技术领域
本发明属于中药技术/药物应用领域，具体涉及地鳖酶解提取物在缓解肉鸡氧化应
激状态中的应用。
背景技术：
随着规模化集约化饲养方式的发展，应激日渐成为影响养殖业经济效益的重要因
素。动物生产中氧化应激引起采食量下降、生长速度降低、畜产品品质下降、种畜繁
殖能力衰退并伴随代谢性疾病的发生，给畜牧业带来很大的经济损失。如何预防和减
小氧化应激给动物机体带来的损害，生产上除了调整日粮结构、改善饲养环境之外，
最主要的方法是通过在日粮中添加抗氧化剂来进行干预。高效抗氧化剂的开发和抗氧
化机制的研究一直是人们关注的焦点。中药和天然抗氧化剂以其独特的疗效、较低的
毒性、高效的作用正在不断兴起。
地鳖为我国传统活血化瘀类中药，其主要成分有蛋白质类、脂肪酸类、生物碱类、
糖类化合物以及脂溶性维生素等。研究表明，地鳖虫提取物具有良好的抗肿瘤、抗氧
化和增强免疫功能的作用，但以全虫入药存在用药剂量大、易产生其他毒副作用等弊
病。
技术实现要素：
本发明的一个目的是提供地鳖多肽或地鳖酶解提取物的新用途。
本发明提供了地鳖多肽或地鳖酶解提取物在缓解动物氧化应激状态中的应用。
本发明还提供了地鳖多肽或地鳖酶解提取物在如下(1)-(7)中至少一种中的应
用：
(1)改善动物在氧化应激状态下的生长性能；
(2)降低动物血清在氧化应激状态下的皮质酮含量；
(3)提高动物在氧化应激状态下的肉品质；
(4)降低动物在氧化应激状态下的肝脏指数；
(5)提高动物在氧化应激状态下的胰腺指数和/或脾脏指数和/或法氏囊指数和/
或胸腺指数；
(6)提高动物在氧化应激状态下的抗氧化功能；
(7)预防和/或降低氧化应激给动物机体带来的损害。
上述应用中，
所述地鳖酶解提取物是用蛋白酶酶解地鳖后得到的提取物；
所述蛋白酶为木瓜蛋白酶。
上述应用中，所述用蛋白酶酶解地鳖包括如下步骤：将地鳖粉水溶液与蛋白酶混
匀，进行酶解反应，得到地鳖酶解提取物；所述地鳖粉水溶液与所述蛋白酶的料酶比
为100g:1g；所述酶解反应条件为55℃水浴4h后再置于100℃沸水中水浴10min；所
述木瓜蛋白酶的活力为500U/mg。其中，1个酶活力单位是指在特定条件(25℃，其
它为最适条件)下，在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量，或是转化底物中1微摩
尔的有关基团的酶量。
上述应用中，所述提高动物在氧化应激状态下的生长性能是通过降低动物的料重
比体现的；
所述提高动物在氧化应激状态下的肉品质是通过降低肉色亮度值和/或降低滴水
损失体现的；
所述提高动物在氧化应激状态下的抗氧化功能是通过如下A1)或A2)体现的：
A1)提高动物肝脏和/或血清和/或胸肌中SOD活性和/或CAT活性和/或GSH-Px
活性；
A2)降低动物肝脏和/或血清和/或胸肌中MDA含量。
本发明的另一个目的是提供一种缓解动物氧化应激状态的产品。
本发明提供的缓解动物氧化应激状态的产品的活性成分为上述地鳖多肽或地鳖
酶解提取物。
上述产品中，
所述缓解动物氧化应激状态体现在如下(1)-(7)中至少一种：
(1)改善动物在氧化应激状态下的生长性能；
(2)降低动物血清在氧化应激状态下的皮质酮含量；
(3)提高动物在氧化应激状态下的肉品质；
(4)降低动物在氧化应激状态下的肝脏指数；
(5)提高动物在氧化应激状态下的胰腺指数和/或脾脏指数和/或法氏囊指数和/
或胸腺指数；
(6)提高动物在氧化应激状态下的抗氧化功能；
(7)预防和/或降低氧化应激给动物机体带来的损害。
上述产品中，
所述提高动物在氧化应激状态下的生长性能是通过降低动物的料重比体现的；
所述提高动物在氧化应激状态下的肉品质是通过降低肉色亮度值和/或降低滴水
损失体现的；
所述提高动物在氧化应激状态下的抗氧化功能是通过如下C1)或C2)体现的：
C1)提高动物肝脏和/或血清和/或胸肌中SOD活性和/或CAT活性和/或GSH-Px
活性；
C2)降低动物肝脏和/或血清和/或胸肌中MDA含量。
本发明还有一个目的是提供一种提高动物在氧化应激状态下的生长性能和/或肉
品质和/或抗氧化功能的方法。
本发明提供的提高动物在氧化应激状态下的生长性能和/或肉品质和/或抗氧化功
能的方法包括如下步骤：用上述地鳖多肽或地鳖酶解提取物饲喂动物。
上述产品或上述方法在动物育种中的应用也属于本发明的保护范围。
上述产品或上述方法在选育氧化应激状态下生长性能高和/或肉品质好和/或抗氧
化功能强的动物中的应用也属于本发明的保护范围。
上述应用或上述产品或上述方法中，所述动物为肉鸡。
本发明通过在肉鸡饮水中添加地鳖酶解提取物，提高了机体氧化应激状态下抗氧
化功能，从而提高肉鸡生产性能及肉品质。
附图说明
图1为地鳖酶解提取物对氧化应激状态下肉鸡生产性能的影响。与正常对照组相
比，**P<0.01；与模型组相比，▲▲P<0.01，▲P<0.05。
图2为地鳖酶解提取物对氧化应激状态下肉鸡血清皮质酮含量的影响。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中的氢化可的松购自山西科龙兽药有限公司，
下述实施例中的鸡皮质酮ELISA检测试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘
肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和总蛋白定量试剂盒均购自南京建成
生物科技有限公司。
下述实施例中的木瓜蛋白酶购自北京中生瑞泰科技有限公司，货号9001-73-4。
实施例1、地鳖酶解提取物在缓解肉鸡氧化应激状态中的应用
一、地鳖酶解提取物的制备
1、将经过沸水煮沸处死的地鳖虫置于电热鼓风干燥箱内，50℃干燥，粉碎，得到
地鳖粉。
2、将地鳖粉和蒸馏水按质量比为1：15的比例混匀，得到溶液A；根据100:1的
料酶比例(g/g)将溶液A与木瓜蛋白酶(500U/mg)混匀，调节pH为6.0，得到溶液
B。
3、将溶液B置于55℃水浴锅内，水浴4h后再置于100℃沸水中，10min后终止
酶解反应，然后10000r/min离心15min，吸取上清，即得到地鳖酶解提取物。并采用
双缩脲法测得地鳖酶解提取物浓度为45mg/mL。
二、实验分组及处理
取1日龄雏鸡，按照处理药剂的浓度不同随机分为如下5组：
1、对照组(C)：每天正常饲养；
2、模型组(0)：在雏鸡饮水中添加地鳖酶解提取物饲喂雏鸡，地鳖酶解提取物的
添加量为0g/kg·BW，从第4天开始饲喂至第21天；且在雏鸡饮水中添加氢化可的松
饲喂雏鸡，使雏鸡处于氧化应激状态，氢化可的松在饮用水中的浓度为25mg/ml，从
第8天开始饲喂，连续饲喂5天。
3、低剂量组(0.4)：在雏鸡饮水中添加地鳖酶解提取物饲喂雏鸡，地鳖酶解提取
物的添加量为0.4g/kg·BW，从第4天开始饲喂至第21天；且在雏鸡饮水中添加氢化
可的松饲喂雏鸡，使雏鸡处于氧化应激状态，氢化可的松在饮用水中的浓度为
25mg/ml，从第8天开始饲喂，连续饲喂5天。
4、中剂量组(0.8)：在雏鸡饮水中添加地鳖酶解提取物饲喂雏鸡，地鳖酶解提取
物的添加量为0.8g/kg·BW，从第4天开始饲喂至第21天；且在雏鸡饮水中添加氢化
可的松饲喂雏鸡，使雏鸡处于氧化应激状态，氢化可的松在饮用水中的浓度为
25mg/ml，从第8天开始饲喂，连续饲喂5天。
5、高剂量组(1.6)：在雏鸡饮水中添加地鳖酶解提取物饲喂雏鸡，地鳖酶解提取
物的添加量为1.6g/kg·BW，从第4天开始饲喂至第21天。且在雏鸡饮水中添加氢化
可的松饲喂雏鸡，使雏鸡处于氧化应激状态，氢化可的松在饮用水中的浓度为
25mg/ml，从第8天开始饲喂，连续饲喂5天。
上述每组6个重复，每个重复6只鸡。
三、处理结果
1、地鳖酶解提取物对氧化应激状态下肉鸡生长性能的影响
分别于饲养第14天和第21天空腹12h后，每个重复随机选取3只鸡，记录采食
量，并计算日均采食量、日增重及料重比。计算公式：日均采食量＝总采食量/鸡只数/
天数；日均增重＝总增重/鸡只数/天数；料重比＝日均采食量/日均增重。
结果如图1所示：从图中可以看出，14日龄时，与对照组相比，模型组、低剂量
组、中剂量组和高剂量组的肉鸡日均采食量、日均增重均明显降低，但料重比升高；
其中，模型组日均增重显著降低，料重比极显著提高；与未添加地鳖酶解提取物的模
型组相比，添加地鳖酶解提取物的低剂量组、中剂量组和高剂量组料重比均显著降低，
其中，中剂量组差异极显著。说明地鳖酶解提取物可以通过降低肉鸡的料重比来缓解
氧化应激状态，进而提高肉鸡生长性能。
2、地鳖酶解提取物对氧化应激状态下肉鸡皮质酮分泌的影响
分别于饲养第14天和第21天空腹12h后，每个重复随机选取3只鸡，称重后心
脏采血，离心制备血清。根据鸡血清皮质酮ELISA检测试剂盒中的说明书检测各组雏
鸡的血清中的皮质酮含量(皮质酮含量是衡量机体氧化应激状态的重要指标)。
检测结果如图2所示，14日龄时，与对照组相比，模型组、低剂量组、中剂量组
和高剂量组肉鸡血清中皮质酮含量明显提高，但与模型组相比，低剂量组、中剂量组
和高剂量组的皮质酮含量均有不同程度降低；21日龄时，与对照组相比，模型组肉鸡
血清中皮质酮含量明显提高，但与模型组相比，低剂量组、中剂量组和高剂量组的皮
质酮含量均有不同程度降低，但低剂量组、中剂量组和高剂量组无明显差异。说明地
鳖酶解提取物可以通过降低肉鸡血清中皮质酮含量来缓解氧化应激状态。
3、地鳖酶解提取物对氧化应激状态下肉鸡肉品质的影响
分别于饲养第14天和第21天空腹12h后，每个重复随机选取3只鸡，称重后处
死，处死后取胸肌称重，测定胸肌的肌肉相对重(肌肉相对重＝胸肌重量/鸡活体重)、
pH值、肉色、滴水损失，具体的测定方法如下：
pH值：屠宰后45min和24h，分别取2g胸肌剪碎至绿豆粒大小，加入10倍体积
超纯水，搅拌均匀后，室温静置30min，用酸度计测定屠体肌肉的pH值。
肉色：用测色色差计测定肌肉亮度值(lightness，L*)、红度值(redness，a*)和
黄度值(yellowness，b*)。
滴水损失：取胸肌的中间部分，分别修整成长×宽×厚为35×15×10mm3的长方体后
称重(W1)，然后用铁丝钓住肉样的一端，使肌纤维垂直，装入充气的塑料袋中，封
口，肉样不与袋壁接触，扎好袋口，置于4℃冰箱中24h后，取出肉样称重(W2)。计
算滴水损失(％)＝100-(W2/W1)。
14日龄的检测结果如表1和表2所示，14日龄时，与对照组的pH(45min和24h)
相比，模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组均有所降低，但与模型组相比，低剂
量组、中剂量组和高剂量组的pH(45min和24h)有所提高，但差异不显著；14日龄
时，与对照组相比，模型组的滴水损失极显著增加，但与模型组相比，低剂量组、中
剂量组的滴水损失均降低，但差异不显著；14日龄时，与对照组相比，模型组、低剂
量组、中剂量组和高剂量组的肉色亮度值(L*)均提高，但与模型组相比，低剂量
组、中剂量组和高剂量组肉色亮度值(L*)均有降低的趋势。地鳖酶解提取物与氢化
可的松间的互作对a*、b*值影响不显著。
21日龄的检测结果如表3和表4所示，21日龄时，与对照组相比，模型组的滴水
损失极显著增加，但与模型组相比，低剂量组显著降低；地鳖酶解提取物与氢化可的
松间的互作对L*、a*、b*值影响不显著。
说明地鳖酶解提取物可以通过提高肌肉pH、降低肉色亮度值和降低滴水损失来缓
解氧化应激状态。
表1、地鳖酶解提取物对氧化应激肉鸡(14日龄)胸肌肉品质的影响
注：与正常对照组相比，aP<0.05，AP<0.01；与模型组相比，bP<0.05。
表2、地鳖酶解提取物对氧化应激肉鸡(14日龄)胸肌肉品质的影响
注：与正常对照组相比，aP<0.05，AP<0.01。
表3、地鳖酶解提取物对氧化应激肉鸡(21日龄)胸肌肉品质的影响
表4、地鳖酶解提取物对氧化应激肉鸡(21日龄)胸肌肉品质的影响
注：与正常对照组相比，aP<0.05；与模型组相比，bP<0.05。
4、地鳖酶解提取物对氧化应激状态下肉鸡脏器指数的影响
脏器指数是体内实验重要的观察指标，通过脏器指数可以判断药物的毒性作用与
免疫作用。本实验通过称重计算组织脏器指数，脏器指数(mg/g)＝脏器重量(mg)/
鸡活体重(g)。具体步骤如下：
分别于饲养第14天和第21天空腹12h后，每个重复随机选取3只鸡，称重处死，
处死后取心脏、肝脏、脾脏、胰腺、法氏囊和胸腺称重。实验数据以平均数±标准差表
示，采用t检验分析比较各组数据，方差不齐时用t’检验，P<0.05和P<0.01为差异有
显著性。
14日龄雏鸡的检测结果如表5所示，14日龄时，心脏指数各组间无明显差异；14
日龄时，模型组肝脏指数显著高于其余各组，但与模型组相比，低剂量组、中剂量组
和高剂量组的肝脏指数明显降低，中高剂量组降低作用显著，说明地鳖酶解提取物具
有降低肝脏指数的功能；14日龄时，和对照组比，模型组、低剂量组、中剂量组和高
剂量组的胰腺指数、脾脏指数、法氏囊指数及胸腺指数均有不同程度减小，但和模型
组相比，低剂量组、中剂量组和高剂量组的胰腺指数、脾脏指数、法氏囊指数及胸腺
指数均有所提高，其中，地鳖酶解提取物与氢化可的松间的互作对脾脏、法氏囊及胸
腺指数影响显著。说明地鳖酶解提取物可以通过提高胰腺指数、脾脏指数、法氏囊指
数及胸腺指数来缓解氧化应激状态。
21日龄雏鸡的检测结果如表6所示，21日龄时，各组间心脏、肝脏、胰腺及脾脏
指数差异均不显著；21日龄时，与对照组相比，模型组、低剂量组、中剂量组和高剂
量组的法氏囊及胸腺指数均显著降低，但与模型组相比，低剂量组、中剂量组和高剂
量组的法氏囊及胸腺指数均明显升高，其中高剂量组差异显著。说明地鳖酶解提取物
可以通过提高法氏囊指数及胸腺指数来缓解氧化应激状态。
表5、地鳖酶解提取物对氧化应激肉鸡(14日龄)主要脏器指数的的影响
注：与正常对照组相比，aP<0.05，AP<0.01；与模型组相比，bP<0.05，BP<0.01。
表6、地鳖酶解提取物对氧化应激肉鸡(21日龄)主要脏器指数的影响
注：与正常对照组相比，aP<0.05，AP<0.01；与模型组相比，bP<0.05。
5、地鳖酶解提取物对氧化应激状态下肉鸡抗氧化能力的影响
分别于饲养第14天和第21天空腹12h后，每个重复随机选取3只鸡，称重后心
脏采血，离心制备血清，并称取1g组织(肝脏、胸肌)于匀浆管中，加9mL预冷生
理盐水匀浆机匀浆，制成10％组织匀浆液备用。根据超氧化物歧化酶(SOD)、过氧
化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)检测试剂盒中的
说明书，分别检测肝脏、血清、胸肌中SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量。
肝脏中SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量的检测结果如表7所示，从表7
中可以看出，14日龄时，与对照组相比，模型组SOD、CAT活性降低，GSH-Px活性
提高，MDA含量显著提高；但和模型组相比，低剂量组、中剂量组和高剂量组的CAT
和GSH-Px活性有提高趋势，MDA含量有不同程度降低，但差异不显著，说明地鳖酶
解提取物可以通过提高CAT和GSH-Px活性，降低MDA含量来提高氧化应激状态下
肉鸡抗氧化能力的作用。21日龄时，和对照组相比，模型组的SOD活性极显著降低，
低剂量组和中剂量组的SOD活性有提高趋势，但差异不显著；与模型组相比，低剂量
组、中剂量组和高剂量组的CAT和GSH-Px活性提高，MDA水平降低，但各组间差
异均不显著。
血清中SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量的检测结果如表8所示，14日龄
时，模型组血清SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量均高于对照组；和模型组相
比，低剂量组、中剂量组和高剂量组血清的SOD和GSH-Px活性显著提高，MDA含
量有不同程度降低。说明地鳖酶解提取物具有通过增加SOD和GSH-Px活性、降低
MDA含量来提高氧化应激状态下肉鸡抗氧化能力的作用。21日龄时，与对照组相比，
模型组血清SOD、CAT、GSH-Px活性均降低，MDA含量升高；和模型组相比，低
剂量组、中剂量组和高剂量组血清的CAT和GSH-Px活性显著提高，MDA含量均降
低。
胸肌中SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量的检测结果如表8所示，14日龄
时，与对照组相比，模型组胸肌SOD、CAT及GSH-Px活性均降低，MDA含量提高；
与模型组相比，低剂量组、中剂量组和高剂量组胸肌SOD、CAT及GSH-Px活性均提
高(其中，低剂量组和高剂量组GSH-Px活性极显著提高)、MDA含量有不同程度降
低。说明地鳖酶解提取物具有通过增加SOD、CAT和GSH-Px活性来提高氧化应激状
态下肉鸡抗氧化能力的作用。21日龄时，和对照组相比，模型组胸肌SOD、CAT及
GSH-Px活性均降低，MDA含量提高；与模型组相比，低剂量组、中剂量组和高剂量
组胸肌SOD、CAT活性均提高，但差异均不显著。
表7、地鳖酶解提取物对氧化应激肉鸡肝脏抗氧化能力的影响
注：与正常对照组相比，aP<0.05，AP<0.01；与模型组相比，bP<0.05，BP<0.01。
表8、地鳖酶解提取物对氧化应激肉鸡血清抗氧化能力的影响
注：与正常对照组相比，aP<0.05，AP<0.01；与模型组相比，bP<0.05，BP<0.01。
表9、地鳖酶解提取物对氧化应激肉鸡胸肌抗氧化能力的影响
注：与正常对照组相比，aP<0.05；与模型组相比，bP<0.05，BP<0.01。