治疗方法
【专利摘要】本发明涉及一种治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病的方法，其包括向有此需要的人给予有效量的抑制EZH2和/或EZH1的化合物或其药学上可接受的盐。
【专利说明】治疗方法
发明领域
[0001] 本发明涉及抑制EZH2/EZH1的化合物以及它们用于治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病的用途。
_2] 发明背景
[0003]蛋白的翻译后修饰在调节来自受体的信号转导、染色质重塑和基因转录中发挥着关键作用。这些修改包括乙酰化，甲基化，磷酸化，泛素化，SUMO化。EZH(zeste同系物的增强子)I和2是多梳蛋白抑制复合体2 (Polycomb Repressor CompIex2) (PRC2)的催化亚基，并表现出能够催化赖氨酸氨基酸的甲基化的甲基转移酶活性(MargueronR, Reinberg D:The Polycomb complex PRC2and its mark in life.Nature.2011Jan20 ；469(7330):343-9)。 [0004]EZHl和EZH2基因在通过组蛋白H3的二或三甲基化赖氨酸27 (H3K27me2/3)进行的基因表达的表观遗传长期沉默中发挥关键作用。组蛋白H3是参与真核细胞中染色质的结构的五个主要组蛋白之一。染色质是DNA和蛋白的复合物组合，其构成了染色体。发现其位于真核细胞的细胞核内，且分为异染色质(凝聚)和常染色质(伸展)。染色质的基本结构单元是核小体，其中每一个核小体是由缠绕在组蛋白八聚体的DNA的146个碱基对组成，该组蛋白八聚体由2组H2A、H2B、H3和H4组成。染色质的功能是将DNA组装至较小的体积以容纳于细胞中、加强DNA以允许有丝分裂和减数分裂，并作为一种机制来控制基因表达和DNA复制。染色质结构通过对组蛋白(特别是组蛋白H3和H4)的一系列翻译后修饰来控制，最常见的是在延伸超出芯核小体的结构的“组蛋白尾部”进行修饰。酶和衔接蛋白结合的组蛋白尾部翻译后修饰调节染色质动力学和基因表达。H3K27me3被认为是通过招募组蛋白去乙酰化酶至修饰的核小体以及通过聚合酶II停止转录伸长而沉默基因表达。因此，抑制EZHl和EZH2的酶活性可造成H3K27me3的损失和靶基因的上调。
[0005]除了在组蛋白H3修饰中的核功能外，EZH2已经涉及于导致细胞的细胞质中肌动蛋白聚合的信号转导的调控(Su IH, Dobenecker MW, Dickinson E, Oser M, BasavarajA, Marqueron R，Viale A，Reinberg D，Wiilfing C，Tarakhovsky A:Polycomb groupprotein ezh2controls actin polymerizat1n and cell signaling.Cell.2005May6 ；121 (3):425-36)。肌动蛋白细胞骨架的重组通过促进T细胞与抗原呈递细胞或靶细胞的相互作用有助于T细胞应答。此外，肌动蛋白重塑在T细胞招募到炎症部位期间的迁移和运动中具有重要作用。EZH2蛋白的组分被发现定位于T细胞的细胞质，并与小GTP酶VAVl (其参与肌动蛋白重塑)相互作用。EZH2的遗传消除导致肌动蛋白在TCR刺激的T细胞中或在T细胞-抗原呈递细胞分裂期间的聚合受损。此外，通过EZH2过表达诱导的肌动蛋白聚合依赖于EZH2的甲基转移酶活性。响应于TCR的T细胞的增殖在没有EZH2的情况下也被削弱。因此，抑制EZHl和/或EZH2可以抑制T细胞的活化。
[0006]成熟T细胞在适当的共刺激的存在下通过抗原呈递细胞对外源肽抗原响应。由于对胸腺中的外源抗原特异的TCR指令的选择，外周自反应性T细胞克隆的耐受诱导，以及通过调节性T细胞自身抗原进行的T细胞活化的控制，它们具有在自我和非自我之间进行区分的能力。作为不同组的细胞因子和其它可溶性和细胞结合的产物的表达的结果，T细胞通过介导不同类型的适应性免疫应答，提供对抗不同种类的病原体的保护。此外，它们用作在先天免疫系统的细胞和非免疫细胞中的适当炎症和效应应答的基础放大器和诱导子。虽然这种协调一致的免疫应答可以针对病原体提供了有力的保障，也可能会造成与对自我和环境抗原和共生微生物的不需要的免疫响应相关的炎症，以及作为针对病原体的免疫响应的副作用的宿主的附带损害。CD8T细胞可裂解带有细胞内病原体的细胞，但也可能导致组织损伤和分泌促炎细胞因子，如TNF和IFNg。CD4T细胞在炎症中具有多种功能，取决于他们的特异性的细胞因子表达特性。CD4+Thl细胞对胞内病原体的清除是重要的，但也通过TNF和IFNg的表达在炎症中起关键作用。IL-17表达的⑶4+Thl7细胞，其介导中性粒细胞和组织重塑和修复，也已显示出参与多种炎性病症。CD4+Th2细胞通过表达介导气道高反应性，嗜酸性粒细胞招募和IgE产生的IL-13，IL-5和IL-4参与过敏性反应。因此，T细胞的活化被认为对于许多炎性免疫性疾病是关键的。因此，抑制EZHl和/或EZH2活性和抑制T细胞的活化的化合物可用于T细胞介导的炎性免疫性疾病的治疗。
[0007]用于治疗癌症的EZH1/EZH2的抑制剂已经报道于PCT申请PCT/US2011/035336、PCT/US2011/035340 和 PCT/US2011/035344 中。
[0008]发明概沭
[0009]本发明涉及一种治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病的方法，其包括向有此需要的人给予抑制EZH2和/或EZHl的有效量的化合物或其药学上可接受的盐。
[0010]在另一方面，本发明涉及抑制EZH2和/或EZHl的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病。
[0011]在另一方面，本发明涉及抑制EZH2和/或EZHl的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病的药物中的用途。
【专利附图】
【附图说明】
[0012]图1 AZiVEZH2抑制剂损害T细胞受体-诱导的⑶4+T细胞增殖。分裂指数在使用10 μ g/mL α⑶3+2 μ g/mL α⑶28刺激后6天通过CFSE荧光进行计算。数据以平均值土平均值的标准误差表示，η = 4。
[0013]图2 =EZH1ZEZH2抑制剂损害⑶4+Τ细胞中T细胞受体-诱导的细胞因子产生。细胞因子产生使用10 μ g/mL α⑶3+2 μ g/mL α⑶28刺激后72小时进行测量。数据以平均值土平均值的标准误差表示，η = 4。
[0014]图3 =EZH1ZEZH2抑制剂于CD4+T细胞中损害T细胞受体-诱导的IL-2产生。IL-2产生使用10 μ g/mL α⑶3+2 μ g/mL α⑶28刺激18小时后进行测量。数据以平均值土平均值的标准误差表示，η = 4。
[0015]表1 AZiVEZH2抑制剂损害⑶4+Τ细胞中T细胞受体-诱导的细胞因子产生。细胞因子产生使用10 μ g/mL α⑶3+2 μ g/mL α⑶28刺激后72小时进行测量。数据以pIC5(l土标准误差表示；n = 4。
[0016]发明详述[0017]本发明涉及一种如上所述的治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病的方法。
[0018]本发明涉及一种如上所述的治疗T细胞介导的超敏反应性疾病的方法。
[0019]本发明涉及一种治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病的方法，其包括向有此需要的人给予有效量的式(I)化合物或其盐
[0020]
【权利要求】
1.一种治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病的方法，其包括向有此需要的人给予有效量的抑制EZH2和/或EZHl的化合物或其药学上可接受的盐。
2.一种治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病的方法，其包括给予有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，
3.权利要求2的方法、其中X和Z选自(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、—NRaRb和-ORa ； Y为H或F ; R1选自(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基； R2为氢、(C1-C8)烷基、三氟甲基、烷氧基或卤素，其中所述(C1-C8)烷基可被一个至两个选自下列的基团所取代:氨基和(C1-C3)烷基氨基；R7为氢、(C1-C3)烷基或烷氧基；R3选自氢、(C1-C8)烷基、氰基、三氟甲基、-NRaRb和卤素； R6选自氢、卤素、氰基、三氟甲基、氨基、(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基、芳基、杂芳基、酰基氨基、(C2-C8)炔基、芳基炔基、杂芳基炔基、-S02Ra、-SO2NRaRb和-NRaSO2Rb; 其中任一(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基、(C2-C8)炔基、芳基炔基、杂芳基炔基基团任选被1、2或3个独立地选自下列的基团所取代^O(C1-C6)烷基(R。)"、-S(C「C6)烷基(Rc) !-2> — (C1-C6)烷基(Rc)1^ (C1-C8)烷基-杂环烷基、(C3-C8)环烷基-杂环烷基、卤素、(C1-C6)烷基、(C3-C8)环烷基、(C5-C8)环烯基、(C1-C6)卤代烷基、氰基、-C0R\ -CO2Ra' -C0NRaR\ -SRa、- S0R\ - SO2Ra、- SO 2NRaRb、硝基、-NRaRb、-NRaC (0)R\ - NRaC (O) NRaRb、-NRaC (O) 0R\ - NRaSO2Rb, - NRaSO2NRaRb、- 0Ra、- OC (0) R\ - OC (0) NRaRb、杂环烷基、芳基、杂芳基、芳基(C1-C4)烷基和杂芳基(C1-C4)烷基； 各个 Rc 独立地为(C「C4)烷基氨基、-NRaS02Rb、-S0Ra、- SO2Ra、-NRaC (O) 0R\ - NRaRb或—CO2Ra ； Ra和Rb各自独立地为氢、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C3-C8)环烷基、(C5-C8)环烯基、(C6-Cltl)双环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基，其中所述(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、环烷基、环烯基、双环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基基团任选被1、2或3个独立地选自下列的基团所取代:卤素、羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基、(C1-C4)烷基氨基、((C1-C4)烷基)((C1-C4)烷基)氨基、-CO2H' - CO2 (C1-C4)烷基、-CONH2' - CONH(C1-C4)烷基、- CON ((C1-C4)烷基)((C1-C4)烷基)、-SO2 (C1-C4)烷基、-SO2NH2' - SO2NH(C1-C4)烷基和-SO2N ((C1-C4)烷基)((C1-C4)烷基)； 或Ra和Rb与它们连接的氮一起表示5-8元饱和或不饱和环、任选地包含选自氧、氮和硫的额外杂原子，其中所述环任选被1、2或3个独立地选自下列的基团所取代:(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、氨基、(C1-C4)烷基氨基、((C1-C4)烷基)((C1-C4)烷基)氨基、羟基、氧代、(C1-C4)烷氧基和(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基，其中所述环任选地稠合至(C3-C8)环烧基、杂环烷基、芳基或杂芳基环； 或Ra和Rb与它们连接的氮一起表示6-至10-元桥连的双环体系，其任选稠合至(C3-C8)环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基环。在该具体亚组A中芳基或杂芳基基团独立地选自呋喃、噻吩、吡咯、囔唑、噻唑、咪唑、吡唑、嚅二唑、噻二唑、三唑、四唑、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并恶唑、苯并噻唑、苯基、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、三嗪、四嗪、喹啉、噌啉、喹唑啉、喹喔啉、和二氮杂萘或如下所示的其它芳基或杂芳基基团:
4.权利要求2的方法，其中X和Z独立地选自(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、-NRaRb和-ORa; Y为H; R1为(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基或杂环烷基； R2为氢、(C1-C3)烷基或卤素，其中所述(C1-C3)烷基可被一个至两个选自下列的基团所取代:氨基和(C1-C3)烷基氨基； R7为氢、(C1-C3)烷基或烷氧基；R3为氢、(C1-C8)烷基或卤素； R6为氢、卤素、氰基、三氟甲基、氨基、(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基、芳基、杂芳基、酰基氨基、(C2-C8)炔基、芳基炔基、杂芳基炔基、-S02Ra、-SO2NRaRb或-NRaSO2Rb; 其中任一(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基、(C2-C8)炔基、芳基炔基、杂芳基炔基基团任选被1、2或3个独立地选自下列的基团所取代滷素、(C1-C6)烷基、(C3-C8)环烷基、(C5-C8)环烯基、(C1-C6)卤代烷基、氰基、—CORa、- CO2Ra' - CONRaRb' - SRa、- SORa、- SO2Ra' - SO2NRaRb'硝基、-NRaRb、-NRaC (O) Rb、- NRaC (O) NRaRb、-NRaC (O) ORa、- NRaSO2Rb、- NRaSO2NRaRb、-0Ra、-OC(O)R\ -OC(O)NRaRb、杂环烷基、芳基、杂芳基、芳基(C1-C4)烷基、和杂芳基(C1-C4)烷基; Ra和Rb各自独立地为氢、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C3-C8)环烷基、(C5-C8)环烯基、(C6-Cltl)双环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基，其中所述(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、环烷基、环烯基、双环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基基团任选被1、2或3个独立地选自下列的基团所取代:卤素、羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基、(C1-C4)烷基氨基、((C1-C4)烷基)((C1-C4)烷基)氨基、-CO2H' - CO2 (C1-C4)烷基、-CONH2' - CONH(C1-C4)烷基、- CON ((C1-C4)烷基)((C1-C4)烷基)、-SO2 (C1-C4)烷基、-SO2NH2' - SO2NH(C1-C4)烷基和-SO2N ((C1-C4)烷基)((C1-C4)烷基)； 或Ra和Rb与它们连接的氮一起表示5-8元饱和或不饱和环，任选地包含选自氧、氮和硫的额外杂原子，其中所述环任选被1、2或3个独立地选自下列的基团所取代:(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、氨基、(C1-C4)烷基氨基、((C1-C4)烷基)((C1-C4)烷基)氨基、羟基、氧代、(C1-C4)烷氧基和(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基，其中所述环任选地稠合至(C3-C8)环烧基、杂环烷基、芳基或杂芳基环； 或Ra和Rb与它们连接的氮一起表示6-至10-元桥连的双环体系，其任选稠合至(C3-C8)环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基环。在该定义中的芳基和杂芳基选自呋喃、噻吩、吡咯、喝唑、噻唑、咪唑、吡唑、喁二唑、噻二唑、三唑、四唑、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并喁挫、苯并噻唑、苯基、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、三嗪、四嗪、喹啉、噌啉、喹唑啉、喹喔啉和二氮杂萘或如下所示的其它芳基或杂芳基基团:
5.权利要求2的方法，其中X为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、苯基、三氟甲基、四氢吡喃、羟基甲基、甲氧基甲基或苄基； Y为H; Z为甲基、乙基、正丙基、异丙基、三氟甲基或苄基； R1为异丙基、叔丁基、环丁基、环戊基、环己基、(1-甲基乙基)环丙基、1，1- 二氧代-四氢噻吩-3-基、1-甲基-哌啶-4-基、四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、N，N- 二甲基-1-丙胺基、苄基或4-吡啶基； R2为氢、(C1-C3)烷基或卤素，其中所述的(C1-C3)烷基可被一个或两个选自下列的基团所取代:氨基和(C1-C3)烷基氨基； R7为氢、(C「C3)烷基或烷氧基；R3为H、甲基或Br ;和 R6为甲基、双(1，1-二甲基乙基)、双(1-甲基乙基)、环丙基、丙基、二甲基氨基、乙基氛基、(2_羟基乙基)氛基、2_丙稀-1-基氛基、1-喊嚷基、1-喊唳基、4_吗琳基、4_喊唳基氨基、四氢-2H-吡喃-4-基氨基、苯基氨基、(苯基甲基)氨基、(4-吡啶基甲基)氨基、[2-(2-吡啶基氨基)乙基]氨基、2-( 二甲基氨基)乙基]氨基、4-吡啶基氨基、4-(氨基羰基)苯基]氣基、3-羟基_3_甲基_1- 丁块_1-基、4_吡淀基乙炔基、苯基乙炔基、2-咲喃基、3-噻吩基；1H-吡唑-4-基、IH-吲唑-5-基、IH-吲唑-6-基、3-甲基-1H-吲唑-5-基、1H-1, 2，3-苯并三唑-5-基、2-氧代-2，3- 二氢-1H-苯并咪唑_5_基、2-氧代-2，3- 二氢-1H-吲哚-5-基、2-氧代-2，3- 二氢-1H-吲哚-6-基、2，I, 3-苯并喝二唑-5-基、2-氨基-6-喹唑啉基、2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5-嘧啶基、2-氨基-5-嘧啶基、7-氧代-1，5，6，7-四氢-1，8- 二氮杂萘-3-基、苯基、2-甲基苯基、2-硝基苯基、2-苯基乙基、3-氛基苯基、4_氛基苯基、4_氣苯基、4_氣苯基、4_(甲基氧基)苯基、3_ (乙酸基氛基)苯基、4-(乙酰基氨基)苯基、4-(氨基羰基)苯基、4-(1Η-吡唑-4-基)苯基、4-(氨基磺酰基)苯基、4-(甲基磺酰基)苯基、4-[( 二甲基氨基)磺酰基]苯基、4-[(甲基氨基)羰基]苯基、4-[(甲基氨基)磺酰基]苯基、4-[(甲基磺酰基)氨基]苯基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-(4-吗啉基)-4-吡啶基、2-氨基-4-吡啶基、5-(甲基氧基)-3-吡啶基、5_(甲基磺酰基)-3_吡啶基、5-[(环丙基磺酰基 )氨基]-6-(甲基氧基)-3-吡啶基、5-[(苯基磺酰基)氨基]-3-吡啶基、6-(4-甲基-1-哌嗪基)-3-吡啶基、6-(4-吗啉基)-3-吡啶基、6-(乙酰基氨基)_3_吡唳基、6-( 二甲基氨基)-3_吡唳基、6-(甲基氧基)-3_吡唳基、6-[(甲基氨基)羰基]-3-吡啶基、6-[(甲基氨基)磺酰基]-3-吡啶基、6-甲基-3-吡啶基、4-吡啶基氧基。
6.上述权利要求中任一项的方法，其中所述T细胞介导的炎性免疫性疾病选自:急性播散性普遍斑秃、贝切特氏病、恰加斯氏病、慢性疲乏综合征、全自主神经失调症、脑脊髓炎、强直性脊柱炎、再生障碍性贫血、化脓性大汗腺炎、自身免疫性肝炎、自身免疫性卵巢炎、脂泻病、克罗恩病、I型糖尿病、巨细胞性动脉炎、古德帕斯彻氏综合征、格雷夫斯病、格-巴二氏综合征、桥本氏病、亨-舍二氏紫癜、川崎氏病、红斑狼疮、镜下结肠炎、镜下多动脉炎、混合性结缔组织病、多发性硬化、重症肌无力、阵挛肌阵挛综合征、视神经炎、奥德甲状腺炎、天疱疮、结节性多动脉炎、多肌痛、赖特综合征、斯耶格伦氏综合征、颞动脉炎、韦格纳氏肉芽肿病、温和体型自身免疫性溶血性贫血、间质性膀胱炎、莱姆病、硬斑病、结节病、硬皮病、溃疡性结肠炎和白癫风。
7.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述T细胞介导的超敏反应性疾病选自:接触性超敏反应、接触性皮炎(包括由毒葛引起的那些)、荨麻疹、皮肤过敏、呼吸系统过敏(花粉热、过敏性鼻炎)和麸质敏感肠病变(脂泻病)。
8.一种治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病的方法，其包括向有此需要的人给予于药学上可接受的组合物中的有效量的抑制EZH2和/或EZHl的化合物或其药学上可接受的盐。
9.一种治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病的方法，其包括向有此需要的人给予于药学上可接受的组合物中的有效量的权利要求2-5中任一项所定义的化合物或其药学上可接受的盐。
10.抑制EZH2和/或EZHl的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病。
11.抑制EZH2和/或EZHl的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗T细胞介导的炎性免疫性疾病或T细胞介导的超敏反应性疾病的药物中的用途。
12.权利要求10或权利要求11的化合物或用途，其中所述T细胞介导的炎性免疫性疾病选自:急性播散性普遍斑秃、贝切特氏病、恰加斯氏病、慢性疲乏综合征、全自主神经失调症、脑脊髓炎、强直性脊柱炎、再生障碍性贫血、化脓性大汗腺炎、自身免疫性肝炎、自身免疫性卵巢炎、脂泻病、克罗恩病、I型糖尿病、巨细胞性动脉炎、古德帕斯彻氏综合征、格雷夫斯病、格-巴二氏综合征、桥本氏病、亨-舍二氏紫癜、川崎氏病、红斑狼疮、镜下结肠炎、镜下多动脉炎、混合性结缔组织病、多发性硬化、重症肌无力、阵挛肌阵挛综合征、视神经炎、奥德甲状腺炎、天疱疮、结节性多动脉炎、多肌痛、赖特综合征、斯耶格伦氏综合征、颞动脉炎、韦格纳氏肉芽肿病、温和体型自身免疫性溶血性贫血、间质性膀胱炎、莱姆病、硬斑病、结节病、硬皮病、溃疡性结肠炎和白癫风。
13.权利要求10或权利要求11的化合物或用途，其中所述T细胞介导的超敏反应性疾病选自:接触性超敏反应、接触性皮炎(包括由毒葛引起的那些)、荨麻疹、皮肤过敏、呼吸系统过敏(花粉热、过敏性鼻炎)和麸质敏感肠病变(脂泻病)。
14.权利要求10-13中任一项的化合物或用途，其中该化合物为权利要求2-5中任一项所定义的化合物。
【文档编号】A61P37/00GK104039956SQ201280066115
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2012年11月2日 优先权日:2011年11月4日
【发明者】A.K.巴锡尔, S.贝因克, R.K.普林杰 申请人:葛兰素史密斯克莱知识产权（第2号）有限公司