专利名称：一种构树叶总黄酮提取物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种构树叶总黄酮提取物及其制备方法与应用。
背景技术：
构树(Broussonetia papyrifera(L. ) Ven. t)为桑科构树属植物，在我国大部分地区有分布，日本、越南、印度等国亦有分布，资源十分丰富。构树的成熟果实，称为“楮实子”， 收载于历版《中国药典》，为常见中药，具有补肾清肝、明目利尿的功效。构树叶又称为楮叶， 性凉味甘，无毒，能清热利湿，凉血止血，杀虫解毒，可用于治疗吐血、衄血、血崩、外伤出血、 水肿、疝气、痢疾和癣疮等。从20世纪80年代开始，人们即开始对构树的化学和药理进行研究。如Lee等从构树的整株植物中分离得到了多个黄酮类化合物(Lee D，Bhat K，Fong H et al. Aromatase inhibitors from Broussonetia papyrifera[J]. J. Nat. Prod,2001,64(10) : 1286—1293)。 高允生等(高允生，邱玉芳，高聆等.构叶醇提取物与黄酮苷对离体心房的抑制作用[J]. 中国药理学通报，1988,4(2) =122-123)对构树叶的乙醇提取物(BPAE)与总黄酮苷(BPF) 对家兔和豚鼠离体心房的作用进行了研究，发现BPAE和BPF均有抑制家兔和豚鼠心房收缩的作用，且BPF的效价强度远大于BPAE，证明了 BPF是构树抑制心房收缩的主要有效成分， 同时也说明了构树叶具有类似钙拮抗剂的作用。但目前尚没有关于构树叶总黄酮抗糖尿病作用的相关报道。中国专利申请“构树叶总黄酮提取物及其制备方法与应用”，公开号为 CN101637503A，对构树叶抑菌抗炎的有效部位和有效成分进行了研究，公开了采用溶剂法、 聚酰胺法和打孔吸附树脂法制备构树叶总黄酮；中国专利申请“一种构树叶总酚酸提取物及其在制备抗癌药物中的应用”，申请号为201110240305. 6，对构树叶抗癌的有效成分进行研究发现木脂素类成分抗癌活性较强，以绿原酸为指标，对抗癌有效部位进行了研究。糖尿病是一种常见的带有遗传倾向的内分泌代谢病。目前我国糖尿病患者的人数约为4千万，居世界各国之首，它是继心脑血管和肿瘤之后人类的第三大致死疾病(周广智.糖尿病有关问题进展.现代临床医学生物工程学杂志1999，5(1) :1)。；因此为了更好地开发和利用构树叶资源，有必要对构树叶的成分进行活性研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种构树叶总黄酮提取物及其制备方法与应用。本发明提供的构树叶总黄酮提取物的制备方法，包括如下步骤(1)用乙醇水溶液对构树叶进行提取至少一次得提取液；所述提取液经浓缩得到浓缩液；(2)所述浓缩液经脱脂溶剂进行脱脂后得到脱脂浓缩液；(3)所述脱脂浓缩液经分离纯化即得所述构树叶总黄酮提取物。上述的制备方法中，所述构树叶包括叶片和叶柄；所述构树叶为粉末状，粒度可为2目-60目。上述的制备方法中，步骤(1)中所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量可为0 100 %，但不为0，优选40 % 80 %，如70 % ；所述提取为回流提取、索氏提取、超声提取或闪式提取；所述提取的次数为1 3次；每次所述提取的时间可为0. 5 3小时，如2小时。上述的制备方法中，步骤(1)中所述乙醇水溶液的用量为所述构树叶的质量的 6 20倍，具体可为10倍；所述浓缩液与所述构树叶的重量份数比为O 1) 1，具体可为1.5 1 ；步骤O)中所述脱脂溶剂为石油醚或氯仿。上述的制备方法中，步骤(3)所述分离纯化的方法为树脂吸附法；所述树脂吸附法中树脂的用量为所述构树叶的质量的0. 5 2倍，优选1倍；所述树脂吸附法的淋洗液依次为、体积百分含量为30 80%的乙醇水溶液(优选为60%的乙醇水溶液)和体积百分含量为95%的乙醇水溶液，收集体积百分含量为30 80%的乙醇水溶液的洗脱液即可。上述的制备方法中，所述树脂按照包括如下步骤的方法进行预处理将所述树脂用体积百分含量为95%的乙醇水溶液依次经浸泡和回流后即可；所述树脂与所述体积百分含量为95%的乙醇水溶液的体积份数比可为1 2。本发明还提供了由上述方法制备的构树叶总黄酮提取物；该提取物包括式(I) (大波斯菊苷)、式(II)(木犀草素-7-0-β-D-葡萄糖苷)、式(III)(黑立脂素苷)、式(IV) (松脂醇-4' -Ο-β-D-葡萄糖-4〃 -Ο-β-D-芹糖苷)、式(V) (R = Glc(2-l)Rha，芹菜素-8-C- α -L-鼠李糖-(1 —幻-0- β -D-葡萄糖碳苷)、式(VI)(木犀草素-6_C_ β -D-葡萄糖碳苷)和式(VII) (R’ =Glc Glc木犀草素-8-C-β-D-葡萄糖苷(1-2)-0-β-D-葡
萄糖碳苷)所示化合物
权利要求
1. 一种构树叶总黄酮提取物的制备方法，包括如下步骤(1)用乙醇水溶液对构树叶进行提取至少一次得提取液；所述提取液经浓缩得到浓缩液(2)所述浓缩液经脱脂溶剂进行脱脂后得到脱脂浓缩液；(3)所述脱脂浓缩液经分离纯化即得所述构树叶总黄酮提取物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述构树叶包括叶片和叶柄；所述构树叶为粉末状，粒度为2目-60目；步骤(1)中所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为0 100%，但不为0 ；所述提取为回流提取、索氏提取、超声提取或闪式提取；所述提取的次数为1 3次；每次所述提取的时间为0. 5 3小时。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述乙醇水溶液的用量为所述构树叶的质量的6 20倍；所述浓缩液与所述构树叶的重量份数比为O 1) 1 ； 步骤O)中所述脱脂溶剂为石油醚或氯仿。
4.根据权利要求1 3中任一所述的方法，其特征在于步骤(3)所述分离纯化的方法为树脂吸附法；所述树脂吸附法中树脂的用量为所述构树叶的质量的0. 5 2倍；所述树脂吸附法的淋洗液依次为体积百分含量为30 80%的乙醇水溶液和体积百分含量为95% 的乙醇水溶液，收集体积百分含量为30 80%的乙醇水溶液的洗脱液即可。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述树脂按照包括如下步骤的方法进行预处理将所述树脂用体积百分含量为95%的乙醇水溶液依次经浸泡和回流后即可；所述树脂与所述体积百分含量为95%的乙醇水溶液的体积份数比为1 2。
6.权利要求1-6中任一所述方法制备的构树叶总黄酮提取物。
7.根据权利要求6所述的总黄酮提取物，其特征在于所述提取物包括式(I)、式 (II)、式(III)、式(IV)、式(V)、式(VI)和式(VII)所示化合物
8.权利要求6或7所述构树叶总黄酮提取物在制备抗糖尿病药物中的应用。
9.一种抗糖尿病药物，其活性成分为权利要求6或7所述提取物。
10.权利要求6或7所述构树叶总黄酮提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种构树叶总黄酮提取物及其制备方法与应用。该制备方法包括如下步骤(1)用乙醇水溶液对构树叶进行提取至少一次得提取液；所述提取液经浓缩得到浓缩液；(2)所述浓缩液经脱脂溶剂进行脱脂后得到脱脂浓缩液；(3)所述脱脂浓缩液经分离纯化即得所述构树叶总黄酮提取物。本发明提供的构树叶总黄酮提取物，按照比色法测定的总黄酮的重量含量为20％～70％，收率为1％～30％，药理试验证明，该构树叶总黄酮提取物可单独或与其它药物组合作为原料药应用于抗糖尿病药物的制剂中。本发明提供的方法制备的构树叶总黄酮提取物中的总黄酮的纯度高，且制备方法简便实用，适合工业化生产；本发明提供的构树叶总黄酮提取物可用于制备抗糖尿病药物。
文档编号A61P3/10GK102423343SQ20111036649
公开日2012年4月25日 申请日期2011年11月17日 优先权日2011年11月17日
发明者张宏, 熊伟, 窦德强, 高思华 申请人:大连中植环境生物科技有限公司