关白附总生物碱及关附壬素的新用途
【专利摘要】本发明提供了一种关白附总生物碱的制备方法，以及其在制备慢钠离子通道阻断剂和制备抗心率失常药物中的应用。研究表明，关白附总生物碱和盐酸关附甲素均对豚鼠心室肌慢钠电流具有抑制作用。特别是关附壬素在制备药物代谢酶抑制剂中的应用。本发明还提供了关附甲素在制备慢钠离子通道阻断剂中的应用。
【专利说明】关白附总生物碱及关附壬素的新用途
[0001]本发明申请为分案申请，原案申请号为201210203325.0，原案申请日为2012年6月19日，原案发明名称为:关白附总生物碱及关附壬素的新用途。
【技术领域】
[0002]本发明涉及关白附总生物碱及关附壬素的新用途。具体涉及关白附总生物碱在制备慢钠离子通道阻断剂及抗心律失常药物中的应用。
【背景技术】
[0003]关白附为中药毛莨科黄花乌头Aconitum coreanum(Levi,)Rapaics的块根,为常见中药之一，主治心痛血痹，具有祛风，燥湿，化痰，止痛作用，民间用药疗效好。其化学成份主要有关附庚素(Guanfu base G, GFG),关附甲素(Guanfu base A, GFA),关附壬素(Guanfubase I, GFI)等，三者均为二萜类生物碱。现代药理学研究表明关附甲素、关附庚素、关附壬素等具有抗心律失常、抗炎和镇痛作用。但由于关附甲素提取得率为0.1%左右，提取工艺周期较长，原料药损耗大，未能充分利用关白附资源。
[0004]近年来研究长QT综合症(L-QT，易诱发室性心律失常，晕厥和猝死的一系列综合症)及其他心律失常发生机制的新靶点，有实验表明，心脏钠离子通道基因SCN5A的突变，造成慢钠电流反复开发，延缓电流衰减，使动作电位平台期延长，引起L-QT。这种变化在慢频率下尤其明显，是LQT3发生的重要原因，也是诱发其他心律失常的重要原因。
【发明内容】
[0005]本发明目的之一在于提供关白附总生物碱的制备方法。
[0006]本发明目的之二在于提供关白附总生物碱在制备慢钠离子通道阻断剂中的应用。
[0007]本发明目的之三在于提供关附甲素在制备慢钠离子通道阻断剂中的应用。
[0008]本发明目的之四在于提供关附壬素在抑制药物代谢酶活性新用途。
[0009]本发明的目的是通过如下技术方案实现的。
[0010]一种关白附总生物碱的制备方法，该方法包括如下步骤:
[0011]步骤1:取关白附药材，有机溶剂提取，回收溶剂，得提取物浸膏；
[0012]步骤2:取步骤I得到的浸膏，以酸溶液捏溶，将酸溶液低温冷藏，取酸水层；
[0013]步骤3:取步骤2得到的酸水液，以有机溶剂萃取，酸水母液加碱液调节pH至碱性；
[0014]步骤4:将步骤3中碱化的溶液用有机溶剂萃取，取有机溶剂层，回收溶剂，得关白附总生物碱。
[0015]优选的，所述步骤I中有机溶剂为正丁醇、异丙醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚、乙醚中的任意一种；
[0016]所述提取方法为冷浸提取；
[0017] 所述步骤2中的酸溶液为盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、甲酸、醋酸、丁酸中的一种或几种；
[0018]所述步骤3和4中的有机溶剂为正丁醇、乙酸乙酯、甲酸乙酯、甲酸乙酯、氯仿、丙酮、石油醚、乙醚中的任意一种；
[0019]所述步骤3中的碱液为氨水、碳酸钠、碳酸氢钠中的一种或几种。
[0020]优选的，关白附总生物碱的制备方法包括如下步骤:
[0021]步骤1:取关白附药材，在10_30°C下用50-95%乙醇冷浸提取，回收溶剂，得浸膏；
[0022]步骤2:取步骤I得到的浸膏，以盐酸水溶液捏溶，将酸溶液低温冷藏，除去上层的脂溶性杂质，取酸水液；
[0023]步骤3:取步骤2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取，酸水母液加氨水调节pH =8-11 ；
[0024]步骤4:将步骤3中经氨水碱化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层，回收溶剂，真空干燥，得关白附总生物碱。
[0025]更有选的参数为:步骤2中盐酸水溶液为0.5-1.5mol/l ;和/或步骤3中:酸水母液加氨水调节pH = 9。
[0026]更优选的，关白附总生物碱的制备方法包括如下步骤:
[0027]步骤1:取关白附药材，粉碎，在10_30°C下用2-8倍量50-95%乙醇冷浸提取2_4次，每次12-36小时，合并提取液，回收溶剂，得浸膏；
[0028]步骤2:取步骤I得到的浸膏，以1-3倍量0.5-1.5mol/l的盐酸水溶液捏溶，将酸溶液低温冷藏12-24小时，除去上层的脂溶性杂质，取酸水液；
[0029]步骤3:取步骤2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取2-4次，酸水母液加氨水调节pH=8-11 ；
[0030]步骤4:将步骤3中经氨水碱化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取2-4次，取乙酸乙酯层，回收溶剂，真空干燥，得关白附总生物碱。
[0031]进一步优选的，关白附总生物碱的制备方法包括如下步骤:
[0032]步骤1:取关白附药材，粉碎成10-20目粗粉，在25°C下用5倍量85%乙醇冷浸提取4次，每次24小时，合并提取液，回收溶剂，得浸膏；
[0033]步骤2:取步骤I得到的浸膏，以I倍量lmol/1的盐酸水溶液捏溶，将酸溶液于2°C低温冷藏12-24小时，除去上层的脂溶性杂质，取酸水液；
[0034]步骤3:取步骤2得到的酸水液,用乙酸乙酯萃取2次，酸水母液加氨水调节pH =9 ；
[0035]步骤4:将步骤3中经氨水碱化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取4次，取乙酸乙酯层，回收溶剂，真空干燥，得关白附总生物碱。
[0036]或，步骤1:取关白附药材，粉碎成10-20目粗粉，在10°C下用3倍量95%乙醇冷浸提取2次，每次36小时，合并提取液，回收溶剂，得浸膏；
[0037]步骤2:取步骤I得到的浸膏，以3倍量0.5mol/l的盐酸水溶液捏溶，将酸溶液于2°C低温冷藏12-24小时，除去上层的脂溶性杂质，取酸水液；
[0038] 步骤3:取步骤2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取4次，酸水母液加氨水调节pH =
8；[0039]步骤4:将步骤3中经氨水碱化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取2次，取乙酸乙酯层，回收溶剂，真空干燥，得关白附总生物碱。
[0040]或，步骤1:取关白附药材，粉碎成10-20目粗粉，在30°C下用8倍量75%乙醇冷浸提取3次，每次12小时，合并提取液，回收溶剂，得浸膏；
[0041]步骤2:取步骤I得到的浸膏，以2倍量1.5mol/l的盐酸水溶液捏溶，将酸溶液于2°C低温冷藏12-24小时，除去上层的脂溶性杂质，取酸水液；
[0042]步骤3:取步骤2得到的酸水液,用乙酸乙酯萃取2次，酸水母液加氨水调节pH =11 ;
[0043]步骤4:将步骤3中经氨水碱化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取4次，取乙酸乙酯层，回收溶剂，真空干燥，得关白附总生物碱。
[0044]上述关白附总生物碱还可以按常规工艺制成关白附总碱盐。
[0045]本发明关白附总生物碱和总碱盐可以按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型，例如肌肉注射剂，静脉注射剂、粉针剂、胶囊剂、颗粒剂或片剂。
[0046]本发明关白附总生物碱在制备慢钠离子通道阻断剂中的应用；所述关白附总生物碱可以是游离碱或无机酸盐的形式。
[0047]一种关附甲素在制备慢钠离子通道阻断剂中的应用；所述关附甲素可以是游离碱或无机酸盐的形式。
[0048]一种关附壬素在制备抑制药物代谢酶药物中的应用。
[0049]所述药物代谢酶优选为细胞色素P450酶系中的一种或几种；进一步优选为CYP2D6。
[0050]本发明所述药物代谢酶CYP2D6所代谢的药物化合物及其盐的分子结构特征为:在化合物分子结构中距离氧化位点5~7A处有一个氮原子。包括抗抑郁药如阿米替林、丙咪嗪、氯米帕明、地昔帕明、去甲替林、氟西汀、帕罗西汀、顽发克星等；β受体阻滞剂如卡维地洛、普萘洛尔、美托洛尔、阿普洛尔、丁呋洛尔、噻吗洛尔、布尼洛尔等；抗精神病药如氯丙嗪、奋乃静、瑞斯哌东、托哌酮等；抗高血压药如胍喹啶、吲哚拉明、乌拉地尔等；抗心绞痛药如派克昔林、特罗地林等；镇痛药如曲马多；止咳平喘药如可待因、右美沙芬等；抗心律失常药如恩卡尼、司巴丁、氟卡尼、普罗帕酮、美西律、茚丙胺。所述关附壬素可以是游离碱或无机酸盐的形式；优选为盐酸盐或硫酸盐。
[0051] 本发明所述关附甲素和关附壬素可以从市场购买，也可以从关白附中提取分离或通过化学合成的方法得到，其结构式如下:
[0052]
【权利要求】
1.关附壬素或其盐在制备药物代谢酶抑制剂中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物代谢酶为细胞色素P450酶系中的一种或几种。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述药物代谢酶为CYP2D6。
4.一种关白附总生物碱，其特征在于所述总生物碱由如下方法制备: 步骤1:取关白附药材，在10-30°C下用50-95%乙醇冷浸提取，回收溶剂，得浸膏；步骤2:取步骤I得到的浸膏，以盐酸水溶液捏溶，将酸溶液低温冷藏，除去上层的脂溶性杂质，取酸水液； 步骤3:取步骤2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取，酸水母液加氨水调节pH = 8-11 ；步骤4:将步骤3中经氨水碱化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层，回收溶剂，真空干燥，得关白附总生物碱。
5.如权利要求4所述的关白附总生物碱，其特征在于: 步骤2中盐酸水溶液为0.5-1.5mol/l ;和/或 步骤3中:酸水母液加氨水调节pH = 9。
6.如权利要求4或5所述的关白附总生物碱，其特征在于所述关白附总生物碱还可以按常规工艺制成关白附总碱盐。
7.如权利要求4-6任一所述的关白附总生物碱在制备慢钠离子通道阻断剂中的应用。
8.一种关白附总生物碱的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤: 步骤1:取关白附药材，在10-30°C下用50-95%乙醇冷浸提取，回收溶剂，得浸膏；步骤2:取步骤I得到的浸膏，以盐酸水溶液捏溶，将酸溶液低温冷藏，除去上层的脂溶性杂质，取酸水液； 步骤3:取步骤2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取，酸水母液加氨水调节pH = 8-11 ；步骤4:将步骤3中经氨水碱化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层，回收溶剂，真空干燥，得关白附总生物碱。
9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于: 步骤2中盐酸水溶液为0.5-1.5mol/l ;和/或 步骤3中:酸水母液加氨水调节pH = 9。
10.一种关附甲素在制备慢钠离子通道阻断剂中的应用。
【文档编号】A61P9/06GK103989672SQ201410240329
【公开日】2014年8月20日 申请日期:2012年6月19日 优先权日:2012年6月19日
【发明者】王广基, 柳祥, 汤依群, 董秀华, 孙建国, 刘静涵, 于鹏, 曾艳, 刘建平, 杨春华, 孙申国, 朱天全, 程志国, 汪旻晖 申请人:中国药科大学, 吉林敖东洮南药业股份有限公司