专利名称：一种红茴香注射液的制备方法
技术领域：
本发明属于中药领域，具体涉及一种红茴香注射液的制备方法。
背景技术：
红茴香系木兰科八角属植物莽草(Lllicium lanceolatum A. C Smith)干燥的根或茎的皮，具有消肿散瘀、活血止痛的功效，用于跌打损伤，风湿类风湿性关节炎的治疗。目前除民间偶有粉剂，酒剂口服或外用 治疗上述疾病外，现有浙江泰康药业集团有限公司独家生产红茴香注射液，原工艺为醇提水沉法，存在有效部位使用不完全的问题(特别是挥发油部分)，故该红茴香注射液的制备工艺亟需改进。
发明内容
本发明的目的是克服上述不足之处提供一种红茴香注射液的制备方法。本发明的目的是通过以下方式实现的一种红茴香注射液的制备方法，该方法包括以下步骤将红茴香的根皮或茎皮粗粉采用水蒸气蒸馏提取得到挥发油提取液，另存；过滤剩余药液，浓缩至药材的广2倍量，为浓缩水液，另存；将过滤出的药渣用浓度为90°/Γ95%乙醇加热回流提取得到醇提液，将挥发油提取液、水提液、醇提液三部分合并，制成注射液。所述的水蒸气蒸馏提取得到挥发油提取液的步骤如下红茴香根皮或茎皮粗粉用药材1(Γ15倍量的水浸泡Γ8小时，水蒸气蒸馏提取挥发油，收集药材5飞倍量的挥发油提取液。上述乙醇加热回流提取具体为将药渣用浓度为90°/Γ95%乙醇加热回流提取2 3次，每次用药材2 3倍量的浓度为90°/Γ95%的乙醇，每次提取时间I小时，合并乙醇提取液。所述的挥发油提取液、水提液、醇提液三部分合并制成注射液的步骤为向乙醇提取液中加入浓缩水液，搅拌均匀，静置冷藏24小时以上，过滤，滤液回收乙醇至无醇味得到浓缩液，再加浓缩液2 3倍量的浓度为95%的乙醇，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，回收乙醇后的药液加药材4飞倍量的注射用水，并加活性炭脱色，冷藏24小时以上，过滤，滤液调PH至7. (Γ7. 5，加入挥发油提取液，得油水混合液，再加混合液重量2%的吐温-80搅拌溶解，静置冷藏24小时以上，过滤，再调pH至9. 7，加注射用水至全量，搅拌过滤，灌封，灭菌，即得。上述方法中采用浓度为10%的NaOH溶液调pH值。与现有技术比较本发明的有益效果本发明制备方法为先用水蒸气蒸馏法提取挥发油部位，再用水提-醇提结合法提取其余有效部位，加入挥发油部位制成注射液。本发明方法充分利用药材的各个有效部位，制备得到的注射液具有消肿散瘀，活血止痛的功效，用于治疗腰肌劳损，关节或肌肉韧带伤痛及风湿痛等具有显著疗效且安全、疗效持久。
具体实施例方式下面通过具体的实施例对本发明进一步说明，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干变型和改进，这些也应视为属于本发明的保护范围。实施例I红茴香茎皮50g加工成粗粉，加药材10倍量的水浸泡8小时，水蒸气蒸馏，收集挥发油提取液300mL，另存；将蒸馏挥发油后的剩余药液过滤，浓缩至50mL (即药材的I倍量)为浓缩水液，另存。过滤后的药渣用浓度为95%的乙醇加热回流提取2次，每次乙醇用量为IOOmL,每次提取时间I小时，合并乙醇提取液，加入浓缩水液搅拌均匀，静置冷藏24小时，过滤，滤液回收乙醇至无醇味得到浓缩液，再加浓缩液2倍量浓度为95%的乙醇沉淀24小时以上,过滤,滤液回收乙醇至无醇味，回收乙醇后的药液加注射用水300mL，并加5g活性炭脱色，冷藏，过滤，滤液用浓度为10%的NaOH溶液调pH至7. (Γ7. 5，加入前述挥发油提取液，得油水混合液，加混合液重量2%的吐温-80搅拌溶解，静置冷藏24小时，过滤，再用浓度为10%的NaOH溶液调pH至9. 7，加注射用水至IOOOmL,搅拌过滤，灌封，灭菌，即得。实施例2 红茴香茎皮50g加工成粗粉，加药材15倍量的水浸泡4小时，水蒸气蒸馏，收集挥发油提取液300mL，另存。蒸馏挥发油后的剩余药液过滤，浓缩至IOOmL (即药材的2倍量)为浓缩水液，另存。过滤后的药渣用浓度为90%的乙醇加热回流提取3次，每次乙醇用量为150mL，每次提取时间I小时，合并乙醇提取液，加入浓缩水液搅拌均匀，静置冷藏24小时以上，过滤，滤液回收乙醇至无醇味得到浓缩液，再加浓缩液3倍量浓度为95%的乙醇沉淀24小时以上，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，回收乙醇后的药液加注射用水300mL，并加8g活性炭脱色，冷藏过滤，滤液用浓度为10%Na0H溶液调pH至7. (Γ7. 5，加入前述挥发油提取液，得油水混合液，加混合液重量2%的吐温-80搅拌溶解，静置冷藏24小时，过滤，再用浓度为10%Na0H溶液调pH至9. 7，加注射用水至IOOOmL,搅拌过滤，灌封，灭菌，即得。以下通过药效实验进一步说明本发明注射剂的效果试验例I采用小鼠尾压镇痛实验、小鼠耳肿胀实验和大鼠足跖肿胀实验观察红茴香茎皮挥发油提取部位(HHX-I)、水提醇沉部位(HHX-2)、本发明实施例I组(本发明方法制备的红茴香注射液)、本发明实施例2组(本发明方法制备的红茴香注射液)、对比例组(市售浙江泰康药业集团有限公司生产的红茴香注射液)的镇痛抗炎作用。红茴香茎皮挥发油提取部位(HHX-1):取红茴香茎皮50g加工成粗粉，加药材10倍量的水浸泡8小时，水蒸气蒸馏，收集挥发油提取液300mL。红茴香茎皮水提醇沉部位(HHX-2):将按照实施例I方法蒸馏挥发油后的剩余药液过滤，浓缩至50mL为浓缩水液，另存。过滤后的药渣用浓度为95%的乙醇加热回流提取2次，每次乙醇用量为IOOmL,每次提取时间I小时，合并乙醇提取液，加入浓缩水液搅拌均匀，静置冷藏24小时，过滤，滤液回收乙醇至无醇味得到浓缩液，再加浓缩液2倍量无水乙醇沉淀24小时以上，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，加水至300mL，即得。I对小鼠尾压痛痛阈值的影响选取体重18 22g的SPF级KM小鼠，将小鼠置于固定器内，尾部和四肢暴露在固定器外，待动物安静后进行实验。测痛前在小鼠尾部距尾尖1/3处作为施压点标记，施压时以小鼠出现挣扎或撕叫作为疼痛反应指标，此压力值即为该鼠痛阈值，连测二次，取平均值作为对照值。共挑选80只小鼠，随机分成8组(10只/组)，雌雄 各半，即空白组、云南白药组^!!!!^/!^乂扶他林组^。!!^/!^)、HHX-I 组(500mg/kg)、HHX-2 组(500mg/kg)、本发明实施例I组(500mg/kg)、本发明实施例2组(500mg/kg)、对比例组(500mg/kg)。给药时用微量注射器将药物涂抹于小鼠尾部受压点，5mL/kg,测定给药 后15min、30min痛阈值,计算Δ痛阈(Δ痛阈=药后痛阈值-药前痛阈值)。结果表明HHX-2组在给药后15min能显著提高小鼠尾压痛阈值(P〈0. 05)，HHX-I组未见显著增加小鼠尾压痛阈值；本发明方法制备的红茴香注射液及对比例组红茴香注射液在给药后15min均能显著提高小鼠尾压痛阈值(P〈0. 05)，但本发明方法制备的红茴香注射液镇痛效果更好，且本发明与对比例组比较具有十分显著的差异，具体见表1-1。表1-1对小鼠压痛痛阈值的影响(Γ土S，n=10)
Μ|,给药前痛给药后15min Δ痛阈(给药 :" Δ痛阈(给药
阈值痛W值后 15min)后 30min)
____
空 R组0.60 士0.33 0.70士0.31 0.10 士0.29 0.59士0.25 -0.02±0.41
云南白药组0.67±0.15 0.81±0.19 0.13±0.22 0.95士0.30 0.27士 0.25
扶他林组0.52±0.27 0.77±0.35 0.25±0.42 0.95士0.35 0.42士0.36*
HHX-I 组0.59±0.27 0.86±0.27 0.28±0.46 0.94±0.37 0.35士0.48
HHX-2 组0.59土0.30 1.05土0.35 0.46±0.42* 0.95±0.42 0.36±0.47
本发明实施例 I 组 0.62±0.34 1.29±0.35 0.67±0.27**Δ 1.07±0.39 0.45士0.28* 本发明实施例 2 组 0.60±0.43 1.24±0.35 0.64=b0.31**A 1.06士0.18 0.46士0.35*
对比例组0.62±0.25 1.09±0.35 0.47士0.28* 0.98士0.29 0.36士 0.31注与空白组比较，*P< 0.05。与对比例组比较，Λ P < O. 05。2对小鼠耳肿胀的影响取SPF级雄性KM小鼠，体重18 22g，随机分为8组(10只/组)，即空白组、云南白药组(5mL/kg)、扶他林组(50mg/kg)、HHX-I 组(500mg/kg)、HHX-2 组(500mg/kg)、本发明实施例I组(500mg/kg)、本发明实施例2组(500mg/kg)、对比例组(500mg/kg)。给药时用微量注射器将药物涂抹于小鼠左右耳廓，5mL/kg。耳廓给药30min后，利用微量注射器将O. 05mL二甲苯分别滴于右耳两侧，保证所滴位置一致，左耳作对照。3h后将小鼠脱颈椎处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9_的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆形耳片，称重，求左右耳片重量之差作为肿胀度，与空白组比较组间差异。结果表明与空白组比较，HHX-I和HHX-2组均能减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀程度(P〈0. 05);本发明方法制备的红茴香注射液能极显著减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀程度(P〈0. OI)，且本发明与对比例组比较具有十分显著的差异，比对比例组红茴香注射液抗炎效果显著，具体见表1-2。表1-2对小鼠耳肿胀的影响(Y±S，n=10)
权利要求
1.一种红茴香注射液的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤将红茴香的根皮或茎皮粗粉采用水蒸气蒸馏提取得到挥发油提取液，另存；过滤剩余药液，浓缩至药材的Γ2倍量，为浓缩水液，另存；将过滤出的药渣用浓度为90°/Γ95%乙醇加热回流提取得到醇提液，将挥发油提取液、水提液、醇提液三部分合并，制成注射液。
2.根据权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的水蒸气蒸馏提取得到挥发油提取液的步骤如下红茴香根皮或茎皮粗粉用药材1(Γ15倍量的水浸泡Γ8小时，水蒸气蒸馏提取挥发油，收集药材5飞倍量的挥发油提取液。
3.根据权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的将药渣用浓度为909Γ95%乙醇加热回流提取2 3次，每次用药材2 3倍量的浓度为909Γ95%的乙醇，每次提取时间I小时，合并乙醇提取液。
4.根据权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的挥发油提取液、水提液、醇提液三部分合并制成注射液的步骤为向乙醇提取液中加入浓缩水液，搅拌均匀，静置冷藏24小时以上，过滤，滤液回收乙醇至无醇味得到浓缩液，再加浓缩液2 3倍量的浓度为95%的乙醇，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，回收乙醇后的药液加药材4飞倍量的注射用水，并加活性炭脱色，冷藏24小时以上，过滤，滤液调pH至7. (Γ7. 5，加入挥发油提取液，得油水混合液，再加混合液重量2%的吐温-80搅拌溶解，静置冷藏24小时以上，过滤，再调PH至9. 7，加注射用水至全量，搅拌过滤，灌封，灭菌，即得。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于用浓度为10%的NaOH溶液调pH值。
全文摘要
本发明公开了一种红茴香注射液的制备方法，该方法是将红茴香的根皮或茎皮粗粉用水蒸气蒸馏法收集挥发油提取液(A液)另存；蒸馏后剩余药液过滤，浓缩后作为浓缩水液(B液)另存；药渣用乙醇回流提取，得乙醇提取液(C液)，将A液、B液、C液合并制成注射液。本发明方法制备得到的注射液具有消肿散瘀，活血止痛的功效，可用于治疗腰肌劳损，关节或肌肉韧带伤痛及风湿痛等。
文档编号A61P19/02GK102895311SQ20121045868
公开日2013年1月30日 申请日期2012年11月14日 优先权日2012年11月14日
发明者陈剑美 申请人:浙江泰康药业集团有限公司