本发明涉及一种用于缓解心绞痛的植物精油，属于植物提取物的应用技术领域。
背景技术：
心绞痛(angina pectoris)是冠状动脉供血不足，心肌急剧的暂时缺血与缺氧所引起的以发作性胸痛或胸部不适为主要表现的临床综合征。心绞痛是心脏缺血反射到身体表面所感觉的疼痛，特点为前胸阵发性、压榨性疼痛，可伴有其他症状，疼痛主要位于胸骨后部，可放射至心前区与左上肢，劳动或情绪激动时常发生，每次发作持续3～5分钟，可数日一次，也可一日数次，休息或用硝酸酯类制剂后消失。本病多见于男性，多数40岁以上，劳累、情绪激动、饱食、受寒、阴雨天气、急性循环衰竭等为常见诱因。
目前的常规治疗药物治疗方法有：(1)硝酸酯制剂①硝酸异山梨醇。②四硝酸戊四醇酯。③长效硝酸甘油制剂：服用长效片剂使硝酸甘油持续而缓慢释放。用2％硝酸甘油软膏或膜片制剂涂或贴在胸前皮肤，作用可维持12～24小时。(2)β受体阻断剂(β阻断剂)常用制剂有：①普萘洛尔，逐渐增加剂量；②氧烯洛尔；③阿普洛尔；④吲哚洛尔；⑤索他洛尔；⑥美托洛尔；⑦阿替洛尔；⑧醋丁洛尔；⑨纳多洛尔等。不良反应有心室喷血时间延长和心脏容积增加，这时可能使心肌缺血加重或引起心力衰竭，但其使心肌耗氧量减少的作用远超过其不良反应。(3)钙通道阻滞剂，常用制剂有：①维拉帕米不良反应有头晕、恶心、呕吐、便秘、心动过缓、PR间期延长、血压下降等；②硝苯地平不良反应有头痛、头晕、乏力、血压下降、心率增快等；③地尔硫卓不良反应有头痛、头晕、失眠等。④新制剂尼卡地平、尼索地平、氨氯地平、非洛地平、苄普地尔等。但停用本类药时，会出现反跳。(4)冠状动脉扩张剂目前仍用的有：①吗多明：不良反应有头痛、面部潮红、胃肠道不适等；②胺碘酮：也用于治疗快速心律失常，不良反应有胃肠道反应、药疹、角膜色素沉着、心动过缓、甲状腺功能障碍等；③乙氧黄酮；④卡波罗孟；⑤奥昔非君；⑥氨茶碱；⑦罂粟碱等。这些抗心绞痛药物多为化学制剂，必须终身服药。因此，药物的安全性尤其重要。
精油可说是植物的荷尔蒙，它拥有与人类相同的构成物质及生命能量。主要表现在：神经系统：通过亲和作用直接进入皮下，植物精油分子一方面刺激神经，最终调节神经活动及内循环；另一方面直接作用于内环境等稳定状态，使体液活动加快，从而改善内环境，进一步达到调节整个身心的作用。循环系统：加速血液、淋巴循环、降低血压。促进交换：通过亲和作用植物精油分子进皮下组织，又经体液交换进入血液和淋巴，促进了血液和淋巴循环，加快了人体的新陈代谢等。
本发明将各种精油组合，制备成用于缓解心绞痛的植物精油。然而现有的精油存在一些问题：精油的理疗不宜内服，而多采用外用方法，如：熏香，洗剂等，都会导致疗效减弱。
本发明采用敷脐疗法。敷脐疗法属中医外治法的范畴。历代医家在长期的医疗实践中发现肚脐是外治法层佳部位之一。中医认为"药物入脐，先作用于胃与小肠，再通过脏腑的气化和输布作用，散布于五脏六腑乃至全身，以达到健脾和胃、温肾散寒、回阳救逆、和中理肠、行气消肿、散结通滞、强肾健骨、活血通经、保健防治百病的作用。现代研究表明，将芳香药物置于脐下，药物不断的刺激脐下皮肤，可激活神经内分泌的反馈作用，促进人体免疫功能的发挥。可以说，敷脐疗法的疗效等同于内服。因此，发明人制备纯度高的敷脐用植物精油制剂，用于缓解心绞痛。
多肽是α－氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，它也是蛋白质水解的中间产物。通常由10～50氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽，它们的分子量低于10,000Da(Dalton，道尔顿)。与蛋白质相比，多肽的具有分子量小，易于溶解，能透过半透膜的特点。部分具有多肽具有生物活性，如。免疫活性肽、神经活性肽、胆固醇肽、促进矿物质吸收的肽(CPPS)、酶调节剂(如促胰酶肽)、激素肽如生长激素释放因子(GRFS)、白蛋白胰岛素增效肽、抗菌多肽(如乳酸链球菌素、橡胶素)、抗癌多肽(如肿瘤细胞坏死因子、环已肽)、抗艾滋病肽(如GLQ蛋白)等。还有一种多肽，称为引导肽，具有穿透细胞膜的功能。在制药领域中，这些引导肽被用于协助药物靶向给药。发明人将这多肽引入精油制备中，与精油发挥协同功效。
技术实现要素：
为解决现有技术中缓解心绞痛的问题，本发明提供一种纯度高的植物精油制剂，采用敷脐疗法，起到缓解心绞痛的作用。
本发明通过下列技术方案实现：一种用于缓解心绞痛的植物精油复合物，其特征在于：所述的植物精油由下列质量份的组分组成：丹皮精油，茶树精油，白术精油，天竺葵精油，丝柏精油，充分混匀，得到混合液A相备用，多肽乙醇溶液为B相，将A相加入B相中，充分混匀后得到成品；所述多肽乙醇溶液含有多肽的序列为SEQ ID NO：1。
所述植物精油复合物的制备方法，其特征在于：步骤包括：
按质量份数称取丹皮精油6～8份，茶树精油8～10份，白术精油3～5份，天竺葵精油5～7份，丝柏精油5～7份，和5-10份的多肽乙醇溶液分别加入到密封混料罐中，常温下边搅拌边加入，加完后再继续搅拌3分钟；所述多肽乙醇溶液是将所述2g多肽溶于40mL65％乙醇溶液中；将密封混料罐中的精油混合液加入大混料罐后高速搅拌5分钟，灌装时边搅拌边灌装，经包装后即可得到产品。所述植物精油复合物制备治疗用于缓解心绞痛制剂的应用。
述植物精油复合物，其特征在于：通过敷脐疗法缓解心绞痛。
有益效果：
本发明采用敷脐疗法，利用精油的高挥发性和高渗透性及多肽的协同作用来达到缓解心绞痛的目的。本发明的作用在于(1)缓解心率异常；(2)增加冠状动脉血流量；(3)减少血液中血栓形成；(4)降低心肌耗氧量；从而达到缓解心绞痛的作用；(5)使用方便。
具体实施方式：
实施例1
本发明制备方法：分别将丹皮，绿茶，白术，天竺葵，丝柏果实进行蒸馏，制备出相应的粗制精油；将所述的丹皮，绿茶，白术，天竺葵，丝柏的粗制精油分别进行二氧化碳超临界萃取，得到相应的二级精油；其中，二氧化碳超临界萃取的操作是：将粗制精油装入萃取器中，加热到40℃，萃取压力为20MPa，萃取流速为25L·h-1，连续萃取8h，二氧化碳和萃取出的精油的混合物输入分离器中，减至常压并降至室温，其中的二氧化碳与精油分离，得到二级精油；将所述的二级精油分别进行划段分馏，其中，丹皮二级精油在分馏时收集230-270℃的馏分，得到丹皮精油；绿茶二级精油在分馏时收集200℃的馏分，得到茶树精油；白术二级精油在分馏时收集170-200℃的馏分，得到白术精油；天竺葵二级精油在分馏时收集210-260℃的馏分，得到天竺葵精油；所述丝柏二级精油在分馏时收集250-320℃的馏分，得到丝柏精油；收集的精油纯度≥99.99％；将各精油按质量份数称取丹皮精油6份，茶树精油8份，白术精油3份，天竺葵精油5份，丝柏精油5份，多肽乙醇溶液5份，分别放入密封混料罐中，常温下边搅拌边加入，加完后再继续搅拌3分钟；所述多肽乙醇溶液是将所述2g多肽溶于40mL65％乙醇溶液中；将密封混料罐中的精油混合液加入大混料罐后高速搅拌5分钟，混合均匀后进行灌装，灌装时边搅拌边灌装，经包装后即可得到产品。
采用pH计测得制备得到的植物精油的pH值为5.7±0.2，接近人体正常皮肤酸碱度。
实施例2
本实施例与实施例1不同的是用于缓解心绞痛的天然植物精油按质量份数由丹皮精油7份，茶树精油9份，白术精油4份，天竺葵精油6份，丝柏精油6份，和8份多肽乙醇溶液组成，其制备方法与实施例1相同。
实施例3
本实施例与实施例1不同的是用于缓解心绞痛的天然植物精油按质量份数由丹皮精油8份，茶树精油10份，白术精油5份，天竺葵精油7份，丝柏精油7份，和10份多肽乙醇溶液组成，其制备方法与实施例1相同。
实施例4
本发明制备的植物精油应用测试：
自2013年11月始，至2014年12月底止，公司分別在贵州，河南等地区，分別对已被珍断确定患心绞痛的患者用本发明对临床效果进行了测试，参加试用总人数为110名，年龄45-65岁。使用方法为：心绞痛发作时，在患者肚脐附近皮肤涂抹、按摩，直到心绞痛缓解为止。
结果显示：调查试用及统计结果见下表1：
表1本发明的临床效果测试结果
调查结果显示本发明的产品对缓解心绞痛具有较好的疗效，平均有效率是91.4％。是一种有潜力的缓解心绞痛的保健品。
实施例5
皮肤刺激性试验包括急性皮肤刺激性试验和多次皮肤刺激性试验。
依据《化妆品卫生规范(2007版)》，对实施例1制备的植物精油进行急性皮肤刺激性试验和多次皮肤刺激性试验。
(1)急性皮肤刺激性试验方法：取SD大鼠10只，试验前约24h，将大鼠背部脊柱两侧毛剪掉，不可损伤表皮，去毛范围左、右各约3cm×3cm。取实施例1制备的植物精油约0.5mL直接涂在一侧皮肤上，然后用二层纱布(2.5cm×2.5cm)和一层玻璃纸或类似物覆盖，再用无刺激性胶布和绷带加以固定。另一侧皮肤作为对照。采用封闭试验，敷用时间为4h。试验结束后用温水清除残留实施例1制备的植物精油。分别在清除实施例1制备的植物精油后的1、24、48和72h观察大鼠涂抹部位皮肤的红斑和水肿反应情况。
结果显示，清除实施例1制备的植物精油后1、24、48和72h大鼠皮肤均未出现红斑和水肿现象。由此可见，实施例1制备的植物精油对皮肤无刺激性。
(2)多次皮肤刺激性试验方法：取SD大鼠10只，试验前约24h，将大鼠背部脊柱两侧被毛剪掉，去毛范围各为3cm×3cm，涂抹面积2.5cm×2.5cm。取实施例1制备的植物精油约0.5mL直接涂在一侧皮肤上，另一侧涂溶剂作为对照，每天涂抹1次，连续涂抹14d。从第二天开始，每次涂抹前应剪毛，用水清除残留实施例1制备的植物精油。一小时后观察大鼠涂抹部位皮肤的红斑和水肿反应情况。
结果显示，将实施例1制备的植物精油连续14天涂布于大鼠一侧皮肤后，均未出现红斑和水肿现象。由此可见，实施例1制备的植物精油对皮肤无刺激性。
实施例6
评价实施例1制备的植物精油大鼠血栓形成的影响。取Wistar雄性大鼠90只，随机分为9组：实施例1制备的植物精油组、多肽组、丹皮精油、茶树精油、白术精油、天竺葵精油、丝柏精油组，阳性对照组，正常组，每组l0只。正常组按照0.2ml/100g的剂量65％乙醇涂擦肚脐部位；阳性对照组灌胃1mg/kg丹参酮片；其他实验组均采用0.2ml/100g涂擦肚脐部位。给药60min后，戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉，仰卧固定后，分离右颈总动脉和左颈外静脉。在聚乙烯管内放一根长7cm的4号手术线，以肝素生理盐水溶液(50U/ml)充满聚乙烯管，然后将其一端插入右颈总动脉中，即开放动脉夹，准确记录血流10min，中断血流取出丝线称重，用总重量减去丝线重量即为血栓湿重。按以下公式计算血栓生成抑制率：抑制率＝(模型对照组血栓湿重-给药后血栓湿重)/模型对照组血栓湿重*100％。
表2实施例1制备的植物精油对大鼠血栓形成的影响(means±s)
结果见表2，由此可见，本发明的实施例1制备的植物精油抑制大鼠血栓形成，与单味精油相比，其抑制血栓作用显著。
实施例7
评价实施例1制备的植物精油对犬心肌耗氧量的影响。将犬按体重分为9组：实施例1制备的植物精油组、丹皮精油、茶树精油、白术精油、天竺葵精油、丝柏精油组，阳性对照组，正常组，每组6条。戊巴比妥钠30mg/kg静脉注射麻醉，背位固定于手术台上，分离一侧股动脉，插入动脉插管，经压力换能器，载波放大器连接多道记录仪，监测血压。颈部正中切口，分离气管并插入气管插管连于人工呼吸机，进行人工呼吸，开胸，剪开心包，暴露心脏，经左心耳向冠状窦插入特制的冠状窦插管，将冠状窦血引出体外通过电磁流量计的体外型探头，经电磁流量计测定冠状窦血流量，后经一侧颈外静脉返回体内。在冠状窦血流量通路上另设一条旁路，用双导流泵6ml/min的速度将通过一侧颈动脉插管导出的动脉血和冠状窦血泵入血氧分析仪，连续测定动/静脉血氧差后，经颈外静脉返回同体内。在进行各项插管前均经股静脉注射肝素(300-500U/kg)，在整个实验过程中，给动物滴注生理盐水(3ml/min)，以补充体液的损失。手术后15-30min，待各项指标稳定后开始实验。正常组按照2ml/Kg的剂量65％乙醇涂擦肚脐部位；阳性对照组灌胃1mg/kg丹参酮片；其他实验组均采用2ml/Kg涂擦肚脐部位。用药后3小时后，根据实测冠状窦血流量计算全心冠血流量应为：冠状窦血流量/0.6，根据所测出的各项值计算出犬的心肌耗氧量。
表3实施例1制备的植物精油对犬心肌耗氧量的影响(means±s)
*p<0.05，**p<0.01与正常组相比
结果：表3。可见，给药后180min时实施例1制备的植物精油对心肌耗氧量显著下降(P<0.05)，与单味精油相比，其心肌耗氧量下降作用显著。
实施例8
评价实施例1制备的植物精油对猫心率的影响。将猫按体重分成9组，实施例1制备的植物精油组、多肽组、丹皮精油、茶树精油、白术精油、天竺葵精油、丝柏精油组，阳性对照组，正常组，每组6只。戊巴比妥钠45mg/kg腹腔注射麻醉，背位固定于实验台上，分离一侧颈动脉，插入动脉插管并通过压力换能器，载波放大器连于多道生理记录仪，由血压信号触发心率计数器计数心率，每只动物在进行各种插管前经股静脉注射肝素1000U/kg。正常组按照2ml/Kg的剂量65％乙醇涂擦肚脐部位；阳性对照组灌胃1mg/kg丹参酮片；其他实验组均采用2ml/Kg涂擦肚脐部位。用药后180min观察心率指标。
表4实施例1制备的植物精油对猫心率的影响(means±s)
*p<0.05，**p<0.01与正常组相比
结果：表4。可见，给药后180min时实施例1制备的植物精油对心率显著增加，与单味精油相比，其心率增加作用显著。
SEQUENCE LISTING
<110> 云南同方科技有限公司
<120> 用于缓解心绞痛的植物精油制备及应用
<130>
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 1
Ala Leu Leu Asn Ala Pro Arg Ser Met Arg Arg Phe Ser Asp Cys Phe
1 5 10 15
Gly Gln Arg Ile Asp Arg
20