用于制造供化疗癌症患者使用的辅助治疗剂的组合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于制造供化疗癌症患者使用的辅助治疗剂的组合物。本发明的组合物主要含有发酵大豆萃取物、绿茶萃取物、螺旋藻、姜黄萃取物、樟芝菌丝体和葡萄籽萃取物。本发明组合物具有抑制大肠息肉发生及癌化、提高化疗的效果，包括延长癌症患者存活期，尤其是无恶化存活期及/或减少化疗引起的副作用等作用。本发明的组合物还提供抗发炎活性，其有效地减少发炎介质如前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的生成。
【专利说明】用于制造供化疗癌症患者使用的辅助治疗剂的组合物
[0001] 相关申请案
[0002] 本案主张2013年9月6日申请的台湾专利申请案第102132310号的优先权，该案 以全文引用方式并入本文中。
【技术领域】
[0003] 本发明涉及一种用于制造化疗的辅助治疗剂的组合物。具体而言，本发明涉及一 种用于制造供化疗癌症患者使用的辅助治疗剂的组合物，其能有效抑制大肠息肉增生和癌 化、提高化疗的效果、提高化疗顺从性并减少化疗副作用。
【背景技术】
[0004] 大豆发酵制品，绿茶，螺旋藻，姜黄，樟芝和葡萄籽都是自然健康的宝藏，而且一些 生化测试显示，每种上述物质对人体有健康效应。姜黄中含有的姜黄素的主要药理活性是 抑制肿瘤生长，而樟芝含有大量多糖类可增强免疫功能，并杀死肿瘤细胞。虽然各种市售产 品中有单成分配方，但没有相关研究显示六成分复方具有减少癌症治疗的化疗副作用的效 果。
[0005] 以大肠癌为例，大肠癌包括结肠癌和直肠癌，是世界上最常见的恶性肿瘤之一。导 致大肠癌原因并不完全清楚，但一般认为，大肠癌和饮食高度相关。例如，增加摄取精制食 品、动物脂肪，和蛋白质丰富的食物，以及富含纤维的食物摄取不足皆会能增加大肠癌发生 率，这是现代的疾病。幸运的是，虽然大肠癌的发生率很高，但较容易找到病变，这些病变需 要较长时间发展成大肠癌。从息肉发展为最早期的大肠癌阶段约5至10年，因此一般来说， 只要定期检查侦测到早期的结肠息肉就能容易控制大肠癌。然而，大肠癌的早期症状并不 明显且特异性低，因此病人和医生容易忽略这些症状，错过了早期诊断和治疗的机会。
[0006] -般而言，治疗大肠癌有三种最常见的类型：外科手术，放射疗法和化学疗法。其 中，以对肿瘤的理解，目前大肠癌化疗主要为以氟尿嘧啶（5-FU)为基础的联合化疗，以减 少复发和肿瘤转移并延长存活率。
[0007] F0LF0X4是目前用于治疗二期及三期转移性大肠癌的化疗方案，包括含有氟尿嘧 陡（5-FU)、亚叶酸I丐（Ieucovorin)及双胺环己烧草酸钼（oxaliplatin)的药物。然而，这 些药物有毒性副作用，包括发烧、恶心、呕吐、腹泻、骨髓抑制、四肢末梢麻木及血液循环不 良。由于药物引起的副作用的症状，故患者通常生活质量低甚至有危及生命的并发症。
[0008] 因此，有必要寻找一种供接受化疗的癌症患者使用的辅助治疗剂，以减少不适感， 提商他们的生活质量。
[0009] 此外，已知慢性发炎或免疫活性调节与肿瘤的发生及恶化有关。若干证据支持了 慢性发炎的参与，例如，使用非类固醇抗炎药物（NSAID)与降低癌症发展风险有关联性。发 炎反应的介导物质在肿瘤形成过程中扮演重要角色，并提供用于癌症治疗性干预的目标。 有需要在接受化疗时调节发炎反应。
【发明内容】
[0010] 鉴于上述情况，本发明的目的是提供一种用于制造供接受化疗的癌症患者使用的 辅助治疗剂的组合物。
[0011] 具体而言，本发明的组合物包括发酵大豆萃取物、绿茶萃取物、螺旋藻、姜黄萃取 物、樟芝菌丝体和葡萄籽萃取物。
[0012] 根据本发明的具体实施例，所述组合物包含重量比为12-30 :4 :1-2 :1-2 :1-2 : 1-2的发酵大豆萃取物、绿茶萃取物、螺旋藻、姜黄萃取物、樟芝菌丝体和葡萄籽萃取物。 [0013] 根据本发明的具体实施例，所述癌症患者是大肠癌患者。
[0014] 根据本发明的具体实施例，癌症患者是以投予选自5-氟尿嘧啶、亚叶酸钙、双胺 环己烷草酸钼及其任意组合的化疗药物进行化疗。
[0015] 根据本发明的具体实施例，本发明的组合物是以口服给药。
[0016] 在部分具体实施例中，本发明的组合物能有效地抑制大肠息肉的增生和癌化，提 高化疗的效果，包括减少肿瘤的大小或延长存活期，特别是无疾病恶化存活期，增加化疗顺 从性和减少化疗引起的副作用。
[0017] 本发明的另一目的是提供作为抗发炎药剂的组合物。
[0018] 特别地，本发明的组合物可有效地减少前列腺素E2 (PGE2)、一氧化氮（NO)，肿瘤 坏死因子-a (TNF-a)和白细胞介素-6 (IL-6)产生。
[0019] 本发明的这些和其它方面可以通过以下具体实施例和图示的描述更清楚。即使可 能有变更或修改，其并不脱离的本发明所揭示的新颖概念的精神和范围。
【专利附图】
【附图说明】
[0020] 前面的概述以及本发明的以下详细描述结合附图阅读时将更易于理解。用于说明 本发明的目的，目前较佳实施例显示于附图。然而，应当理解，本发明并不限于所示的精确 安排和手段。
[0021] 在附图中：
[0022] 图1显示大鼠结肠中异常腺窝灶（ACF) ;(A)相较于Cl (1，2_二甲基肼（DMH)对照 组）的大鼠，MB-6(B1 = 17.3毫克/大鼠/天，82 = 34.6毫克/大鼠/天，83 = 69.2毫 克/大鼠/天）治疗的大鼠表现出ACF/结肠的总数显著减少（40. 6-51. 0%;*p〈0. 05) ; (B) 每个ACF的腺窝数分类为1-3腺窝，4-6腺窝和腺窝> 7 ;MB-6显著防止化学诱导ACF的形 成，且观察到腺窝彡7的组别抑制率最高（81. 7%，*p〈0. 05,对Cl组）；
[0023] 图2显示MB-6与亚叶酸钙/5-氟尿嘧啶化疗治疗结肠CT-26-VD-荷瘤BALB/c小 鼠的存活率；中位存活时间分别为27. 5天（单独肿瘤）、30. 5天（NC)、34. 5天（PSK)、35天 (MB-6-L)、39天（MB-6-M)和39天（MB-6-H) ;NC表示阴性对照组；PSK表示多糖；MB-6-L表 示0. 625克/公斤的MB-6 ;MB-6-M表示1. 25克/公斤的MB-6 ;MB-6-H表示2. 5克/公斤 的 MB-6 ;
[0024] 图3显示意图治疗（ITT)族群的次要终点：无恶化存活期（PFS)显著延长。
【具体实施方式】
[0025] 除非另外定义，所有本文中使用技术和科学术语具有如本发明所属领域技术人员 所理解的相同的含义。
[0026] 除非文中另有明确说明，如本文所用，单数形式"一"，"一个"和"该"包括复数个 所指对象的"至少一个"。因此，例如，提及"一个成份"包括多个此成份和本领域技术人员 已知的等同物。
[0027] 如本文所使用的，与生物活性药剂或组合物的施用有关的术语"治疗有效量"表示 相较于未经治疗的对照个体，足以造成经治疗个体中欲达成的生物效果的生物活性药剂或 组合物的量或剂量。具体而言，本发明组合物的有效量可以指抑制大肠息肉增生及/或癌 化、增进化疗有效性，包括延长存活期，特别是无恶化存活期、增加化疗顺从性及/或减少 化疗引起的副作用的量。量可以根据给药途径和治疗的状况，包括年龄、体重、症状、治疗效 果、给药方法和治疗时间调整。例如，在某些具体实施例，用在本发明组合物的口服剂量是 每日10至1000毫克/公斤，具体地是每天10至800毫克/公斤，更具体地是每天10至 500毫克/公斤，甚至更具体地是每天10至250毫克/公斤，还更具体地是每日10至150 晕克/公斤。
[0028] 如本文所用，术语"个体"或"受试者"包括人类和非人类动物，例如宠物（如狗， 猫等），农场动物（如牛，羊，猪，马等）或实验动物（例如大鼠，小鼠，豚鼠等）。
[0029] 根据本发明，本发明组合物可以用作化疗的辅助治疗剂。在一个具体实施例中，本 发明治疗有效量的组合物可与药学上可接受的载剂配制成适当形式的医药组合物，以供递 送和吸收为目的。根据给药方式，本发明的医药组合物，较佳含有重量约10%至约1〇〇%， 或约20%至约100%，或约40%至约100%，或约60%至约100%的活性成分，其中重量百 分比是基于组合物整体的重量来计算。
[0030] 如本文所使用的，术语"载剂"或"药学上可接受的载剂"是指用于药物的稀释剂 或赋形剂或类似物，包括制药工业中普通技术人员所公知者。
[0031] 本发明提供了一种主要包括发酵大豆萃取物、绿茶萃取物、螺旋藻、姜黄萃取物、 樟芝菌丝体和葡萄籽萃取物的组合物，其可用于制造供接受化疗的癌症患者使用的辅助治 疗剂。
[0032] 具体来说，本文所用的发酵大豆萃取物是指通过利用至少一种乳酸菌和可视需 要的至少一种酵母菌使水溶性大豆萃取物发酵制得的萃取物。在一实施例中，该至少一 种乳酸菌是乳杆菌属且该至少一种酵母菌是酵母菌属。在某些实施例中，发酵是使用不 同种类的乳杆菌属培养物（例如，5、10、15、20、25或30种乳杆菌属菌株的培养物）来实 施，且较佳地，将至少一种酵母菌添加到不同种类的乳杆菌属培养物中。发酵中可使用的 乳杆菌属菌株包括，但不限于，嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus)CCRC(食品工业 发展研究所之生物资源保存及研究中心，台湾）10695、14026、14064、14065和/或14079 ; 德氏乳杆菌保加利亚亚种（Lactobacillus delbrueckiibulgaricus)CCRC10696、14007、 14009、14010、14069、14071、14098 和 / 或 16054 ;德氏乳杆菌乳亚种（Lactobacillus lactislactis)CCRC10791、12267、12306、12312、12315、12323、14016、14015 和 / 或 14117;高加索酸奶乳杆菌（Lactobacillus kefir)CCRC14011和/或马乳酒样乳杆菌 (Lactobacilluskefiranofaciens)CCRC16059。发酵中可使用的酵母菌菌株包括，但不限于， 酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae)CCRC20577、20578、20581、21494、21550、21797、 21805、22138、22234、22337、22731 和 / 或 22728 和 / 或乳酒假丝酵母菌（Candidakefyr) CCRC21269、21742和/或22057。具体而言，在发酵后进行一个或一个以上步骤，例如灭菌、 过滤、浓缩、冻干或其任何组合。较佳地，在发酵后（例如）通过加热进行灭菌，且可视需要 地进行过滤和浓缩。更佳地，可（例如）经由冻干来干燥发酵大豆萃取物，以获得呈粉末形 式的发酵大豆萃取物。在某一实施例中，本发明的发酵大豆萃取物是通过包含以下步骤的 方法来制得：(a)利用至少一种乳酸菌与至少一种酵母菌一起使水溶性大豆萃取物发酵， 以形成发酵液；(b)对该发酵液进行灭菌；（c)过滤经灭菌发酵液，以收集过滤液；和（d)浓 缩过滤液以形成浓缩的发酵大豆萃取物。在特定的实施例中，大豆与蒸馏水混合（例如，以 1 :1〇的比例），混合物于约l〇〇°C加热约30分钟后过滤。得到的大豆萃取水溶液在合适的 培养基以至少一乳酸菌和至少一酵母菌发酵，并于36-43°C培养45-50小时，将经发酵萃取 物灭菌、过滤及浓缩以得到浓缩形式的发酵大豆萃取物（例如，将过滤液95%的水去除）。 在某个实施例中，发酵大豆萃取物为I. 136g/ml和71. 49%水分、5. 15%灰分、0. 16%粗脂 肪、5. 45%粗蛋白质、0. 15%粗纤维及碳水化合物。也可含有数种维生素和矿物质：0. 004 毫克/100克维生素B1、0. 12毫克/100克维生素B2、2. 17毫克/100克铁、113. 55毫克/100 克钙及379. 19毫克/100克磷酸。本文所用的发酵大豆萃取物可如美国专利第6, 855, 350 号和第6, 733, 801号来制备，所述专利的每一者都以全文引用方式并入本文中。
[0033] 另外，绿茶萃取物、姜黄萃取物和葡萄籽萃取物是以涉及用水或乙醇萃取的一般 标准程序制成。螺旋藻可由收获螺旋藻后干燥，然后将其作成粉末或锭剂获得。此外，可由 一般液态发酵，然后干燥，浓缩和/或研磨成粉末得到的樟芝菌丝。这些成分可以从市场上 购买。
[0034] 根据本发明的部分具体实施例，如本文所述的组合物，包括发酵大豆萃取物、绿 茶萃取物、螺旋藻、姜黄萃取物、樟芝菌丝体和葡萄籽萃取物，且它们的重量比为12-30 :4 :1-2 :1-2 :1-2 :1-2,较佳为12-20 :4 :1-2 :1-2 :1-2 :1-2。根据本发明的特定具体实施例，发 酵大豆萃取物、绿茶萃取物、螺旋藻、姜黄萃取物、樟芝菌丝体和葡萄籽萃取物的重量比是 12 :4 :2 :1 :1 :1。根据本发明另一具体实施例，发酵大豆萃取物、绿茶萃取物、螺旋藻、姜黄 萃取物、樟芝菌丝体和葡萄籽萃取物的重量比是12 :4 :1 :1 :2 :1。根据上述的重量比，可依 不同情况适当地调整该组合物的各成分的重量比例。
[0035] 本发明组合物可以被制造为各类食品或药品。食品类的产品可利用常规赋形剂或 填料以任何常规技术制造，并且如需要与添加剂混合。另外，药物可利用治疗有效量的本发 明组合物和其医药上可接受的载剂以一般的药物技术或方法制造。本发明的组合物的给药 包括口服或注射剂给药，并且可以进一步包括医药上可接受的载剂、稀释剂和/或赋形剂。 上述载剂可以是溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂、抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。稀释剂 可以是抑菌性注射用水（BWFI)、磷酸盐缓冲液、林格溶液或葡萄糖溶液等。赋形剂可以是碳 酸钙、碳酸钠、磷酸钙、磷酸钠、乳糖、淀粉、明胶、藻酸、硬脂酸、硬脂酸镁等。
[0036] 在部分特定的具体实施例中，本发明组合物具有抑制大肠息肉增生和/或癌化的 作用。具体而言，如实施例中所示，本发明组合物可以抑制由1，2-二甲基肼（DMH)引发的 异常腺窝灶（ACF)，且还具有防止大肠息肉增生和/或癌化的作用。
[0037] 在部分特定的具体实施例中，本发明组合物具有增强化疗有效性的效果，其包括 延长癌症患者存活期，特别是无恶化存活期。如实施例中所示，接受本发明组合物及化疗的 受试者相较于接受化疗但未接受本发明组合物的受试者显示较长的存活期，特别是较长的 无恶化存活期。
[0038] 在部分特定的具体实施例中，本发明的组合物具有增加化疗顺从性的效果。如实 施例所示，接受本发明组合物及化疗的受试者相较于接受化疗但未接受本发明组合物的受 试者显示出显著较高的化疗顺从性。
[0039] 在部分特定的具体实施例中，本发明的组合物具有降低化疗引起副作用的效果。 如实施例所示，在癌症化疗过程中投予本发明组合物时，发现该组合物可降低化疗的副作 用，尤其是减少肾损伤和改善嗜中性白血球低下。
[0040] 此外，根据本发明，所述组合物如本文所述可作为抗发炎剂。具体而言，本发明的 组合物可有效地减少发炎细胞，如巨噬细胞中的前列腺素E2 (PGE2)，一氧化氮（NO)，肿瘤 坏死因子-a (TNF-a)和白细胞介素-6 (IL-6)的产生。
[0041] 本发明适用于治疗癌症，包括前列腺癌、乳腺癌、子宫癌、血液癌、卵巢癌、子宫内 膜癌、子宫颈癌、结肠直肠癌、睾丸癌、淋巴瘤、横纹肌肉瘤、神经母细胞瘤、胰腺癌、肺癌、脑 癌、皮肤癌、胃癌、口腔癌、肝癌、喉癌、胆癌、甲状腺癌、肝癌、肾癌及鼻咽癌。根据本发明的 一个具体实施例，所述患者是大肠癌患者。根据本发明的具体实施例，化疗使用药物包括 5_氟尿嘧啶，亚叶酸钙和双胺环己烷草酸钼。
[0042] 以下面实施例提供了用于示范而不是限制的目的，进一步说明本发明。本领域的 技术人员按目前揭露应理解所揭露的特定具体实施例可进行许多变化而仍得到类似的结 果而不脱离本发明的精神和范围。
[0043] 实例
[0044] 实施例1 :抑制1，2-二甲基肼（DMH)诱导形成的异常腺窝灶（ACF)
[0045] I. 1材料与方法
[0046] 动物研究是由国立台湾大学实验动物管理和使用委员会批准，所有动物都按照照 顾和使用实验动物的标准指引处理。约6周龄的F344雄性大鼠是购自国立台湾大学医学 院实验动物中心。
[0047] 将雄性F344大鼠随机依重量分组，每组8只大鼠。大鼠于适应后第一周喂食含重 量百分比17. 7%的蛋白质、64. 9%的碳水化合物及5. 2%的脂肪的哈伦AIN-76纯化粮嚿齿 动物饲料（Harlan AIN_76purified rodent diet，美国印第安纳州印第安纳波利斯哈伦实 验室）（哈伦AIN-76纯化粮卩齿齿动物饲料资料页，http://www. harlan. com/download, axd /1131a6el617348b9a99c8d2af933f796. pdf? d = 170481)。大鼠被关在不锈钢笼子里，可 自由取得食物和蒸馏水。动物室保持在23± 1°C，50± 10%湿度和12小时光照/黑暗周期。 食物摄入量和体重每周记录。
[0048] 本发明的组合物（MB-6)包括六种成分，即发酵大豆萃取物（以在美国专利号 6, 855, 350和6, 733, 801中所述的方法制备）、绿茶萃取物（Camellia sinensis 0?)、螺 旋藻（Arthrospiraplatensis)、姜黄萃取物（Curcuma longa L.)、樟芝菌丝体（Antrodia camphorata mycelia)及葡萄杆萃取物（Vitisvinifera)。表1显不于特定实施例中MB-6 的成分，其重量比为12 :4 :2 :1 :1 :1。
[0049] 表 1
[0050]
【权利要求】
1. 一种用于制造供化疗癌症患者使用的辅助治疗剂的组合物，其中该组合物包括发酵 大豆萃取物、绿茶萃取物、螺旋藻、姜黄萃取物、樟芝菌丝体和葡萄籽萃取物。
2. 如权利要求1所述的组合物，其中该发酵大豆萃取物是由水性大豆萃取物与至少一 种乳酸杆菌及视需要至少一种酵母菌发酵而制得。
3. 如权利要求1所述的组合物，其中该发酵大豆萃取物是通过包含以下步骤的方法而 制得：(a)以至少一种乳酸菌与至少一种酵母菌使水溶性大豆萃取物发酵，以形成发酵液； (b)对该发酵液进行灭菌；（c)过滤经灭菌的发酵液，以形成过滤液；和（d)浓缩过滤液，以 形成浓缩的发酵大豆萃取物。
4. 如权利要求1所述的组合物，其中该发酵大豆萃取物、绿茶萃取物、螺旋藻、姜黄萃 取物、樟芝菌丝体和葡萄籽萃取物是以重量比12-30 :4 :1-2 :1-2 :1-2 :1-2存在于该组合 物中。
5. 权利要求1-4任一项所述的组合物在制造供化疗癌症患者使用的辅助治疗剂中的 用途。
6. 如权利要求5所述的用途，其中该癌症是大肠癌。
7. 如权利要求5所述的用途，其中该化疗是以投予选自5-氟尿嘧啶、亚叶酸钙、双胺环 己烷草酸钼和其任意组合所组成群组的化疗药物施行。
8. 如权利要求5所述的用途，其中该组合物能够有效抑制大肠息肉增生或癌化、提高 化疗的效果、增加化疗顺从性或减少化疗引起的副作用。
9. 如权利要求5所述的用途，其中该辅助治疗剂可有效地延长患者的存活期，特别是 患者的无恶化存活期。
10. 权利要求1至4中任一项所述的组合物在制造抗发炎药剂中的用途，优选的，该组 合物能够有效降低前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮（NO)、肿瘤坏死因子-a (TNF-a)或白介 素-6(IL-6)的生成。
【文档编号】A61K36/9066GK104415298SQ201410455205
【公开日】2015年3月18日 申请日期:2014年9月9日 优先权日:2013年9月6日
【发明者】路孔明 申请人:中天生物科技股份有限公司