授权，专利号200410051250.4。虽然不少复方中药具有良好的血脂调节功能和临床疗效，但是由于是中药复方制 剂，还有许多不足之处(1)其成分较复杂，其有效成分还不清楚，不易量化，最终将影响产 品的临床疗效的稳定性，(2)相对简单的制备工艺，方中有效成分得不到应有的纯化，杂质 成分多，服用剂量大，病人服用顺应性不够理想，(3)由于方剂提取物量大，应用范围受到各 种限制。
发明内容
本发明的目的在于克服已有技术的不足，提供一种疗效更显著确切，有效成份含 量高，易于量化，质量易于控制的防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物。本发明的另一目的是提供一种工艺稳定，重现性好的上述防治脂代谢紊乱的植物 提取物组合物的制备方法。本发明的又一目的是提供上述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物在制备预防 或治疗脂代谢紊乱相关疾病药物和或保健品中的应用。本发明通过以下技术方案实现上述目的
一种防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物，包括三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提 取物。三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物的重量比优选为广9:广3。一种防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物的制备方法，步骤如下
(ι)三七总皂苷提取物的制备将原料药物三七经过(V3醇提后，合并总提取物，浓缩 总提取物后得到浓缩液，除去浓缩液中非皂苷类成分，得到三七总皂苷提取物；
(2)黄连总生物碱提取物的制备将原料药物黄连加Ci_3醇回流提取，回收CV3醇，浓缩 得浓缩液，再以酸溶解碱沉淀重结晶析出黄连总生物碱提取物；
(3)将三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物混合，得到防治脂代谢紊乱的植物提 取物组合物。上述制备方法步骤(1) Ci_3醇提是用30 95体积％的CV3醇提取1 5次，优选 用65 75体积％的C"醇提取2 3次，每次提取的CV3醇体积为药材质量的1 15倍， 优选为5 10倍，每次提取时间为5分钟以上，优选为6(Γ120分钟；所述Cu醇为甲醇、乙 醇或丙醇，优选为乙醇，因为乙醇安全性比甲醇更高，也更易获得，提取效果也比丙醇好。
步骤(1)中除去浓缩液中非皂苷类成分采用大孔树脂，大孔树脂与浓缩液的用量 比是Ikg树脂加浓缩液0. 5飞L，优选为广1. 5L。用大孔树脂柱吸附后洗脱用5(Γ95体积％ 乙醇，优选为75 85体积％乙醇，用量为每Ikg大孔树脂用;Γ20 L乙醇，优选4飞L乙醇， 以广20 ml/min，优选5 12 ml/min流速洗脱、洗脱至无色；所述大孔树脂为聚酰胺型树脂 或聚苯乙烯弱碱性阴离子交换树脂。步骤(2) CV3醇回流提取是用50 95体积％，优选为65 75体积％ C1^3醇提取1 5次，优选为2 3次，每次提取的C"醇体积为药材质量的1 15倍，优选为5 10倍， 每次提取时间为5分钟以上，优选为6(Γ120分钟。所述CV3醇为甲醇、乙醇或丙醇，优选为 乙醇，因为乙醇安全性比甲醇更高，也更易获得，提取效果也比丙醇好。酸溶解是用醋酸溶解，醋酸用量为Cu醇提物的3 10倍，优选为3 5倍；加 Γ30质量％，优选为10质量％HC1调pH为0. 2 4，优选pH为1. 5 2. 5。加入NaCl重结晶， 溶液NaCl浓度约为5 12质量％，优选为6 8质量％ ；碱沉淀是用广30质量％，优选为 10质量％NaOH溶液，pH为纩13，优选pH为1广12. 5，重结晶体积为黄连重量的广5倍，优选 为2 3倍。防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物在制备预防或治疗脂代谢紊乱疾病药物或 保健品中的应用，所述脂代谢紊乱疾病为高脂血症、代谢综合症等。本发明中所述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物简称为SHCE。所述药物为将SHCE按照药剂学上可以接受的载体和/或辅料，使用一般制剂方 法，加工成为口服制剂或注射制剂等形式。常规辅料有润滑剂、填充剂、粘合剂、崩解剂等。 口服制剂有片剂、胶囊、散剂、丸剂、粉末、颗粒、晶体、溶液、浸出物、悬剂、汤、糖浆、酏剂、 茶、油等形式。本发明的SHCE有效成分为三七皂苷Rl、人参皂苷Rb 1、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、 人参皂苷Rgl、小檗碱、黄连碱、表小檗碱、巴马汀。其中重量比例比为三七皂苷Rl 人参皂 苷Rbl 人参皂苷Rd:人参皂苷Re 人参皂苷Rgl 小檗碱黄连碱表小檗碱巴马汀等于 1 4:1 8:1 3:1 2:1 11:1 10 :1 3:1 2:1 3。当三七总皂苷提取物和黄总生物碱提取物的配比为7 3时，SHCE有效成分及重 量百分含量比分别为三七皂苷Rl 人参皂苷Rgl 人参皂苷Re 人参皂苷Rbl 人参皂苷 Rd 小檗碱黄连碱表小檗碱巴马汀等于2. 3 2. 8 10 12 :0. 95 1. 1 :7. 6 9. 0 1. 6 1. 9 :9· 5 11. 5 :2· 4 2. 8 1. 1 1. 3 :2. 1 2. 4。经药理研究，(1)动物体内试验表明，本发明SHCE对实验性高脂血症，有明显降低 胆固醇的作用，能够改善脂质代谢；(2)本发明SHCE能作用于脂代谢的胆固醇吸收、转运、 转化、排泄和体内胆固醇合成等环节，从而调节脂质代谢紊乱；(3)临床研究结果表明，本 发明SHCE具有显著的降脂作用，治疗高血脂症和代谢综合征临床疗效确切，并且没有观察 到明显副作用。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果
本发明SHCE是在中国发明专利ZL200410051250. 4基础上，选取其中的两味中药三七 和黄连，用其提取物组成的组合物，该组合物是在进行活性成分群(有效部位)及其组分配 伍的活性筛选而获得的最佳配伍。通过本发明制备方法，可以去除复方中药中大量无效的 化学成分，得到更有效的中药有效提取部位，既保留了中药特色，又使传统中药中的有效成分含量大大提高，减少了无效成分对产品加工和制剂质量及安全性的影响，使该复方中药 有效成分明确，制备工艺稳定，产品质量可控，有利于大量生产。动物体内试验表明，该植物 提取物组合物对实验性高脂血症有明显降脂作用，能降低胆固醇，改善脂质代谢，并且没有 观察到明显副作用，增加了用药的安全性。本发明的优点在于为预防和/或治疗脂质代谢紊乱相关疾病提供了一种新产品。 本发明与同类防治脂代谢脂紊乱相关疾病的药品比较，疗效确切，安全无明显毒副作用，单 独使用或与其它药物复配都有良好的应用前景。本发明的防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物与复方贞术调脂方(原方，FTZ)相 比较
(1)服用量由原来的6g提取物缩减为600mg，缩减为原来的1/10；
(2)药物有效成分的含量提高约10倍；
(3)动物体内试验表明，SHCE对实验性高脂血症有明显降脂作用，并能降低胆固醇的作 用，改善脂质代谢，并且没有观察到明显副作用，增加了用药的安全性。对于高脂饮食性高 脂血症的降血胆固醇的药效，SHCE部分指标优于原方，达到了减少服用量而不降低药效的 目的。
图1 实施例1 SHCE的制备(6)片剂的制备项下SHCE经HPLC分析得到的指纹图 谱中三七总皂苷成分的色谱峰图。图2 实施例1 SHCE的制备(6)片剂的制备项下SHCE经HPLC分析得到的指纹图 谱中黄连总生物碱成分的色谱峰图。图3 实施例2中SHCE促进L_02肝细胞胆固醇7 α羟化酶(CYP7A1)基因mRNA表 达的试验结果图，其中1为空白对照，2为FTZ组，3为SHCE低剂量组，4为SHCE中剂量组， 5为SHCE高剂量组。图4 实施例2中SHCE对HMG-CoA还原酶活性的抑制作用，图中C为空白对照；FTZ 为FTZ组；SHCE小为SHCE小剂量组；SHCE大为SHCE大剂量组；辛伐他汀为辛伐他汀组。
具体实施例方式实施例1 SHCE的制备 一、三七总皂苷提取物的制备 (1)三七总皂苷提取物
称取10 kg三七药材，粉碎，以药材量的8倍、8倍和6倍的75体积％乙醇分别回流提 取3次，每次池，合并提取液用200目滤布过滤，合并滤液。回收乙醇并使醇提部分浓度为 Iml相当于Ig生药的浓缩液(1. 9 L);上大孔树脂柱吸附，大孔树脂为聚苯乙烯弱碱性阴离 子交换树脂系列的HPD-100，按1 kg树脂加浓缩液1.5L上大孔树脂柱吸附，用水洗至洗脱 液近无色，然后用85体积％乙醇4. 5 L以10 ml/min流速洗脱，洗脱至流出液无色，合并 洗脱液，真空减压回收乙醇并浓缩至为Iml约相当于2 g生药浓缩液(相对密度为1. 08 1. 10，60°C )，600C以下干燥得总皂苷提取物0. 65 kg。干燥的方法很多，可用减压干燥，也可用薄膜蒸发干燥等。本发明优选采用喷雾干
5燥法，其进风口温度80 108°C，出口温度55 60°C，风速5 10m/S，压力0. 02 0. IkPa,广2次干燥。三七总皂苷提取物用HPLC方法测定含三七总皂苷含量为73. 8%，人参皂苷Rbl、人 参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分别为提取物总重量的25. 6%、 5. 2%、3· 1%、32· 1%、7· 5%。(2)三七总皂苷提取物
称取10 kg三七药材，粉碎，以药材量的8倍、7倍和5倍的65体积％甲醇分别回流提 取3次，每次池，合并提取液用200目滤布过滤，合并滤液。回收甲醇并使醇提部分浓度为 Iml相当于Ig生药的浓缩液(2. O L);上大孔树脂柱吸附，大孔树脂为聚苯乙烯弱碱性阴离 子交换树脂系列的HPD-600，按1 kg树脂加浓缩液1.2 L上大孔树脂柱吸附，用水洗至洗 脱液近无色，然后用90体积％乙醇3. 5 L以10 ml/min流速洗脱，洗脱至流出液无色，合并 洗脱液，真空减压回收乙醇并浓缩至为Iml约相当于2 g生药浓缩液(相对密度为1. 08 1. 10，60°C )，600C以下减压干燥得总皂苷提取物0. 64 kg。三七总皂苷提取物用HPLC方法测定含三七总皂苷含量为75. 2%，人参皂苷Rbl、人 参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分别为提取物总重量的26. 1%、 5. 3%、3· 2%, 32. 8%、7· 6%。(3)三七总皂苷提取物
称取10 kg三七药材，粉碎，以药材量的8倍、7倍的70体积％正丙醇分别回流提取2 次，每次池，合并提取液用200目滤布过滤，合并滤液。回收正丙醇并使醇提部分浓度为Iml 相当于Ig生药的浓缩液(1.7 L);上大孔树脂柱吸附，大孔树脂优选为聚酰胺型AB-8。按 1 kg树脂加浓缩液1.3L上大孔树脂柱吸附，用水洗至洗脱液近无色，后用80%乙醇6 L以 9 ml/min流速洗脱、洗脱至流出液无色、合并洗脱液，真空减压回收乙醇并浓缩至为Iml约 相当于2 g生药浓缩液(相对密度为1. 08 1. 10，60°C )，60°C以下减压干燥得总皂苷提取 物 0.62 kg。三七总皂苷提取物用HPLC方法测定含三七总皂苷含量为72. 2%，人参皂苷Rbl、人 参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分别为提取物总重量的25. 3%、 5. 0%、3· 2%, 31. 3%、7· 2%。 表1不同制备工艺三七总皂苷提取物得率及HPLC含量测定结果(％)
样品序号得率三七总皂苷人参皂苷Rbl人参皂苷Rd人参皂苷Re人参皂苷Rgl三七皂苷Rl(1)6. 573. 825. 65. 23. 132. 17. 5(2)6. 475. 226. 15. 33. 232. 87. 6(3)6. 272. 225. 35. 03. 231. 37. 2
、黄连总生物碱的制备
(4)黄连总生物碱提取物
称取10 kg黄连药材，粗粉碎，以药材量的6倍、5倍和5倍的70%乙醇分别回流提取3 次，每次2 h，合并提取液，真空减压回收乙醇浓缩至1.3g药材、ml，得流浸膏2. lkg。加入 冰醋酸6 L溶解，充分搅拌，4 10°C放置过夜，离心(5000 r / min，15min)，抽滤，弃去沉 淀，取上清液，上清液中加10质量％HC1调pH至2. 5，然后加入NaCl，使溶液NaCl浓度约为 8质量％，充分搅拌，使NaCl溶解，静置Mh，离心(5000 r / min，15min)，收集沉淀物；上清 液加10质量％NaOH调pH至12，静置24h，离心(5000 r / min，15min)，收集沉淀物，合并2次沉淀物，60°C减压干燥，即得黄连总生物碱提取物1.65 kg。黄连总生物碱提取物用HPLC方法测定含总生物碱含量为57. 1%，其中小檗碱 35. 0%,黄连碱8. 6%、表小檗碱4. 1%、巴马汀7. 6%。(5 )黄连总生物碱提取物
称取10 kg黄连药材，粗粉碎，以药材量的8倍、5倍和4倍的75体积％甲醇分别回流 提取3次，每次2 h，合并提取液，真空减压回收甲醇得浸膏2. 05kg。加入冰醋酸溶解5. 5 L， 得酸水提取液，4 1(TC放置过夜，离心(5000 r / min，15min)，抽滤，弃去沉淀，取上清液， 上清液中加10质量％HC1调pH至3. 0，然后加入NaCl，使溶液NaCl浓度约为6质量％，充 分搅拌，使NaCl溶解，静置Mh，离心(5000 r / min，15min)，收集沉淀物；上清液加10质 fi%NaOH调pH至12，静置24h，离心(5000 r / min，15min)，收集沉淀物，合并2次沉淀物， 60°C减压干燥，即得黄连总生物碱提取物1. 63 kg。黄连总生物碱提取物用HPLC方法测定含总生物碱含量为55. 6%，其中小檗碱 34. 0%,黄连碱8. 4%、表小檗碱4. 0%、巴马汀7. 5%。三七总皂苷色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表2中的 规定进行梯度洗脱；检测波长为203nm ；流速lml/min ；柱温25°C ；检测波长203nm ；自动 进样器进样。表 权利要求
1.一种防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物，包括三七总皂苷提取物与黄连总生物碱 提取物。
2.根据权利要求1所述的防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物，其特征在于所述三七 总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物的重量比为广9:广3。
3.权利要求1或2所述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物的制备方法，步骤如下(ι)三七总皂苷提取物的制备将原料药物三七经过(V3醇提后，合并总提取物，浓缩总提取物后得到浓缩液，除去浓缩液中非皂苷类成分，得到三七总皂苷提取物；(2)黄连总生物碱提取物的制备将原料药物黄连加Ci_3醇回流提取，回收CV3醇，浓缩 得浓缩液，再以酸溶解碱沉淀重结晶析出黄连总生物碱提取物；(3)将三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物混合，得到防治脂代谢紊乱的植物提 取物组合物。
4.根据权利要求3所述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于 步骤(1) C1^3醇提是用30 95体积％的Cp3醇提取1 5次，每次提取的Cp3醇体积为药 材质量的1 15倍，每次提取时间为5分钟以上；所述CV3醇为甲醇、乙醇或丙醇。
5.根据权利要求3所述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于 步骤(1)中除去浓缩液中非皂苷类成分采用大孔树脂，大孔树脂与浓缩液的用量比是Ikg 大孔树脂加浓缩液广5L。
6.根据权利要求5所述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于 是用大孔树脂柱吸附后洗脱用5(Γ95体积％乙醇，用量为每Ikg大孔树脂用5 20 L乙醇，以 Γ20 ml/min流速洗脱，洗脱至无色；所述大孔树脂为聚酰胺型树脂或聚苯乙烯弱碱性阴离 子交换树脂。
7.根据权利要求3所述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于 步骤(2)(V3醇回流提取是用5(Γ70体积醇提取1 5次，每次提取的Cu醇体积为药 材质量的1 15倍，每次提取时间为5分钟以上。
8.根据权利要求3所述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于 步骤(2)所述酸溶解是用醋酸溶解，用广30质量％HC1调pH为0.广5。
9.根据权利要求3所述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于 步骤(2)所述碱沉淀是用广30质量％NaOH溶液，pH为9 13，重结晶体积为黄连重量的广5 倍。
10.权利要求1或2所述防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物在制备预防或治疗脂代 谢紊乱疾病药物或保健品中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物，包括三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物。本发明还公开了上述组合物的制备方法，是将三七经过C1-3醇提后，合并总提取物，浓缩后得总提取物浓缩液，除去其中非皂苷类成分，得到三七总皂苷提取物；将黄连加C1-3醇回流提取，回收C1-3醇，浓缩，浓缩液再以酸溶解碱沉淀重结晶析出总生物碱提取物，两者混合后得到防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物。本发明的防治脂代谢紊乱的植物提取物组合物去除了原复方中药中大量无效的化学成分，减少了无效成分对产品加工和制剂质量及安全性的影响，使有效成分明确，含量增加，制备工艺稳定，产品质量可控，利于工业化生产，并显著提高降脂药效。
文档编号A61P3/06GK102100761SQ20111002684
公开日2011年6月22日 申请日期2011年1月25日 优先权日2011年1月25日
发明者郭姣 申请人:广州中医药大学