专利名称：用于治疗幽门螺旋杆菌感染的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于治疗幽门螺旋杆菌感染的组合物。更具体说，本发明涉及包含已知的乳化和非离子型表面活性剂，即聚山梨酯，与已经用于幽门螺旋杆菌根除治疗的两种具体的抗生素的组合作为活性成分的抗生素组合物的抗感染药的应用。
背景技术：
已知，幽门螺旋杆菌是一种螺旋形革兰氏阴性微需氧微生物，可位于胃和十二指肠中，以一种非常特殊的方式使其自身适应胃粘膜不太友好的环境，从而常常不会表现出任何可检测的症状。实际上，据信超过80%感染幽门螺旋杆菌的个体是无症状的。全球超过一半的人在胃-十二指肠水平感染这种微生物。感染的传播途径尚不明确，虽然感染似乎通常是在儿童期获得的。胃部受到覆盖胃粘膜的一层厚粘液的保护从而免受由浓盐酸构成并富含消化酶的其自身胃液的影响，所述粘液内螺旋杆菌属可穿透并存活，由于该细菌产生的酶即脲酶的作用使其耐受可能接触到的酸。脲酶将胃中包含的大量脲转化为碳酸氢盐和铵。因此，在该菌落周围形成碱性环境，这种环境能够中和胃分泌的盐酸，从而保护幽门螺旋杆菌。幽门螺旋杆菌的另一种保护机制在于，在胃粘液中机体天然的免疫防御不能到达。免疫系统通过产生白细胞，杀伤细胞T淋巴细胞和其他防御因子对幽门螺旋杆菌感染起反应，但是这些因子不能到达感染部位，因为它们不能轻易地穿透粘液层，保留并在该部位累积，当它们死亡时留下其破坏性含量(由超氧自由基组成)。其他营养素到达该部位以帮助白细胞，该作用不过是为幽门螺旋杆菌进一步提供营养。结果，几天后形成胃炎，有时可进展一直到消化性溃疡。鉴于上述内容，据信对胃粘膜造成破坏的致病因子不是幽门螺旋杆菌本身，而是炎症以及后续对该微生物的免疫应答。从科学文献来看，似乎幽门螺旋杆菌感染是慢性胃炎的主要原因，并且是发展成消化性溃瘍的最相关因素(Warren JR, Marshall BJ, Unidentified curved bacilli ongastric epithelium in active chronic gastritis,Lancet 1983 ;1: 1273-5)。通过克隆胃，发现幽门螺旋杆菌诱导持续性炎症(慢性胃炎)，可能持续几年而不产生临床症状。然而，在10-20 %的病例中，也可导致形成胃或十二指肠溃疡。而且,幽门螺旋杆菌 还常常与胃癌(胃腺癌和非霍奇金胃淋巴瘤)有关(Moss SF,The carcinogenic effect of H.pylori on the gastric epithelial cell.J PhysiolPharmacol 1999 ；50:847_56)。通过广泛研究胃癌病例，发现幽门螺旋杆菌的存在导致胃癌风险提高6倍。因此，认为慢性胃炎可导致肠化生，肠化生又可变性形成恶性癌症。低级恶性淋巴瘤或MALToma似乎源于与粘膜有关的淋巴样组织的恶性变性。在这种情况下，追溯性活检研究提示，90 %的这些MALToma与幽门螺旋杆菌的存在有关。并非幽门螺旋杆菌的各种菌株都被赋予了相同的致病力:其染色体中插入“cag致病岛”(cagPAI)(与微生物的毒力相关的一组基因)的菌株表现出较高的致炎潜能。两方国家发现的大约50-70%的幽门螺旋杆菌菌株含有cag致病岛，与感染其基因组中不包含该插入物的菌株的患者相比，感染包含cag PAI的细菌的患者具有较强的胃部炎症反应和较高的发展成消化性溃疡或胃癌的风险。cag-阳性菌株能够在克隆的胃细胞中注入癌蛋白(由一种cag基因编码)，称为cagA,其可增加发展成瘤性损伤的风险(Censini S7LangeC, Xiang Z, Crabtree JE, Ghiara P, Borodovsky M 等，cag,a pathogenicity island ofHelicobacter pylori, encodes type I—specific and disease-associated virulencefactors.Proc Natl Acad Sci USA 1996;93:14648-53)。一旦在消化性溃疡患者中诊断出幽门螺旋杆菌感染，正常程序包括药物根除该微生物，因而治愈溃疡。目前，首选的标准治疗方法称为“三联疗法”，包括给予:a)胃质子泵抑制剂；b)两种抗生素,选自:阿莫两林、克拉霉素、甲硝唑(metronidazole)或四环素。已知，胃质子泵是胃内壁细胞典型的代谢机制，允许它们分泌盐酸到胃液中。质子泵抑制剂是一组分子，其主要作用是长时间降低胃液的酸度(18-24小时)。它们通过抑制胃酶H+/K+-ATPase (质子泵)(即H+和K+离子交换的催化剂)而起效。这类活性成分最常用的是奥美拉唑，兰索拉唑和艾美拉唑，导致胃液酸度显著降低，因而用于治疗消化不良、胃-食管回流和消化性溃疡，实际上它们可以取代过去用于类似适应症的药物，即组胺H2受体拮抗剂或H2抗组胺剂，如雷尼替丁和两眯替丁。在幽门螺旋杆菌根除 治疗过程中，质子泵抑制剂用于缓解消化性溃疡的症状和促进抗生素的作用，而合适的根除作用是由后者提供的，其给药存在与抗生素治疗典型相关的注意事项和限制。多年来，治疗方案日益改进，在标准情况下，治疗从两周改进到7或10天，因而降低了每天需要给予的剂量单位的数量，限制了毒性和副作用。由于对具体药物的变态反应而开发了替代方案；二线治疗方案设计用于首循环(first cycle)疗法失效的情况，总根除效力得到改善，成功率至少为80%。不良反应发生率被控制在10-15%的范围内，正常情况下不良反应不会严重到放弃该疗法。然而这些不良反应，包括局部和全身反应，导致所述疗法耐受性较差。除了真的不耐受活性成分的病例之外，最常见的副作用是头晕和意识错乱，口腔异味，恶心以及消化道或肠道不适。此外，更为严重的是，越来越多的患者似乎受到了耐药菌的感染:在许多国家已经发现了几种克拉霉素-耐药菌以及甲硝唑-耐药菌。对于幽门螺旋杆菌耐药菌感染的患者，已经提出使用替代抗生素，在首次治疗循环失效的情况下可采用替代抗生素。例如，为了治疗克拉霉素耐药菌，在二线三联疗法中已提出使用左氧氟沙星(Perna F，Zullo A，RicciC,Hassan CiMorini S,Vaira D.Levofloxacin-based triple therapy for Helicobacterpylori re-treatment:role of bacterial resistance.Dig Liver Dis，2007，39 (11):1001-5) o鉴于上述内容，显然根除幽门螺旋杆菌的药理学疗法需要不断的修正和更新，这不仅是为了改善药物的功效或耐受性，而且也是在一些群体中抗生素耐药菌进化的结果，还与在不同的领域中使用各种抗生素有关。
近来研究表明，在用于治疗幽门螺旋杆菌感染的药物中加入具有自由基清除活性的物质如维生素C可以提高根除率，微生物学家和临床医师的兴趣集中于已知具有抗氧化和/或抗菌活性的生物活性的天然化合物，尤其是植物提取物。这些物质可以与药物治疗联用或者用作营养补充剂(Correa P, Malcom G, Schmidt B, Fontham E, Ruiz B, Bravo JC等，Antioxidant micronutrients and gastric cancer.Aliment Pharmacol Ther 1998 ；1:73-8)。一些研究表明，许多果实及其衍生物具有抗菌效果，例如樱桃、大蒜、洋葱、猕猴桃、柑橘类水果和葡萄酒，以及植物和药物的提取物，具体是精油、肉桂、百里香、蜂胶、甘草、红辣椒、茶和稻米(例如参见 Nostro A, Cellini L, Di Bartolomeo S, Di CampliE, Grande R, Cannatelli MA 等，Antibacterial effect of plant extracts againstHelicobacter pylor1.Phytother Res 2005 ; 19:198-202 ;和 Ohno T, Kita M, Yamaoka Y,Imamura S, Yamamoto T, Mitsufuji S 等，Antimicrobial activity of essential oilsagainst Helicobacter pylor1.Helicobacter 2003;8:207-15)。在这种框架下，一些现代研究者近来研究和鉴定了多刺疏林叶(Rubusulmifolius)中和普通小麦粉中存在的酹类化合物,查明抗氧化活性及其对抗幽门螺旋杆菌的抗菌倉泛力(Martini S, DjAddario C, Colacevich A, Focardi S, Borghini F, SantucciA, Figura N, Rossi C.Antimicrobial activity against Helicobacter pylori strainsand antioxidant properties of blackberry leale (Rubus ulmifolius)and isolatedcomponents.1nt.J Antimicrob Agents.2009 ；34:50-9)。在这些提取物中最丰富存在的酚类组分是阿魏酸，一种构成植物细胞壁的木质素组分，大量存在于稻米、小麦和其他谷物中，以及咖啡和各种种子和果实中。阿魏酸的抗氧化性质提示其可用于各种治疗性应用，通过一些包含阿魏酸的植物提取物用于预防和治疗各种病理情况，从癌症到神经变性病，到糖尿病、心血管功能障碍，以及在消化性溃疡领域中，用于治疗幽门螺旋杆菌感染。考虑到已提出许多其他物质鉴于其抗菌性而用作幽门螺旋杆菌根除的药理学治疗的活性成分或辅助成分，国际专利申请公开WO 96/05822 (New England Medical CenterHospital)揭示了适用于食品、化妆品和药品的一些通常用作非离子型表面活性剂和乳化剂的分子，特别是聚山 梨酯。这些化合物是一类源于聚乙氧基化或PEG-化去水山梨糖醇((3S)-2-(l，2-二羟乙基)四氢呋喃-3，4-二醇，山梨糖醇脱水后获得的一种环状多羟基化合物)的物质，四个羟基与聚乙二醇链醚化，再与脂肪酸链酯化(单月桂酸酯、单棕榈酸酯、单硬脂酸酯或单油酸酯)。商品名为吐温的聚山梨酯由于其增溶性质而常常用作乳化剂和发酵中的消泡添加剂。从对幽门螺旋杆菌培养物的实验开始，所述专利申请的作者发现这类化合物可用作细菌生长的强效抑制剂。出于这种原因，所述专利申请提出给予聚山梨酯基组合物在连续根除治疗的框架中治疗幽门螺旋杆菌感染，但是绝对排除抗生素治疗与用聚山梨酯治疗之间的任何暂时性重叠。事实上，已经发现所述表面活性剂/乳化剂在一些给定浓度下具有杀菌活性，只是在较低的浓度下具有抑菌活性，抑制幽门螺旋杆菌生长但不能完全根除。既然临床上使用的许多抗生素只对活跃生长期的微生物有活性，所述表面活性剂/乳化剂与抗生素的同时存在会产生反作用。因此，所述文献提出的疗法包括在没有所述表面活性剂/乳化剂的存在下给予已知的抗生素用于治疗幽门螺旋杆菌，然后再单独给予所述表面活性剂/乳化剂。之后提交的国际专利申请WO 97/36600 (AMBI Inc.)还提出使用包含聚山梨酯的组合物来治疗幽门螺旋杆菌导致的胃肠道疾病。作者报道发现特别是聚山梨酯，不仅能够抑制幽门螺旋杆菌生长，而且能够快速杀死所述菌株，因而它们可以在该微生物的根除中单独使用。所述文献描述了单独使用聚氧乙烯去水山梨糖醇酯(特别是聚山梨酯20，它是聚山梨酯的单月桂酸酯)或者与其他已知的抗溃疡药物联用，包括H2受体拮抗剂，铋盐，解酸剂和质子泵抑制剂，特别是与溶粘蛋白剂联用，但不与全身性抗生素联用。相反，该文献明确不推荐与可吸收 进入全身循环或通过肠道的抗生素联用。
发明内容
基于现有技术的内容，因此本发明的目的是提供具有改善的活性和耐受性的用于治疗幽门螺旋杆菌感染的新药物制剂，能够更加成功地治疗耐药菌株，而不会过度脱离对于幽门螺旋杆菌根除治疗的药理学治疗已经固定结合的治疗方案。基于在本发明框架内进行的研究发现，与现有技术所述不同，常用名为聚山梨酯、商品名为吐温的非离子型表面活性剂/乳化剂与目前用于幽门螺旋杆菌根除治疗的抗生素中的两种(具体是甲硝唑和克拉霉素)联用显示意想不到的协同活性，并且所述组合物对于耐受所述抗生素的菌株也意外地有效。
具体实施例方式因此，本发明具体提供了用于治疗幽门螺旋杆菌感染的药物组合物，其包含聚山梨酯和抗生素作为活性成分，抗生素选自克拉霉素、甲硝唑及其混合物，其特征在于，聚山梨酯与抗生素或抗生素混合物的重量比为0.5: 5至5: I。在本发明中，聚山梨酯通常是指聚氧乙烯(20)去水山梨糖醇酯和月桂酸、棕榈酸、硬脂酸或油酸的酯，其中数字20表示分子的氧乙烯单元的总数。具体说，聚山梨酯80或吐温80是聚氧乙烯(20)去水山梨糖醇酯单油酸酯，聚山梨酯20或吐温20是聚氧乙烯
(20)去水山梨糖醇酯单月桂酸酯，聚山梨酯40或吐温40是聚氧乙烯(20)去水山梨糖醇酯单棕榈酸酯，聚山梨酯60或吐温60是聚氧乙烯(20)去水山梨糖醇酯单硬脂酸酯。根据本发明优选的实施方式，与聚山梨酯联合配制的抗生素是克拉霉素，而根据另一个同样优选的实施方式，所述抗生素是甲硝唑。实际上，通过本发明的实验发现，例如，当与具体的抗生素甲硝唑和克拉霉素联用时聚山梨酯的活性是协同类型的，聚山梨酯和抗生素联用时的最小杀菌浓度(CMB，或MBC)比两种物质单独测试的CMB低几倍(例如，聚山梨酯-克拉霉素联用比克拉霉素低8倍)。优选地，根据本发明，采用的聚山梨酯是聚山梨酯80。这种产品已广泛用作食品的乳化剂，尤其是冰淇淋生产过程中，在胃肠外给药的药物产品中用作消泡添加剂，在细菌培养物中，例如疫苗生产过程中，考虑是一种在人体中安全且良好耐受的产品。基于用聚山梨酯60处理的大鼠中13周重复毒性研究的结果，认为对于该类聚山梨酯而言，最小NOAEL(无副作用水平)为1000毫克/千克/天。因此，这代表了不产生副作用的最大临床前剂量。一旦确定NOAEL= 100毫克/千克/天，为了固定人体ADI (可接受的日剂量)，采用100的安全系数，结果目前的ADI固定为10毫克/千克/天。因此，从食品角度以及从聚山梨酯调节点角度考虑，不产生副作用的剂量对于成人约为700-750毫克/天，对于儿童约为200毫克/天。该限制在很大程度上是谨慎的，但是出于严格的药学目的，也可以超出，即使略微超出。聚山梨酯在室温下是油状液体；具体说，聚山梨酯80是一种粘稠的水溶性黄色液体。基于聚山梨酯以及选自甲硝唑和克拉霉素或其混合物的抗生素，本发明的药物组合物优选配制成溶液、胶状悬浮液、乳液、糖浆或颗粒剂形式的药物制剂。从能够立即分散到胃壁的角度来说，给予流体形式是有益的。根据本发明一些优选的实施方式，配制所述制剂使得所述组合物(液体、半固体或固体)的每个剂量单位包含500-750毫克聚山梨酯和500毫克克拉霉素或500毫克甲硝唑。相应地，考虑到根除幽门螺旋杆菌的标准三联疗法，抗生素的剂量为500毫克，每天两次(除了阿莫两林之外，阿莫两林的常规剂量为I克，每天两次)，可提出一种制剂，例如糖浆形式的制剂，其每个剂量单位包含等于10或20毫升，预定量为500-750毫克聚山梨酯80和500毫克抗生素(克拉霉素或甲硝唑)。这种制剂应每天给予两次，剂量为10或20毫升(I或2汤匙)。在类似于标准三联疗法的疗法中，用本发明的聚山梨酯-抗生素组合进行的治疗可以(例如)根据以下方案:奥美拉唑20毫克，每天两次；阿莫两林I克,每天两次；聚山梨酯80-克拉霉素糖浆(或聚山梨酯80-甲硝唑糖浆)10毫升，每天两次(相当于500毫克聚山梨酯+500毫克抗生素，每天两次)。根据本发明一些更加优选的实施方式，所述药物组合物还包含阿魏酸作为额外的活性成分。在聚山梨酯中加入阿魏酸的目的是利用其抗氧化性和对幽门螺旋杆菌的抗菌作用，如前文所述。事实上，如上所述，近来研究已表明，在用于治疗幽门螺旋杆菌感染的试剂中加入具有自由基清除活性的物质如维生素C能够提高根除率。如下面报道的制剂实施例所示，从实现幽门螺旋杆菌根除治疗和在幽门螺旋杆菌根除治疗中有作用的角度看，尤其优选的药物制剂是粉末或颗粒化产品的囊剂，通常包含4克制剂，在给药前分散在一杯水中，或者是具有计量盖的糖浆形式，其中抗生素(或抗生素混合物)与部分辅料包含在计量盖中，而聚山梨酯与另一部分辅料以及所需的水包含在瓶中的溶液形式中。类似的实施方式使得该制剂定义具有多样性。具体说，各种活性剂相应的比率可以选自各种比例范围。根据本发明一些优选的实施方式，其中一些如下文所述，聚山梨酯80与抗生素或抗生素混合物的重量比为1: 5至4: 1(聚山梨酯/抗生素)。还可能预见到本发明所述活性化合物在支持用于幽门螺旋杆菌根除的抗生素治疗中的进一步应用。因此，制剂例如糖浆剂中可包含阿魏酸和聚山梨酯，不含抗生素，包含例如聚山梨酯、阿魏酸、维生素E或其衍 生物、和/或用于保护肠道菌群的益生菌。可用于该目的的一种可能的制剂是糖浆剂，包含例如5%聚山梨酯80，I %阿魏酸，0.5% PEG-化维生素E (和任选的一些益生菌)，给药剂量为10毫升，每天两次，作为幽门螺旋杆菌根除治疗的支持。
根据另一方面，本发明提供了聚山梨酯以及选自克拉霉素、甲硝唑及其混合物的抗生素的组合在治疗幽门螺旋杆菌感染中的应用，其中聚山梨酯与抗生素或抗生素混合物的重量比为0.5: 5至5: I。如前所述，在本发明一些优选的实施方式中，所述制剂是聚山梨酯和克拉霉素的组合，而在其他优选的实施方式中，所述制剂是聚山梨酯和甲硝唑的组合。在所有情况下，制剂中优选包含的聚山梨酯的类型是聚山梨酯80，优选地，制剂还包含阿魏酸作为抗氧化剂和制剂抗菌活性的辅助成分。应理解，用于治疗人体幽门螺旋杆菌感染的与本发明所述相同类型的组合和制剂预期也可用于兽用，用于治疗动物口腔或胃肠道器官中存在的类似菌种。兽用治疗感兴趣的幽门螺旋杆菌菌种包括例如犬螺旋杆菌(H.canis)和猫螺旋杆菌(H.felis)，代表了狗和猫中相应的病原体。显然，在对甲硝唑或克拉霉素敏感的细菌感染的治疗中，本发明所述的药物组合物通常可用作抗菌剂，但特别推荐用于幽门螺旋杆菌根除治疗的框架中。这种治疗包括同时给予对于所述治疗已经固定结合的属于抗生素组的其他抗生素，首选阿莫两林。更优选地，如下面内容清楚表明的那样，本发明的制剂可用于需要根除的螺旋杆菌属于对克拉霉素和/或甲硝唑耐受的菌株的情况。实施例下面描述本发明，仅仅是为了阐述的目的，在以下实施例中，显示了基于聚山梨酯、克拉霉素和/或甲硝唑的可能的制剂，用于治疗幽门螺旋杆菌感染，如本发明所述。在下面的实施例中报道了两种不同药物形式的制剂:粉末形式的产品，4克囊剂，给予前分散在一杯水中；溶液形式的产品，使用前制成糖浆，由包含抗生素的计量盖和包含聚山梨酯80溶液的20晕升瓶子组成。包含克拉霉素、甲硝唑和聚山梨酯80的制剂A.粉末产品的4克囊剂在每一个下面的实施例中，制备包含抗生素和部分辅料的第一混合物(抗生素混合物)。制备包含聚山梨酯80和另一部分辅料的第二混合物(表面活性剂混合物)。然后将两种混合物按照对应于下面每一个实施例的表格中所示的比例合并和混合。分成两部分表明，聚山梨酯80不具有工艺学功能，相反它是一种相对于抗生素混合物单独制备的活性成分。实施例1-聚山梨酯/抗生素比率:I: 5的制剂
权利要求
1.一种用于治疗幽门螺旋杆菌感染的药物组合物，其包含聚山梨酯和抗生素作为活性成分，所述抗生素选自克拉霉素、甲硝唑及其混合物，其特征在于，聚山梨酯与抗生素或抗生素混合物的重量比为0.5:5至5:1。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述抗生素是克拉霉素。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述抗生素是甲硝唑。
4.如权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述聚山梨酯是聚山梨酯80。
5.如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物被配制成溶液、胶状悬浮液、乳液、糖浆或颗粒剂形式的药物制剂。
6.如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物中每个液体、半固体或固体剂量单位包含500-750毫克聚山梨酯和500毫克克拉霉素和/或500毫克甲硝唑。
7.如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物还包含额外的活性成分阿魏酸。
8.如权利要求1-7中任一项所述的药物组合物，其特征在于，聚山梨酯与抗生素或抗生素混合物的重量比为1:5至4:1。
9.聚山梨酯和抗生素的组合，该组合用于治疗幽门螺旋杆菌感染，所述抗生素选自克拉霉素、甲硝唑及其混合物，其特征在于，聚山梨酯与抗生素或抗生素混合物的重量比为0.5:5 至 5:1。
10.如权利要求9所述的组合，其特征在于，所述抗生素是克拉霉素和甲硝唑的组合。
11.如权利要求9所述的组合，其特征在于，所述抗生素是克拉霉素。
12.如权利要求9所述的组合，其特征在于，所述抗生素是甲硝唑。
13.如权利要求9所述的组合，其特征在于，所述聚山梨酯是聚山梨酯80。
14.如权利要求9-13中任一项所述的组合，该组合用于幽门螺旋杆菌根除治疗。
15.如权利要求14所述的组合，其特征在于，所述幽门螺旋杆菌属于耐受克拉霉素和/或甲硝唑的菌株。
全文摘要
本发明描述了一种用于治疗幽门螺旋杆菌感染的药物组合物，其包含聚山梨酯和选自克拉霉素、甲硝唑及其混合物的抗生素作为活性成分。本发明还涉及该组合物作为幽门螺旋杆菌根除治疗的抗感染试剂的应用，尤其是在与第二抗生素试剂以及与胃质子泵抑制剂，或解酸剂，或H2受体拮抗剂的联合疗法中，在用于消化性溃疡治疗的称为“三联疗法”的治疗方案中。
文档编号A61P31/04GK103153304SQ201180025432
公开日2013年6月12日 申请日期2011年5月26日 优先权日2010年5月26日
发明者A·桑图奇, N·费古拉, A·斯普利菲克, G·卡瓦罗, R·F·马尔科朗格 申请人:欧弗有限公司