专利名称：紫茎泽兰提取物在制备杀灭蜱的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及紫茎泽兰提取物在制备杀灭吸血昆虫(蜱)的药物中的应用。
背景技术：
蜱(Tick)是危害多种脊椎动物的一类吸血昆虫，全世界已知蜱类有3科18属897种，在我国已报道蜱类达2科、10属、119种。蜱的各活动期都需要吸食宿主动物的血液。经蜱叮咬，宿主的皮肤组织受到破损，留下微小的伤口，有时引起皮炎，发生糜烂，出现溃疡或继发感染全身病症，严重时会引起宿主动物死亡。家畜如被蜱类寄生，不仅皮毛易受损伤，而且还会使畜产品质量下降，影响畜产品产量，甚至引起家畜死亡。蜱类还可传播病毒、衣原体、立克次体、细菌、螺旋体和原虫等病原体。目前，已经证实森林脑炎(Forest-SpringEncephalitis)、克里米亚-刚果出血热(Crimean-Congo hemorrhagic fever)、北亚蝶媒斑疫伤寒(Noah-Asian tick-borne typhus)、Q 热(Q-fever)、人粒细胞无形体病(Human granulocytic anaplasmosis, HGA)、莱姆病(Lyme disease)、蝶媒回归热(tick-bornerelapsing fever)和巴贝虫病(Babesiosis)等与吸血昆虫(蝶)的传播有关。目前，对感染家养动物进行喷洒化学杀虫药剂或定期用化学杀虫药剂药浴杀蜱，在林区使用烟雾剂灭蜱等是较为常见的防蜱措施。但是，长期的、大量使用化学杀蜱药物会带来的严重的药物残留、环境危害等问题(Currie，2004; Terada. , 2010 ;Nong.，2012)。因此，开发有效的、低毒、环境友好型的替代药物便成为当务之急。相比较于一些高效的化学类杀蜱药物，植物源杀蜱剂具有在环境中可自行降解等特点(Mulla and Su, 1999; Panella et al. , 2005)。因此,越来越多的研究致力于开发植物源杀蜱药物。紫莖泽兰(Eupatorium adenophorum)在分类上属紫堯目、菊科(Auld andMartins, 1975),为多年生草本植物，主要分布在中美洲、墨西哥等的热带与温和地带(Sun et al., 2004)。由于其传播速度快，已经成为分布世界各地的农作物、自然环境和森林等的主要有害杂草。目前，作为一种有害的外来入侵杂草，至少对30个国家造成了环境与生态的危害，并且已经成中国最重要外来入侵物种(Sang et al. , 2010),已经广泛分布于重庆、四川、贵州、云南、西藏、广西、河北以及台湾等并造成当地的生态危害(Zheng etal. , 2009, Ma et al.，2012)。紫茎泽兰作为一种外来有害植物，给共生的其它植物带来了非常大的灾难(Zhu and Sang, 2008)。虽然，研究人员发现马误食了紫茎泽兰叶子后，可造成中毒(Sullivan，1979)，紫莖泽兰的提取物也能给实验老鼠造成肝毒性(Kaushal et al. , 2001; Singh. , et al.,2012)。然而，紫茎泽兰作为最引人关注的外来有害植物，目前正在被人类进行深入研究，而如何利用这一资源庞大的有害外来植物，变废为宝是研究的热点。近年来，人们开始认识到紫茎泽兰作为植物源性农药发展的潜力，并试图采用利用与防除相结合的方法对这有害杂草进行控制。研究发现，紫茎泽兰提取物中含有治疗足癣具有较强活性的成分(Romero-Cerecero, 2008 ),具有杀灭钉螺的活性成分(ZouFC，2009)，紫茎泽兰提取物还对蚜虫(Lipathis erysimi )的角皮和触角具有破坏作用(Dey et al.，2005)。同时，紫茎泽兰的丙酮提取液对白菜蚜虫、甘蓝蚜防治效果比较好(Xu. , 2009)ο紫莖泽兰叶的提取物有杀灭伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)作用(Shabaet al. , 2012)。研究还发现紫莖泽兰的提取物对鸡球虫卵囊有杀灭作用(Yang et al.,2012)。但是，目前还没有紫茎泽兰杀灭吸血昆虫(蜱类)的报导。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种紫茎泽兰提取物在制备杀灭吸血昆虫(蜱)的药物中的应用。本发明的技术方案如下紫茎泽兰提取物在制备杀灭吸血昆虫(蜱)的药物中的应用，结果表明，紫茎泽兰乙醇提取物浓度为I. 0-1. 5 g/ml，对长角血蜱的幼蜱和若蜱杀灭效果良好，与毒死蜱的杀灭效果相当。本研究结果预示紫茎泽兰具有杀灭吸血昆虫(蜱)的活性成分，可以作为植物 源性中草药加以开发利用。
具体实施例方式以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。I.材料与方法I. I紫茎泽兰以及提取物紫茎泽兰2010年11月采自中国西南四川省西昌市。紫莖泽兰提取物采用水煎煮(F.macchioni.，2004)、乙醇热回流以及水蒸懼(Khodadad.，2009)三种方法提取。乙醇热回流提取物用蒸馏水和丙三醇(I: I)配制成不同浓度的药液，其余两种提取物用蒸馏水溶解并配成不同浓度的药液。I. 2试验用血蜱吸饱血后的长角血蜱采集自流行区家畜的体表，采集后，24小时内放到预先装有细砂石和一张滤纸片的小广口瓶内，广口瓶用单层纱布和胶圈封住口部，防止血蜱爬出，定期观察，待血蜱产卵后，收集孵出的幼蜱，将部分幼蜱自然感染实验家兔并收集吸饱血的幼蜱，待长成若蜱后，收集并保存供实验用。I. 3试验设计参照Ribeiro (2010)等的方法，结合实验实施的实际稍加改变。I. 3. I幼蜱的杀灭试验用丙三醇和蒸馏水将紫茎泽兰乙醇提取物配成不同浓度的药液，其它提取物用蒸馏水配制。把2ml不同浓度的药液滴加到平皿中(IOcmX 2cm)，放置裁好的滤纸片，在吸湿了药液的滤纸片上放置10只幼蜱，用小型喷雾器向供试幼蜱喷洒药液三次后，置于相对湿度为75%，温度为25°C的培养箱中培养，设置6个重复。定时检查，用针刺激幼蜱，没有反应或较长时间静止的判定为死亡。定期记录死亡情况。1.3.2若蜱的杀灭试验精心挑选I只健康家兔，在其左耳和右耳中各感染约200只饥饿幼蜱，然后在其两耳的外耳处套上用纱布自制的收集吸饱血的幼蜱的外耳套，收集吸饱血的幼蜱，每三个小时收集一次，直接到收集完。待饱血的幼蜱蜕皮后即发育为若蜱，若蜱的体外杀灭试验与幼蜱的杀灭方法相同。幼蜱与若蜱的杀灭试验均以毒死蜱以及丙三醇作为阳性以及阴性空白对照组。I. 4数据统计数据统计采用SAS软件进行分析(SAS Institute, 2002)。主要统计分析用药前后不同浓度的紫茎泽兰提取物组、毒死蜱阳性对照组以及空白对照组的杀灭效果是否存在
差异等。2.结果与讨论紫茎泽兰不同提取方法的提取物对幼蜱与若蜱均有一定的杀灭效果，其中5小时 内较高浓度的乙醇提取物能100%杀灭幼蜱与若蜱。紫茎泽兰乙醇提取物的不同浓度在不同时间内杀灭供试幼蜱与若蜱的效力差异比较大(表I、表2)。从结果可以看出，乙醇提取物最佳浓度为lg/ml到1.5g/ml之间。表I紫茎泽兰乙醇提取物不同浓度杀灭幼蜱效果
权利要求
1.紫茎泽兰提取物在制备杀灭蜱的药物中的应用。
2.根据权利要求I所述的应用，其特征在于，紫茎泽兰こ醇提取物浓度为I.0-1. 5 g/ml，对长角血蜱的幼蜱和若蜱杀灭效果良好，与毒 死蜱的杀灭效果相当。
全文摘要
本发明公开了紫茎泽兰提取物在制备杀灭吸血昆虫(蜱)的药物中的应用，结果表明，紫茎泽兰乙醇提取物浓度为1.0-1.5 g/ml，对长角血蜱的幼蜱和若蜱杀灭效果良好，与毒死蜱的杀灭效果相当。本研究结果预示紫茎泽兰具有杀灭吸血昆虫(蜱)的活性成分，可以作为植物源性中草药加以开发利用。
文档编号A61P33/14GK102861118SQ201210353228
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月21日 优先权日2012年9月21日
发明者杨光友, 农向, 彭雪蓉, 古小彬 申请人:四川农业大学