专利名称：一种兽用盐酸多西环素注射液及其制备方法
一种兽用盐酸多西环素注射液及其制备方法
技术领域：
本发明属于兽药技术领域。更具体地，本发明涉及一种兽用高浓度长效盐酸多西环素注射液，还涉及所述注射液的制备方法。
背景技木盐酸多西环素(Doxycycline Hydrochloride)为四环素类抗生素，别名盐酸脱氧土霉素、盐酸强カ霉素，其体内体外抗菌活性强于同类药物土霉素和四环素。该药不仅对大多数革兰氏阳性菌与阴性菌有效，而且对螺旋体、放线菌、霉形体、衣原体、立克次体和某些原虫(如阿米巴原虫、球虫等)均有抑制作用，对四环素、土霉素的耐药菌也有效，用于治疗畜禽慢性呼吸道疾病、支原体病、大肠杆菌病、沙门氏菌病、巴氏杆菌病、附红细胞体病等。该药脂溶性大，对组织渗透力強，体内分布广，生物利用度高，有效血液浓度维持时间长，毒 性较低，在兽医临床上广泛应用。目前，盐酸多西环素剂型単一，正式产品仅有ロ服粉剂和片剂，缺乏其作用迅速、剂量准确、疗效可靠的注射剂型，而普通的注射剂由于浓度低，药效持续时间短，造成使用剂量大，给药次数多，操作繁琐，治疗成本较高，直接影响了家畜等动物感染性急症的治疗效果和效率。因此，研发高浓度、长效盐酸多西环素注射液成为本发明的目标。盐酸多西环素在水溶液中易氧化、降解，导致变色、析出，其不稳定性制约了这种注射液的制备。利用多西环素与金属离子络合的特性使其形成络合物是提高盐酸多西环素溶解度和稳定性的有效手段，这种方法已在制备土霉素注射液中使用过，上世纪六、七十年代曾借鉴其方法应用于制备多西环素注射液。但是，金属离子与多西环素形成络合物的同时也会加速药物的氧化变色，并且生成的络合物还不溶于水，因此，能否有效形成及溶解络合物是这种注射液制备的关键，其涉及因素与药物和金属离子的用量，采用的溶剂、反应温度、PH值的控制及含氧量有夫，故优选络合剤、抗氧剂及溶剂等并采用合理的制备エ艺均对注射液的安全、稳定、高效和长效起到至关重要的作用。而目前多西环素注射液，特别是高浓度的多西环素注射液在制备技术上有一定难度并存在诸多问题，例如US3674859、US3957980涉及的是低浓度注射液，给药剂量大；US 4086332抗氧剂甲醛合次硫酸氢钠用量较大，易对注射液的安全造成影响。CN101062013A、CN101062014A与CN101822817A涉及低浓度注射液，未采用金属离子络合，使用EDTA-2Na作为抗氧化剂，没有长效作用，也缺少稳定性试验数据。CN101703464A所述抗氧剂适用于弱酸性药液,在pH7. 5、条件下抗氧效果较弱；CN 101416974A公开其制剂的长效作用不明显；CN 101804062A、CN102144967A缺乏体内动物试验和稳定性试验数据支持其长效作用。CN 101301268A等没有说明其产品具有长效作用。为了提高和弥补现有技术的不足，本发明人通过对注射液的附加剂种类、用量以及制备エ艺的研究和优化，获得ー种高浓度、安全稳定、长效的盐酸多西环素注射液及其制备方法。
发明内容[要解决的技术问题]本发明的目的是提供一种兽用高浓度长效盐酸多西环素注射液。本发明的另ー个目的是提供所述兽用高浓度长效盐酸多西环素注射液的制备方法。[技术方案]本发明是通过下述技术方案实现的。本发明涉及一种兽用盐酸多西环素注射液。所述的兽用盐酸多西环素注射液每IOOml含有
以多西环素计的盐酸多西环素15 25克；镁离子化合物络合剂，它与多西环素的摩尔比为I. (Tl. 8 1 ；抗氧剂O. 25 1.0克；EDTA-2Na金属离子螯合剂O. θΓθ. 05克；水溶性高分子化合物稳定剂I. (Γ5. O克；有机溶剂45 80克；pH 值3·0 5·0;残氧量，以所述注射液总体积计く3% ；注射用水，它的量为使所述注射液总量达到IOOml的量。盐酸多西环素是目前市场上销售的抗生素，该药在水溶液中易氧化、降解，从而导致其水溶液变色并析出。为此，让镁离子化合物与多西环素进行络合反应生成络合物，以提高多西环素在所述注射液中的稳定性。所述的镁离子化合物络合剂是MgCL2 · 6H20、MgO或MgS04。优选地，所述的镁离子化合物络合剂是MgCL2 · 6H20或MgO。以多西环素计的盐酸多西环素为15 25克时，如果镁离子化合物络合剂与其多西环素的摩尔比小于1.0 :1，则会使多西环素络合不完全；如果镁离子化合物络合剂与其多西环素的摩尔比高于I. 8 :1，则会使药液碱性偏高，易氧化并影响其溶解。因此，镁离子化合物络合剂与其多西环素的摩尔比为I. (Tl. 8 1时较为适宜。优选地，镁离子化合物络合剂与其多西环素的摩尔比为I. (Tl. 6:1。为了防止多西环素氧化，在本发明的每IOOml注射液中使用了 O. 25^1. O克抗氧齐 。所述的抗氧剂是一种或两种选自甲醛合次硫酸氢钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠或维生素C的抗氧剂。优选地，所述的抗氧剂是一种或两种选自甲醛合次硫酸氢钠、亚硫酸氢钠或焦亚硫酸钠的抗氧剂。以多西环素计的盐酸多西环素为15 25克时，如果抗氧剂的量小于O. 25克，则其抗氧效果不足；如果抗氧剂的量大于I. O克，则会对注射剂质量产生影响，如影响其安全性；因此，以多西环素计的盐酸多西环素为15 25克时，所述抗氧剂的量为O. 25 1. O克是比较合适的。优选地，所述抗氧剂的量是O. 3、. 8克。为了获得稳定具有长效作用的注射液，在本发明的注射液中使用了水溶性高分子化合物稳定剂。所述水溶性高分子化合物稳定剂选自聚こ烯吡咯烷酮PVPK17、聚こ烯吡咯烷酮PVPK3tl、泊洛沙姆188或泊洛沙姆4。7。聚こ烯吡咯烷酮为白色或浅黄色粉末，易溶于水及多种有机溶剤，具有良好的吸湿性、成膜性、络合能力和生理相容性。这些水溶性高分子化合物稳定剂都是目前市场上销售的并常用的药用辅料，例如上海其福青材料科技有限公司生产的聚こ烯吡咯烷酮PVPK17与聚こ烯吡咯烷酮PVPK3tl。泊洛沙姆为聚氧こ烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，是ー类新型的高分子非离子表面活性剂，具有稳定、增溶、促进吸收等作用。它易溶于水或こ醇，水溶液在空气中较稳定，对酸碱水溶液和金属离子稳定。作为优良的药用新辅料-市售的泊洛沙姆已在制药エ业中使用，例如上海源叶生物科技有限公司销售的泊洛沙姆系列产品。以多西环素计的盐酸多西环素为15 25克时，如果水溶性高分子化合物稳定剂的量小于I. O克，则会起不到应有的作用；如果水溶性高分子化合物稳定剂的量高于5. O克，则会加大药液的粘稠度，造成制备和应用中的困难并增加成本。因此，所述水溶性高分子化合物稳定剂的量为I. (Γ5. O克是合适的。优选地，所述水溶性高分子化合物稳定剂的量为2. (Γ4. O克。为了保证盐酸多西环素络合效果，往往使用过量的络合剤，因此，反应中多余的镁离子以及其它试剂、溶媒或设备等带入的各种微量金属离子均会加速药物的氧化变色，因 此，螯合掩蔽过量镁离子与其它微量金属离子极其必要。为此，在本发明的注射液中使用了 EDTA_2Na金属离子螯合剤。它为白色结晶性粉末，能溶于水，是钙、镁及其他金属离子的螯合剂和掩蔽剂。它是ー种目前市场上销售的医药化工技术领域里普遍使用的产品。EDTA2Na作为金属离子螯合剂用于注射液的常用量为O. 005-0. 05% (克/100ml)。在本发明的产品中，以多西环素计的盐酸多西环素为15 25克时，如果EDTA_2Na金属离子螯合剂的量小于O. 01克，则抗氧化效果不够好；采用O. 05克EDTA2Na己能达到预计要求，如果再高于O. 05克，则会增加成本；因此，所述EDTA-2Na金属离子螯合剂的量为O. 01 O. 05克是合适的。优选地，所述EDTA_2Na金属离子螯合剂的量为O. 02 O. 05克。为了有效地制成溶解度小的络合物或形成高分子亲水凝胶减少溶出，采用丙ニ醇等有机溶剂来增加溶解度和粘滞度，降低扩散系数，这在提高药物稳定性的同时延缓了药物释放，延长了药物作用时间，因此，在本发明的注射液中使用了有机溶剂作为制备介质。所述的有机溶剂是ー种或两种选自α -吡咯烷酮、丙ニ醇、ニ甲基こ酰胺或聚こニ醇■、聚こニ醇2Μ的有机溶剤。优选地，所述的有机溶剂是ー种或两种选自α -吡咯烷酮、丙ニ醇或ニ甲基こ酰胺的有机溶剤。以多西环素计的盐酸多西环素为15 25克时，如果有机溶剂的量小于45克，则导致注射液不稳定，易析出；如果有机溶剂的量大于80克，则造成药液粘稠度大，成本増加；因此，有机溶剂的量为45 80克较为适宜。优选地，有机溶剂的量是5(Γ70克。就本发明而言，pH值是保证产品稳定性的关键因素之一，络合物能否有效形成又是注射液制备的关键之一。因此，络合反应PH值和终产品pH值的控制是保证药物顺利络合、延缓药物氧化，提高稳定性的关键因素。在本发明中，使用PH调节剂将其反应液的pH值控制在3. 0 6. O，优选地3. 5 5. O ;终产品pH值控制在3. 0 5. O，优选地3. 9 4. 5。所述的PH调节剂是盐酸和/或こ醇胺。由于多西环素易氧化变色，氧对注射液的稳定性影响很大，注射液中含氧量越高，稳定性越差，药液颜色越深，故本发明注射液中残氧量是控制产品质量的又一个关键指标。在本发明注射液配制和灌装过程中需要在氮气保护下实施，严格地将产品中氧的含量控制在以所述注射液总体积计3%以下，优选地1%以下，这样可以有效地防止其注射液在生产、灭菌和储存过程中的氧化变色现象，从而有效地保证其注射液产品质量。优选地，所述的兽用盐酸多西环素注射液所述的注射液每IOOml含有 以多西环素计的盐酸多西环素18 22克；镁离子化合物络合剂，它与多西环素的摩尔比为I. (Tl. 61；抗氧剂0. 3 0. 8克；EDTA-2Na金属离子螯合剂0. 02 0. 05克；水溶性高分子化合物稳定剂2. (T4. 0克；有机溶剂50 70克；pH 值3. 9 4. 5 ；残氧量，以所述注射液总体积计く 1% ;注射用水，它的量为使所述注射液总量达到IOOml的量。本发明还涉及所述兽用盐酸多西环素注射液的制备方法。所述制备方法的步骤如下A、将0. 25^1. 0克抗氧剂和I. (T5. 0克水溶性高分子化合物稳定剂溶于注射用水中，或者将0. 25^1. 0克抗氧剂溶于注射用水中，得到ー种水溶液，移取以体积计6(T75%所述水溶液，加到45 80克有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液。所述的抗氧剂和水溶性高分子化合物稳定剂如前面所述，在此不再赘述。B、往步骤A得到的混合液中依次加入镁离子化合物络合剂和15 25克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为I. (Tl. 8 :1 ;在温度50-65°C下使用pH调节剂将其混合液的PH值调节至3. 0-6. 0，搅拌直至得到ー种黄色透明液体。C、然后，在温度50 65 °C下保温5-20分钟；往步骤B得到的透明液体中加入
0.oro. 05克EDTA-2Na金属离子螯合剂与以体积计25 40%步骤A的水溶液，溶解混匀后再使用PH调节剂将其pH值调节至3. 0-5. 0，之后用注射用水补充其总量至IOOmL,接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在以所述注射液体积计3%以下，然后用蒸汽灭菌，得到所述的兽用盐酸多西环素注射液。在所述制备方法中，所使用的抗氧剂、水溶性高分子化合物稳定剂、镁离子化合物络合剤、EDTA-2Na金属离子螯合剂、有机溶剂与pH调节剂等如前面所述，在此不再赘述。本发明使用的有机滤膜为聚四氟こ烯、聚偏氟こ烯或脂肪族尼龙材料，具有广泛的化学相容性，耐适当浓度的酸碱，均是目前医药化工技术领域里普遍使用的市售产品。本发明灭菌使用的设备是目前市场上销售的医药化工技术领域里普遍使用的产品，例如山东中泰医疗器械股份有限公司销售的产品。
本发明的注射液通常进行蒸汽灭菌15 30分钟。本发明还涉及所述兽用盐酸多西环素注射液的另ー种制备方法。所述制备方法的步骤如下A、将0. 25 I. 0克抗氧剂的50 75%单独或与I. 0 5. 0克水溶性高分子化合物稳定剂一起溶于总量5(T75%计量的注射用水中，得到ー种水溶液，再把所述的水溶液加到45 80克有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B、然后，在温度5(T65°C下往步骤A得到的混合液中依次加入镁 离子化合物络合剂和15 25克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为I. (Tl. 81 ；搅拌均匀；再用PH调节剂将其pH值调节至3. (T6. 0，待反应体系呈黄色透明；C、将余下的抗氧剂与0. OrO. 05克EDTA_2Na金属离子螯合剂溶于余下一部分注射用水中，把其溶液再加到步骤B的反应溶液体系里，混匀，使用pH调节剂将pH值调节至
3.(T5. 0，再用注射用水将其总量补充到100ml，接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用蒸汽灭菌，得到所述的兽用盐酸多西环素注射液。采用本发明方法所得到兽用盐酸多西环素注射液的pH值为3. (T5. O。本发明的技术特点如下(I)抗氧剂的组成及制备エ艺本发明采用多西环素与金属离子络合的方法防止其药物氧化水解，还能够延长体内药物吸收，但镁离子在与多西环素络合的同时也能够加速其药物的氧化。本发明使用EDTA2Na作为金属离子螯合剂，可螯合镁等金属离子，防止其对药物的催化起到抗氧化作用，但同时它又參与多西环素的竞争，在一定程度上影响多西环素的络合，甚至会被大量镁离子消耗而失去其络合抗氧化作用。为此，本发明采用在络合反应完成，即形成透明溶液后，再加入EDTA-2Na络合剩余的镁离子和其他微量金属离子，这样既达到络合反应完全，也防止其注射液被微量金属离子氧化，同时采用抗氧剂与EDTA-2Na组合二次加入抗氧剂的方法，有效地补充了络合反应中抗氧剂量的消耗，明显增加了抗氧化效果，从而在保证疗效的情况下提高了产品的稳定性。这种技术方案在该类注射液的现有技术中无任何人报道。( 2 )反应温度及络合pH值络合物能否有效形成是注射液制备的关键之一。本发明络合反应温度控制在50^650C (优选地55 60°C)，络合pH值控制在3. 0 6. 0 (优选地3. 5 5. 0)，可保证多西环素顺利络合，防止因温度和PH过高造成的顔色加深等氧化现象。本发明所提出的具体温度和PH值范围的络合条件，在现有技术中未见具体相同报道。(3)残氧量控制多西环素易氧化变色，氧对注射液的稳定性影响很大，注射药液中含氧量越高，稳定性越差，药液颜色越深，故产品中残氧量的控制为关键指标之一。在配制和灌装过程中充入氮气，将产品中氧的含量控制在3%以下，可有效地降低注射液在生产、灭菌和储存过程中的氧化变色现象。本发明提出的该项控制指标在同类专利中未见报道。(4)采用的延效技术有效地制成溶解度小的络合物或形成高分子亲水凝胶减少溶出，采用丙ニ醇等有机溶剂增加粘滞度，降低扩散系数，可在提高药物稳定性的同时延缓了药物释放，延长了药物作用时间。该制剂技术制备的产品吸收快，体内消除半衰期长(>30h)，其表明长效作用的參数值明显高于CN101416974公开的作用数据。(5) pH 调节剂本发明采用的酸性pH调节剂为9M盐酸，而现有技术使用的是浓盐酸(CN101301268A)，不够安全并且加入时因局部浓度高有析出，易影响稳定性。本酸性pH调节剂的优点为易于配制和调节并相对安全。试验结果表明，本发明制备的兽用盐酸多西环素注射液产品色泽较浅、稳定性好、具有高效、速效和长效作用。[有益效果]本发明的有益效果如下本发明制备的兽用盐酸多西环素注射液产品色泽较浅、稳定性好、具有高效、速效和长效作用。多西环素属于长效广谱半合成抗生素，脂溶性大，本发明制备的多西环素注射液半衰期长约25 39h，比现有技术提高约l(T25h，因此，延长了药物在体内的作用时间，以10mg/kg的剂量给药，可Γ2天给药一次，減少了给药次数和使 用量，提高了治疗效果和效率，在兽医临床上将有广阔的应用前景。
具体实施方式通过下述实施例将能够更好地理解本发明。实施例I :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下A、将O. 25克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂和5. O克聚こ烯吡咯烷酮PVPK17水溶性高分子化合物稳定剂溶于注射用水中，得到ー种水溶液，移取以体积计60%所述水溶液，加到45克α -吡咯烷酮有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B、往步骤A得到的混合液中依次加入MgCL2 ·6Η20络合剂和15克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为1.3 :1 ;在温度55°C下使用盐酸或こ醇胺调节剂将PH值调节至3. 0，搅拌直至得到ー种黄色透明液体；C、然后，在温度55°C下保温5分钟；再往其中加入O. 01克EDTA_2Na金属离子螯合剂与以体积计40%步骤A的水溶液，溶解混匀后使用盐酸与こ醇胺pH调节剂将pH值调节至3. O,之后用注射用水补充其总量至IOOmL,接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在以所述注射液体积计3%以下，然后用流通蒸汽灭菌15分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液，其PH为3. O。实施例2 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下A、将I. O克甲醛合次硫酸氢钠和亚硫酸氢钠(重量比3 :2)抗氧剂和I. O克聚こ烯吡咯烷酮PVPK3tl水溶性高分子化合物稳定剂溶于注射用水中，得到ー种水溶液，移取以体积计68%所述水溶液，加到60克α -吡咯烷酮和ニ甲基こ酰胺(体积比2 :1)复合有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B、往步骤A得到的混合液中依次加入MgO络合剂和25克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为1.8 :1 ;在温度64°C下使用盐酸与こ醇胺pH调节剂将PH值调节至6. 0，搅拌直至得到ー种黄色透明液体；C、然后，在这个温度下保温20分钟；再往其中加入O. 05克EDTA_2Na金属离子螯合剂与以体积计32%步骤A的水溶液，溶解混匀后再使用所述pH调节剂将pH值调节至5. O，接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽灭菌30分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液，其pH为5. O。实施例3 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下A、将0. 50克甲醒合次硫酸氢钠和焦亚硫酸钠(重量比3:2)抗氧剂和3. 5克泊洛沙姆407水溶性高分子化合物稳定剂溶于注射用水中，得到ー种水溶液，移取以体积计75%所述水溶液，加到50克a -吡咯烷酮和ニ甲基こ酰胺(体积比2 1)复合有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；
B、往步骤A得到的混合液中依次加入MgSO4络合剂和20克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为1.2 :1 ;在温度58°C下使用盐酸与こ醇胺调节剂将PH值调节至3. 5，搅拌直至得到ー种黄色透明液体；C、然后，在这个温度下保温14分钟；再往其中加入0. 02克EDTA_2Na金属离子螯合剂与以体积计25%步骤A的水溶液，溶解混匀后再使用所述pH调节剂将pH值调节至3. 5，用注射用水将其总量补充至IOOmL,接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽灭菌20分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液，其PH为3. 5。实施例4 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下Ajf 0. 80克亚硫酸氢钠和维生素C (重量比I :I)抗氧剂溶于注射用水中，得到一种水溶液，移取以体积计70%所述水溶液，加到70克a -吡咯烷酮和聚こニ醇■(体积比4 3)复合有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B、往步骤A得到的混合液中依次加入MgO络合剂和23克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为1.6 :1 ;在温度60°C下使用盐酸与こ醇胺调节剂将PH值调节至4. 0，搅拌直至得到ー种黄色透明液体；C、然后，在这个温度下保温8分钟；再往其中加入0. 03克EDTA_2Na金属离子螯合剂与以体积计30%步骤A的水溶液，溶解混匀后再使用所述pH调节剂将pH值调节至4. 2，用注射用水将其总量补充至IOOmL,接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用蒸汽灭菌20分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液，其pH 为 4. 2。实施例5 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下A、将0. 4克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂和2. 0克泊洛沙姆188水溶性高分子化合物稳定剂溶于注射用水中，得到ー种水溶液，移取以体积计62%所述水溶液，加到65克a -吡咯烷酮有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B、往步骤A得到的混合液中依次加入MgCL2 *6H20络合剂和20克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为1.4:1 ;在温度62°C下使用盐酸或こ醇胺PH调节剂将pH值调节至4. 6，搅拌直至得到ー种黄色透明液体；C、然后，在这个温度下保温10分钟；再往其中加入0. 01克EDTA_2Na金属离子螯合剂与以体积计38%步骤A的水溶液，溶解混匀后再使用所述pH调节剂将pH值调节至4. O，用注射用水补充其总量至IOOmL,接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽灭菌30分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液，其pH为4. O。实施例6 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下A、将O. 65克焦亚硫酸钠和维生素C (重量比I :I)抗氧剂溶于注射用水中，得到一种水溶液，移取以体积计74%所述水溶液，加到80克聚こニ醇■和ニ甲基こ酰胺(体积比
53)复合有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B、往步骤A得到的混合液中依次加入MgSO4络合剂和15克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为1.5 :1 ;在温度65°C下使用盐酸与こ醇胺pH调 节剂将PH值调节至5. 6，搅拌直至得到ー种黄色透明液体；C、然后，在这个温度下保温18分钟；再往其中加入O. 04克EDTA_2Na金属离子螯合剂与以体积计26%步骤A的水溶液，溶解混匀后再使用所述pH调节剂将pH值调节至4. 5，用注射用水补充其总量至IOOmL,接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用蒸汽灭菌20分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液，其pH为 4. 5。实施例7 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下A、将O. 45克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂和3. O克聚こ烯吡咯烷酮PVPK17水溶性高分子化合物稳定剂溶于以体积计70%所述注射用水中，得到ー种水溶液，把所述水溶液加到50克α -吡咯烷酮和丙ニ醇(体积比4 1)复合有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B、在温度50°C下往步骤A得到的混合液中依次加入MgO络合剂和20克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为1.4:1 ;搅拌均匀；再使用盐酸与こ醇胺PH调节剂将其pH值调节至3. 8，直至得到ー种黄色透明液体；C、另取O. 15克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂与O. 02克EDTA_2Na金属离子螯合剂溶于余量30%注射用水，把其溶液加到步骤B得到的透明液体中，混匀后，降至室温，用所述pH调节剂将其PH值调节至4. 0，用注射用水将其总量补充到IOOmL,有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽灭菌15分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液。实施例8 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下A将O. 4克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂溶于以体积计65%所述注射用水，得到ー种水溶液，把所述水溶液加到60克α -吡咯烷酮和丙ニ醇(体积比I :1)复合有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B在温度55°C下往步骤A得到的混合液中依次加入MgO络合剂和20克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为I. 5 1 ;搅拌均匀；再使用盐酸与こ醇胺PH调节剂将其pH调节至4. 8，直至得到ー种黄色透明液体；C另取0. 3克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂与0. 02克EDTA_2Na金属离子螯合剂溶于以体积计35%所述注射用水，把其溶液再加到步骤B得到的透明液体中，混匀后，降至室温，用所述pH调节剂将其pH值调节至4. O，再用注射用水将其总量补充到IOOmL,有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽灭菌15分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液。实施例9 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下A将0. 25克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂溶于以体积计60%所述注射用水，得到ー种水溶液，把所述水溶液加到75克a -吡咯烷酮和ニ甲基こ酰胺(体积比3. 5 :4)复合有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B在温度55°C下往步骤A得到的混合液中依次加入MgO络合剂和20克以多西环 素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为1.0 :1 ;搅拌均匀；再使用盐酸与こ醇胺PH调节剂将其pH调节至4. 5，直至得到ー种黄色透明液体；C另取0. 25克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂与0. 02克EDTA_2Na金属离子螯合剂溶于以体积计40%所述注射用水，把其溶液再加到步骤B得到的透明液体中，混匀后，降至室温，用所述pH调节剂将其pH值调节至3. 9，再用注射用水将其总量补充到IOOmL,有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽灭菌15分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液。实施例10 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下A、将0. 29克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂、4. 0克泊洛沙姆188水溶性高分子化合物稳定剂溶于以体积计75%所述注射用水，得到ー种水溶液，再把所述的水溶液加到48克a -吡咯烷酮有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B、然后，在温度58°C下往步骤A得到的混合液中依次加入MgCL2 6H20络合剂和15克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为I. 6 :1 ;搅拌均匀；再使用盐酸与こ醇胺PH调节剂将其pH调节至3. 5，直至反应体系呈黄色透明；C、另取0. 16克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂与0. 01克EDTA_2Na金属离子螯合剂溶于以体积计25%所述注射用水，把其溶液再加到步骤B得到的透明液体中，混匀后，再用所述的PH调节剂将pH值调节至3. 8，用注射用水将其总量补充到100ml，接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用蒸汽灭菌20分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液。实施例11 :制备兽用盐酸多西环素注射液其实施步骤如下Ajf 0. 4克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂溶于以体积计50%所述注射用水，得到ー种水溶液，再把所述的水溶液加到76克聚こニ醇400和ニ甲基こ酰胺(体积比5 :2. 6)复合有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液；B、然后，在温度62°C下往步骤A得到的混合液中依次加入MgSO4络合剂和22克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为I. 2 1 ;搅拌均匀；再使用所述的PH调节剂将其pH值调节至5. 0，直至反应体系呈黄色透明；C、另取0. 4克甲醛合次硫酸氢钠抗氧剂和0. 05克EDTA_2Na金属离子螯合剂溶于以体积计50%所述注射用水，把其溶液再加到在步骤B得到的透明液体中，混匀后再使用所述的PH调节剂将pH值调节至4. 5，用注射用水将其总量补充到100ml，接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在3%以下，然后用流通蒸汽灭菌30分钟，得到本发明的兽用盐酸多西环素注射液。试验实施例试验实施例I :反应温度试验
权利要求
1.一种兽用盐酸多西环素注射液，其特征在于所述的注射液每IOOml含有以多西环素计的盐酸多西环素15 25克；镁离子化合物络合剂，它与多西环素的摩尔比为l.(Tl.8 :1 ；抗氧剂O. 25 I. O克；EDTA-2Na金属离子螯合剂IO. θΓθ. 05克；水溶性高分子化合物稳定剂I. (Γ5. O克；有机溶剂45 80克；pH 值3. 0-5. O ；残氧量，以所述注射液总体积计〈3% ；注射用水，它的量为使所述注射液总量达到IOOml的量。
2.根据权利要求I所述的兽用盐酸多西环素注射液，其特征在于所述的注射液每IOOml含有以多西环素计的盐酸多西环素If 22克；镁离子化合物络合剂，它与多西环素的摩尔比为l.(Tl.6 :1 ；抗氧剂O. 3^0. 8克；EDTA-2Na金属离子螯合剂O. 02 O. 05克；水溶性高分子化合物稳定剂2. (Γ4. O克；有机溶剂5(Γ70克；pH 值3. 9-4. 5 ；残氧量，以所述注射液总体积计く 1% ；注射用水，它的量为使所述注射液总量达到IOOml的量。
3.根据权利要求I或2所述的兽用盐酸多西环素注射液，其特征在于所述的抗氧剂是一种或两种选自甲醛合次硫酸氢钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠或维生素C的抗氧剂。
4.根据权利要求I或2所述的兽用盐酸多西环素注射液，其特征在于所述的镁离子化合物络合剂是MgCL2 · 6H20、MgO或MgSO4。
5.根据权利要求I或2所述的兽用盐酸多西环素注射液，其特征在于所述的有机溶剂是ー种或两种选自α-吡咯烷酮、丙ニ醇、ニ甲基こ酰胺、聚こニ醇■和聚こニ醇2。。的有机溶剤。
6.根据权利要求I或2所述的兽用盐酸多西环素注射液，其特征在于所述的水溶性高分子化合物稳定剂是聚こ烯吡咯烷酮PVPK17、聚こ烯吡咯烷酮PVPK3tl、泊洛沙姆188或泊洛沙姆 407。
7.根据权利要求I或2所述的兽用盐酸多西环素注射液，其特征在于所述的pH调节剂是盐酸和/或こ醇胺。
8.—种权利要求I或2所述兽用盐酸多西环素注射液的制备方法，其特征在于所述制备方法的步骤如下A、将O.25^1. O克抗氧剂和I. (Γ5. O克水溶性高分子化合物稳定剂溶于注射用水中，或者将O. 25^1. O克抗氧剂溶于注射用水中，得到ー种水溶液，移取以体积计6(Γ75%所述水溶液，加到45 80克有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液； B、往步骤A得到的混合液中依次加入镁离子化合物络合剂和15 25克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为I. (Tl. 8 :1 ;然后在温度5(T65°C下用pH调节剂将其混合液的PH值调节至3. 0-6. 0，接着搅拌直至得到ー种黄色透明液体； C、然后，在温度50 65°C下保温5 20分钟；再往其中加入0. 01 0. 05克EDTA_2Na金属离子螯合剂与以体积计25 40%步骤A的水溶液，溶解混匀后再使用pH调节剂将其pH值调节至3. (T5. 0 ;接着用注射用水加至总量IOOmL,进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在以所述注射液体积计3%以下，然后用流通流通蒸汽灭菌，得到所述的兽用盐酸多西环素注射液。
9. 一种权利要求I或3所述兽用盐酸多西环素注射液的制备方法，其特征在于所述制备方法的步骤如下 A、将0.25 I. 0克抗氧剂的50-75%单独或与I. 0^5. 0克水溶性高分子化合物稳定剂一起溶于以体积计5(T75%所述注射用水中，得到ー种水溶液，再把所述的水溶液加到45 80克有机溶剂中，混合均匀得到ー种混合液； B、然后，在温度5(T65°C下往步骤A得到的混合液中依次加入镁离子化合物络合剂和15 25克以多西环素计的盐酸多西环素，其络合剂与多西环素的摩尔比为I. (Tl. 8 1 ;搅拌均匀；再用PH调节剂将其pH调节至3. (T6. 0，直至反应体系呈黄色透明； C、另取余下的抗氧剂与0.oro. 05克EDTA-2Na金属离子螯合剂溶于余下一部分注射用水中，把其溶液再加到步骤B的反应体系里，混匀后，用pH调节剂将其pH值调节至.3. (T5. 0，再用注射用水将其总量补充到100ml，接着进行有机滤膜过滤，收集滤液，充氮气分装，将其残氧量控制在以所述注射液体积计3%以下，然后用蒸汽灭菌，得到所述的兽用盐酸多西环素注射液。
全文摘要
本发明涉及一种兽用高浓度长效盐酸多西环素注射液及其制备方法。该方法包括将适量抗氧剂和稳定剂溶于注射用水中，然后把其水溶液加到有机溶剂中，再加入盐酸多西环素和络合剂，调节pH，保温，接着加入金属离子螯合剂和部分抗氧剂，然后过滤、充氮气、灭菌，得到所述的兽用盐酸多西环素注射液。本发明制备的多西环素注射液安全、稳定、半衰期长约30~39h，延长了药物在体内的作用时间，减少了给药次数和使用量，提高了治疗效果和效率，在兽医临床上将有广阔的应用前景。
文档编号A61K31/65GK102772360SQ20121030097
公开日2012年11月14日 申请日期2012年8月22日 优先权日2012年8月22日
发明者孙雷, 张聪敏, 张骊, 徐倩, 徐士新, 徐秉恩, 朱明文, 朱馨乐, 毕言峰, 汪霞, 王亦琳, 胡海燕, 黄耀凌 申请人:中国兽医药品监察所