用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂，其原料药包括黄芪、白头翁、仙鹤草、墨旱莲、淫羊藿、蓝布正、黄连、元宝草、南沙参、五倍子、山柰、刺五加、大蒜、肉豆蔻、莱菔子、鸦胆子、知母、女贞子、山楂、地桃花、黄精、含羞草、党参、九里香、枸杞子、紫苏子和鱼腥草。该中药免疫制剂在预防鸡传染性法氏囊方面具有显著的效果，且具有无毒，耐药、无药物残留的优势。
【专利说明】用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂
【技术领域】
[0001]本发明涉及中医药【技术领域】，尤其涉及一种用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂。
【背景技术】
[0002]鸡传染性法氏囊病(IBDV)又称鸡传染性腔上囊病，是由传染性法氏囊病毒引起的一种急性、接触性、免疫抑制性疾病，以法氏囊发炎、坏死、萎缩和法氏囊内淋巴细胞严重受损为特征，临床表现为精神不振、厌食、间接性腹泻、震颤和重度虚弱。具有很强的致病性和较高的死亡率。通常情况下致病率为40~60%，死亡率一般为8~25%。 [0003]本病主要侵害鸡的体液免疫中枢器官法氏囊等淋巴组织，由于免疫抑制引起继发和并发其他疾病，致使死亡率明显升高，给养鸡业带来严重灾害，被称为“鸡的艾滋病”，是目前养禽业最主要的疾病之一。
[0004]本病潜伏期为2~3d，发病时有部分病例表现为没有任何症状突然采食量增加，第二天急剧下降，鸡群内突然出现精神不好的鸡，并很快蔓延至全群；病鸡精神萎顿、畏寒虚弱、羽毛蓬乱、缩头闭目、两翅下垂、蹲伏在地上、走路不稳、采食量减少、饮水增多、有些自啄肛门，排米汤样或蛋清样粪便，重者脱水、卧地不起、极度虚弱，最后死亡。死亡多发生在病后3~4d左右，呈现典型的“尖峰式死亡”。耐过雏鸡贫血消瘦，生长缓慢。
[0005]鸡传染性法氏囊病病毒主要侵害鸡的免疫器官，导致免疫抑制，使病鸡更易感染其他致病因子，因而治疗的关键是改善鸡的免疫功能。
[0006]防治鸡传染性法氏囊所使用的鸡传染性法氏囊疫苗主要是国产和进口的鸡传染性法氏囊弱毒苗或油苗，长期使用免疫效果不理想，许多地区在使用鸡传染性法氏囊商品疫苗免疫后常有鸡传染性法氏囊暴发流行，且发病率和死亡率有增无减,为此,寻求一种毒性低、无耐药性，在畜产品中无残留的新的替代物或辅助物势在必行。
[0007]祖国的传统兽医学博大精深，治病注重整体且标本兼治，用中药预防该病有独特的疗效。本病隶属中兽医“瘟疫”的范畴。其病因病机是热毒侵袭，而呈现表里俱热，或热毒蔓延脏腑导致的三阴危候，该病是由温热之邪直入气分迫转血分引起气血两播，血热炽盛，热毒传变所致。天然中草药防治该病的基本原理是扶正祛邪，即保证健康的生理功能和消除致病因素来增强抗病能力，治病机理可归纳为直接抗病毒作用和对鸡的免疫功能调节两方面。本发明就是再此基础上提出的一种用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂，其具有良好的治疗效果。
【发明内容】
[0008]本发明所要解决的技术问题是提供一种用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂，其在预防鸡传染性法氏囊方面具有显著的效果，且具有无毒，耐药、无药物残留的优势。
[0009]为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂，其原料药包括黄芪、白头翁、仙鹤草、墨旱莲、淫羊藿、蓝布正、黄连、元宝草、南沙参、五倍子、山柰、刺五加、大蒜、肉豆蘧、莱菔子、鸦胆子、知母、女贞子、山楂、地桃花、黄精、含羞草、党参、九里香、枸杞子、紫苏子和鱼腥草。
[0010]其中，所述中药免疫制剂中各原料药的重量份分别为:
[0011]黄苗75重量份~85重量份、白头翁35重量份~45重量份、仙鹤草25重量份~35重量份、墨旱莲40重量份~50重量份、淫羊藿25重量份~35重量份、蓝布正45重量份~55重量份、黄连55重量份~65重量份、元宝草30重量份~40重量份、南沙参45重量份~55重量份、五倍子40重量份~50重量份、山柰25重量份~35重量份、刺五加30重量份~40重量份、大蒜15重量份~25重量份、肉丑蘧30重量份~40重量份、莱菔子20重量份~30重量份、鸦胆子25重量份~35重量份、知母40重量份~50重量份、女贞子45重量份~55重量份、山楂30重量份~40重量份、地桃花25重量份~35重量份、黄精45重量份~55重量份、含羞草30重量份~40重量份、党参45重量份~55重量份、九里香20重量份~30重量份、枸杞子35重量份~45重量份、紫苏子20重量份~30重量份和鱼渥草25重量份~35重量份。
[0012]其中，所述中药免疫制剂中各原料药的重量份分别为黄芪78重量份~82重量份、白头翁38重量份~42重量份、仙鹤草28重量份~32重量份、墨旱莲43重量份~47重量份、淫羊藿28重量份~32重量份、蓝布正48重量份~52重量份、黄连58重量份~62重量份、兀宝草33重量份~37重量份、南沙参48重量份~52重量份、五倍子43重量份~47重量份、山柰28重量份~32重量份、刺五加33重量份~37重量份、大蒜18重量份~22重量份、肉丑蘧33重量份~37重量份、莱菔子23重量份~27重量份、鸦胆子28重量份~32重量份、知母43重量份~47重量份、女贞子48重量份~52重量份、山楂33重量份~37重量份、地桃花28重量份~32重量份、黄精48重量份~52重量份、含羞草33重量份~37重量份、党参48重量份~52重量份、九里香23重量份~27重量份、枸杞子38重量份~42重量份、紫苏子23重量份~27重量份和鱼腥草28重量份~32重量份。
[0013]其中，所述中药免疫制剂中各原料药的重量份分别为黄芪80重量份、白头翁40重量份、仙鹤草30重量份、墨旱莲45重量份、淫羊藿30重量份、蓝布正50重量份、黄连60重量份、元宝草35重量份、南沙参50重量份、五倍子45重量份、山柰30重量份、刺五加35重量份、大蒜20重量份、肉豆蘧35重量份、莱菔子25重量份、鸦胆子30重量份、知母45重量份、女贞子50重量份、山楂35重量份、地桃花30重量份、黄精50重量份、含羞草35重量份、党参50重量份、九里香25重量份、枸杞子40重量份、紫苏子25重量份和鱼腥草30重量份。
[0014]本发明还提供了上述中药免疫制剂的制备方法，具体为:
[0015]第一步，将黄芪、墨旱莲、淫羊藿、蓝布正、南沙参、五倍子、刺五加、女贞子、黄精、党参和枸杞子按比例混合，取混合物100g装入渗漉筒中，加入50°C~55°C的白酒600g~800g，在25°C~35°C的条件下浸泡20小时~30小时，调节渗漉筒阀门，使白酒药液慢慢滴出，滴出速度为每分钟2~4mL，收集滴出液，得700mL~IL的渗漉液，浓缩，除去白酒，干燥，粉碎，获得第一干燥粉末；
[0016]第二步，将佘下组分按比例混合，取100g混合物，加入500g~800g的水，煮沸3~4小时，过滤，获得第一滤液，滤渣再次加入200g~300g的水，再次煮沸I~2小时，过滤，获得第二滤液，将第一滤液和第二滤液混合，浓缩，除去水，干燥，粉碎，获得第二干燥粉末；[0017]第三步，将第一干燥粉末和第二干燥粉末混合，获得中药免疫制剂散剂。
[0018]本发明还提供了一种鸡饲料，其原料包括玉米、豆柏、食盐、鱼粉、骨粉、微量元素添加剂、氨基酸添加剂、维生素添加剂和用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂散剂饲料添加剂。
[0019]其中，所述饲料中，各原料成分的重量份分别为玉米90重量份~110重量份、豆柏30重量份~50重量份、食盐2重量份~4重量份、鱼粉8重量份~12重量份、骨粉3重量份~5重量份、微量元素添加剂2重量份~4重量份、氨基酸添加剂2重量份~4重量份、维生素添加剂2重量份~4重量份和中药免疫制剂散剂饲料添加剂15重量份~20重量份。
[0020]其中，所述饲料中，各原料成分的重量份分别为玉米100重量份、豆柏40重量份、食盐3重量份、鱼粉10重量份、骨粉4重量份、微量元素添加剂3重量份、氨基酸添加剂3重量份、维生素添加剂3重量份和中药免疫制剂散剂饲料添加剂18重量份。
[0021]本发明还提供了上述饲料的制备方法，具体为:
[0022]第一步，按照上述方法制备所述中药免疫制剂散剂饲料添加剂；
[0023]第二步，将饲料原料中其他原料组分与第一步获得的所述中药免疫制剂散剂饲料添加剂一起放入饲料搅拌机中，连续均匀搅拌I~3小时后，放入粉碎机中进行粉碎，获得饲料。
[0024]本发明的有 益效果:
[0025]本发明提供的中药免疫制剂在预防鸡传染性法氏囊方面具有显著的效果，且具有无毒，耐药、无药物残留的优势。
【具体实施方式】
[0026]本发明提供了一种用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂，其原料药包括黄芪、白头翁、仙鹤草、墨旱莲、淫羊藿、蓝布正、黄连、元宝草、南沙参、五倍子、山柰、刺五加、大蒜、肉豆蘧、莱菔子、鸦胆子、知母、女贞子、山楂、地桃花、黄精、含羞草、党参、九里香、枸杞子、紫苏子和鱼腥草。
[0027]进一步,所述中药免疫制剂仅由上述原料药构成。
[0028]方中，黄芪、蓝布正能显著提高机体的细胞免疫和体液免疫能力，改善和调整机体的免疫功能，有效地抑制传染性法氏囊病毒感染鸡胚成纤维细胞，白头翁、仙鹤草具有清热解毒且能提高巨噬细胞吞噬能力，墨旱莲具有清热滋阴且有强心止血作用，淫羊藿能明显提高脾脏抗体生成水平，增强T淋巴细胞的功能，促进B淋巴细胞的增生和转化，提高免疫功能，黄连能抗炎、抗变态反应，并且有很广的抗菌谱，对多种病菌以及流感病毒有较强作用，元宝草凉血解毒，活血调经，南沙参可提高细胞免疫和非特异性免疫力，抑制体液免疫，具有调节免疫平衡的功能，五倍子收敛固涩、益气生津，刺五加益气健脾，补肾安神，大蒜、山柰温中消食，行气暖胃，肉豆蘧、莱菔子温中涩肠、行气消食，鸦胆子清热解毒，知母滋阴润燥、清肺止咳，女贞子能提升白细胞，增强免疫功能的功效，山楂消食健胃，地桃花祛风利湿，清热解毒，黄精养气养阴，健脾润肺，含羞草凉血解毒，清热利湿，党参补气益脾，养血生津，九里香行气止痛，活血散瘀，枸杞子补益肝肾，养血补血，紫苏子降气消痰、止咳平喘，提高机体免疫力，鱼腥草清热解毒，排脓消痈，诸药合用，共奏补气滋阴、清热解毒、活血祛瘀之功，能够调节机体的免疫力，通过清热清热解毒作用与对正气虚弱的补助、扶持、促进等作用，能够激活、促进、上调活力低下的细胞因子，以调整分子生物学功能，具有增强动物机体免疫力的功效。
[0029]各原料药的药理如下:
[0030]黄芪:味甘，性温，入脾、肺经，有补益脾土，升举阳气、固表止汗，托疮生肌等作用，主要用于脾肺气虚所致之乏力食少便溏，心悸气短，中气下陷之脏器下垂，气不摄血之崩漏便血，久泻脱肛；表虚不固之自汗盗汗，气血不足等证。黄芪可增加细胞免疫和体液免疫功能，增加血浆中的IgM、IgA，对免疫功能有双向调节的作用。
[0031]白头翁:味苦、性寒，入胃、大肠经，具有清热解毒，凉血止痢的作用，主要用于胃肠有湿热积滞之发热腹痛、下痢脓血，里急后重等证；对大肠血热之热痢下血效果更好，对痢疾杆菌、伤寒杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、黄金色葡萄球菌有抑制作用。
[0032]仙鹤草:拉丁名Agrimoniae Herba,味苦、潘,性平，归心、肝经,具有收敛止血,止痢杀虫的功效,主治各种出血之证,例如:吐血、尿血、便血、崩漏、咯血、衄血，赤白痢疾,劳伤脱力，痈肿，跌打，创伤出血等证
[0033]墨旱莲:又名旱莲草、墨草、水旱莲，味甘、酸，性寒，归肝、肾经，起到补益肝肾，凉血止血的作用，用于肝肾阴虚所致头晕目眩、视物昏花，腰膝酸软；适宜于阴虚有热者，用于治疗胃中积热之吐血，热伤肺络之咳血等症状，墨旱莲对金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、宋氏痢疾杆菌、绿脓杆菌有抑制作用，能明显增强非特异性免疫和细胞免疫功能。
[0034]淫羊藿:拉丁名Epimedii Folium，味辛、甘，性温，入肝、肾经，具有补肾阳，强筋骨，祛风湿的功效，主治肾虚阳痿、遗精早泄、腰膝痿软、肢冷畏寒；寒湿痹痛或四肢拘挛麻木等证，淫羊藿为传统的补肾壮阳中药，富含黄酮类化合物，具有性激素样作用，直接抑制骨吸收和促进骨形成，使机体代谢处于骨形成大于骨吸收的正平衡状态。
[0035]蓝布正:拉丁名Gei Herba，味辛、苦，性平，归肝、脾、肺经，具有镇痛，降压，调经，祛风除湿的功效，主治高血压病，头晕头痛，月经不调，小腹痛，白带，小儿惊风，风湿腰腿痛；外用治痈疖肿毒，跌打损伤等证。
[0036]黄连:味苦，性寒，入心、肺、胆、胃、大肠经，有清热燥湿，泻火解毒，凉血明目的作用，常用于治疗泻心经之火，心火旺之心烦不眠，及温热病之壮热神昏、心烦、口渴等证。
[0037]元宝草:味苦，辛，性寒，归肝、脾经，具有凉血解毒，活血调经，祛风通络的功效，主治各种出血，肠炎痢疾，乳痈，痈肿疔毒，烫伤，蛇咬伤，月经不调，痛经，白带，跌打损伤，风湿痹痛，口疮等证。
[0038]南沙参:味甘、微苦，性微寒，入肺、胃经，有润肺止咳，养胃生津的作用，主要用于阴虚肺燥、干咳少痰、劳嗽痰血，胃阴不足、口感咽燥、大便秘结、舌红少苔等证，可提高细胞免疫和非特异性免疫力，抑制体液免疫，具有调节免疫平衡的功能。
[0039]五倍子:拉丁名Galla Chinensis,味酸,潘,性寒，归肺、大肠、肾经,具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效，主治:肺虚久咳；自汗盗汗；久痢久泻；脱肛；遗精；白浊；各种出血；痈肿疮疖等证，五倍子能增强机体对非特异性刺激的防御能力，能增强细胞的免疫功能，对这种致病菌有抑制作用，并能够抗病毒生长。
[0040]山柰:味辛、性温，归胃经，具有行气温中，消食止痛的功效，主治胸膈胀满，脘腹冷痛，饮食不消等证。
[0041]刺五加:拉丁名 Acanthopanacis Senticosi Radix et Rhizoma seu Caulis,味辛、苦、微甘，性温，入脾、肾、心经，具有益气健脾，补肾安神，祛风除湿的功效，用于风寒湿痹、腰膝疼痛、筋骨痿软、行动迟缓、体虚羸弱、跌打损伤、骨折、水肿、脚气、阴下湿痒等证。
[0042]大蒜:性温，味辛平；入脾、胃、肺经，具有温中消食、行滞气、暖脾胃、消积、解毒、杀虫的功效，主治饮食积滞、脘腹冷痛、水肿胀满、泄泻、痢疾、疟疾、百日咳、痈疽肿毒、白秃癣疮、蛇虫咬伤以及钩虫、蛲虫等病症。
[0043]肉豆蘧:拉丁名Myristicae Semen,味辛、苦,性温,入脾、胃、大肠经,具有温中潘肠、行气消食的作用，用于虚泻、冷痢、脘腹胀痛、食少呕吐、宿食不消等证。
[0044]莱菔子:性平，味辛、甘，归肺、脾、胃经，具有消食除胀，降气化痰的功效，主治饮食停滞、脘腹胀痛、大便秘结、积滞泻痢、痰壅喘咳等证。
[0045]鸦胆子:拉丁名Bruceae Fructus,味苦,性寒，归大肠经、肝经,具有清热解毒,止痢，截疟，腐蚀赘疣的功效，主治痢疾、疟疾；外治赘疣、鸡眼等证。
[0046]知母:拉丁名Anemarrhenae Rhizoma,味苦、甘,性寒,入肺、胃、肾经,有湾热除烦，滋阴润燥、清肺止咳的作用，主治外感热病，高热烦躁，肺热燥咳，内热消渴等症状；其苦寒质润，性沉降，既能清热，又能生津，善治温热病邪入气分，热盛伤津；也用于治疗消渴症；痰热壅肺而喘，肺燥咳嗽，痰少不利；阴虚火旺，虚火上炎等症状，知母对痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌等多种细菌有抑制作用。
[0047]女贞子:味甘、苦，微寒，入肝、肾经，有强肝益肾，清热明目的作用，主要用于治疗肝肾阴亏，头目失养之头昏耳鸣，阴虚内热等症状。女贞子能提升白细胞，增强免疫功能的功效，对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌有较强的抑制作用。现代医学研究证明，女贞子内含熊果酸、甘露醇、葡萄糖 、脂肪油等，有强心、利尿和保肝作用，能使因化疗引起的白细胞下降数量升高，并对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有抑制作用。
[0048]山楂:味酸、甘，性微温，归脾、胃、肝经，具有消食健胃，行气散瘀的功效，主要用来治疗食积不化，泄泻，痢疾，山楂为治疗消化不良之常用品，山楂能增加胃消化酶的分泌，促进消化等证。
[0049]地桃花:味甘，淡，性平，入心、肺经，具有祛风利湿，清热解毒的功效，主治感冒发热,风湿痹痛,痢疾,水肿，白带，吐血,痈肿，外伤出血,毒蛇咬伤，急惊风,破伤风，哮喘，胃痛产后风等证。
[0050]黄精:拉丁名Polygonati Rhizoma,味甘,性平,入肺、脾、肾经,具有养气养阴，健脾润肺，益肾填精的功效，用于脾胃气阴亏虚，食少无力，阴虚肺燥，干咳少痰，阴虚内热之消渴，肾虚精亏、阳痿遗精、头晕耳鸣、目昏眼花等证。
[0051]含羞草:味甘、潘，微苦，性微寒，归脾、肾二经，具有凉血解毒，清热利湿，镇静安神的功效，主治感冒，小儿高热，支气管炎，肝炎，胃炎，结膜炎，泌尿系结石，水肿，咳血，血尿，神经衰弱，失眠，疮疡肿毒，带状疱疹，跌打损伤等证。
[0052]党参:味甘，性平，归肺、脾经，具有补气益脾，养血生津的功效，主治脾肺气虚或气血两虚之倦怠乏力、气短，咳嗽自汗等症状，党参长于补脾养胃，调理中焦，兼有养血的作用，其性平，健脾运而不燥；滋味阴而不湿，能够改善机体的免疫状态，提高抗病能力，促进消化吸收，提高新陈代谢，促进肠道对营养物质的吸收。
[0053]九里香:味辛、微苦，性温，归肝，胃经，具有行气止痛，活血散瘀的功效，主治胃痛，风湿痹痛；外治牙痛，跌扑肿痛，虫蛇咬伤等证。[0054]枸杞子:味甘、性平，入肝、肾经，有补益肝肾、养血补血、益精明目、润肺止咳的作用，主要用于肝肾两虚、精血不足之腰膝酸软、头晕耳鸣、遗精耳鸣、自汗乏力；肾阳不足之阳痿、不育；阴精亏损、肝血不足之眼目昏花以及阴虚劳嗽等证，枸杞子能够促进肝细胞再生，增强非特异性免疫功能的作用。
[0055]紫苏子:拉丁名Perillae Fructus,紫苏子为紫苏的干燥成熟果实，其味辛、性温、无毒，归肺经，具有降气消痰、止咳平喘、润肠通便的功效，主治痰壅气逆，咳嗽气喘，肠燥便秘等证，紫苏子中的主要的活性成分为ω-3多不饱和脂肪酸(co-3PU FA)，《-3PUFA和黄酮对畜禽具有特定的生物活性作用。在饲粮中增加《-3PUFA的含量可提高畜产品中?-3PU FA的含量、多不饱和脂肪酸(PU FA)与饱和脂肪酸(SFA)比例、ω-3Ρυ FA与ω-6多不饱和脂肪酸(ω-6Ρυ FA)比例，有利于调节免疫功能和减缓炎症反应。
[0056]鱼腥草:味辛，性微寒，入肺、膀胱经，具有清热解毒，排脓消痈，利尿通淋的功效，用于肺痈吐脓，痰热咳喘，热毒血痢，湿热淋证，热毒疮痈，蛇虫要上等证，鱼腥草主含癸酰乙醛、丹桂醛、甲基正壬酮、柏皮李甙等，主要功能为消肿止痛、止血、抗菌，并可增强机体免疫力，改善局部血液循环，减少炎性渗出，促进上皮修复。
[0057]所述中药免疫制剂中各原料药的重量份分别为:
[0058]黄苗75重量份~85重量份、白头翁35重量份~45重量份、仙鹤草25重量份~35重量份、墨旱莲40重量份~50重量份、淫羊藿25重量份~35重量份、蓝布正45重量份~55重量份、黄连55重量份~65重量份、元宝草30重量份~40重量份、南沙参45重量份~55重量份、五倍子40重量份~50重量份、山柰25重量份~35重量份、刺五加30重量份~40重量份、大蒜15重量份~25重量份、肉丑蘧30重量份~40重量份、莱菔子20重量份~30重量份、鸦胆子25重量份~35重量份、知母40重量份~50重量份、女贞子45重量份~55重量份、山楂30重量份~40重量份、地桃花25重量份~35重量份、黄精45重量份~55重量份、含羞草30重量份~40重量份、党参45重量份~55重量份、九里香20重量份~30重量份、枸杞子35重量份~45重量份、紫苏子20重量份~30重量份和鱼渥草25重量份~35重量份。
[0059]进一步优选，所述中药免疫制剂中各原料药的重量份分别为黄芪78重量份~82重量份、白头翁38重量份~42重量份、仙鹤草28重量份~32重量份、墨旱莲43重量份~47重量份、淫羊藿28重量份~32重量份、蓝布正48重量份~52重量份、黄连58重量份~62重量份、元宝草33重量份~37重量份、南沙参48重量份~52重量份、五倍子43重量份~47重量份、山柰28重量份~32重量份、刺五加33重量份~37重量份、大蒜18重量份~22重量份、肉丑蘧33重量份~37重量份、莱菔子23重量份~27重量份、鸦胆子28重量份~32重量份、知母43重量份~47重量份、女贞子48重量份~52重量份、山楂33重量份~37重量份、地桃花28重量份~32重量份、黄精48重量份~52重量份、含羞草33重量份~37重量份、党参48重量份~52重量份、九里香23重量份~27重量份、枸杞子38重量份~42重量份、紫苏子23重量份~27重量份和鱼腥草28重量份~32重量份。
[0060]更进一步优选，所述中药免疫制剂中各原料药的重量份分别为黄芪80重量份、白头翁40重量份、仙鹤草30重量份、墨旱莲45重量份、淫羊藿30重量份、蓝布正50重量份、黄连60重量份、元宝草35重量份、南沙参50重量份、五倍子45重量份、山柰30重量份、刺五加35重量份、大蒜20重量份、肉S.蘧35重量份、莱菔子25重量份、鸦胆子30重量份、知母45重量份、女贞子50重量份、山楂35重量份、地桃花30重量份、黄精50重量份、含羞草35重量份、党参50重量份、九里香25重量份、枸杞子40重量份、紫苏子25重量份和鱼腥草30重量份。
[0061]本发明提供的中药免疫制剂制备成散剂，拌合到饲料中，喂食患病鸡。
[0062]本发明还提供了上述中药免疫制剂散剂的制备方法，具体为:
[0063]第一步，将黄芪、墨旱莲、淫羊藿、蓝布正、南沙参、五倍子、刺五加、女贞子、黄精、党参和枸杞子按比例混合，取混合物100g装入渗漉筒中，加入50°C~55°C的白酒600g~800g，在25°C~35°C的条件下浸泡20小时~30小时，调节渗漉筒阀门，使白酒药液慢慢滴出，滴出速度为每分钟2~4mL，收集滴出液，得700mL~IL的渗漉液，浓缩，除去白酒，干燥，粉碎，获得第一干燥粉末； [0064]第二步，将佘下组分按比例混合，取100g混合物，加入500g~800g的水，煮沸3~4小时，过滤，获得第一滤液，滤渣再次加入200g~300g的水，再次煮沸I~2小时，过滤，获得第二滤液，将第一滤液和第二滤液混合，浓缩，除去水，干燥，粉碎，获得第二干燥粉末；
[0065]第三步，将第一干燥粉末和第二干燥粉末混合，获得中药免疫制剂散剂。
[0066]本发明还提供了一种鸡饲料，其原料包括玉米、豆柏、食盐、鱼粉、骨粉、微量元素添加剂、氨基酸添加剂、维生素添加剂和用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂散剂饲料添加剂。
[0067]其中，所述饲料中，各原料成分的重量份分别为玉米90重量份~110重量份、豆柏30重量份~50重量份、食盐2重量份~4重量份、鱼粉8重量份~12重量份、骨粉3重量份~5重量份、微量元素添加剂2重量份~4重量份、氨基酸添加剂2重量份~4重量份、维生素添加剂2重量份~4重量份和中药免疫制剂散剂饲料添加剂15重量份~20重量份。
[0068]进一步优选，所述饲料中，各原料成分的重量份分别为玉米100重量份、豆柏40重量份、食盐3重量份、鱼粉10重量份、骨粉4重量份、微量元素添加剂3重量份、氨基酸添加剂3重量份、维生素添加剂3重量份和中药免疫制剂散剂饲料添加剂18重量份。
[0069]微量元素添加剂可以为各种常规的微量元素添加剂，可以使用简单的有机酸盐，如柠檬酸铁，也可以使用微量元素与氨基酸螯合物，如氨基酸铁，添加的微量元素主要有铁、锌、铜、锰、碘、钴、硒、钥，也可以使用复合微量元素预混料，如北京优利保生物科技有限责任公司提供的英美尔。
[0070]氨基酸添加剂包括丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸、脯氨酸等各种常规氨基酸，也可以采用氨基酸预混料，如上海贝能化工有限公司生产的复合氨基酸粉。
[0071]维生素添加剂包括核黄素、维生素C、维生素E、维生素A、维生素B等各种常规维生素，也可以采用维生素预混料，如北京优利保生物技术有限公司生产的优维素。
[0072]本发明还提供了上述饲料的制备方法，具体为:
[0073]第一步，按照上述方法制备所述中药免疫制剂散剂饲料添加剂；
[0074]第二步，将饲料原料中其他原料组分与第一步获得的所述中药免疫制剂散剂饲料添加剂一起放入饲料搅拌机中，连续均匀搅拌I~3小时后，放入粉碎机中进行粉碎，获得饲料。
[0075]以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
[0076]实施例1中药免疫制剂I
[0077]将黄芪80g、墨旱莲45g、淫羊藿30g、蓝布正50g、南沙参50g、五倍子45g、刺五加35g、女贞子50g、黄精50g、党参50g和枸杞子40g按比例混合，取混合物100g装入渗漉筒中，加入50°C的白酒700g，在30 V的条件下浸泡25小时，调节渗漉筒阀门，使白酒药液慢慢滴出，滴出速度为每分钟3mL，收集滴出液，得800mL的渗漉液，浓缩，除去白酒，干燥，粉碎，获得第一干燥粉末，将白头翁40g、仙鹤草30g、黄连60g、元宝草35g、山柰30g、大蒜20g、肉豆蘧35g、莱菔子25g、鸦胆子30g、知母45g、山楂35g、地桃花30g、含羞草35g、九里香25g、紫苏子25g和鱼腥草30g混合，取100g混合物，加入600g的水，煮沸4小时，过滤，获得第一滤液，滤渣再次加入300g的水，再次煮沸2小时，过滤，获得第二滤液，将第一滤液和第二滤液混合，浓缩，除去水，干燥，粉碎，获得第二干燥粉末，将第一干燥粉末和第二干燥粉末混合，获得中药免疫制剂I。
[0078]实施例2中药免疫制剂2
[0079]将黄芪78g、墨旱莲43g、淫羊藿28g、蓝布正48g、南沙参48g、五倍子43g、刺五加33g、女贞子48g、黄精48g、党参48g和枸杞子38g按比例混合，取混合物100g装入渗漉筒中，加入50°C的白酒700g，在30 V的条件下浸泡25小时，调节渗漉筒阀门，使白酒药液慢慢滴出，滴出速度为每分钟3mL，收集滴出液，得800mL的渗漉液，浓缩，除去白酒，干燥，粉碎，获得第一干燥粉末，将白头翁38g、仙鹤草28g、黄连58g、元宝草33g、山柰28g、大蒜18g、肉豆蘧33g、莱菔子23g、鸦胆子28g、知母43g、山楂33g、地桃花28g、含羞草33g、九里香23g、紫苏子23g和鱼腥草28g混合，取100g混合物，加入600g的水，煮沸4小时，过滤，获得第一滤液，滤渣再次加入30 0g的水，再次煮沸2小时，过滤，获得第二滤液，将第一滤液和第二滤液混合，浓缩，除去水，干燥，粉碎，获得第二干燥粉末，将第一干燥粉末和第二干燥粉末混合，获得中药免疫制剂2。
[0080]实施例3中药免疫制剂3
[0081]将黄芪82g、墨旱莲47g、淫羊藿32g、蓝布正52g、南沙参52g、五倍子47g、刺五加37g、女贞子52g、黄精52g、党参52g和枸杞子42g按比例混合，取混合物100g装入渗漉筒中，加入50°C的白酒700g，在30 V的条件下浸泡25小时，调节渗漉筒阀门，使白酒药液慢慢滴出，滴出速度为每分钟3mL，收集滴出液，得800mL的渗漉液，浓缩，除去白酒，干燥，粉碎，获得第一干燥粉末，将白头翁42g、仙鹤草32g、黄连62g、元宝草37g、山柰32g、大蒜22g、肉豆蘧37g、莱菔子27g、鸦胆子32g、知母47g、山楂37g、地桃花32g、含羞草37g、九里香27g、紫苏子27g和鱼腥草32g混合，取100g混合物，加入600g的水，煮沸4小时，过滤，获得第一滤液，滤渣再次加入300g的水，再次煮沸2小时，过滤，获得第二滤液，将第一滤液和第二滤液混合，浓缩，除去水，干燥，粉碎，获得第二干燥粉末，将第一干燥粉末和第二干燥粉末混合，获得中药免疫制剂3。
[0082]实施例4毒理实验
[0083]急性毒性实验
[0084]选择昆明种小鼠20只，雌性各半，体重(20+2)g，由青岛市实验动物中心提供，将实施例1制备的中药免疫制剂溶解在水中，获得生药浓度为lg/ml的溶液，灌服小鼠，经过预实验，未能检测出口服给药的LD5tl,故测其最大耐受量，以1.4ml/10g体重的给药体积，灌服2次/d，间隔6h，给药后观察7d，记录动物死亡及毒副反应症状，实验结束时，将全部动物处理，解剖，肉眼观察各主要脏器组织病变情况，2次灌服140g生药/kg后，动物活动，进食进水未见任何异常，观察7d动物死亡，肉眼尸检未见主要脏器组织的明显异常，因此，中药颗粒剂的最大给药量为> 140g生药/kg，此剂量相当于临床成人(按60kg计)每日最大口服剂量2g生药/kg的70倍。
[0085]长期毒性实验
[0086]选择40只雄性SD大鼠，体质量(180±20) g,由青岛市实验动物中心提供，随机分为2组，空白对照组和中药组，每组20只，空白对照组给予蒸馏水，将实施例1制备的中药免疫制剂溶解在水中，获得生药浓度为lg/ml的溶液，灌服大鼠，灌服量为50g生药/kg，每周一至周六上午灌胃给药I次，连续180d，给药体积为2mL/100g体重，给药前及给药期间每天观察大鼠一般状态、体征、摄食量、饮水及粪便情况。给药90d时于末次给药24h后，各组抽取6只，雌雄各半；180d时末次给药24h后，各组抽取6只，雌雄各半；停药后30d各组抽取6只，雌雄各半，用乌拉坦麻醉，从腹部主动脉取血，各组均杀取动物，检查血液学和血液生化指标， 取血后，立刻掊取心、肝、肾、脾、肺、肾上腺、甲状腺、胸腺、睾丸、卵巢、子宫、脑、前列腺等脏器称重，根据体重计算器官重量系数并作病理学检查。
[0087]经检查，在连续给药期间，动物的活动、体重、摄食量、大便和毛发光泽程度未见异常，动物未见死亡，肉眼未见明显病变，各组大鼠外周血象检查均在正常范围，血液指标均在正常范围，中药组大鼠脏器系数与空白对照组相比没有显著差异。
[0088]实施例5饲料
[0089]将玉米10kg、豆柏4kg、食盐0.3kg、鱼粉0.1kg、骨粉0.4kg、微量元素添加剂英美尔(北京优利保生物科技有限责任公司提供)0.3kg、氨基酸添加剂复合氨基酸粉(上海贝能化工有限公司生产)0.3kg、维生素添加剂优维素(北京优利保生物技术有限公司生产)0.3kg和实施例1制备的中药免疫制剂1.8kg 一起放入饲料搅拌机中，连续均匀搅拌3小时后，放入粉碎机中进行粉碎，获得饲料。
[0090]比较例I饲料
[0091]将玉米10kg、豆柏4kg、食盐0.3kg、鱼粉0.1kg、骨粉0.4kg、微量元素添加剂英美尔(北京优利保生物科技有限责任公司提供)0.3kg、氨基酸添加剂复合氨基酸粉(上海贝能化工有限公司生产)0.3kg、维生素添加剂优维素(北京优利保生物技术有限公司生产)0.3kg 一起放入饲料搅拌机中，连续均匀搅拌3小时后，放入粉碎机中进行粉碎，获得饲料。
[0092]实施例6动物实验
[0093]实验动物
[0094]选择I日龄非免疫罗曼公雏150只。
[0095]实验药品
[0096]实施例5制备的饲料。
[0097]攻毒用鸡传染性法氏囊病病毒制备及毒价测定
[0098]取野外采集具有典型病变的法氏囊，用组织捣碎机捣碎反复冻融4次，800r/min离心lOmin，取上清液，佘渣再用生理盐水稀释、离心、吸上清液，反复4次，合并上清液制成I:4匀衆，_20°C保存备用。取上清液用生理盐水作10_2~10_7系列稀释，分别接种于9日龄SPF鸡胚，每个稀释度接种5个，每胚0.1mL ;设生理盐水对照。37°C孵化120h，统计各组鸡胚死亡数，按Reach-Muench法计算EID50为10~7.25。临用前用生理盐水以1: 10稀释。
[0099]检测用阳性血清
[0100]由青岛农业大学提供，效价为1: 26。
[0101]试验设计
[0102]选择I日龄雏鸡150只，随机分成空白对照组、攻毒对照组和预防组，每组50只。各组采取严格隔离措施，分开后按常规方法饲养，自由采食饮水，24h光照，除鸡传染性法氏囊病外，正常免疫，饲养管理水平力求一致，预防组喂食本发明实施例5制备的饲料，喂至第15日龄时开始，对攻毒对照组和预防组雏鸡直接灌服鸡传染性法氏囊病病毒，攻毒量为每只1: 10的病毒稀释液2.0mL，空白对照组雏鸡应用0.9%生理盐水灌服2.0mL，不攻毒，攻毒对照组喂食比较例I的饲料。
[0103]试验期间，每天仔细观察鸡群的精神状态、食欲、粪便、发病、死亡等情况，记录试验各组雏鸡的死亡数，并对病死雏鸡逐只进行病理剖检，检测并统计胸肌、腿肌、法氏囊等器官的出血等情况。
[0104]检测指标及数据处理
[0105]血清抗鸡传染性法氏囊病毒抗体效价的测定攻毒后I周对各组试验鸡随机抽出5只，翼下静脉采血，分离血清，采用半微量血凝抑制实验法测定血清中IBDV抗体效价，HI抗体效价以Log/表示。
[0106]鸡脾脏淋巴细胞转化的测定
[0107]试验全期结束后，每组随机抽取I只实验鸡，颈静脉放血处死，无菌取出脾脏，分别用灭菌生理盐水冲洗3次，放入含Hank' s液的皿中剪碎后，再转入100目网孔的灭菌尼龙网袋中，用弯针头轻轻挤压过滤，收集细胞液，小心加在淋巴细胞分离液上层，2000r/min离心20min，吸取中间云雾状白细胞层，用Hank' s液洗2次，1500r/min离心lOmin。活细胞计数后，含10%小牛血清的RPMI1640营养液调整细胞密度为I X IO7个/mL。
[0108]采用MTT法，将上述制备各组鸡脾脏淋巴细胞的分出2份，分别加伴刀豆素球蛋白(ConA)和细菌脂多糖(LPS)，使其质量浓度为5和10mg/L。随后，与未处理的鸡脾脏淋巴细胞悬液一起，分别加到96孔细胞培养板中，100 μ L/孔，每组重复4孔。置39.5°C>5% CO2培养箱中培养44h时，每孔加MTT20 μ L继续培养4h后，吸出上清液，每孔加DMS0100 μ L。将细胞板置微量震荡器上震荡5min使沉淀完全溶解，在酶联免疫仪上检测吸光值(D57tl)，计算淋巴细胞转化率。计算公式为:
[0109]淋巴细胞转化率(％)=(实验孔平均OD值-对照孔平均OD值)/平均OD值X 100
[0110]数据处理与分析
[0111]各组数据均用均数土标准差pc±s>表示，各组均数作正态性检验及重复测量方差
齐性检验，以单因素方差分析进行组间比较仔检验)，P < 0.05为相差显著，P < 0.01为相差非常显著。统计计算均采用SPSS12.0软件完成。
[0112]结果
[0113]临床症状
[0114]各组雏鸡在人工灌服鸡传染性法氏囊病病毒前，雏鸡的精神、食欲和粪便等情况正常。在第15日龄灌服后，前2d也未见明显临床症状，仅少数雏鸡出现采食量减少，个别鸡有轻微沉郁。灌服后第3d，攻毒对照组和预防组鸡开始出现精神沉郁，食欲明显减少，部分雏鸡羽毛松乱，两翼力下垂，缩颈，闭目卧地，肛门周围羽毛有粪便污染现象，有些排出白色水样稀粪，病鸡开始出现因脱水竭而死亡情况。但两组之间临床症状表现差异显著。预防组雏鸡的临床症状明显好于攻读对照组，空白对照组无明显临床症状。
[0115]病理变化
[0116]对病死鸡进行剖检，发现病死鸡呈严重脱水现象，腿肌呈暗红色或有点状、斑块状、片状出血，胸肌暗红色偶有点状血，法氏囊黏膜褶皱有不同程度的出血，黏膜有水肿现象，囊腔内有胶冻样黏液，或奶油状分泌物，少数腔内有干酪样物质，肌胃和腺胃交界处有点状和条块状的出血带，少数腺胃黏膜溃疡，个别腺胃乳头有出血点，部分雏鸡肠道有不同程度的出血，直肠和泄殖腔出血较为严重，肾脏肿大出血，个别鸡心脏上有出血状况。
[0117]各组雏鸡死亡情况，结果见表1。
[0118]表1攻毒后各组鸡的死亡情况比较
[0119]
【权利要求】
1.一种用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂，其特征在于:原料药包括黄芪、白头翁、仙鹤草、墨旱莲、淫羊藿、蓝布正、黄连、元宝草、南沙参、五倍子、山柰、刺五加、大蒜、肉豆蘧、莱菔子、鸦胆子、知母、女贞子、山楂、地桃花、黄精、含羞草、党参、九里香、枸杞子、紫苏子和鱼腥草。
2.如权利要求1所述的中药免疫制剂，其特征在于:所述中药免疫制剂中各原料药的重量份分别为黄芪75重量份~85重量份、白头翁35重量份~45重量份、仙鹤草25重量份~35重量份、墨旱莲40重量份~50重量份、淫羊藿25重量份~35重量份、蓝布正45重量份~55重量份、黄连55重量份~65重量份、元宝草30重量份~40重量份、南沙参45重量份~55重量份、五倍子40重量份~50重量份、山柰25重量份~35重量份、刺五加30重量份~40重量份、大蒜15重量份~25重量份、肉丑蘧30重量份~40重量份、莱菔子20重量份~30重量份、鸦胆子25重量份~35重量份、知母40重量份~50重量份、女贞子45重量份~55重量份、山楂30重量份~40重量份、地桃花25重量份~35重量份、黄精45重量份~55重量份、含羞草30重量份~40重量份、党参45重量份~55重量份、九里香20重量份~30重量份、枸杞子35重量份~45重量份、紫苏子20重量份~30重量份和鱼腥草25重量份~35重量份。
3.如权利要求1或2所述的中药免疫制剂，其特征在于:所述中药免疫制剂中各原料药的重量份分别为黄芪78重量份~82重量份、白头翁38重量份~42重量份、仙鹤草28重量份~32重量份、墨旱莲43重量份~47重量份、淫羊藿28重量份~32重量份、蓝布正48重量份~52重量份、黄连58重量份~62重量份、元宝草33重量份~37重量份、南沙参48重量份~52重量份、五倍子43重量份~47重量份、山柰28重量份~32重量份、刺五加33重量份~37重量份、大蒜18重量份~22重量份、肉丑蘧33重量份~37重量份、莱菔子23重量份~27重量份、鸦胆子28重量份~32重量份、知母43重量份~47重量份、女贞子48重量份~52重量份、山楂33重量份~37重量份、地桃花28重量份~32重量份、黄精48重量份~52重量份、含羞草33重量份~37重量份、党参48重量份~52重量份、九里香23重量份~27重量份、枸杞子38重量份~42重量份、紫苏子23重量份~27重量份和鱼腥草28重量份~32重量份。
4.如权利要求1至3所述的中药免疫制剂，其特征在于:所述中药免疫制剂中各原料药的重量份分别为黄芪80重量份、白头翁40重量份、仙鹤草30重量份、墨旱莲45重量份、淫羊藿30重量份、蓝布正50重量份、黄连60重量份、元宝草35重量份、南沙参50重量份、五倍子45重量份、山柰30重量份、刺五加35重量份、大蒜20重量份、肉丑蘧35重量份、莱菔子25重量份、鸦胆子30重量份、知母45重量份、女贞子50重量份、山楂35重量份、地桃花30重量份、黄精50重量份、含羞草35重量份、党参50重量份、九里香25重量份、枸杞子40重量份、紫苏子25重量份和鱼腥草30重量份。
5.权利要求1至4所述中药免疫制剂的制备方法，其特征在于，包括: 第一步，将黄芪、墨旱莲、淫羊藿、蓝布正、南沙参、五倍子、刺五加、女贞子、黄精、党参和枸杞子按比例混合，取混合物100g装入渗漉筒中，加入50°C~55°C的白酒600g~800g，在25°C~35°C的条件下浸泡20小时~30小时，调节渗漉筒阀门，使白酒药液慢慢滴出，滴出速度为每分钟2~4mL，收集滴出液，得700mL~IL的渗漉液，浓缩，除去白酒，干燥，粉碎，获得第一干燥粉末；第二步，将佘下组分按比例混合，取100g混合物，加入500g~800g的水，煮沸3~4小时,过滤,获得第一滤液,滤渣再次加入200g~300g的水，再次煮沸I~2小时，过滤，获得第二滤液，将第一滤液和第二滤液混合，浓缩，除去水，干燥，粉碎，获得第二干燥粉末； 第三步，将第一干燥粉末和第二干燥粉末混合，获得中药免疫制剂。
6.一种鸡饲料，其特征在于:原料包括玉米、豆柏、食盐、鱼粉、骨粉、微量元素添加剂、氨基酸添加剂、维生素添加剂和用于预防鸡传染性法氏囊的中药免疫制剂。
7.如权利要求6所述的鸡饲料，其特征在于:所述中药免疫制剂的原料药包括黄芪、白头翁、仙鹤草、墨旱莲、淫羊藿、蓝布正、黄连、元宝草、南沙参、五倍子、山柰、刺五加、大蒜、肉豆蘧、莱菔子、鸦胆子、知母、女贞子、山楂、地桃花、黄精、含羞草、党参、九里香、枸杞子、紫苏子和鱼腥草。
8.如权利要求6或7所述的鸡饲料，其特征在于:所述饲料中，各原料成分的重量份分别为玉米90重量份~110重量份、丑柏30重量份~50重量份、食盐2重量份~4重量份、鱼粉8重量份~12重量份、骨粉3重量份~5重量份、微量元素添加剂2重量份~4重量份、氨基酸添加剂2重量份~4重量份、维生素添加剂2重量份~4重量份和中药免疫制剂饲料添加剂15重量份~20重量份。
9.权利要求6至8所述饲料的制备方法，其特征在于: 第一步，按照权利要求5所述方法制备所述中药免疫制剂饲料添加剂； 第二步，将饲料原料中其他原料组分与第一步获得的所述中药免疫制剂散剂饲料添加剂一起放入饲料搅拌机中，连续均匀搅拌I~3小时后，放入粉碎机中进行粉碎，获得饲料。
【文档编号】A61P31/14GK103599447SQ201310498941
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年10月23日 优先权日:2013年10月23日
【发明者】赵玉妹 申请人:青岛华仁技术孵化器有限公司