专利名称：番茄红素在制备治疗脑缺血损伤药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及番茄红素在药物制备领域的新用途，特别涉及番茄红素在制备治疗脑缺血损伤药物中的应用。
背景技术：
番茄红素是食用番茄中的一种脂溶性成分，其分子式为C4tlH56，分子量为536. 85。 其化学结构式中含有11个共扼双键及2个非共扼双键，这种多不饱和脂肪烃结构使得该化合物具有卓越的抗氧化性能，并成为天然胡萝卜素类中最有效的捕获剂，其猝灭单线态氧的速率常数较胡萝卜素高2倍。1990年I^oIO等报道了类胡萝卜素和生育酚等30余种生物抗氧化剂猝灭单线态氧的作用，番茄红素是猝灭单线态氧最强的。此外，番茄红素能通过化学反应消除其他形式的活性氧自由基，包括过氧化氢、亚硝酸根等，这些氧自由基能引起生物体中脂质、蛋白、生物酶及DNA等大分子的过氧化，而这种过氧化与人体老化、癌症发生、自身免疫病及神经退行性疾病等都有重大关系。已有研究表明，除抗氧化性能外，番茄红素还可以通过影响生长因子受体、细胞间缝隙连接的信号传导而抑制多种肿瘤细胞的生长、增殖和分化。
发明内容
本发明的一个目的是提供番茄红素在制备治疗脑缺血损伤药物中的应用。本发明提供了番茄红素在制备治疗脑缺血损伤药物中的应用；所述治疗脑缺血损伤药物为如下1)-3)中至少一种1)治疗脑水肿的药物；2)治疗脑梗死的药物；3)治疗神经损伤的药物。所述药物为如下a)或b)所示a)所述药物由番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜组成；b)所述药物由番茄红素、水和二甲基亚砜组成。所述a)中所述番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜的质量比为1 1 99 1 1 495 ；所述b)中所述番茄红素、水和二甲基亚砜的质量比为1 1 49. 5 1:1:198。所述a)中所述不饱和磷脂为橄榄油。本发明的另一个目的是提供一种治疗脑缺血损伤的药物。本发明所提供的治疗脑缺血损伤的药物，其活性成分为番茄红素。所述治疗脑缺血损伤的药物为如下1)-3)中至少一种1)治疗脑水肿的药物；2)治疗脑梗死的药物；
3)治疗神经损伤的药物。所述治疗脑缺血损伤的药物为如下a)或b)所示a)所述药物由番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜组成；b)所述药物由番茄红素、水和二甲基亚砜组成。所述a)中所述番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜的质量比为1 1 99 1 1 495 ；所述b)中所述番茄红素、水和二甲基亚砜的质量比为1 1 49. 5 1:1: 198。所述a)中所述不饱和磷脂为橄榄油。本发明为北京市自然基金资助项目，项目编号为7092009。本发明提供了一个新的在急性脑缺血再灌注损伤期具有治疗和保护作用的药物。本发明具有以下明显优势(1)本发明避免了预防性给药面临用药的盲目性和长期用药的问题。预防用药的目的是用以预防未来可能发生的疾病，则首先面临的问题是那些人需要用药，即哪些人群是可能的疾病高发人群；对于这些人群来说疾病在未来可能发生也可能不发生，必然带来用药的盲目性；其次，即便针对高发人群，用药预防不知未来何时的可能疾病，意味着需要长期用药，必然出现用药依从性差的问题，而且预防成本也不容忽视；(2)本发明提供了一个可能的临床急需的急性期治疗用药，即在急性脑缺血再灌注损伤期具有治疗和保护作用的药物，具有很强的临床针对性。在急性脑缺血损伤中，最缺乏的是急性治疗药物，尤其是在临床常规采用血管扩张药物急救的情况下，再灌注损伤在所难免。本发明的研究表明番茄红素在急性脑缺血的再灌期给药，仍然能够发挥很好的抗脑梗塞和神经保护作用，因此本发明具有真正的临床治疗学意义和极大的临床优势。(3)本发明提供了可能的参考剂量范围。在对抗大鼠脑缺血再灌损伤中，番茄红素在50-200mg/kg(每日2次)的剂量范围内有明显对抗脑梗塞、脑水肿和神经行为保护作用，对临床用药具有一定的指导意义。
图1为假手术(空白)对照组TTC染色脑片照片。图2为模型对照组TTC染色脑片照片。图3为番茄红素小剂量组(20mg/kg) TTC染色脑片照片。图4为番茄红素中剂量组(50mg/kg)TTC染色脑片照片。图5为番茄红素大剂量组(100mg/kg) TTC染色脑片照片。图6为依达拉奉组TTC染色脑片照片。
具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1、番茄红素在制备治疗脑缺血损伤药物中的应用一、制备治疗脑缺血损伤的药物以番茄红素为主体药物，与不饱和磷脂等乳化制成混悬剂，用于脑缺血再灌损伤的急性期与康复期治疗。本实施例中，向IOOmg番茄红素(含量> 99% )(购自西安博胜生物有限公司， 产品目录号为13739-02-1)中加入0. Iml 二甲基亚砜(DMSO)快速研磨乳化，再逐渐加入 9. 9ml橄榄油，混勻后超声混悬20分钟，即得10mg/ml番茄红素制剂。该10mg/ml番茄红素制剂中，番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜的质量比为1 1 99。在此基础上用橄榄油稀释得到5mg/ml番茄红素制剂和2mg/ml番茄红素制剂，以确保不同番茄红素剂量下大鼠灌服的橄榄油溶剂为等体积。5mg/ml番茄红素制剂中，番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜的质量比为1 1 198。2mg/ml番茄红素制剂中，番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜的质量比为1:1: 495。二、治疗脑缺血损伤的药物的效果评价本发明采用了线拴法大脑中动脉阻断模型造成大鼠急性脑缺血再灌损伤模型，并采用急性治疗给药方式(再灌注期间给药)，从脑梗塞面积、脑水肿程度及动物行为评分三方面证明番茄红素对急性脑缺血再灌损伤的急性治疗作用和神经康复作用。1.实验材料与方法动物与分组Wistar雄性大鼠M只，体重240_260g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司。实验分为6组，每组8只⑴假手术(空白)对照组；⑵模型对照组；(3)番茄红素小剂量组(20mg/kg)(即上述实验一制备的2mg/ml番茄红素制剂，用量为1. 0ml/100g)； (4)番茄红素中剂量组(50mg/kg)(即上述实验一制备的5mg/ml番茄红素制剂，用量为 1. 0ml/100g) ； (5)番茄红素大剂量组(100mg/kg)(即上述实验一制备10mg/ml番茄红素制剂，用量为1.0ml/100g) ； (6)依达拉奉组(3mg/kg)(购自Sigma公司，产品目录号为 M70800)。番茄红素组分别在再灌后即时和再灌后2小时灌胃给药，依达拉奉组在同样时间采用静脉注射给药，模型对照组在造模后相同再灌时间点给予等剂量溶剂(含DMSO的橄榄油)，空白对照组为不插入线栓的假手术动物。脑缺血再灌模型的制备参照ka Longa等的方法，Wistar雄性大鼠以3%戊巴比妥钠Iml · kg—1麻醉后仰卧位固定，沿颈正中切开，分离暴露左侧颈总动脉(CCA)与颈内(ICA)、颈外动脉(ECA)， 夹闭CCA，于ECA外端0. 7cm处结扎并切口，将以多聚赖氨酸处理过的尼龙线栓线(长2cm， φ = 0.沈讓，顶部光滑圆头直径0. 36mm)轻轻插入，并顺势经ECA、ICA入颅至大脑中动脉 (MCA)分叉处(尼龙线进入CCA分叉处约18mm)后结扎，阻断MCA脑血流，同时放开夹闭的 CCA进行缺血。缺血2小时后，轻轻抽出尼龙线实现再灌注。之后将动物伤口缝合，独笼饲养。整个实验过程维持动物体温34°C，室温。神经行为评分各组动物在再灌M小时后取出，按照Bederson方法对动物的行为缺陷进行分级评分，其标准为0分未观察到神经症状，行为正常；1分提尾悬空时，动物的手术对侧前肢表现为腕肘屈曲，肩内旋，肘外展，紧贴胸壁；2分将动物置于光滑平面上，推手术侧肩向对侧移动时，阻力降低；3分动物自由行走时向手术对侧环转或转圈；4分软瘫，肢体无自发活动。脑梗塞面积和脑水肿检测方法如下
动物进行完行为检测后，断头处死，迅速取出完整大脑，以4°C的生理盐水洗去血迹，-20°C冻1011^11后在距离嗅球5_、7_、9_、11_和13mm处将大脑横断为5个2mm厚的切片，置1 % TTC溶液中37°C水浴避光染色lOmin，取出后照相，计算机分析脑梗塞面积和水肿程度。每组8只鼠，结果取平均值。脑梗死体积(％ )=(未损伤侧大脑面积-损伤侧非白色区面积)Λ2Χ未损伤侧大脑面积)X 100%。脑水肿(％ )=(损伤侧大脑面积-未损伤侧大脑面积)Λ2 X未损伤侧大脑面积)Χ100%ο结果见表1和图1-图6 ；图1为假手术(空白)对照组TTC染色脑片照片；图2 为模型对照组TTC染色脑片照片；图3为番茄红素小剂量组O0mg/kg)TTC染色脑片照片； 图4为番茄红素中剂量组(50mg/kg)TTC染色脑片照片；图5为番茄红素大剂量组(IOOmg/ kg)TTC染色脑片照片；图6为依达拉奉组TTC染色脑片照片。表1番茄红素橄榄油混悬剂对大鼠急性脑缺血再灌注导致的脑梗死体积、脑水肿及神经行为评分的影响(Mean士SD，η = 8)
权利要求
1.番茄红素在制备治疗脑缺血损伤药物中的应用；所述治疗脑缺血损伤药物为如下 1)-3)中至少一种1)治疗脑水肿的药物；2)治疗脑梗死的药物；3)治疗神经损伤的药物。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物为如下a)或b)所示a)所述药物由番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜组成；b)所述药物由番茄红素、水和二甲基亚砜组成。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述a)中所述番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜的质量比为1 1 99 1 1 495 ；所述b)中所述番茄红素、水和二甲基亚砜的质量比为1 1 49. 5 1 1 198。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于 所述a)中所述不饱和磷脂为橄榄油。
5.一种治疗脑缺血损伤的药物，其活性成分为番茄红素。
6.根据权利要求5所述的药物，其特征在于所述治疗脑缺血损伤的药物为如下1)-3) 中至少一种1)治疗脑水肿的药物；2)治疗脑梗死的药物；3)治疗神经损伤的药物。
7.根据权利要求5或6所述的药物，其特征在于所述治疗脑缺血损伤的药物为如下 a)或b)所示a)所述药物由番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜组成；b)所述药物由番茄红素、水和二甲基亚砜组成。
8.根据权利要求7所述的药物，其特征在于所述a)中所述番茄红素、不饱和磷脂和二甲基亚砜的质量比为1 1 99 1 1 495 ；所述b)中所述番茄红素、水和二甲基亚砜的质量比为1 1 49. 5 1 1 198。
9.根据权利要求7或8所述的药物，其特征在于所述a)中所述不饱和磷脂为橄榄油。
全文摘要
本发明公开了番茄红素在制备治疗脑缺血损伤药物中的应用。本发明提供了番茄红素在制备治疗脑缺血损伤药物中的应用；所述治疗脑缺血损伤药物为如下1)-3)中至少一种1)治疗脑水肿的药物；2)治疗脑梗死的药物；3)治疗神经损伤的药物。本发明提供了一个可能的临床急需的急性期治疗用药，即在急性脑缺血再灌注损伤期具有治疗和保护作用的药物，具有很强的临床针对性。本发明的研究表明番茄红素在急性脑缺血的再灌期给药，仍然能够发挥很好的抗脑梗塞和神经保护作用，因此本发明具有真正的临床治疗学意义和极大的临床优势。
文档编号A61P9/10GK102302479SQ20111029986
公开日2012年1月4日 申请日期2011年9月29日 优先权日2011年9月29日
发明者徐平湘, 熊杰 申请人:首都医科大学