专利名称：树豆酮酸a在制备糖尿病伴随症及高脂血症药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及化合物的新用途，具体涉及树豆酮酸A及其药用衍生物，特别是树豆酮酸A及其药用盐或酯在制备糖尿病伴随症或高脂血症药物中的应用。
背景技术：
高脂血症是由于脂肪代谢紊乱引起的血中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)单项或多项水平高于正常标准。高脂血症的主要危害是导致动脉粥样硬化。动脉血管堵塞使全身重要器官长期供血供氧不足，造成脏器器质性的和功能性的损伤，从而导致众多的相关疾病。其中最为常见的一种致命性疾病就是冠心病。高血脂是促进高血压、糖耐量异常、糖尿病的一个重要危险因素，还会导致脂肪肝，肝硬化，胰腺炎，胆石症，高尿酸血症，肾功能衰竭等。高脂血症可分为原发性和继发性两类。其中原发 性高血脂症主要是由于遗传或者饮食不当等原因造成。而继发性高血脂症则是由其他中间原发疾病如糖尿病、肥胖症、甲状腺疾病、肾脏疾病、肝病、胰腺疾病等弓I起。肥胖伴高脂血症者更容易出现胰岛素抵抗进而诱发糖尿病。糖尿病是由于体内胰岛素绝对或相对分泌不足而引起的以糖、脂肪、蛋白质等代谢紊乱为主的内分泌疾病，其中2型糖尿病占整个糖尿病比例的93. 7%，并且中国是全球2型糖尿病患病率增长较快的国家之一。由于长期慢性高血糖诱发脂肪和蛋白代谢紊乱，继而引起一系列的眼、肾、神经、心血管等并发症，对人类健康、寿命和生活质量构成了严重威胁，同时也是糖尿病患者致残和早亡的主要原因。很多糖尿病人都伴有高脂血症，因此人们通常把糖尿病与高脂血症称为姐妹病，并认为高血脂是糖尿病的继发症。高血脂诱发胰岛素抵抗进而诱发糖尿病，而糖尿病引起脂代谢紊乱进而引致高血脂，所以高血脂症和高血糖症之间之间是相互促进的关系。胰岛素抵抗是2型糖尿病的重要病因和显著特征，从理论上分析，糖尿病病人针对胰岛素抵抗的治疗将大大减少其他降糖药物的用量，减轻胰腺胰岛细胞分泌胰岛素的压力，延缓2型糖尿病向I型转化的进程，使糖尿病病人减少并发症的发生，降低死亡率。目前针对胰岛素抵抗的常用治疗药物为胰岛素增敏剂，噻唑烷二酮类(TZDs)是一类比较得到公认的胰岛素增敏剂。其代表药物有曲格列酮、吡格列酮、罗格列酮。但是，这类药物通过激活过氧化物酶体增殖子活化受体Y (PPARy)活性增强胰岛素敏感性的同时，还可增加脂肪细胞的增殖，从而导致水钠潴留，体重增加甚至肥胖等。TZDs还可致贫血、血红蛋白和红细胞减少，对心功能不全者宜慎重应用。作为第一个噻唑烷二酮类药物，曲格列酮经过140万例人次研究，暴露有肝脏毒性的缺点，于上市后三年被美国FDA禁止临床使用。2010年9月以来，应用广泛的马来酸罗格列酮由于可能导致心脏出现问题而相继被欧盟药品管理局、美国食品药品管理局和中国国家食品药品监督管理局建议暂停使用，仅用于那些其他药品不能控制血糖的2型糖尿病患者，大大限制了这类药物的使用。因此，虽然有罗格列酮缓解糖尿病人高血脂症状的报道，但作为治疗慢性代谢疾病的药物，需要终身服用，其安全性是首要条件。因此PPAR Y激活剂类型的胰岛素增敏剂并不适合糖尿病人长期服用，更不适合用于治疗高脂血症，或者糖尿病伴随的其他疾病如肝损伤，胰腺损伤或者肾损伤等。树豆酮酸A是本发明人发现的一种新化合物(CN101422450A)，并通过ob/ob型先天性肥胖高血糖小鼠证明其具有降糖减肥的功效。树豆酮酸A的药用衍生物，特别其药用酯或盐，可以按常规方法制备得到。这些衍生物在体内可以重新解离出树豆酮酸A，具有与树豆酮酸A类似的生物活性。在之前的申请文件中，并未涉及治疗糖尿病伴随症或高脂血症用途的研究。
发明内容
本发明的目的在于提供树豆酮酸A及其药用衍生物在制备治疗糖尿病伴随症药物中的应用。特别的，树豆酮酸A药用衍生物为树豆酮酸A的药用盐或药用酯；其药用盐优选为树豆酮酸A的钠盐、钾盐、钙盐；其酯优选为树豆酮酸A的甲基酯、乙基酯、丙基酯、异丙基 酯、丁基酯、异丁基酯、叔丁基酯。这些药用盐和酯在体内可以转化或水解成树豆酮酸A，产生与树豆酮酸A相一致的疗效。糖尿病伴随症为糖尿病伴高脂血症、糖尿病伴肝脏损伤、糖尿病伴肾脏损伤或糖尿病伴胰腺损伤。2型糖尿病SD大鼠模型动物的特点是糖尿病和高脂血症。动物实验数据表明，树豆酮酸A在降低2型糖尿病SD大鼠血糖的同时，显著降低了动物的血清甘油三酯水平、总胆固醇水平和低密度脂蛋白胆固醇水平，表明树豆酮酸A可以治疗或改善糖尿病伴高脂血症。2型糖尿病SD大鼠给予树豆酮酸A进行试验治疗，结果表明，与模型组相比，治疗组动物的肝体比、AST、ALT均有显著下降，病理学研究结果证实，树豆酮酸A可减少肝细胞的点状坏死，其预防肝肿大和保护肝脏的作用优于罗格列酮。实验数据表明树豆酮酸A可以治疗或改善糖尿病伴肝脏损伤。给予树豆酮酸A后，糖尿病SD大鼠与模型组相比，胰岛素敏感指数、胰岛P细胞功能指数显著升高，胰岛素抵抗指数显著下降。病理学研究结果证实，树豆酮酸A可逆转糖对大鼠胰岛组织的损伤，并对胰脏具有保护和修复作用。先天性肥胖Zucker大鼠模型动物的特点是血糖值基本正常，但出生后其血清甘油三酯水平、总胆固醇水平异常偏高，形成典型的高脂血症。动物实验数据表明，树豆酮酸A能够显著降低先天性肥胖Zucker大鼠的血清甘油三酯水平、总胆固醇水平，表明树豆酮酸A具有治疗或改善高脂血症的作用。
图I.不同治疗组大鼠胰脏组织HE染色病理切片图(X 100)，图中，(A)正常对照组，(B) 2型糖尿病模型组，(C)树豆酮酸A治疗组，(D)文迪雅治疗组；
图2.不同治疗组大鼠肝脏组织HE染色病理切片图(X 100)，图中，(A)正常对照组，(B) 2型糖尿病模型组，(C)树豆酮酸A治疗组，(D)文迪雅治疗组；
图3.不同治疗组大鼠肾脏组织HE染色病理切片图，图中，(A)正常对照组，(B) 2型糖尿病模型组，(C)树豆酮酸A治疗组，(D)文迪雅治疗组；图4.药物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响图(XlOO)(油红染色法)；
图5.树豆酮酸A对脂肪细胞PPAR y和C/EBP a mRNA水平的影响 图6.药物对脂肪细胞GLUT4表达的影响。
具体实施例方式下面结合实验及实验数据，进一步说明本发明。 树豆酮酸A在SD大鼠2型糖尿病动物模型上的药效学实验结果动物分组及给药选取高糖高脂膳食伴腹腔注射小剂量链脲佐菌素诱导的糖尿病SD雄性大鼠，根据空腹血糖和体重均匀分为模型组、治疗组以及阳性对照组。每组8只。另有8只正常大鼠作随行观察。(I)模型组等体积混合的吐温-80和二甲基亚砜用蒸馏水十倍稀释，以每IOOg体重ImL进行腹腔注射，每日一次，直到实验结束。(2)治疗组树豆酮酸A用等体积混合的吐温80和二甲基亚砜溶解，配成lOmg/mL的储备液。临用时将储备液用蒸馏水十倍稀释，以每IOOg体重ImL进行腹腔注射，每日一次，直到实验结束，剂量为10mg/kg/d。(3)阳性药组马来酸罗格列酮片(商品名文迪雅，葛兰素史克公司)加水崩解后制成0. 4mg/mL的悬液，以每IOOg体重ImL灌胃，每日一次,直到实验结束,剂量为4mg/kg/d0测定方法
(1)空腹血糖测定给药期间每隔7天大鼠尾静脉取血，用罗康全活力型血糖仪(罗氏)测定空腹8h血糖值；
(2)葡萄糖耐受量测定末次给药后次日大鼠禁食4h，测定空腹4h血糖值(0时)后，立即按2g/kg灌服葡萄糖溶液,并测定灌服葡萄糖后30min、60min、120min血糖值，即大鼠葡萄糖耐受量OGTT ；
(3)血清生化分析末次给药后日大鼠禁食16h后，腹主动脉采血，离心分离得血清，采用全自动生化分析仪检测大鼠血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高/低密度脂蛋白(H/LDL-C)，肝脏谷草转氨酶AST、谷丙转氨酶ALT、尿素、肌酐水平。大鼠胰岛素ELISA试剂盒测定血清胰岛素水平，并计算胰岛素敏感指数ISI [= I/(空腹血糖X胰岛素)]，稳态胰岛抵抗指数HOMA-IR = (FBGXFINS/22. 5)、稳态胰岛^细胞功能指数HBCI [ = 22. 5X胰岛素/(空腹血糖-3. 5)]。(4)脏器组织及病理切片处死大鼠，剖取肝脏称重，计算脏器系数RLB(=肝重/体重)，同时取胰、肾脏。经HE染色显微镜下进行观察病理切片并拍照。实验结果
(I)树豆酮酸A显著降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖水平表I显示，正常大鼠在实验期间的FBG水平保持在7. 5mM以下，而模型组大鼠的FBG则从实验开始时的22. 5±4. 5mM上升到实验结束时的26.8±4. 7mM。说明建立的糖尿病模型稳定可靠。T2DM大鼠经连续四周的树豆酮酸A或文迪雅治疗后，其FBG水平分别为18. 7 ±8. OmM和20. I ±7. 9mM，和模型组FBG比较有显著性差异(P < 0. 05)。说明树豆酮酸A同文迪雅一样，可降低T2DM大鼠的FBG水平。
表I树豆酮酸A对2型糖尿病大鼠的FBG水平的影响
权利要求
1.树豆酮酸A及其药用衍生物在制备治疗糖尿病伴随症药物中的应用。
2.树豆酮酸A及其药用衍生物在制备有益于糖尿病伴随症患者食用的功能性保健品中应用。
3.根据权利要求I或2所述的应用，其特征在于糖尿病伴随症为糖尿病伴高脂血症、糖尿病伴肝脏损伤、糖尿病伴肾脏损伤或糖尿病伴胰脏损伤。
4.树豆酮酸A及其药用衍生物在制备治疗高脂血症药物中的应用。
5.树豆酮酸A及其药用衍生物在制备有益于高脂血症患者食用的功能性保健品中应用。
6.根据权利要求1、2、4或5所述的应用，其特征在于树豆酮酸A药用衍生物为树豆酮酸A的药用盐或药用酯。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于树豆酮酸A药用盐为树豆酮酸A的钠盐、钾盐、钙盐。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于树豆酮酸A药用酯为为树豆酮酸A的甲基酷、乙基酷、丙基酷、异丙基酷、丁基酷、异丁基酷、叔丁基酷。
全文摘要
本发明公开了树豆酮酸A及其药用衍生物在制备糖尿病伴随症或高脂血症药物中的应用。动物实验数据表明，树豆酮酸A在降血糖的同时，可以显著降低2型糖尿病SD大鼠的血清甘油三酯水平、总胆固醇水平和低密度脂蛋白胆固醇水平，表明树豆酮酸A可以治疗或改善糖尿病伴高脂血症；病理学研究结果证实，树豆酮酸A可减少肝细胞的点状坏死，可以治疗或改善糖尿病伴肝脏损伤，逆转糖对大鼠胰岛组织的损伤，并对胰腺具有保护和修复作用。树豆酮酸A可以显著降低先天肥胖Zucker大鼠的血清甘油三酯水平、总胆固醇水平，表明树豆酮酸A可以治疗或改善高脂血症。
文档编号A61P3/10GK102670576SQ20121011966
公开日2012年9月19日 申请日期2012年4月20日 优先权日2012年4月20日
发明者沈小玲, 王璐, 符林春, 胡英杰, 邱声祥, 麦兆 申请人:广州允中生物科技有限公司