本发明属于中草药制备技术领域，具体涉及一种西青果提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
随着环境的污染恶化、食品的不安全及社会压力的增加，恶性肿瘤的发病率越来越高，临床上治疗腹部或盆腔等恶性肿瘤，除手术、化疗等手段外，常配合或单用放射治疗。其中，放射性肠炎(Radiation proctitis)则是盆腔等恶性肿瘤经放射治疗引起的常见肠道并发症，可累及小肠、结肠和直肠，故又称为放射性直肠、结肠、小肠炎。具有发病率较高，治疗恢复较慢且易复发的特点，如治疗不及时可引起腹泻，水电解质紊乱，营养失调等，使疾病恶化。目前尚无有效的治疗药物或方法，一般选择对症治疗，以西药为主，如消炎止痛、补液止泻等，但往往效果不佳，给患者的工作和生活带来极大的不便和痛苦。因此，急需一种能有效治疗放射性肠炎的药物及方法。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于：(1)提供一种西青果提取物的制备方法；(2)提供一种西青果提取物；(3)提供一种西青果提取物的应用。
为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：
1、一种西青果提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)将西青果粉碎后，采用超临界流体萃取法，以超临界CO2作为超临界萃取剂，对粉碎后的西青果进行萃取，所述萃取为在35-45℃，300-500bar条件下以0.5-1.0g/min的速度萃取6h；
(2)采用超临界流体萃取装置，以低分子有机溶剂为萃取剂，对经步骤(1)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液A，所述萃取为在35-45℃，300-500bar条件下以5.0-10.0g/min的速度萃取6h；
(3)采用超临界流体萃取装置，以水为萃取剂，对经步骤(2)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液B，所述萃取为在35-45℃，300-500bar条件下以5.0-10.0g/min的速度萃取6h；
(4)将步骤(2)中制得的萃取液A和步骤(3)中制得的萃取液B混合后，浓缩干燥，制得西青果提取物。
进一步，步骤(1)中，所述粉碎后的西青果颗粒尺寸为－40目。
进一步，步骤(1)中，所述萃取为在40℃，300bar条件下以0.6g/min的速度萃取6h。
进一步，步骤(2)中，所述低分子有机溶剂为丙酮、乙醇或异丙醇中的一种或多种。
进一步，步骤(2)中，所述萃取为在40℃，300bar条件下以6.0g/min的速度萃取6h。
进一步，步骤(3)中，所述萃取为在40℃，300bar条件下以7.0g/min的速度萃取6h。
进一步，步骤(4)中，所述浓缩干燥为在45℃，200mbar条件下减压旋转蒸发至所述萃取液A和萃取液B中萃取剂挥发。
2、由所述的一种西青果提取物的制备方法制备的西青果提取物。
3、所述的西青果提取物在制备治疗放射性肠炎药物中的应用。
进一步，所述西青果提取物可被制成用于治疗放射性肠炎的不同药物剂型，所述不同药物剂型为片剂或灌肠剂中的一种。
本发明的有益效果在于：本发明提供了一种西青果提取物及其制备方法和应用，该西青果提取物具有清热解毒，收敛止泻，抗炎抗氧化等作用，可用于修复放射性损伤，治疗因放射线照射引起的肠粘膜充血、水肿以及细胞损伤，改善由此所致的腹痛、腹泻和脓血便等症状，经实验验证，该西青果提取物在一定程度上对抗辐射所致炎症损伤，降低炎症因子TNF-α的表达，提高抗氧化活性酶SOD活性(p＜0.05)，将其用于制备治疗放射性肠炎药物，为临床治疗放射性肠炎提供了一种新方法。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：
图1为辐射对小鼠TNF-α和SOD酶的影响以及西青果提取物的干预作用图。
具体实施方式
下面将对本发明的优选实施例进行详细的描述。
实施例1
西青果提取物的制备
(1)将500g西青果粉碎后过40目筛，取筛下物，采用超临界流体萃取法，以超临界CO2作为超临界萃取剂，对颗粒尺寸为－40目的西青果进行萃取，所述萃取为在40℃，300bar条件下以0.62g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(2)采用超临界流体萃取装置，以丙酮为萃取剂，对经步骤(1)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液A，所述萃取为在40℃，300bar条件下以5.6g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(3)采用超临界流体萃取装置，以水为萃取剂，对经步骤(2)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液B，所述萃取为在40℃，300bar条件下以7.1g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(4)将步骤(2)中制得的萃取液A和步骤(3)中制得的萃取液B混合后，在45℃，200mbar条件下减压旋转蒸发至所述萃取液A和萃取液B中萃取剂挥发，制得西青果提取物，收率58.56％。
实施例2
西青果提取物的制备
(1)将400g西青果粉碎后过40目筛，取筛下物，采用超临界流体萃取法，以超临界CO2作为超临界萃取剂，对颗粒尺寸为－40目的西青果进行萃取，所述萃取为在45℃，350bar条件下以0.58g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(2)采用超临界流体萃取装置，以丙酮为萃取剂，对经步骤(1)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液A，所述萃取为在45℃，350bar条件下以6.4g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(3)采用超临界流体萃取装置，以水为萃取剂，对经步骤(2)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液B，所述萃取为在45℃，350bar条件下以8.1g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(4)将步骤(2)中制得的萃取液A和步骤(3)中制得的萃取液B混合后，在45℃，200mbar条件下减压旋转蒸发至所述萃取液A和萃取液B中萃取剂挥发，制得西青果提取物，收率62.78％。
实施例3
西青果提取物的制备
(1)将500g西青果粉碎后过40目筛，取筛下物，采用超临界流体萃取法，以超临界CO2作为超临界萃取剂，对颗粒尺寸为－40目的西青果进行萃取，所述萃取为在35℃，450bar条件下以1.0g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(2)采用超临界流体萃取装置，以丙酮为萃取剂，对经步骤(1)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液A，所述萃取为在35℃，450bar条件下以7.8g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(3)采用超临界流体萃取装置，以水为萃取剂，对经步骤(2)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液B，所述萃取为在35℃，450bar条件下以5.0g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(4)将步骤(2)中制得的萃取液A和步骤(3)中制得的萃取液B混合后，在45℃，200mbar条件下减压旋转蒸发至所述萃取液A和萃取液B中萃取剂挥发，制得西青果提取物，收率61.34％。
实施例4
西青果提取物的制备
(1)将500g西青果粉碎后过40目筛，取筛下物，采用超临界流体萃取法，以超临界CO2作为超临界萃取剂，对颗粒尺寸为－40目的西青果进行萃取，所述萃取为在40℃，400bar条件下以0.83g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(2)采用超临界流体萃取装置，以丙酮为萃取剂，对经步骤(1)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液A，所述萃取为在40℃，400bar条件下以5.0g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(3)采用超临界流体萃取装置，以水为萃取剂，对经步骤(2)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液B，所述萃取为在40℃，400bar条件下以10g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(4)将步骤(2)中制得的萃取液A和步骤(3)中制得的萃取液B混合后，在45℃，200mbar条件下减压旋转蒸发至所述萃取液A和萃取液B中萃取剂挥发，制得西青果提取物，收率67.35％。
实施例5
西青果提取物的制备
(1)将500g西青果粉碎后过40目筛，取筛下物，采用超临界流体萃取法，以超临界CO2作为超临界萃取剂，对颗粒尺寸为－40目的西青果进行萃取，所述萃取为在35℃，500bar条件下以0.5g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(2)采用超临界流体萃取装置，以丙酮为萃取剂，对经步骤(1)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液A，所述萃取为在35℃，500bar条件下以10g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(3)采用超临界流体萃取装置，以水为萃取剂，对经步骤(2)处理后的西青果再次进行萃取，制得萃取液B，所述萃取为在35℃，500bar条件下以9.2g/min的速度萃取6h，每20min收集一次萃取物；
(4)将步骤(2)中制得的萃取液A和步骤(3)中制得的萃取液B混合后，在45℃，200mbar条件下减压旋转蒸发至所述萃取液A和萃取液B中萃取剂挥发，收率62.33％。
实施例6
1、将西青果提取物制成用于治疗放射性肠炎的药物片剂
取实施例1中制得的西青果提取物，加入稀释剂、崩解剂、矫味剂等辅料，混合后制粒，干燥后压片，制得西青果片剂。
2、将西青果提取物制成用于治疗放射性肠炎的药物灌肠剂
取实施例2所制得的西青果提取物25g，加入质量为西青果提取物2倍的蜂蜜和适量的水，过滤后定容至100ml，灭菌即得。
实施例7
实施例6中西青果片剂抗炎效果测试
1、实验材料
西青果片剂(实施例6制备所得)，二甲苯(石首化学试剂厂)，BP124S电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司)，雄性SPF级昆明小鼠，由第三军医大学实验动物中心提供，许可证号：SYXK(渝)2012-0002。阿司匹林肠溶片(石家庄康力药业)。
2、实验操作
取雄性SPF级昆明小鼠50只，体重20-25g，将小鼠称重后随机分为5组，分别为空白对照组(生理盐水0.2ml/10g)、阿司匹林组(0.5g/kg)，西青果片剂低剂量组(0.425g/kg)、中剂量组(0.85g/kg)、高剂量组(1.7g/kg)。待小鼠适应环境后，按体重(0.2ml/10g)采取灌胃的方式连续给药5天，每天给药一次，末次给药1h后，在每只小鼠的右耳正反两面涂布0.02ml的致炎剂二甲苯，左耳不经任何处理，作为对照，2h后将其动物处死，剪下耳廓，在左右耳的同一位置用8mm的打孔器取下耳片，称重，计算出耳肿胀度及抑制率(肿胀度＝右耳重量-左耳重量，肿胀抑制率＝空白对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度/空白对照组平均肿胀度×100％)。实验结果见表1，将各组小鼠的耳肿胀度值用表示，数据处理用SPSS18.0统计软件进行统计学分析，各组间耳肿胀度比较用单因素差分析，P<0.05认为差异有统计学意义。
表1西青果片剂对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
注：西青果口含片组、阿司匹林组与空白对照组比较，#p<0.001；
西青果口含片组与阿司匹林组比较，*p<0.001，**p>0.05
由表1可知，与空白对照组相比，三个剂量组的西青果片剂及阿司匹林组均对二甲苯所致小鼠耳肿胀有不同程度的抑制作用(p<0.001)，其中，高剂量组的西青果片剂与阿司匹林组相比，抗炎效果无明显差异(p>0.05)，说明本发明中由西青果提取物制备的西青果片剂具有良好的抗炎效果。
实施例8
放射辐射对小鼠存活率的影响以及西青果提取物的干预作用
1、实验动物及分组
实验选用SPF级健康昆明小鼠，体重18-22g，将小鼠适应性喂养后，随机分为7组，每组10只。具体分组如下：空白对照组、辐射对照组、西青果对照组(160mg/kg)、辐照+西青果低剂量组(40mg/kg)、辐照+西青果中剂量组(80mg/kg)、辐照+西青果高剂量组(160mg/kg)、辐照+阳性对照组(强的松5mg/kg)。
2、实验操作
各组均采用灌胃给药方式(0.1ml/10g)给予药物，每天一次给药，连续给药2周，空白对照组和辐射对照组给予等量的生理盐水。第14天除空白对照、西青果对照组以外，其他各组小鼠均一次性接受6.0Gy/只的60Co照射，随后记录小鼠30天的存活数量和存活时间。结果见表2。
表2 60Co照射小鼠30天存活率及西青果提取物的干预效果观察
注*与空白对照组比较，p＜0.05；#与辐射对照比较，p＜0.05
由表2可知，与空白对照组相比，三个剂量组的西青果提取物及强的松的阳性对照组均对辐射所致损伤有一定的修复作用(p＜0.05)，与阳性对照组比无统计学差异(p>0.05)。
实施例9
放射辐射对小鼠相关氧化炎症因子的影响以及西青果提取物的干预作用
按照实施例8中方法分组处理，将60只昆明小鼠随机分为0组后，各组均采用灌胃给药方式(0.1ml/10g)给予药物，每天一次给药，连续给药2周，空白对照组和辐射对照组给予等量的生理盐水。第14天除空白对照、西青果对照组以外，其他各组小鼠均一次性接受6.0Gy/只的60Co照射，3天后测定炎症因子TNF-α的表达水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性，结果见图1，图1中*与空白对照组比较，p＜0.05；#与辐射对照比较，p＜0.05，由图1可知，与空白对照组相比，三个剂量组的西青果提取物均能在一定程度上对抗辐射所致炎症损伤，降低炎症因子TNF-α的表达，提高抗氧化活性酶SOD活性(p＜0.05)。
最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。