本发明涉及生殖炎症用药
技术领域：
，具体是涉及一种卵黄生物蛋白泡沫填塞剂及其制备方法。
背景技术：
：生殖炎症是最常见的女性生殖器官炎症，为妇科门诊常见的疾病。各个年龄阶段都可发病。主要由解尿和人形支原体，葡萄球菌，链球菌，大肠杆菌，阴道加特纳菌，淋球菌，白色念球菌等所引起。正常健康妇女，由于解剖学及生物化学特点，阴道对病原体的侵入有自然防御功能；当阴道的自然防御功能遭到破坏，则病原体易于侵入，导致阴道炎症。目前传统复合洗液的抑制病原体(细菌、霉菌、支原体)成分主要以中药、化药、抗生素为主。传统药物在治疗同时会产生不同程度的副作用，难以选择性杀灭病原菌，破坏生殖系统的生理环境，病原体易产生耐药性。因此，需要开发出一种对人体无刺激、无任何副作用，不产生依赖性及耐药性，无过敏性，安全高效的新型药。技术实现要素：本发明解决的技术问题是，提供一种卵黄生物蛋白泡沫填塞剂及其制备方法，卵黄生物蛋白泡沫填塞剂能够靶向灭活病原体，对人体无刺激、无任何副作用，不产生依赖性及耐药性，无过敏性，安全高效。本发明的技术方案是：一种卵黄生物蛋白泡沫填塞剂，按质量百分比计，主要成分如下：8-20％多联卵黄蛋白、0.1-0.3％防腐剂、40-50％基质、余量为发泡剂。进一步地，所述多联卵黄蛋白是可以与多种病原体相结合的卵黄生物蛋白，所述病原体包括但不限于解脲支原体、人型支原体、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、阴道加特纳菌、淋球菌、白色念球菌。更进一步地，所述多联卵黄蛋白的制备方法为：(1)用培养基分别培养解脲支原体、人型支原体、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、阴道加特纳菌、淋球菌、白色念球菌，得到的菌体分别用甲醛灭活，乳化制成油乳剂灭活菌苗；(2)将未经人工免疫，已开产且产蛋正常的健康母鸡分别用上述步骤(1)得到的灭活菌苗进行免疫，取母鸡生产的鸡蛋并分离得到卵黄液；(3)将步骤(2)得到的蛋黄液与灭菌蒸馏水按1:1-5的体积比混合，350-500rpm振荡15-30min，再按1:2的体积比加入灭菌蒸馏水，600rpm振荡5-10min，调节pH至5.1，4℃静置10小时，然后6000rpm离心10分钟，收集上清液；(4)将等体积饱和硫酸铵水溶液加入步骤(3)得到的上清液中，4℃静置12小时，8000rpm离心20分钟，取沉淀；按1:6的质量比用蒸馏水溶解所得到的沉淀，得到溶解液，然后加入相对于所得溶解液1.3‰的正辛酸，混匀；(5)按1:2的体积比将饱和硫酸铵水溶液与步骤(4)得到溶解液混匀，4℃静置12小时，8000rpm离心20分钟，取沉淀，按1:4的质量比用无菌、pH7.2、0.01M的PBS缓冲液溶解，得到的溶液用100Ku超滤膜包进行除盐浓缩，得到浓缩液；(6)步骤(5)得到的浓缩液中加入0.05-0.1％的甲醛，然后在密封状态下室温静置3-5小时，然后用微孔滤膜过滤，得到滤液，即为多联卵黄蛋白。进一步地，所述防腐剂选自对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丁酯、山梨酸钾、苯甲酸钠、对羟基苯甲酸乙酯中的任意一种或多种。进一步地，所述发泡剂为K12发泡剂或AES发泡剂。一种卵黄生物蛋白泡沫填塞剂的制备方法，包括以下步骤：(1)基质配制：按3:4:6:100:1的重量比取卡波姆、甘油、丙二醇、纯化水、三乙醇胺，将卡波姆置入真空搅拌锅内，加入甘油、丙二醇搅拌，加入纯化水溶胀30小时，加入三乙醇胺搅拌，制备成透明凝胶，得到基质，待用；(2)按所述配比在基质中加入多联卵黄蛋白、防腐剂、发泡剂搅拌均质，装入一次性推注器内，外加PVC铝箔密封，包装即成。与现有技术相比，本发明的有益效体现在：(1)本发明主要以具有针对性抑制病原菌的卵黄生物蛋白为主，能够与相应病原体相结合，从而有效地抑制、清除病原体，阻断生殖道细菌、霉菌、支原体感染，预防阴道感染发生。(2)本发明针对性的抑制致病菌，而不影响有益菌，维护生殖系统的健康生理环境，减轻阴道炎性反应、减少阴道分泌物量，有效改善阴道清洁度、降低阴道pH值，不进入血、局部使用安全性更高。(3)本发明的卵黄生物蛋白是与人体高度亲和的蛋白质，对人体无刺激、无任何副作用，不产生依赖性及耐药性，无过敏性，安全高效。(4)本发明可用于各种阴道炎的临床治疗性产品，靶向灭活病原体，对绝大多数的细菌，霉菌，支原体均有效。具体实施方式实施例1：一种卵黄生物蛋白泡沫填塞剂，按质量百分比计，主要成分如下：8％多联卵黄蛋白、0.1％防腐剂、40％基质、余量为发泡剂。其中，所述多联卵黄蛋白是可以与多种病原体相结合的卵黄生物蛋白，所述病原体包括但不限于解脲支原体、人型支原体、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、阴道加特纳菌、淋球菌、白色念球菌。所述防腐剂为对羟基苯甲酸乙酯。所述发泡剂为K12发泡剂。所述多联卵黄蛋白的制备方法为：(1)用培养基分别培养解脲支原体、人型支原体、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、阴道加特纳菌、淋球菌、白色念球菌，得到的菌体分别用甲醛灭活，乳化制成油乳剂灭活菌苗；(2)将未经人工免疫，已开产且产蛋正常的健康母鸡分别用上述步骤(1)得到的灭活菌苗进行免疫，取母鸡生产的鸡蛋并分离得到卵黄液；(3)将步骤(2)得到的蛋黄液与灭菌蒸馏水按1:1的体积比混合，350rpm振荡15min，再按1:2的体积比加入灭菌蒸馏水，600rpm振荡5min，调节pH至5.1，4℃静置10小时，然后6000rpm离心10分钟，收集上清液；(4)将等体积饱和硫酸铵水溶液加入步骤(3)得到的上清液中，4℃静置12小时，8000rpm离心20分钟，取沉淀；按1:6的质量比用蒸馏水溶解所得到的沉淀，得到溶解液，然后加入相对于所得溶解液1.3‰的正辛酸，混匀；(5)按1:2的体积比将饱和硫酸铵水溶液与步骤(4)得到溶解液混匀，4℃静置12小时，8000rpm离心20分钟，取沉淀，按1:4的质量比用无菌、pH7.2、0.01M的PBS缓冲液溶解，得到的溶液用100Ku超滤膜包进行除盐浓缩，得到浓缩液；(6)步骤(5)得到的浓缩液中加入0.05％的甲醛，然后在密封状态下室温静置3-5小时，然后用微孔滤膜过滤，得到滤液，即为多联卵黄蛋白。该卵黄生物蛋白泡沫填塞剂的制备方法为：(1)基质配制：按3:4:6:100:1的重量比取卡波姆、甘油、丙二醇、纯化水、三乙醇胺，将卡波姆置入真空搅拌锅内，加入甘油、丙二醇搅拌，加入纯化水溶胀30小时，加入三乙醇胺搅拌，制备成透明凝胶，得到基质，待用；(2)按所述配比在基质中加入多联卵黄蛋白、防腐剂、发泡剂搅拌均质，装入一次性推注器内，外加PVC铝箔密封，包装即成。实施例2：一种卵黄生物蛋白泡沫填塞剂，按质量百分比计，主要成分如下：14％多联卵黄蛋白、0.2％防腐剂、45％基质、余量为发泡剂。其中，所述多联卵黄蛋白是可以与多种病原体相结合的卵黄生物蛋白，所述病原体包括但不限于解脲支原体、人型支原体、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、阴道加特纳菌、淋球菌、白色念球菌。所述防腐剂为对羟基苯甲酸丁酯。所述发泡剂为AES发泡剂。所述多联卵黄蛋白的制备方法为：(1)用培养基分别培养解脲支原体、人型支原体、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、阴道加特纳菌、淋球菌、白色念球菌，得到的菌体分别用甲醛灭活，乳化制成油乳剂灭活菌苗；(2)将未经人工免疫，已开产且产蛋正常的健康母鸡分别用上述步骤(1)得到的灭活菌苗进行免疫，取母鸡生产的鸡蛋并分离得到卵黄液；(3)将步骤(2)得到的蛋黄液与灭菌蒸馏水按1:1-5的体积比混合，425rpm振荡22.5min，再按1:2的体积比加入灭菌蒸馏水，600rpm振荡7.5min，调节pH至5.1，4℃静置10小时，然后6000rpm离心10分钟，收集上清液；(4)将等体积饱和硫酸铵水溶液加入步骤(3)得到的上清液中，4℃静置12小时，8000rpm离心20分钟，取沉淀；按1:6的质量比用蒸馏水溶解所得到的沉淀，得到溶解液，然后加入相对于所得溶解液1.3‰的正辛酸，混匀；(5)按1:2的体积比将饱和硫酸铵水溶液与步骤(4)得到溶解液混匀，4℃静置12小时，8000rpm离心20分钟，取沉淀，按1:4的质量比用无菌、pH7.2、0.01M的PBS缓冲液溶解，得到的溶液用100Ku超滤膜包进行除盐浓缩，得到浓缩液；(6)步骤(5)得到的浓缩液中加入0.075％的甲醛，然后在密封状态下室温静置4小时，然后用微孔滤膜过滤，得到滤液，即为多联卵黄蛋白。该卵黄生物蛋白泡沫填塞剂的制备方法为：(1)基质配制：按3:4:6:100:1的重量比取卡波姆、甘油、丙二醇、纯化水、三乙醇胺，将卡波姆置入真空搅拌锅内，加入甘油、丙二醇搅拌，加入纯化水溶胀30小时，加入三乙醇胺搅拌，制备成透明凝胶，得到基质，待用；(2)按所述配比在基质中加入多联卵黄蛋白、防腐剂、发泡剂搅拌均质，装入一次性推注器内，外加PVC铝箔密封，包装即成。实施例3：一种卵黄生物蛋白泡沫填塞剂，按质量百分比计，主要成分如下：20％多联卵黄蛋白、0.3％防腐剂、50％基质、余量为发泡剂。其中，所述多联卵黄蛋白是可以与多种病原体相结合的卵黄生物蛋白，所述病原体包括但不限于解脲支原体、人型支原体、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、阴道加特纳菌、淋球菌、白色念球菌。所述防腐剂为山梨酸钾。所述发泡剂为K12发泡剂。所述多联卵黄蛋白的制备方法为：(1)用培养基分别培养解脲支原体、人型支原体、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、阴道加特纳菌、淋球菌、白色念球菌，得到的菌体分别用甲醛灭活，乳化制成油乳剂灭活菌苗；(2)将未经人工免疫，已开产且产蛋正常的健康母鸡分别用上述步骤(1)得到的灭活菌苗进行免疫，取母鸡生产的鸡蛋并分离得到卵黄液；(3)将步骤(2)得到的蛋黄液与灭菌蒸馏水按1:5的体积比混合，500rpm振荡30min，再按1:2的体积比加入灭菌蒸馏水，600rpm振荡10min，调节pH至5.1，4℃静置10小时，然后6000rpm离心10分钟，收集上清液；(4)将等体积饱和硫酸铵水溶液加入步骤(3)得到的上清液中，4℃静置12小时，8000rpm离心20分钟，取沉淀；按1:6的质量比用蒸馏水溶解所得到的沉淀，得到溶解液，然后加入相对于所得溶解液1.3‰的正辛酸，混匀；(5)按1:2的体积比将饱和硫酸铵水溶液与步骤(4)得到溶解液混匀，4℃静置12小时，8000rpm离心20分钟，取沉淀，按1:4的质量比用无菌、pH7.2、0.01M的PBS缓冲液溶解，得到的溶液用100Ku超滤膜包进行除盐浓缩，得到浓缩液；(6)步骤(5)得到的浓缩液中加入0.1％的甲醛，然后在密封状态下室温静置5小时，然后用微孔滤膜过滤，得到滤液，即为多联卵黄蛋白。该卵黄生物蛋白泡沫填塞剂的制备方法为：(1)基质配制：按3:4:6:100:1的重量比取卡波姆、甘油、丙二醇、纯化水、三乙醇胺，将卡波姆置入真空搅拌锅内，加入甘油、丙二醇搅拌，加入纯化水溶胀30小时，加入三乙醇胺搅拌，制备成透明凝胶，得到基质，待用；(2)按所述配比在基质中加入多联卵黄蛋白、防腐剂、发泡剂搅拌均质，装入一次性推注器内，外加PVC铝箔密封，包装即成。本发明卵黄生物蛋白泡沫填塞剂治疗生殖炎症实验：1、治疗对象：选取细菌性阴道炎、霉菌性阴道炎以及支原体阴道炎患者共200例，临床表现为：阴道分泌物增多，阴道异味，外阴瘙痒，尿频，尿痛及性交痛，白带有血等症状。随机平分为2组，即实验组和对照组，每组100人。2、治疗方法：实验组采用本发明实施例2制备的卵黄生物蛋白泡沫填塞剂进行治疗，治疗方法为每月在非经期连续使用5-10天，连续使用两个月；对照组采用硝夫太尔制霉素阴道软胶囊治疗，按说明书使用方法治疗，连续使用两个月。3、疗效判断标准：显效是指相关的症状消失；有效是指被治疗对象感觉症状减轻；无效是指被治疗对象对治疗效果感觉不明显。4、统计结果见表1：表1-治疗结果统计组别显效/人有效/人无效/人有效率/％实验组87130100对照组523216845、结论：本发明卵黄生物蛋白泡沫填塞剂对各种细菌、霉菌、支原体引起的阴道感染均有效，能够阻断生殖道细菌、霉菌、支原体感染，改善阴道微环境、减轻阴道炎性反应、减少阴道分泌物量，用于各类阴道炎症引起的阴道异味、瘙痒，效果显著。以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页1 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