本发明属于中药
技术领域：
，具体涉及到一种林蛙油滴丸及其制备方法。
背景技术：
：林蛙油是指摘取雌性林蛙的输卵管，采用传统工艺与现代先进技术进行加工而成的。林蛙油因其形状似脂肪而得名，自古以来被认为是滋补强壮剂，可补虚强精壮阳，养肺滋肾益肝.可治疗肾亏劳损、神经衰弱、心慌失眠、溢汗不止、身体虚弱等一切消耗性疾病。从古到今林蛙油出口世界各地，广泛应用于医药和保健品，林蛙油是我国传统的保健品，既可药用、又可食用，其补肾益精润肺的功能深入民心，林蛙油中含有多种对人体有益的生物活性物质，其中主要成分为蛋白质及其氨基酸、脂肪酸、无机元素、维生素、激素等。有促进卵泡早熟及卵泡增殖作用，对性周期有明显的影响，可延长兴奋期，有良好的强精作用。同时有补虚、增精、退热之功效，可治精血不足，体虚气弱、肺虚咳、神经衰弱、记忆减退、产后无乳、乳汁不足以及肺结核、肝炎等疾病。中药滴丸剂是近年来在中药丸剂基础上发展起来的新剂型，它是以中医药学理论为基础，吸取现代剂型之所长，并与其它制剂技术相结合，基本能符合现代制剂“三效”(高效、速效、长效)、“三小”(毒性小、反应小、用量小)、“五方便”(生产、运输、使用、携带、保管)的发展方向，故发展非常迅速，滴丸技术不仅在医药制剂中应用广泛，而且还可用于生产各种新型保健食品与普通食品。林蛙油制备成滴丸，在载体(基质)中呈高度分散的状态，可以提高林蛙油的溶解度和溶出度，提高生物利用度，同时能减少剂量，降低毒副作用，避免氧化、水解反应的发生、提高药物的稳定性。技术实现要素：本发明的目的在于补充现在技术的不足，提供一种林蛙油滴丸及其制备方法。本发明所制备的林蛙油滴丸，具有生物利用度高、疗效好、副作用小、药物稳定性好以及制备简单、质量易控制，生产中无污染等特点，同现有技术中林蛙油制品相比，生物活性取得了预料不到的技术效果。本发明处方以林蛙油为活性物质，以滴丸基质为辅料，通过合适的工艺制备而成。本发明通过实验获得林蛙油和滴丸基质的配比为1∶3-1∶10，最佳配比为1∶3，混合后的药物粘稠度适中，适合滴丸的制备。本发明中滴丸的基质可以是聚乙二醇、泊洛沙姆、硬质酸钠、甘油、明胶中的一种或是多种。本发明基质优选聚乙二醇，其中聚乙二醇是聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，其配比为1∶0.5-1∶1.2，最佳配比为1∶0.8。本发明采用以下技术，即可得到所述的林蛙油滴丸。【制备方法】1.原料：选择颜色鲜亮，没有黑色附着物的干燥林蛙油固体，通过粉碎机粉碎成粗粉。2.基质：聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，其混合比例为1∶0.5-1∶1.2。3.药物原料与基质的配比：以g为单位，林蛙油∶基质＝1∶3-1∶10。4.取处方量的滴丸基质，80-100℃水浴加热搅拌至熔融状态，加入林蛙油，充分搅拌均匀，并维持此温度，将滴丸剂储液室加热至滴丸基质温度，将熔融药液加入到储液室中，以每分钟30-45滴的速度滴入冷却液中，收集成型的滴丸，拭去滴丸表面的冷却剂，干燥，包装即得。注：滴丸冷却剂可以是液体石蜡、二甲基硅油或是食用植物油中的一种或是多种。一、制备工艺实验：1.基质与冷却剂的选择以正交实验优选林蛙油滴丸制剂中基质、冷却剂的种类，药物与基质的最佳配比以及药液滴制温度等条件，选用L9(33)表安排实验。表1实验中各因素水平表分别选用表中所列的基质比例，与药物提取物按不同比例混溶，滴入80cm长的不同种类的冷却剂中，观察滴丸的成型状况及沉降时间，以滴制的难易程度、丸形、沉降状况以及成丸的溶散时间为考察指标，选择最适宜的基质及冷却剂。结果见表2。表2实验中各因素水平表由以上结果可以看出，林蛙油在PEG4000∶PEG6000比例为1∶0.5、1∶1.2时溶解度稍差，而在比例为1∶0.8时均有较好的溶解度，故采用PEG4000与PEG6000比例为1∶0.8作为基质，冷却剂选择二甲基硅油，所制成的滴丸外形圆整光滑，不拖尾，且无气泡产生，圆整度较好，即最佳方案为A2B1C2(PEG4000与PEG6000以1∶0.8比例，林蛙油与基质以1∶3比例，冷却剂为二甲基硅油)时效果最好。2.滴制条件的筛选以PEG4000∶PEG6000＝1∶0.8为基质，林蛙油和滴丸基质的配比为1∶3，二甲基硅油为冷却剂滴制微丸，以成丸的重量差异变异系数为指标，筛选滴头的内外径大小、滴速、滴距以及冷却剂的温度，因素水平选择见表3、4。表3滴制条件的选择表4滴制条件方案及结果表5方差分析表SSfSFPA0.13242.00000.06311.000＜0.05B3.00112.00001.504122.7293C2.10552.00001.056615.9242D0.89222.00000.44216.7482＜0.05SMIN0.0664对上表进行直观及方差分析，结果表明，最佳滴制条件为：选择滴口内外径为2.4/4.0mm的滴头、冷却剂温度为10℃、滴速35-40滴/min、滴口距冷却液面6cm。3.验证实验以最佳成型工艺进行验证实验3次，称取适量PEG4000、PEG6000与药物混匀，倒入滴制罐中，滴口内外径为2.4/4.0mm的滴头，滴口距冷却液面6cm，滴速35～40滴/min，以二甲基硅油为冷却剂，冷却温度为10℃，进行滴制，结果见表6。表6滴丸验证实验结果实验号平均丸重/mg变异系数/％成品率/％溶解时限/minA35.23.029512B35.13.5094.411C35.03.4994.113平均值35.13.3794.512由上述结果可知，此工艺是稳定可行的。二、增强免疫力、抗疲劳药效实验现有技术中具有增强免疫力的药物有很多，药效好的林蛙油产品是北京同仁堂生物制品开发有限公司生产的同仁堂牌长白山中国林蛙油颗粒。为了体现本发明制备得到的林蛙油滴丸的技术效果，利用游泳劳损法结合限食法得到气虚模型，然后将本发明制备得到的产品与以上产品进行了对比实验研究，用以阐明本发明产品的显著疗效，说明本发明所达到的显著有益技术效果。具体实验如下：(一)材料和方法1、实验动物SD大鼠，雌雄各半，体重220-250g，由山东大学实验动物中心提供，生产许可证号(SCXK(鲁)20150001)。2、药物本发明林蛙油滴丸。3、主要试剂同仁堂牌长白山中国林蛙油颗粒，北京同仁堂生物制品开发有限公司生产，批号20140315。4、方法4.1造模将大鼠随机分为对照组、气虚组、本发明林蛙油滴丸组、同仁堂牌长白山中国林蛙油颗粒组(下称同仁堂林蛙油颗粒组)。对照组常规饲养，自由饮食，其余各组控制饮食(喂食量为正常时的一半)，并进行力竭游泳，水温控制在20℃，大鼠游泳时，不能以尾撑在池底休息，每天1次，连续14天，以游泳最后下沉，经10s后仍不能返回水面为力竭。造模完成后并观察各组大鼠的活动情况和精神状态。4.2实验分组按照随机化原则分为四组，对照组、气虚模型组、本发明林蛙油滴丸组、同仁堂林蛙油颗粒组，每组10只。对照组、气虚模型组灌服等量生理盐水，林蛙油滴丸组分别灌服混悬液(浓度为1.2g/kg)，同仁堂林蛙油颗粒组灌服林蛙油颗粒混悬液(浓度为1.2g/kg)，连续14天。4.3统计学分析应用SPSS12.0软件统计，方法采用单因素方差分析，组间比较用方差分析，所有数据均以的形式表示，P＜0.05为差异有统计学意义。4.4方法(1)大鼠生物学表征观察模型组大鼠于第6、7天时，出现食量减少，10天之后，先后出现精神萎靡，反应迟钝，蜷伏少动，嗜卧，懒动，倦怠，行动缓慢，明显成群蜷缩，扎堆，拱背，游泳时间大幅下降，同时出现毛失光泽，发黄、易脱落，毛发枯槁，咳嗽，气喘，有时有呼吸道分泌物从鼻中流出，对照组始终没有出现以上症状与体征。表7实验大鼠生物学表征半定量评分观察表表8实验各组大鼠生物学表征观察表组别n分值对照组101.24±0.33气虚模型组104.39±1.14**林蛙油滴丸组101.52±0.11ΔΔ#同仁堂林蛙油颗粒组101.79±0.23ΔΔ注：与对照组相比，**P＜0.01；与气虚模型组比较，ΔΔP＜0.01；与同仁堂林蛙油颗粒组相比，#P＜0.05表9实验各组大鼠力竭游泳时间比较组别n力竭游泳时间(s)对照组10711.5±45.2气虚模型组10255.7±91.3**林蛙油滴丸组10655.6±45.7ΔΔ#同仁堂林蛙油颗粒组10603.1±49.3ΔΔ注：与对照组相比，**P＜0.01；与气虚模型组比较，ΔΔP＜0.01；与同仁堂林蛙油颗粒组相比，#P＜0.05(二)结果1、各组小鼠生物学表征评分实验结果显示，对照组小鼠活泼好动，反应灵敏；气虚模型组小鼠则表现倦怠懒动，精神萎顿，四肢蜷缩，行动迟缓，甚则眯眼、缩肩拱背；皮肤松弛，背部毛色无光泽；尾、鼻颜色淡白少润；大便稀软，排泄浓尿，生物学表征评分与对照组比较显著升高(P＜0.01)；与气虚模型组比较，同仁堂林蛙油颗粒组、本发明林蛙油滴丸组反应稍有迟钝，自主活动减少，皮肤略松弛，松软，尾、鼻颜色淡红少润；大便干、有形，生物学表征评分显著降低(P＜0.01)；与同仁堂林蛙油颗粒组比较，本发明林蛙油滴丸组具有显著性差异(P＜0.05)。参见表8。2、各组大鼠力竭游泳时间实验结果显示，与对照组比较，气虚模型组大鼠力竭游泳时间明显缩短，统计有显著性差异(P＜0.01)；与气虚模型组比较，同仁堂林蛙油颗粒组、本发明林蛙油滴丸组大鼠力竭游泳时间明显延长，统计有显著性差异(P＜0.01)；与同仁堂林蛙油颗粒组比较，本发明林蛙油滴丸组具有显著性差异(P＜0.05)。参见表9。具体实施例实施例1林蛙油30g聚乙二醇400050g聚乙二醇600040g将处方量的聚乙二醇4000和聚乙二醇6000至蒸发皿中，80℃水浴加热搅拌至熔融状态，搅拌均匀后加入药物，搅拌均匀，保持温度，备用。将滴丸机预热至80℃，二甲基硅油冷却至10℃，调节滴嘴到冷却液液面的高度至6cm，滴口内外径为2.4/4.0mm，将药液加入到储液室中，启动阀门，以每分钟35-40的速度滴制，于收集口收集滴丸，用滤纸吸取滴丸表面的二甲基硅油，干燥，包装即得。实施例2林蛙油30g聚乙二醇4000200g聚乙二醇6000100g将处方量的聚乙二醇4000和聚乙二醇6000至蒸发皿中，80℃水浴加热搅拌至熔融状态，搅拌均匀后加入药物，搅拌均匀，保持温度，备用。将滴丸机预热至80℃，液体石蜡冷却至12℃，调节滴嘴到冷却液液面的高度至4cm，滴口内外径为2.6/4.2mm，将药液加入到储液室中，启动阀门，以每分钟40-45的速度滴制，于收集口收集滴丸，用滤纸吸取滴丸表面的液体石蜡，干燥，包装即得。实施例3林蛙油30g聚乙二醇4000109g聚乙二醇6000131g将处方量的聚乙二醇4000和聚乙二醇6000至蒸发皿中，80℃水浴加热搅拌至熔融状态，搅拌均匀后加入药物，搅拌均匀，保持温度，备用。将滴丸机预热至80℃，食用植物油冷却至8℃，调节滴嘴到冷却液液面的高度至8cm，滴口内外径为2.8/3.8mm，将药液加入到储液室中，启动阀门，以每分钟30-35的速度滴制，于收集口收集滴丸，用滤纸吸取滴丸表面的食用植物油，干燥，包装即得。当前第1页1 2 3