专利名称：一种防治肉种鸡脂肪肝出血综合征的中药组方的制作方法
技术领域：
本发明涉及中兽医领域，尤其涉及的是一种防治肉种鸡脂肪肝出血综合征的中药组方。
背景技术：
肉种鸡是专门培育后代的鸡，是和异性一起交配的，主要用来生产种蛋后进行孵化出肉鸡苗。传统的种鸡饲养师通过地面平养或者网架平养的方式，而目前肉种鸡多采用笼养的模式。肉种鸡的笼养，虽然节约垫料，提高了饲养密度，节省了饲料，而且还减少了种鸡生产中最容易发生的疾病感染和传播，但也存在着很多不足之处。由于肉种鸡本身体型大，在笼内饲养活动量少，从而造成体质下降，对疾病的抵抗力减弱，出现鸡只过肥而引起脂肪肝出血综合症。目前发病率通常为鸡群的1%_2%，有的高达5%-7%，甚至15%以上；死亡率一般低于5%，有时高达20%-60%，还能导致肉种鸡群的产蛋量下降，影响产蛋高峰期 的出现，影响种蛋的入孵率，目前己成为许多国家养殖业的常见病。大量研究资料显示，导致肉种鸡肪肝综合征的发生主要因素包括食用高能低蛋白饲料；饲料中脂肪(动物油脂、油渣)含量过多；某些亲脂肪性因子如蛋氨酸、胆碱、生物素、维生素等营养素缺乏；机体内激素失调如血液中儿茶酚胺等水平偏低；鸡舍温过高、饮水不足、光照过少、更换饲料、通风不良、受惊等应激因素；饲料霉败产生的真菌毒素(黄曲霉毒素、红青霉毒素等)也可致肝机能损伤而引起脂肪沉积于肝脏而发病；笼养肉种鸡因采食量大，活动空间缺少，运动不足，能量消耗少更容易发生脂肪过度沉积。其特征病变为肝脏肿大，肝呈黄色油腻状，表面有出血点和白色坏死灶，质脆易碎，用刀切时，在刀的表面有脂滴附着；突然死亡的鸡只肝包膜破裂，表面和腹腔内有血块；皮下、腹腔脏器表面、骨盆腔及输卵管周围均有大量的脂肪。患此病的鸡普遍过肥，体重一般超出正常的25% 30%，产蛋率下降，死亡率增加，高温季节此病尤为明显。目前预防肉种鸡脂肪肝出血综合征的有效方法是严格执行育成期母鸡的限饲程序，以保持适当的标准体重；应注意保证日粮中足够的营养成分，对发病鸡群可在每IOOOkg饲料中添加氯化胆碱500g、蛋氨酸500g、多种维生素50g,连续用IOd ;也可在每吨饲料中添加硫酸铜63g、胆碱550g、维生素B233mg、维生素E 5500IU、蛋氨酸550g，同时将日粮中粗蛋白提高I % _2 %，能量水平适当降低，对发病鸡群有较好的疗效，但养殖户对药物的混合均匀度有困难，同时胆碱剂量控制不好反而影响会引起不良反应。也有学者使用一些中药配方进行预防取得一定的疗效，但使用中药组份多，配方复杂，机理不清，成本高；多采用拌饲料的方式，鸡群吸收困难，起效慢。为有效治疗肉种鸡脂肪肝出血综合征，本试验应用中兽医理论，运用中草药赶黄草、丹参、垂盆草、山楂、虎杖、郁金、甘草合理组方，达到活血化瘀、疏肝解郁、健脾导滞为主，同时辅以清热解毒，利胆化湿、消脂清肝，添加到患病鸡群饮水中，观察其对肉种鸡脂肪肝出血综合征的影响，为该病的诊断和中草药治疗提供理论依据，更好地为肉种鸡生产服务。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足提供一种防治肉种鸡脂肪肝出血综合征的中药组方。本发明的技术方案如下—种防治肉种鸡脂肪肝出血综合征的中药组方，组方为赶黄草900重量份，丹参900重量份、垂盆草800重量份、山楂800重量份、虎杖750重量份、郁金650重量份、甘草500重量份。本发明具有以下有益效果I选用了兽医临床少用的赶黄草、垂盆草、虎杖、郁金等中草药，里面的药物都有较好的的保肝作用，还能抑菌、抗病毒、降血脂、血糖，并采用中兽医理论科学按照君、臣、佐、 使进行组方，目前未见相同组方报道。2使用现代制剂技术，使用现代中药制剂技术乙醇回流法提取药物中的脂溶性成分，并利用水煎法提取水溶性成分，达到有效成分的完全提取制备成口服液，减少了药物的使用剂量。改变了文献报道中使用原药材直接粉碎后拌料的方法，而直接饮水，吸收更快，解决了鸡肠道短，中草药粉吸收困难的特点。3疗效高，对肉种鸡脂肪肝出血综合征的治疗效果明显，优于胆碱，同时纯中药制剂没有耐受性和有害物残留。
具体实施例方式以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。I试验材料与方法1.1试验药物中药赶黄草900g购自古蔺赶黄草合作社，丹参900g、垂盆草800g、山楂800g、虎杖750g、郁金650g、甘草500g购自雅安惠民堂药店，经鉴定为正品药材后分别60目粉碎，
装袋备用。取以上7 B未，其中赶黄草加6倍量(ml/g，下同)65% (V/V)乙醇回流提取2次，每次1. 5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至无乙醇味备用；丹参加入6倍量的70% (V/V)乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至无乙醇味；山楂、虎杖加入6倍量的80% (V/V)乙醇回流提取2次，每次1. 5小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至无乙醇味；其余垂盆草、郁金、甘草，与乙醇提取后的赶黄草、丹参、山楂、虎杖药渣加6倍量水煎煮2次，每次1. 5小时，合并煎液，并加入上述赶黄草、丹参、山楂、虎杖提取物，力口水稀释至大约5300mL，相当于每mL药液含有生药lg，搅拌溶解，静置12小时，用747滤布过滤2次即得(命名为黄丹保肝汤)。1. 2试验动物选择四川农业大学家禽育种场中疑似鸡脂肪肝出血综合征自然发病的产蛋肉种鸡，不少于700只。1. 3器材和仪器电子天平；高速冷冻台式离心机；低温冰箱；光学显微镜；照相机；烘箱。1. 4试验方法
1. 4.1病例的诊断和纳入标准根据鸡群的品种、饲料营养、发病年龄、鸡群状况及临床症状进行综合分析做出初步诊断。再结合剖检病理变化、血清指标检测、肝脏系数、肝脂率、腹脂率、实验室诊断结果及其它病例的排除来确诊为鸡脂肪肝出血综合症。当鸡群中脂肪肝出血综合征发病率达到5%，则判定该鸡群得了脂肪肝出血综合征。临床症状患病鸡过于肥胖，有的超过正常体重的25%，产蛋量减少，产蛋率下降，通常由75%-85%降低到35%-55%，在下腹部可以摸到厚实的脂肪组织。鸡往往突然发病，病鸡精神沉郁，食欲减少，肉髯、鸡冠褪色乃至苍白，喜卧，不愿走动，腹部柔软下垂。严重的嗜目民、瘫痪，体温到达41. 5-42. 8 0C，进而鸡冠、肉髯及脚变冷，可在数小时内死亡。
病理变化剖检病死鸡只，主要表现为腹腔内脂肪大量沉积，特别是腹部，以及肌胃和腺胃的外周都有一层厚厚的脂肪存在。除此之外，心脏、肠系膜等处也有多量的脂肪分布。肝脏明显肿大，呈浅褐色至黄色，质脆易碎并有油腻感，肝脏表面常有出血斑点，且周围有大量的血凝块。有的肝脏破裂，肝表面和体腔中有大的出血块或血凝块。胆囊肿大或缩小，囊壁因脂肪沉积而变厚。脾脏质软，一般不见肿大。肌胃由于被沉积的脂肪包裹，其容积仅为正常的1/2-1/3，肌胃内容物少，鸡内金薄且易剥离，肌层变薄。肾脏稍肿大，质脆。部分病例在输卵管内还有一枚正常形成的硬壳蛋。生理生化指标血清指标检测、肝脏系数、肝脂率、腹脂率的初步测定与正常种鸡相比较，差异应均显著。肝脏触片镜检取病鸡肝脏触片镜检，可见肝细胞内充满脂肪空泡，胞浆内有大量的脂肪沉积及大小不等的出血；有的可见局部肝细胞坏死，脂肪弥漫分布整个肝小叶，使肝小叶失去正常的结构，与一般的脂肪组织相似。1.4.2试验分组将确诊患有鸡脂肪肝出血综合征的蛋鸡672只，随机平均分成3组，每组4个重复，每个重复各56只。第I组为发病对照组，第2组为阳性药物对照组，氯化胆碱按lg/kg饲料的剂量给药；第3组为黄丹保肝汤组，按O. 3mL/L的浓度进行集中饮水，每天I次；两试验组先观察I周，再连续给药治疗21天后都停药，整个试验周期为4周。1. 5 一般性观察试验期4周，观察鸡群状况，采食、饮水。1. 6检测指标试验期4周，试验开始前I周和试验结束时各称重I次(空腹12h)，记录每组鸡的平均体重，每日的产蛋率、入孵率、死亡率，结束后的治愈率，并进行I次血清指标检测，测定肝脏系数、肝脂率、腹脂率。1. 6.1样品采集每次每个重复随机抽取3只鸡进行下述处理称量每只鸡体重，翅静脉采血(采血前12h禁食)，制备血清。采血后剖杀，观察并记录各组鸡只内脏组织的肉眼变化，剖腹完整剪下肝脏，称取肝脏重量；剥离腹脂(腹部脂肪及肌胃周围脂肪)，对腹脂进行称重。1. 6. 2样品测定测定肝脏系数剖杀鸡只后，将肝脏完整的取出，计算肝脏系数。肝脏系数=肝重量(g)/体重(g) X100。
血清生化指标的测定用一次性注射器空腹翅静脉采血2 5ml于离心管，在室温下倾斜放置30min, 3500r/min离心IOmin,血清放在_20°C保存。按照诊断试验盒的说明测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量。肝脂率的测定(I)将低温下保存的肝脏于常温下解冻。(2)将肝脏放入105°C的烘箱中烘至恒重；同时将脱脂滤纸在105°C烘箱中烘至恒重，用电子天平称出其重量(绝干滤纸重)。(3)将样品从烘箱中取出磨碎后，取2g包在滤纸中，标记好，再次放入烘箱中烘至恒重，在电子天平上称出各滤纸包的准确重量(脱脂前样包重)。(4)将滤纸包放入干燥器中冷却至室温，用长镊子将滤纸包放入索氏提取器抽提筒中，注入一次虹吸量的1. 67倍的无水乙醚，使样品包完全浸没在乙醚中。连接好抽提器 各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调节水温在70°C 80°C之间，使冷凝下滴的乙醚成连珠状(120 150滴/min或回流7次/h以上)，抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止(约需6 12h)。(5)抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，在通风处使乙醚挥发。提取瓶中的乙醚另行回收。待乙醚挥发之后，将滤纸包置于105°C烘箱中干燥2h，放入干燥器冷却至恒重为止，最后进行称重(脱脂后样包重)。(6)计算肝脂率肝脂率(%)=(脱脂前样包重一脱脂后样包重)(g)/(脱脂前样包重一绝干滤纸重)(g)X100。腹脂率的测定将放有大平皿的电子天平进行调零；将宰杀称重后的鸡从腹部进行开膛，先剥离腹部脂肪，再将肌胃周围的脂肪剥离出来，放于大平皿中；称出并计录腹脂重，计算腹脂率。腹脂重=腹部脂肪重+肌胃周围的脂肪重；腹脂率(%) =腹脂重(g)/活体重(g)X100。1. 7试验数据的统计处理试验数据均按统计学要求，用SPSS软件进行统计分析，所有数据以平均值X土标准差(SD)表示，用方差分析进行差异显著性检验。2结果与分析2.1病例的选择选自四川农业大学家禽育种场350日龄肉种鸡，产蛋率由早期的75%下降到目前的43%，病鸡精神沉郁，食欲减少，肉髯、鸡冠褪色乃至苍白，喜卧，不愿走动，腹部柔软下垂。经解剖后发现腹腔内脂肪大量沉积，特别是腹部，以及肌胃和腺胃的外周都有一层厚厚的脂肪存在。除此之外，心脏、肠系膜等处也有多量的脂肪分布。肝脏明显肿大，呈浅褐色至黄色，质脆易碎并有油腻感，肝脏表面常有出血斑点，且周围有大量的血凝块。有的肝脏破裂，肝表面和体腔中有大的出血块或血凝块。胆囊肿大或缩小，囊壁因脂肪沉积而变厚。脾脏质软，一般不见肿大。肌胃由于被沉积的脂肪包裹，其容积仅为正常的1/2 1/3，肌胃内容物少，鸡内金薄且易剥离，肌层变薄。肾脏稍肿大，质脆。血清指标检测、肝脏系数、肝脂率、腹脂率与正常种鸡相比较，差异应均显著；取病鸡肝脏触片镜检，可见肝细胞内充满脂肪空泡，胞浆内有大量的脂肪沉积。初步判定该鸡群患上脂肪肝出血综合征，可以作为试验动物。
2. 2 一般观察试验前各组主要表现为食欲下降，站立不稳，喜卧，腹大柔软下垂，严重者嗜睡，瘫痪，单侧卧地，体温升至42°C ;少数病例鸡冠、肉髯苍白，偶见鸡冠增大。试验结束时，对照组仍然保持虚弱状态，无好转；胆碱组和黄丹保肝汤组在用药10天以后死亡率逐渐减少，鸡冠开始变红，试验结束时鸡群基本恢复正常的饮水采食，产蛋率和入孵率有一定的上升。2. 3生产性能情况从表I可以看出，试验前各组各项指标无显著差异(P > O. 05)。3周结束时,从表2看出，对照组分别比胆碱组、黄丹保肝汤组体重增加13. 88%、13. 25%差异极显著(P< O. 01)。产蛋率比较对照组分别胆碱组和黄丹保肝汤组降低46. 70%、67. 11%差异极显著(P <0.01);胆碱组比黄丹保肝汤组降低13. 91%差异显著(P < O. 05)。入孵率比较，对照组分别胆碱组和黄丹保肝汤组降低32. 84%,38. 92%差异极显著(P < O. 01)。死亡率比较， 对照组分别胆碱组和黄丹保肝汤组增加48. 99%,68. 59%差异极显著(P < O. 01);胆碱组比黄丹保肝汤组增加38. 42%差异极显著(P < O. 01)。治愈率比较，对照组分别胆碱组和黄丹保肝汤组降低79. 64%,98. 05%差异极显著(P < O. 01)。通过用药后，胆碱组和黄丹保肝汤组鸡群逐渐恢复，体重趋于正常，产蛋率、入孵率上升，死亡率降低，治愈率较高病情得到有效控制，而对照组生产成绩继续下降，表现为体重增加，产蛋率、入孵率下降，死亡率上升。表I给药前I周内鸡群情况
权利要求
1.一种防治肉种鸡脂肪肝出血综合征的中药组方，其特征在于，组方为赶黄草900重量份，丹参900重量份、垂盆草800重量份、山楂800重量份、虎杖750重量份、郁金650重量份、甘草500重量份。
全文摘要
本发明公开了一种防治肉种鸡脂肪肝出血综合征的中药组方，组方为赶黄草900重量份，丹参900重量份、垂盆草800重量份、山楂800重量份、虎杖750重量份、郁金650重量份、甘草500重量份。疗效较好，对肉种鸡脂肪肝出血综合征的治疗效果明显，优于胆碱，同时纯中药制剂没有耐受性和有害物残留。
文档编号A61K36/9066GK103007208SQ201310018500
公开日2013年4月3日 申请日期2013年1月18日 优先权日2013年1月18日
发明者舒刚, 赵小玲, 汪开毓, 林居纯, 符华林, 吕程, 张伟, 贺常亮, 范巧佳, 李英伦, 殷中琼, 杨志勤, 朱庆, 古小云, 张露 申请人:四川农业大学