一种轮状病毒感染乳鼠实验模型的构建方法与流程

文档序号:12208297阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种轮状病毒感染乳鼠实验模型的构建方法,其特征在于,包括下述步骤:

以7日龄ICR乳鼠为实验动物,用1ml改良注射器,经灌胃方式给予0.2ml轮状病毒液。

2.根据权利要求1所述的轮状病毒感染乳鼠实验模型的构建方法,其特征在于,所述7日龄ICR乳鼠为随机选取的体重在5.0-7.0g之间的常规7日龄ICR乳鼠。

3.根据权利要求1所述的轮状病毒感染乳鼠实验模型的构建方法,其特征在于,所有乳鼠在灌胃前后分别禁奶2小时。

4.根据权利要求1所述的轮状病毒感染乳鼠实验模型的构建方法,其特征在于,所述轮状病毒为非唾液酸依赖的人源轮状病毒WA株。

5.根据权利要求1所述的轮状病毒感染乳鼠实验模型的构建方法,其特征在于,所述轮状病毒还包括扩增步骤,方法如下:

将原始病毒液从-80℃冰箱中取出,4℃溶解;将生长成单层的MA104细胞用PBS冲洗2次,后加入原始病毒液,放入37℃含5%二氧化碳的培养箱中孵育2h后,弃去病毒液,加入无胎牛血清的DMEM培养液,然后放入37℃含5%二氧化碳的培养箱中培养并观察,至病毒感染MA104细胞病变达到+++~++++时,置于-80℃冻存,再4℃融解,如此反复冻融3次,2~4℃高速12000rpm离心10min,取上清收获病毒液;再同上法重复1次病毒在细胞中传代实验,收获病毒,分装,-80℃保存。

6.根据权利要求5所述的轮状病毒感染乳鼠实验模型的构建方法,其特征在于,所述MA104细胞在含10%胎牛血清,100μ/mL青霉素,100μg/mL链霉素的DMEM培养液中生长成单层。

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