用于改善皮肤皱纹的化妆品组合物的制作方法

本发明涉及用于改善皮肤皱纹的化妆品组合物，所述组合物包含药草(中药材，medicinal herbs)的组合提取物(混合提取物，combined extract)。

背景技术：

皮肤皱纹的原因大致归类为自然老化和对UV辐射的暴露(即，光老化)。作为这两种原因的结果的皮肤皱纹形成的机制还未被确切理解。发现的与自然老化和光老化引起的皮肤变化相关的共同现象是由于作为真皮的主要结构蛋白质的胶原蛋白和弹性蛋白的减少和变形以及作为真皮的基底的透明质酸的减少所致的皮肤弹性的劣化。根据目前获得的研究结果，特别地，已知的是作为真皮的主要结构蛋白质的胶原蛋白和弹性蛋白的减少和变形直接涉及皮肤皱纹形成和皮肤弹性劣化。

胶原蛋白，胞外基质的一种主要成分，是皮肤成纤维细胞中产生的一种主要基质蛋白质。而且，作为一种占生物蛋白质总重量30％的重要蛋白质，胶原蛋白具有刚性的三螺旋结构。其还形成皮肤、筋腱、骨和牙齿的有机物质的大部分，特别富含于骨和皮肤中。

胶原蛋白的量随年龄和暴露于UV辐射所致的光老化而减少。已知该事实与皮肤皱纹的形成具有密切关系。此外，胶原蛋白在创伤愈合期起重要作用；通过促进受损表皮层中胶原蛋白的合成可以使创伤快速愈合而不留下疤痕。

过去，有许多将胶原蛋白和皮肤外用组合物(如化妆品或软膏)组合使用的商业产品，以利用胶原蛋白的皮肤保湿和创伤愈合作用。然而，这些产品仅作为胶原蛋白本身被施用到皮肤表面并且关于属于大分子类的胶原蛋白的经皮吸收具有困难，因此在皮肤保湿或创伤愈合方面几乎没有作用。因此，不认为这样的产品具有改善皮肤功能或愈合创伤的功效。

为了解决该问题，对用于促进胶原蛋白合成的物质存在日益增长的兴趣，已知的促进胶原蛋白合成的物质可以包括，例如，维生素C、视黄酸、来源于动物胎盘的蛋白质、桦木酸、绿藻提取物等。

然而，这些物质由于安全性问题如当施用于皮肤时的刺激和发红而在其用量方面有限制并且效果不显著，因此它们不被预期在改善皮肤功能或愈合创伤方面起作用。因此，迫切地需要开发比现有的用于改善皮肤皱纹的组合物具有更高的安全性和更好的效果的新的用于改善皮肤皱纹的组合物。

技术实现要素：

技术问题

本发明的一个目的因此是提供在改善皮肤皱纹和增加皮肤弹性方面具有效果的化妆品组合物。

本发明的另一个目的是提供用于改善皮肤皱纹的方法，所述方法包括施用有效量的蒲公英(Taraxaci Herba)、大黄(Rhei Rhizoma)、枇杷叶(Eriobotryae Folium)和白蔹(Ampelopsis Radix)的组合提取物。

本发明进一步的另一个目的是提供蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物在制备用于改善皮肤皱纹的化妆品组合物中的用途。

技术方案

在尝试开发具有改善皮肤皱纹和增加皮肤弹性的效果的化妆品组合物中，本发明的发明人发现以下事实，即蒲公英(Taraxaci Herba)、大黄(Rhei Rhizoma)、枇杷叶(Eriobotryae Folium)和白蔹(Ampelopsis Radix)的组合提取物在改善皮肤皱纹和增加皮肤弹性方面是高度有效的，从而完成了本发明。

本发明提供蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物。

利用通过混合四种药草的协同作用，根据本发明的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物与个体药草相比细胞毒性更低并且在改善皮肤皱纹和增加皮肤弹性方面更有效。

在本发明中，蒲公英(Taraxaci Herba)是指广泛分布于韩国、中国等的菊科(Compositae)中的蒲公英(Taraxacum platycarpum H.)或其他同属植物的整株植物。

在本发明中，大黄(Rhei Rhizoma)是广泛分布于韩国、中国等的蓼科(Polygonaceae)中的物种掌叶大黄(Rheum palmatum L.)、唐古特大黄(Rheum tanguticum M)或药用大黄(Rheum officinale B.)的干燥根茎。

在本发明中，枇杷叶(Eriobotryae Folium)是指广泛分布于韩国、中国、日本等的蔷薇科(Rosaceae)中的Eriobotryajaponica L.的干燥叶子。

在本发明中，白蔹(Ampelopsis Radix)是广泛分布于中国、韩国等的葡萄科(Vitaceae)中的作为攀缘茎植物属的Ampelopsis japonica Makino的干燥根。

这些可以容易地以低成本从国内或国外获得的药草可以简单地购买或手工收割。

在本发明中，蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物可以是单一药草的混合物的提取物或单一药草提取物的混合物。优选地，本发明的组合提取物作为从蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的药草混合物获得的提取物使用。在本发明中，组合提取物可以以浓缩液或冻干粉的形式获得。

基于蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的总重量，本发明的组合提取物可以包含30至50重量％的蒲公英、15至30重量％的大黄、15至30重量％的枇杷叶和10至20重量％的白蔹，优选地35至50重量％的蒲公英、17至30重量％的大黄、17至30重量％的枇杷叶和15至20重量％的白蔹。

更优选地，蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹在本发明的组合提取物中的重量比可以为4∶2∶2∶1.5(基于重量比)。

与单一药草提取物或者两种或更多种药草的组合提取物的每一个相比，以上面限定的重量百分比含有全部四种药草的本发明的组合提取物在改善皮肤皱纹和增加皮肤弹性方面，特别是在抑制MMP-1表达和促进1型原胶原(procollagen)合成方面显示显著优异效果，因此导致在改善皮肤皱纹和增加皮肤弹性方面更高的活性。

在本发明中，蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物可以通过热水提取、浸泡提取、回流提取、超声提取等制备。提取的次数优选为1至5次。提取溶剂的实例包括，但不限于，水和C₁-C₄醇或其混合物，优选水或乙醇水溶液。提取过程中使用的提取溶剂的量为蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的总重量的2至15倍。为了获得热水(水)提取物，水浴回流提取可以在100至110℃重复一至四次达2至24小时，优选地2至10小时。

本发明还提供通过进一步分离蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物获得的来自蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的级分(fraction)。级分分离可以使用本领域技术人员已知的分离方法进行。优选地，将四种药草蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹悬浮在水中，然后用溶剂如己烷、氯仿、乙酸乙酯、丁醇等提取，得到蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的可溶性级分。

本发明还提供用于改善皮肤皱纹的化妆品组合物，其包含蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物。

根据本发明的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物由于使用了安全的天然成分而在应用于皮肤时不导致副作用并且在增加皮肤弹性和改善皮肤皱纹方面显示优异效果，因为其证明了在抑制MMP-1表达和增加1型原胶原合成方面是有效的，由此显示作为用于改善皮肤皱纹的化妆品组合物的优异效果。

与单一药草提取物者两种或更多种药草的组合提取物的每一个相比，根据本发明的包含蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的用于改善皮肤皱纹的化妆品组合物，由于通过组合药草蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组分的协同作用，而在改善皮肤皱纹方面显示优异效果。换言之，根据本发明的包含蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的用于改善皮肤皱纹的新型化妆品组合物在抑制胶原酶(被称为MMP-1)的表达和增加胶原蛋白前体(被称为1型原胶原)的生物合成方面都显著有效，导致改善皮肤皱纹的优异效果，而使用各个个体药草的组合物不能同时抑制MMP-1表达和增加1型原胶原合成。特别地，蒲公英由于其高的细胞毒性而被认为在人体中应以低浓度使用，但是本发明的组合的组合物通过使用药草的组合而对细胞毒性的问题提供了解决方案并且与各个单一提取物相比在抑制MMP-1表达和增加1型原胶原合成方面显示显著优异的效果。

在本发明中，蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物可以以粉末或液体的形式以基于化妆品组合物的总重量的0.001至10重量％，优选地0.01至5重量％的量添加至化妆品组合物中。

除了作为活性成分的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物以外，本发明的化妆品组合物的组分还可以包括化妆品组合物中的常用成分，其包括，例如，常规佐剂(例如，抗氧化剂、稳定剂、增溶剂、维生素、色素、着色剂和香料)和载体。

本发明的化妆品组合物可以被配制成本领域中典型制备的任意类型的制剂形式，其实例包括，但不限于，溶液、混悬剂、乳液、糊剂、凝胶、霜剂、洗剂、粉剂、肥皂、含表面活性剂的清洁剂、油、粉底、粉底乳(emulsion foundation)、粉底蜡(wax foundation)、喷剂等。更特别地，本发明的化妆品组合物可以被配制成皮肤软化剂、面部洗液(面霜，face lotions)、营养霜、按摩霜、精华液、面膜(pack)、眼霜、洁面霜、洁面泡沫(洗面奶，cleansing foam)、洁面水(卸妆水，cleansing water)、面膜、喷剂(spray)或粉剂的制剂形式。

当本发明的制剂形式为糊剂、霜剂或凝胶时，动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮(有机硅，silicone)、斑脱土、二氧化硅、滑石或氧化锌等可以被用作载体组分。

当本发明的制剂形式为粉剂或喷剂时，乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉末可以被用作载体组分。特别地，如果其为喷剂，则其可以另外地含有推进剂，如氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚。

当本发明的制剂形式为溶液或乳液时，溶剂、增溶剂或乳化剂可以被用作载体组分，其实例可以包括水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、丁二醇、1，3-丁二醇油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、丙三醇、甘油、脂肪族酯、苯氧基乙醇、三乙醇胺、聚乙二醇、蜡、聚山梨醇酯60、脱水山梨醇倍半油酸酯、石蜡、脱水山梨醇硬脂酸酯、亲脂性单硬脂酸甘油酯、硬脂酸、硬脂酸甘油酯/PEG-400硬脂酸酯、羧基聚合物、cytosterol、聚甘油2-油酸酯、神经酰胺、胆甾醇、steareth-4、磷酸二鲸蜡酯、澳洲胡桃油(macadamia oil)、羧基乙烯基聚合物、黄原胶或脱水山梨醇的脂肪族酯等。

当本发明的制剂形式为混悬剂时，液体稀释剂(例如，水、乙醇、丁二醇或丙二醇)、助悬剂(例如、乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯或聚氧乙烯脱水山梨醇酯)、微晶纤维素、羟乙基纤维素、透明质酸钠、苯氧基乙醇、偏铝酸(aluminum metahydroxide)、班脱土、琼脂或黄蓍胶等可以被用作载体组分。

当本发明的制剂形式为含表面活性剂的清洁剂时，脂肪醇硫酸酯、脂肪醇醚硫酸酯、单酯磺基琥珀酸酯(monoester sulfosuccinate)、羟乙基磺酸酯(isethionate)、咪唑鎓衍生物、牛磺酸甲酯、肌氨酸酯、脂肪族酰胺醚硫酸酯(aliphatic amide ether sulfate)、烷基酰胺甜菜碱、脂肪醇、脂肪族甘油酯、脂肪族二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物或乙氧基化甘油脂肪酸酯等可以被用作载体成分。

本发明还提供用于改善皮肤皱纹的方法，所述方法包括施用有效量的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物。

当在本文中使用时，术语“有效量”是指用于防止或减轻皮肤皱纹的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的量。

根据本发明的用于改善皮肤皱纹的方法包括将包含蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的组合物与皮肤接触。当在本文中使用时，皮肤包括，但不限于，面部、颈部、手臂以及脚和腿的皮肤。在皮肤皱纹的改善中，蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的量可以根据对象的年龄、皱纹形成的进程或皮肤的靶区域而变化。足够的组合提取物的量可以由本领域技术人员考虑这些因素而确定。此外，蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物可以与有效量的另外的有助于改善皮肤皱纹的活性剂一起施用。

根据本发明的用于改善皮肤皱纹的方法还可以包括鉴别需要改善皮肤皱纹的靶皮肤区域。鉴别过程可以由用户或第三方进行，所述第三方包括，例如，皮肤科医生、美容师或另一个人。

本发明还提供蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物在制备用于改善皮肤皱纹的化妆品组合物中的用途。用于制备化妆品组合物的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物可以与可商购的佐剂、稀释剂等组合，或者可以与另一种活性剂组合使用以产生协同作用。当在本文中使用时，另一种活性剂的实例可以包括UV阻断剂(UV blocks)、保湿剂、去角质剂(exfoliators)、软化剂、增白剂等。

有利效果

根据本发明的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物由于使用安全的天然成分而不具有副作用并且证明了在抑制MMP-1表达和增加1型原胶原合成，由此增加皮肤弹性和改善皮肤皱纹方面是有效的。

附图简述

图1是显示在施用蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物后1型原胶原水平的变化的图。

图2是显示在施用蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物后MMP-1激活的变化的图。

实施本发明的最佳方式

下文中，将参考实施例和试验例来进一步详细地描述本发明的公开内容，给出所述实施例和试验例用于理解本发明的公开内容并且不意在限制本发明的权利要求的范围。

实施例1：制备蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物

为了制备蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物，从Omniherb Inc.购买药草；蒲公英(来源于韩国)，大黄(来源于中国)，枇杷叶(来源于中国)，白蔹(来源于中国)。在使用前，将各个药草用水洗涤，然后阴干。

将40g蒲公英、20g大黄、20g枇杷叶和15g白蔹放入1L蒸馏水中。在100℃使所得的混合物通过回流管进行回流提取4小时，并且在真空下浓缩，得到14g的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物。

对于个体药草提取物，将100g各个药草与1L蒸馏水混合。在100℃使由此获得的混合物各自通过回流管进行回流提取达4小时，并且在真空下浓缩，分别得到20g蒲公英提取物、28g大黄提取物、12g枇杷叶提取物和16g白蔹提取物。

试验例2：对蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物用于促进1型原胶原的生物合成的效果的评价

测试程序进行如下以评价蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物促进1型原胶原的生物合成的效果。

将人成纤维细胞在DMEM溶液(10％胎牛血清，1％抗生素)中培养并以10⁴个细胞/孔的密度接种到24-孔板中。在确认细胞贴壁后，将DMEM溶液弃去。然后，将0.5mL的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物添加到各个孔中，其中将所述组合提取物制成不同浓度(即，50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL)，根据毒性测试，在这些浓度下没有观察到毒性。将人成纤维细胞在用5％CO₂吹扫的培养箱中在37℃培养48小时，以测量培养基中的皱纹形成因子(即，1型原胶原和基质金属蛋白酶-1)的细胞水平。

结果显示在图1中。

如图1中所示，将人成纤维细胞用不同浓度(0至200μg/mL)的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物处理48小时以评价培养基中的抗皱纹效力。作为结果，利用浓度分别为50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL的组合提取物，被称为1型原胶原的胶原蛋白前体的水平显著增加至15.6％(p＜0.05)、29.0％(p＜0.01)和34.4％(p＜0.001)。

即，本发明克服了由于个体药草的细胞毒性所致的在用于产生增加1型原胶原的效果的蒲公英、大黄、枇杷叶或白蔹的个体药草提取物的处理量方面的限制，并且与个体药草提取物相比显示显著增加的增加1型原胶原的效果。

实施例3：对蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物抑制胶原酶(MMP-1)的生物合成的效果的评价

测试程序进行如下以评价蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物抑制胶原酶(MMP-1)的生物合成的效果。

将人成纤维细胞在DMEM溶液(10％胎牛血清，1％抗生素)中培养并以10⁴个细胞/孔的密度接种到24-孔板中。在确认细胞贴壁后，将DMEM溶液弃去。然后，将0.5mL的蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物添加到各个孔中，其中将所述组合提取物制成不同浓度。将人成纤维细胞在用5％CO₂吹扫的培养箱中在37℃培养48小时以测量培养基中的MMP-1的细胞水平。

结果显示在图2中。

如图2中所示，利用浓度分别为50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL的蒲公英、大黄、枇杷叶或白蔹的组合提取物处理的试验组中，胶原酶(MMP-1)的水平以依赖于浓度的方式显著性地(p＜0.001)降低至45.0％、52.8％和58.7％。

即，本发明克服了由于个体药草的细胞毒性所致的关于用于抑制MMP-1的生物合成的有效量的在蒲公英、大黄、枇杷叶或白蔹的个体药草提取物的处理量方面的限制，并且与个体药草提取物相比显示显著增加的抑制MMP-1的细胞水平的效果。

在改善皮肤皱纹中尤其需要抑制MMP-1和增加1型原胶原生物合成。一般的药草要么在抑制MMP-1表达方面有效要么在促进1型原胶原生物合成方面有效，并且由于其自身的细胞毒性而在人体内会产生问题。相反，根据本发明的蒲公英、大黄、枇杷叶或白蔹的组合提取物克服了关于个体药草细胞毒性的问题并且显示更强的同时抑制MMP-1和促进1型原胶原生物合成的效果，因此其作为用于改善皮肤皱纹的化妆品组合物可以产生显著效果。

制剂例1：制备含有蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的面部洗液

根据如以下给出的表1的组成，进行程序以制备1kg的含有蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物(实施例1)的面部洗液。

[表1]含有蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的面部洗液的组成

制剂例2：制备含有蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的营养洗液

根据如以下给出的表2的组成，进行程序以制备1 kg的含有蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物(实施例1)的营养洗液。

[表2]含有蒲公英、大黄、枇杷叶和白蔹的组合提取物的营养洗液