专利名称：万年蒿提取物在制备抗肝损伤药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及朝药万年蒿的提取物，具体涉及从朝药万年蒿中分离得到的抗肝损伤的单体化合物。
背景技术：
肝损伤是多种肝脏疾病共有的一种特点突出的病理状态，严重威胁着人类健康。 各种有害因素诸如药物、病毒、酒精、生物等可能致使肝功能有不同程度的损害，从而使肝脏的解毒、排泄功能及贮备和再生能力降低，肝血流量减少，代谢负荷加重，从而发生内环境紊乱，肝细胞坏死和凋亡，进而造成肝损伤。各种有害因素导致的肝损伤主要有药物性肝损伤、病毒性肝损伤、酒精性肝损伤、免疫性肝损伤等类型，全世界有数十亿人曾经或正忍受着肝损伤的痛苦。以病毒性肝损伤病因中的乙型肝炎病毒为例，全世界有20亿人感染过乙型肝炎病毒(HBV)，其中3. 78亿人转化成慢性感染，0. 5-1. 2亿人死于肝硬化、肝衰竭、肝癌等。药物性肝损伤、酒精性肝损伤患者也同样不计其数。肝损伤的长期存在往往会导致肝纤维化，是进而诱发肝硬化，肝功能衰竭，甚至肝癌的重要始动因素。因此预防和治疗肝细胞损伤是临床上肝病治疗的重要环节之一，是抑制肝纤维化、肝坏死、脂肪肝、胆汁郁积、 肝硬化以及肝癌等疾病发生和发展的基础。治疗和预防肝损伤，在临床上没有特别好的办法。因此目前临床上对疗效明确、副作用低的抗肝损伤药物的需求十分强烈。虽然现有技术中有一些中草药的提取物具有抗肝损伤的作用，但从中草药中提取得到具有治疗作用的化合物单体相比于提取物至少具有以下几个方面的优势单体化合物作为活性成分更加容易控制质量，特别是对于注射剂而言， 使用单体化合物作为活性成分更加安全；提取物中有效成分含量通常较少，单体化合物作为活性成分时其来源并不仅仅局限于提取。因此，如何从中草药中提取得到具有活性成分的单体一直是现代中药领域具有挑战性的研究。
发明内容
本发明的目的是制备一种具有治疗肝损伤的药物。为了实现本发明的目的，本发明采用如下的技术方案本发明涉及化合物1-3在制备治疗肝损伤药物中的应用，其中所述的化合物1是 2-羟基-6-甲氧基苯乙酮-4-0- β -D-葡萄糖苷；化合物2是苯乙酮-4-0- β -D葡萄糖苷； 化合物3是6-甲氧基-槲皮万寿菊素-7-0- β -D-葡萄糖苷。在本发明的一个优选实施方式中，所述的药物包括化合物1-3中的一种、两种或三种作为活性成分。在本发明的一个实施方式中，所述的化合物1-3是从万年蒿提取分离或者通过化学合成的方法或者通过从其它中草药中提取分离得到。在本发明的一个优选实施方式中，所述的药物是将所述的化合物以及药学上可接受的药物制成药学上可接受的剂型，所述的剂型包括但不限于丸剂、片剂、胶囊剂、口服液、散剂、注射剂。在本发明的一个优选实施方式中，本发明的药物不包括除化合物1-3以外的其它抗肝损伤的活性成分。在本发明的一个优选实施方式中，本发明的药物还包括其它西药活性成分。在本发明的一个优选实施方式中，本发明的所述的肝损伤是药物性肝损伤、病毒性肝损伤、酒精性肝损伤和/或免疫性肝损伤。本发明得到的药物的活性成分是从万年蒿提取得到，其来源广泛，对肝损伤具有显著的疗效。
具体实施例方式1.单体化合物的分离取1500g万年蒿中加入水浸泡池后加热池，过滤得到滤液I，残渣中加水再加热 lh，得到滤液II，合并滤液I和II，得到万年蒿水提液。预处理过的大孔吸附树脂柱中加入万年蒿水提液，依次用蒸馏水、50%乙醇、95%乙醇洗脱，收集50%乙醇洗脱液，浓缩后冷冻干燥至干，将其中的万年蒿50%乙醇洗脱物用水溶解，依次用二氯甲烷、乙酸乙酯萃取， 得到二氯甲烷萃取物，乙酸乙酯萃取物及剩余水溶解部分。取其中剩余水溶解部分适量上样于预处理的反相硅胶柱中，甲醇-水系统梯度洗脱。以薄层层析原理为依据观察、判断， 25%和50%甲醇洗脱液洗脱部分分别上样于反相硅胶柱层析柱、葡聚糖凝胶柱(kphadex LH-20)层析柱，分别得到单体化合物1和2。通过波谱解析和文献对照，确定其化学结构为分别为2-羟基-6-甲氧基苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷，和苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷。取乙酸乙酯萃取物适量，用甲醇溶解、过滤后湿法上样于反相硅胶层析柱，甲醇-水系统洗脱，其中一部分上样于葡聚糖凝胶(S^hadex LH-20)层析柱，甲醇-水系统反复洗脱，得到少量样品，再经制备型高效液相色谱法确定流动相为甲醇-水5 5的混合液，保持柱温为室温，检测波长为2Mnm，流速为lml/min，进样量为300uL/次，得到一个单体化合物3，通过波谱解析和文献对照，确定其化学结构为6-甲氧基-槲皮万寿菊素-7-0-β-D-葡萄糖苷。化合物1，2，3的波谱数据分别如下化合物1 :2-羟基-6-甲氧基苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷1H-WR (300MHz，PYRIDINE-d5) δ ppm :14. 30 (1H，s，2-0H)，6. 68(lH，d，J = 2. OOHz, H-3)，6· 34 (1H, d, J = 2. OOHz, H_5)，5. 72 (1H, d, J = 6. 72，m, H-I' )，3. 67 (3H, s, OCH3)， 2. 50 (3H, s, COCH3).13C-NMR (75MHz, CD3OD) δ ppm :107. 89 (C-1) , 163. 27 (C-2) ,96. 40 (C-3), 164. 08 (C-4), 91. 43 (C-5), 166. 23 (C-6), 99. 98 (C-l ' ),73. 31 (C-2 ' ), 76. 49 (C-3 ')， 69. 92(C-4 ' ) ,77. 04 (C-5 ' ) ,61. 06 (C-6 ' ), 203. 49 (C = 0), 31. 81 (COCH3), 54. 92 (-OCH3).化合物2 :苯乙酮-4-0- β -D-葡萄糖苷1H-WrGOOMHz,，D2O) 7. 78 (2Η, d, J = 8. 32Hz，H-2，6)，7. 00 (2H, d, J = 8. 34Hz, H-3, 5)，2. 42 (3H, s, COCH3)，5. 06 (1H, d, J = 6. 36Hz, H-I' )，3. 21-3. 82 (m-sugar-H)。13C-NMR (75MHz，，D2O) 107. 7 (C-I) , 131. 11 (C-2, 6) , 116. 12 (C-3, 5)，160. 92(C-4) ,99. 48 (C-l ' ), 72. 90 (C-2 ' ) ,75. 58 (C-3 ' ) ,69. 46 (C-4 ')， 76. 29 (C-5' ) ,60. 61 (C_6' ),202. 51 (C = 0),26. 03 (COCH3)。化合物3 :6-甲氧基-槲皮万寿菊素-7-0- ^ -D-葡萄糖苷1H-WrGOOMHz, (CD3)2CO) 8 ppm 12. 42 (1H, s，5-0H)，6. 47 (1H，s，8-H)，3. 75 (3H， s，6-0CH3)，7. 89(lH，d，J = 2. OlHz, 2' -H), 6. 82(lH，d，J = 8. 40Hz,5' -H)，7. 46(lH，dd， J = 2. 01,8. 40Hz，6' -H), 5. 12 (1H, d, J = 7. 26Hz, H-I " )，3. 24-3. 75 (m, sugar-H).13C-NMR (75MHz, DMS0_d6) 8 ppm :145. 26 (C-2)，133. 43 (C-3)，178. 11 (C-4)， 156. 72 (C-5)，131. 70 (C_6)，157. 95 (C_7)，94. 22 (C_8)，152. 84 (C_9)，104. 76 (C-IO)， 122. 06 (C-l ' ), 116. 64 (C-2 ' ), 151. 98 (C-3 ' ),148. 91 (C-4 ' ), 115. 65 (C-5 ')， 121. 67(C-6 ' ),101. 31 (C-l “ ),74.55 (C-2 “ ), 76. 96 (C-3 “ ),70. 41 (C-4 “)， 78. 02 (C-5 〃 )，61.45(C-6" ), 60. 43 (-OCH3).化合物1，2，3的结构式分別如下
权利要求
1.化合物1-3在制备治疗肝损伤药物中的应用，其中所述的化合物1是2-羟基-6-甲氧基苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷；化合物2是苯乙酮-4-0-β -D葡萄糖苷；化合物3是 6-甲氧基-槲皮万寿菊素-7-0- β -D-葡萄糖苷。
2.根据权利要求1所述的应用，所述的药物包括化合物1-3中的一种、两种或三种作为活性成分。
3.根据权利要求1所述的应用，所述的化合物1-3是从万年蒿提取分离或者通过化学合成的方法或者通过从其它中草药中提取分离得到。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的应用，所述的药物是将所述的化合物以及药学上可接受的药物制成药学上可接受的剂型。
5.根据权利要求4所述的应用，所述的剂型选自丸剂、片剂、胶囊剂、口服液、散剂、注射剂中的一种。
6.根据权利要求1所述的应用，所述的药物不包括除化合物1-3以外的其它抗肝损伤的活性成分。
7.根据权利要求1所述的应用，所述的药物还包括其它西药活性成分。
8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的肝损伤是药物性肝损伤、病毒性肝损伤、酒精性肝损伤和/或免疫性肝损伤。
全文摘要
本发明公开了万年蒿提取分离得到的2-羟基-6-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-葡萄糖苷；苯乙酮-4-O-β-D葡萄糖苷和6-甲氧基-槲皮万寿菊素-7-O-β-D-葡萄糖苷在制备抗肝损伤药物中的应用。本发明得到的药物的活性成分是从万年蒿中提取分离得到，其来源广泛，对肝损伤具有显著的疗效。
文档编号A61K31/7048GK102379889SQ20111024473
公开日2012年3月21日 申请日期2011年8月25日 优先权日2011年8月25日
发明者元海丹, 朴光春 申请人:朴光春