一种核桃蛋白肽及其制备方法和其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种核桃蛋白肽及其制备方法与应用。该核桃蛋白肽是按照包括下述步骤的方法制备得到的：采用芳香水果植物复合蛋白酶对核桃分离蛋白进行酶解反应，得到所述核桃蛋白肽。其相对分子质量主要在0～1000Da之间，均由2～9个氨基酸组成。本发明所提供的核桃蛋白肽风味独特、含肽率高、分子量小、肽链短、无需脱苦、具有极强的活性和多样性，可作为医药原料以及食品添加剂用于制备降血压、抗氧化、增强记忆力、提高脑神经灵敏度的产品，如药品、保健品、食品等。本发明制备核桃蛋白肽的方法工艺简易、投资少、见效快、回报率高、无环境污染、是一种低碳高效，适宜于工业化生产的项目。
【专利说明】一种核桃蛋白肽及其制备方法和其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于生物【技术领域】，具体涉及一种核桃蛋白肽及其制备方法和其应用。
【背景技术】
[0002]核桃为胡桃科胡桃属植物，是世界四大干果之一。核桃油中饱和脂肪酸总量一般小于10%，不饱和脂肪酸含量丰富，主要有油酸、亚油酸和亚麻酸，总量约90%。
[0003]核桃仁中蛋白的含量约为15%，其中含8种人体必需氨基酸，且含量合理，接近联合国粮农组织（FAO)和世界卫生组织（WHO)规定的标准，是一种很好的木本植物蛋白。核桃制油剩余的核桃柏多被用作动物饲料原料，造成资源浪费。因此对核桃进行深加工，通过提取核桃蛋白对其进行再利用，既可提高核桃加工的附加值，又可以充分利用核桃蛋白资源。
【发明内容】
[0004]本发明的一个目的是提供一种核桃蛋白肽及其制备方法和其应用。
[0005]本发明提供的一种制备核桃蛋白肽的方法，包括下述步骤：采用芳香水果植物复合蛋白酶对核桃分离蛋白进行酶解反应，得到所述核桃蛋白肽；所述芳香水果植物复合蛋白酶是由无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶按照酶活单位iu ：1U ：4U的比例混合而成。
[0006]所述方法中，所述核桃分离蛋白的制备过程包括：将核桃仁经液压搾油机压搾后得到核桃柏加入水中，每30ml水中加入Ig核桃柏，用氢氧化钠调节pH8. 5，50°C的条件下，对核桃柏利用超声波提取60min，然后用冰醋酸调节pH值，在pH4. 5条件进行酸沉淀，过滤后所得固体物质即为核桃分离蛋白。`
[0007]所述方法中，所述核桃柏的制备过程包括：利用去壳工具去掉核桃外壳后，得到核桃仁；然后将核桃仁倒入烘干池，用热风炉将核桃仁升温到40°C并使其受热均匀，烘干3h ；最后将经过预处理的核桃仁放入网状过滤袋，然后将过滤袋装入液压搾油机开始压搾去油后，所得固体物质为核桃柏。
[0008]所述方法中，所述酶解反应的反应温度为60°C，反应时间为90分钟，pH值为
7.5—8. O ο
[0009]所述方法中，所述酶解反应的反应体系中，核桃分离蛋白与水的质量份数比为I :15 ;酶解每克核桃分离蛋白所需芳香水果植物复合蛋白酶8000U。
[0010]所述方法还包括下述步骤：在酶解反应结束后，对酶解液进行冷藏沉降处理，过滤，收集滤液；所述冷藏沉降的温度为-4°C，时间为24小时。
[0011]所述方法还包括将所述滤液进行酶灭活处理的步骤；所述酶灭活的条件为：温度100。。，时间20分钟。
[0012]所述方法制备得到的核桃蛋白肽也属于本发明保护的范围。
[0013]所述方法制备得到的核桃蛋白肽在下述至少一种中的用途：
[0014]( I)制备降血压的广品中的应用；[0015](2)制备抗氧化的产品中的应用；
[0016](3)制备增强记忆力和/或提高脑神经灵敏度产品中的应用。
[0017]所述应用中，所述产品可为药品、保健品或食品。
[0018]本发明的再一个目的是提供一种具有下述任一用途的产品，其活性成分为所述方法制备得到的核桃蛋白肽：
[0019](I)降血压；
[0020](2)抗氧化；
[0021](3)增强记忆力和/或提高脑神经灵敏度。
[0022]以核桃蛋白肽为活性成分制备的降血压、抗氧化、增强记忆力、提高脑神经灵敏度的药物或保健品，需要的时候，在上述药物或保健品中还可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
[0023]所述降血压、抗氧化、增强记忆力、提高脑神经灵敏度的药物可以制成口服液、片剂、冲剂、胶囊(包括软、硬胶囊)、喷剂以及包衣丸剂等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
[0024]本发明所提供的核桃蛋白肽风味独特、含肽率高、分子量小、肽链短、无需脱苦、具有极强的活性和多样性，可作 为医药原料以及食品添加剂用于制备降血压、抗氧化、增强记忆力、提高脑神经灵敏度的产品，如 药品、保健品、食品等。
[0025]本发明制备核桃蛋 白肽的方法工艺简易、投资少、见效快、回报率高、无环境污染、是一种低碳高效，适宜于工业化生产的项目。
【具体实施方式】
[0026]下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0027]下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0028]实施例I、核桃蛋白肽的制备
[0029](一）核桃分离蛋白的制备
[0030]I、核桃制油剩余的核桃柏的获得：利用去壳工具去掉核桃外壳后，得到核桃仁；然后将核桃仁倒入烘干池，用热风炉将核桃仁升温到40°C并使其受热均匀，烘干3h ;最后将经过预处理的核桃仁放入网状过滤袋，然后将过滤袋装入液压搾油机开始压搾去油后，所得固体物质为核桃柏。
[0031]2、从核桃制油剩余的核桃柏中提取蛋白：将榨油后的核桃柏加入水中，每30ml水中加入Ig核桃柏，用氢氧化钠调节pH8. 5，50°C的条件下，对核桃柏利用超声波提取60min，然后用冰醋酸调节pH值，在pH4. 5条件进行酸沉淀，过滤后所得固体物质即为核桃分离蛋白。
[0032](二）芳香水果植物复合蛋白酶的配制
[0033]将无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶按照IU ：1U ：4U的比例混合即得芳香水果植物复合蛋白酶。
[0034](三）核桃蛋白肽的制备
[0035]将上述制备的核桃分离蛋白投入酶解罐中，向酶解罐内加入相当于所述核桃分离蛋白质量的15倍的水，按酶解每克核桃分离蛋白需要芳香水果植物复合蛋白酶8000U的量加入复合蛋白酶；搅拌混匀后加热至60°C对核桃分离蛋白酶解90min，酶解过程保持pH值在7. 5-8. O，用冰醋酸调节反应液的pH值；酶解结束后，还需对酶解液进行酶灭活处理，所述酶灭活的条件为温度100°C，时间为20分钟。之后在-4°C条件下冷藏沉降处理24小时，待其杂质基本沉淀，取上清液，再用板框过滤后即得核桃蛋白
[0036]实施例2、核桃蛋白肽的分子量分布检测
[0037]核桃蛋白肽的分子量分布的测定方法采用高效凝胶过滤色谱法，测试结果表明本发明提供的核桃蛋白肽的相对分子质量主要集中在O-1000Da的小分子肽与氨基酸混合物，小肽含量为65%以上。
[0038]对比例1-3、核桃蛋白肽的制备
[0039]按照表1所述的酶反应条件，按实施例I所述方法，进行核桃蛋白肽的制备。
[0040]表1
[0041]
【权利要求】
1.一种制备核桃蛋白肽的方法，包括下述步骤：采用芳香水果植物复合蛋白酶对核桃分离蛋白进行酶解反应，得到所述核桃蛋白肽；所述芳香水果植物复合蛋白酶是由无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶按照酶活单位iu ：1U ：4U的比例混合而成。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述核桃分离蛋白的制备过程包括，将核桃仁经液压搾油机压搾后得到核桃柏加入水中，每30ml水中加入Ig核桃柏，用氢氧化钠调节pH8. 5，50°C的条件下，对核桃柏利用超声波提取60min，然后用冰醋酸调节pH值，在PH4. 5条件进行酸沉淀，过滤后所得固体物质即为核桃分离蛋白。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述酶解反应的反应温度为60°C，反应时间为90分钟，pH值为7. 5-8. O。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其特征在于：所述酶解反应的反应体系中，核桃分离蛋白与水的质量份数比为I :15 ;酶解每克核桃分离蛋白所需芳香水果植物复合蛋白酶8000U。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其特征在于：所述方法还包括下述步骤：在酶解反应结束后，对酶解液进行冷藏沉降处理，过滤，收集滤液；所述冷藏沉降的温度为_4°C，时间为24小时。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法还包括将所述滤液进行酶灭活处理的步骤；所述酶灭活的条件为：温度100°c，时间20分钟。
7.权利要求1-6中任意一项所述方法制备得到的核桃蛋白肽。
8.权利要求7所述的核桃蛋白肽在下述至少一种中的用途： (1)制备降血压的产品中的应用； (2)制备抗氧化的产品中的应用； (3)制备增强记忆力和/或提高脑神经灵敏度产品中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述产品可为药品、保健品或食品。
10.一种具有下述任一用途的产品，其活性成分为权利要求7所述的核桃蛋白肽： (1)降血压； (2)抗氧化； (3)增强记忆力和/或提高脑神经灵敏度。
【文档编号】A61P25/00GK103484518SQ201310412884
【公开日】2014年1月1日 申请日期:2013年9月11日 优先权日:2013年9月11日
【发明者】邹远东 申请人:邹远东