一种植物提取物及其制备方法和应用与流程

本发明属于中药、天然药物领域，更具体地，涉及一种植物提取物及其制备方法和应用。

背景技术：

心血管疾病是目前影响人类健康的重大疾病之一，氧化应激和炎症反应在其发病过程中占有相当大的比例。

按照公认的损伤学说，当血液中携带的胆固醇、脂肪、细胞废弃物以及血浆中低密度脂蛋白(LDL)在血管损伤区域堆积：一方面LDL被氧化修饰成为ox-LDL；另一方面，内皮细胞求助巨噬细胞进行吞噬。吞噬后的巨噬细胞转变成为泡沫细胞，堆积形成斑块。此时，平滑肌细胞进行增殖与迁移覆盖斑块形成纤维帽，使动脉通道变窄，周围组织氧气含量降低。泡沫细胞不稳定，发生坏死协同炎症，产生斑凝块，周围组织供血功能退化死亡，导致组织坏死，从而引发冠心病、心绞痛、心肌梗死和脑血管意外等疾病。

所以消除过量活性氧自由基、调节血脂异常，抑制炎症反应，对降低动脉粥样硬化性心血管疾病的发生、发展有重要的作用。然而现有的具有上述作用的药物种类有限，部分存在副作用，因此需要进一步拓展药物的可选种类。

技术实现要素：

本发明的目的在于根据现有技术中的不足，提供了一种植物提取物。所述植物提取物中含有黄酮类活性组合物，具有治疗或缓解活性氧自由基损伤、抑制炎症反应、调节脂代谢异常、保护心肌缺血损伤等效果，有望作为一种有效的抗氧化、抗炎、降血脂和保护心血管药物或者具有上述功效的保健食品。

本发明的另一目的在于提供上述植物提取物的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述植物提取物的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种植物提取物，所述植物提取物为布渣叶和番石榴叶经醇提取后获得，所述植物提取物中含有至少占其质量60％以上的黄酮类活性物质，所述黄酮类活性物质包括如下组分：

芹菜素，牡荆苷，异牡荆苷，芹菜素-6，8-二-C-葡萄糖苷，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-鼠李糖苷，芹菜素-6-C-鼠李糖-8-C-葡萄糖苷，芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷，芹菜素-6-C-葡萄糖糖-8-C-阿拉伯苷，芹菜素-6-C-木糖-8-C-葡萄糖苷，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷，山柰素，山奈酚-3-O-β-D葡萄糖苷，异鼠李素，异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷，槲皮素，槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷，番石榴苷，瑞诺苷，金丝桃苷，异槲皮苷。

优选地，所述黄酮类活性物质中，含有芹菜素0.2～1份，牡荆苷3～10份，异牡荆苷2～8份，芹菜素-6，8-二-C-葡萄糖苷1～4份，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-鼠李糖苷0.5～2份，芹菜素-6-C-鼠李糖-8-C-葡萄糖苷0.4～2份，芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷0.3～2份，芹菜素-6-C-葡萄糖糖-8-C-阿拉伯苷1.2～3.2份，芹菜素-6-C-木糖-8-C-葡萄糖苷0.4～2份，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷0.3～2份，山柰素0.4～2份，山奈酚-3-O-β-D葡萄糖苷1～3份，异鼠李素0.3～1.2份，异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷6～12份，槲皮素0.5～1.2份，槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷5～11份，番石榴苷6～15份，瑞诺苷3～10份，金丝桃苷1.5～4.5份，异槲皮苷1.5～4.5份。

优选地，所述黄酮类活性物质中，含有芹菜素0.52份，牡荆苷8.2份，异牡荆苷5.5份，芹菜素-6，8-二-C-葡萄糖苷2.2份，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-鼠李糖苷0.91份，芹菜素-6-C-鼠李糖-8-C-葡萄糖苷0.97份，芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷0.9份，芹菜素-6-C-葡萄糖糖-8-C-阿拉伯苷2.3份，芹菜素-6-C-木糖-8-C-葡萄糖苷0.86份，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷0.99份，山柰素1.12份，山奈酚-3-O-β-D葡萄糖苷2.3份，异鼠李素0.98份，异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷10.7份，槲皮素0.79份，槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷8.8份，番石榴苷10.3份，瑞诺苷6.4份，金丝桃苷2.5份，异槲皮苷2.1份。

所述黄酮类活性物质中的黄酮类化合物的结构如表1所示：

表1本发明植物提取物中黄酮类化合物的结构式:

优选地，所述植物提取物的提取方法具体为:

将布渣叶和番石榴叶按照质量比为1∶5～5∶1混合，采用30％～80％乙醇进行醇提，料液比为1∶10～30，粗提液减压浓缩，离心，上清液加3～5倍体积水后用0.5～1倍药材重量的大孔树脂吸附过夜；采用醇溶液洗脱，收集40～90％醇洗脱部分，减压浓缩后过凝胶柱分离，分离采用的洗脱剂为60％～95％甲醇水溶液，合并类黄酮流份，减压浓缩后用纯化，洗脱，收集相应流份，合并，浓缩，真空干燥得到所述植物提取物。

优选地，凝胶柱为LH-20葡聚糖凝胶柱，减压浓缩后用ODS柱色谱纯化。

最优选地，以0.5kg布渣叶和0.5kg番石榴叶为原料，经提取、分离、纯化后得到活性提取物部位。提取溶剂为70％乙醇，料液比1∶20，90℃加热回流；粗提液减压浓缩至醇味淡后，3000r/min室温离心20min，上清液加4倍体积纯化水后用1000g大孔树脂吸附过夜；继而以10％、70％、100％甲醇溶液洗脱，收集70％甲醇洗脱部分，减压浓缩后过LH-20葡聚糖凝胶柱分离，洗脱剂为90％甲醇水溶液，聚酰胺薄层色谱跟踪，合并类黄酮流份，减压浓缩后用ODS柱色谱纯化，甲醇水溶液梯度洗脱，收集相应流份，合并，浓缩，65℃真空干燥得到植物提取物。

所述植物提取物在制备防治活性氧自由基损伤药物或保健食品中的应用。

所述植物提取物在制备防治高脂血症的药物或保健食品中的应用。

所述植物提取物在制备防治动脉粥样硬化的药物或保健食品中的应用。

所述植物提取物在制备防治糖尿病微血管损伤药物或保健食品中的应用。

与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：

本发明所提供的植物提取物中含有不少于60％质量百分比的所述黄酮类化合物，且经验证其在体外能清除DPPH自由基和活性氧自由基，能显著降低实验动物血脂，而且能保护异丙肾上腺素致急性心肌损伤模型大鼠，能有效改善脂多糖(LPS)诱导炎症模型小鼠的炎症反应。所述的植物提取物源于民间习用植物或药食同源植物，安全可靠，无毒副作用，可作为一种新型抗氧化、抗炎、降脂的保健食品或药物制剂原料。

附图说明

图1为植物提取物MpPgFF制备工艺流程简图。

图2为植物提取物MpPgFF清除DPPH自由基结果。

图3为植物提取物MpPgFF对高脂血症模型小鼠肝脏组织形态学的影响。

图4为植物提取物MpPgFF对心肌缺血模型大鼠心肌病理组织形态学的影响。

具体实施方式

以下结合具体实施例和附图来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，本发明所用试剂和材料均为市购。

实施例1：

如图1所示，以0.5kg布渣叶和0.5kg番石榴叶为原料，经提取、分离、纯化后得到活性提取物部位。提取溶剂为70％乙醇，料液比1∶20，90℃加热回流；粗提液减压浓缩至醇味淡后，3000r/min室温离心20min，上清液加4倍体积纯化水后用1000g大孔树脂吸附过夜；继而以10％、70％、100％甲醇溶液洗脱，收集70％甲醇洗脱部分，减压浓缩后过LH-20葡聚糖凝胶柱分离，洗脱剂为90％甲醇水溶液，聚酰胺薄层色谱跟踪，合并类黄酮流份，减压浓缩后用ODS柱色谱纯化，甲醇水溶液梯度洗脱，254nm和280nm波长检测，收集相应流份，合并，浓缩，65℃真空干燥得到目标提取物MpPgFF 1 124.5mg。

经过测定，上述目标提取物中，按质量百分数计，含有黄酮类活性物质69.34％，各黄酮类化合物具体含量为：芹菜素(1，0.52％)，牡荆苷(2，8.2％)，异牡荆苷(3，5.5％)，芹菜素-6，8-二-C-葡萄糖苷(4，2.2％)，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-鼠李糖苷(5，0.91％)，芹菜素-6-C-鼠李糖-8-C-葡萄糖苷(6，0.97％)，芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷(7，0.9％)，芹菜素-6-C-葡萄糖糖-8-C-阿拉伯苷(8，2.3％)，芹菜素-6-C-木糖-8-C-葡萄糖苷(9，0.86％)，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷(10，0.99％)，山柰素(11，1.12％)，山奈酚-3-O-β-D葡萄糖苷(12，2.3％)，异鼠李素(13，0.98％)，异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷(14，10.7％)，槲皮素(15，0.79％)，槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(16，8.8％)，番石榴苷(17，10.3％)，瑞诺苷(18，6.4％)，金丝桃苷(19，2.5％)，异槲皮苷(20，2.1％)。

实施例2：

如图1所示，以0.5kg布渣叶和1.0kg番石榴叶为原料，经提取、分离、纯化后得到活性提取物部位。提取溶剂为50％乙醇，料液比1∶20，90℃加热回流；粗提液减压浓缩至醇味淡后，减压抽滤，上清液加4倍体积纯化水后用1500g大孔树脂吸附过夜；继而以10％、70％、100％甲醇溶液洗脱，收集70％甲醇洗脱部分，减压浓缩后过LH-20葡聚糖凝胶柱分离，洗脱剂为90％甲醇水溶液，聚酰胺薄层色谱跟踪，合并类黄酮流份，减压浓缩后用ODS柱色谱纯化，甲醇水溶液梯度洗脱，254nm和280nm波长检测，收集相应流份，合并，浓缩，65℃真空干燥得到目标提取物MpPgFF 1 630.8mg。

经过测定，上述目标提取物中，按质量百分数计，含有黄酮类活性物质62.4％，各黄酮类化合物具体含量为：芹菜素(1，0.22％)，牡荆苷(2，3.4％)，异牡荆苷(3，2.7％)，芹菜素-6，8-二-C-葡萄糖苷(4，1.16％)，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-鼠李糖苷(5，0.51％)，芹菜素-6-C-鼠李糖-8-C-葡萄糖苷(6，0.44％)，芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷(7，0.39％)，芹菜素-6-C-葡萄糖糖-8-C-阿拉伯苷(8，1.25％)，芹菜素-6-C-木糖-8-C-葡萄糖苷(9，0.46％)，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷(10，0.37％)，山柰素(11，0.43％)，山奈酚-3-O-β-D葡萄糖苷(12，1.3％)，异鼠李素(13，0.38％)，异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷(14，6.7％)，槲皮素(15，1.19％)，槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(16，10.7％)，番石榴苷(17，14.6％)，瑞诺苷(18，8.3％)，金丝桃苷(19，4.2％)，异槲皮苷(20，3.7％)。

实施例3：

如图1所示，以1.0kg布渣叶和0.5kg番石榴叶为原料，经提取、分离、纯化后得到活性提取物部位。提取溶剂为60％乙醇，料液比1∶20，90℃加热回流；粗提液减压浓缩至醇味淡后，减压抽滤，上清液加4倍体积纯化水后用1500g大孔树脂吸附过夜；继而以10％、70％、100％甲醇溶液洗脱，收集70％甲醇洗脱部分，减压浓缩后过LH-20葡聚糖凝胶柱分离，洗脱剂为90％甲醇水溶液，聚酰胺薄层色谱跟踪，合并类黄酮流份，减压浓缩后用ODS柱色谱纯化，甲醇水溶液梯度洗脱，280nm和340nm波长检测，收集相应流份，合并，浓缩，65℃真空干燥得到目标提取物MpPgFF 1 590.2mg。

经过测定，上述目标提取物中，按质量百分数计，含有黄酮类活性物质65.7％，各黄酮类化合物具体含量为：芹菜素(1，0.8％)，牡荆苷(2，9.2％)，异牡荆苷(3，6.0％)，芹菜素-6，8-二-C-葡萄糖苷(4，2.9％)，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-鼠李糖苷(5，1.2％)，芹菜素-6-C-鼠李糖-8-C-葡萄糖苷(6，1.5％)，芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷(7，1.2％)，芹菜素-6-C-葡萄糖糖-8-C-阿拉伯苷(8，3.1％)，芹菜素-6-C-木糖-8-C-葡萄糖苷(9，1.8％)，芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷(10，1.9％)，山柰素(11，1.3％)，山奈酚-3-O-β-D葡萄糖苷(12，3.0％)，异鼠李素(13，1.0％)，异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷(14，11.7％)，槲皮素(15，0.6％)，槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(16，5.3％)，番石榴苷(17，6.2％)，瑞诺苷(18，3.7％)，金丝桃苷(19，1.8％)，异槲皮苷(20，1.5％)。

实施例4:应用实验:

提取物MpPgFF清除DPPH自由基

1、供试溶液制备和清除DPPH自由基活性的测定

取实施例1中提取得到的植物提取物MpPgFF，以DMSO溶解，配制成14.5mg/mL的母液。准确移取100μL母液，分别用甲醇稀释50、100、120、150、200倍，即得不同浓度的MpPgFF供试品溶液。

分别取100μL上述浓度梯度的MpPgFF供试液于棕色具塞小瓶中，再向其中加入3mL的DPPH标准溶液(精密称取2.5mg DPPH，用甲醇定容于100mL棕色容量瓶)，混匀。于室温暗处静置25min，然后于517nm测定吸光度值记为At，实验重复三次。按照下式计算DPPH自由基清除率：E＝(A0-At)/A0×100％(A0:DPPH标准溶液的吸光度；At：加入供试品溶液t时刻后的吸光度)。采用IC₅₀(清除率为50％时，供试品的浓度)为自由基清除能力大小的评价指标。

提取物MpPgFF对DPPH自由基清率测定结果如图2所示，其DPPH自由基清活性的IC50约0.038mg/mL，说明其具有较好的自由基清除能力。实施例2和实施例3的提取物MpPgFF具有与实施例1的提取物类似的活性。

实施例5:应用实验:

提取物MpPgFF改善二甲苯致小鼠耳廓炎性肿胀

1实验材料：

二甲苯：天津市大茂化学试剂厂；阿司匹林：广州全奥化工公司；

取实施例1中提取得到的植物提取物MpPgFF：高、中、低剂量分别为200mg/kg，100mg/kg，50mg/kg。

2实验动物：

SPF级昆明种小鼠，雌雄各半，体质量18～22g，由广东省医学实验动物中心提供，许可证号：SCXK(粤)2008-0002。

3实验方法：

50只小鼠，随机分为5组：模型对照组、阳性对照组(阿司匹林，100mg/kg)、提取物MpPgFF高剂量组(200mg/kg)、中剂量组(100mg/kg)、低剂量组(50mg/kg)。各组小鼠灌胃给予相应剂量的药物，给药体积20ml/kg。每日1次，连续7d，末次给药后1h，将100μL二甲苯均匀涂抹于小鼠右耳两面，左耳作为对照，1h后将小鼠脱颈椎处死，剪下左右两耳，用直径为8mm打孔器取下双侧对称处的耳片称质量，以左右耳片质量之差作为肿胀度，并计算不同剂量给药组的肿胀抑制率。

表2提取物MpPgFF对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(n＝10)

与模型组比较，^*P﹤0.05，^**P﹤0.01

实验结果表明，与对照组相比，提取物MpPgFF低剂量组虽然没有统计学意义，但有减轻炎性肿胀的趋势，其高、中剂量组均能明显减轻二甲苯致小鼠耳廓炎性肿胀，并且剂量越高抑制率越大。实施例2和实施例3的提取物MpPgFF具有与实施例1的提取物类似的活性。

实施例6:应用实验:

提取物MpPgFF降低高脂饮食诱导模型小鼠血脂

1实验材料：

胆固醇、脱氧胆酸钠：北京鼎国生物技术有限公司；蔗糖：汕头市光华化学厂；吐温80：天津市大茂化学试剂厂；丙硫氧嘧啶：广东华南药业集团有限公司；血脂康胶囊：北京北大维信生物科技有限公司；总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)检测试剂盒：中生北控生物科技股份有限公司，批号分别为121321、114961、110431和110441。

取实施例1中提取得到的植物提取物MpPgFF：高、中、低剂量分别为90mg/kg，60mg/kg，30mg/kg。

2实验动物：

SPF级昆明种小鼠，雄性，体质量18～22g，由广东省医学实验动物中心提供，许可证号：SCXK(粤)2008-0002。

3实验方法：

SPF级体重为18～22g的雄性小鼠72只，平均分成6组，包括正常对照组、模型对照组、阳性对照组(血脂康胶囊)、MpPgFF高剂量组、MpPgFF中剂量组、MpPgFF低剂量组，分别标记。

各组每天均给予正常饮水和饲料，除正常组外，其余各组每天上午用脂肪乳剂灌胃(脂肪乳剂由胆固醇，猪油，脱氧胆酸钠，丙硫氧嘧啶，吐温-80，蔗糖，蒸馏水按一定比例配制，用前用37℃水浴融化，灌胃体积20ml/kg)，建立高血脂小鼠模型，下午再分别以不同药液灌胃(灌胃体积20ml/kg)，连续进行14d。每2天称1次体重，监测小鼠体重变化。各组动物最后一次灌胃后，禁食不禁水，12h后眼眶取血，血样于4℃、3000rpm条件下离心10min，分离血清，-20℃保存备用，择日测血液生化指标。

应用血脂测定试剂盒，按说明书检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)的含量。

另取肝脏称重，计算小鼠肝脏指数(肝指数＝肝重量/体重×100)；取肝组织置于10％甲醛中浸泡，石蜡包埋、切片，HE常规染色，在光学显微镜下观察各组肝脏病理组织形态的改变。

4实验结果：

表3提取物MpPgFF对高脂血症模型小鼠TC，TG，HDL和LDL的影响(n＝12)

与正常组比较，^*P﹤0.05，^**P﹤0.01；与模型组比较，^△P﹤0.05，^△△P﹤0.01

表4提取物MpPgFF对高脂血症小鼠肝指数的影响(n＝12)

肝脏病理形态观察：

正常小鼠肝脏的肝血窦丰富，较密集，细胞质中不出现脂肪堆积现象(图3A)。模型组小鼠肝细胞出现轻度脂肪变性，局部有脂肪液滴堆积现象(图3B)。灌胃提取物MpPgFF 2周后，高血脂小鼠肝脏脂肪数量有不同程度减少，以高剂量组效果最显著(图3D)，低剂量效果较差，炎细胞浸润、肝细胞索紊乱(图3F)。血脂康组脂肪变性较轻，但有散在炎细胞浸润(图3C)。实施例2和实施例3的提取物MpPgFF具有与实施例1的提取物类似的活性。

实施例7:应用实验：

提取物MpPgFF保护异丙肾上腺素致急性心肌损伤

1、实验药品与试剂

盐酸异丙肾上腺素注射液(ISO)：上海禾丰制药有限公司生产，批号：110202；水合氯醛：中国医药集团上海化学试剂公司，批号：20050205；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒：南京建成生物试剂有限公司生产；复方丹参滴丸：天津天士力制药股份有限公司生产，批号：110703；提取物MpPgFF。

2、实验动物

SPF级SD大鼠，雌雄各半，体质量(200±20)g，由广东省医学实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK(粤)2008-0002。

3、仪器

MedLab-6.0生物信号采集处理系统；WFZ-26A紫外可见分光光度计；MS-18全自动生化分析仪；TGL-16G台式离心机；NIKON E600显微镜。

4、方法：动物分组与给药方法

SD大鼠60只，随机分为6组，每组10只，分别为正常对照组(正常组)、模型对照组(模型组)、复方丹参滴丸组(324mg/kg)、MpPgFF高剂量组(90mg/kg)、中剂量组(60mg/kg)、低剂量组(30mg/kg)。各给药组每天按体重灌胃给药1次，连续5d，正常对照组和模型对照组给予同体积的蒸馏水。

5、异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠模型制备

上述各组大鼠末次给药后1h，以10％水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉，仰卧位固定，连接MedLab-6.0生物信号采集处理系统心电图电极，先记录一段正常心电图。随后，除正常组外，各组大鼠均采取皮下多点注射异丙肾上腺素即ISO(2mg/kg)，正常对照组注射等量的生理盐水，多点注射部位包括：四肢根部和背部共5-6点，10s内注射完毕，记录注射后1、3、5、8、10、15、20、25、30min大鼠的ECG，分别统计1、3、5、8、10、15、20、25、30min的ECG J点下移值(J点是QRS波群的终末部分与ST段起始之交接点，即S波的终点，以PR段为基线，J点位移的变化值)。测完心电图后，除正常组外，每只大鼠再给2天ISO5mg/kg(腹腔注射)，同时持续灌胃给药，每天1次。

6、检测指标

大鼠末次给予ISO 24h后，腹主动脉取血，离心制备血清，采用全自动生化分析仪检测血清中LDH)和CK的活性。另取大鼠心脏中下1/3处的部分心肌置于10％甲醛中浸泡固定，石蜡包埋后连续切片，HE染色，光镜下观察病理改变；另取大鼠心尖同一部位心肌组织，用冰生理盐水冲洗，滤纸吸干后称取适量，在冰浴条件下充分研磨制成10％组织匀浆，测SOD、MAD、GSH-PX的含量。组织蛋白含量采用考马斯亮蓝法测定。

7、统计学处理

所有数据以均数±标准差()表示，采用SPSS 13.0统计软件分析处理，组间比较采用单因素方差分析，以P<0.05表示差异有显著性。

8、结果

提取物MpPgFF对急性心肌缺血大鼠病理组织形态学的影响

由图4结果可见，正常对照组大鼠心肌组织结构完整，心肌纤维呈短柱状，心肌细胞排列整齐，致密，细胞核呈椭圆形，位于中央，大小均一，胞浆染色均匀(图4A)。模型组大鼠心肌纤维排列紊乱，心肌出现广泛性心肌纤维变性、坏死，毛细血管扩张，心肌纤维之间水肿和大量炎性细胞浸润(图4B)。复方丹参滴丸组大鼠心肌纤维排列有些紊乱，个别心肌出现心肌细胞肥大、局部心肌纤维变性、坏死(图4C)。MpPgFF高剂量组大鼠心肌组织心肌纤维之间轻微水肿，并局部少量炎性细胞浸润，个别出现心肌组织点片状坏死和变性(图4F)。中剂量组大部分心肌纤维排列整齐，部分出现心肌组织点片状坏死和变性，间质少量炎性细胞浸润(图4E)。低剂量组出现心肌组织片状坏死和变性，毛细血管扩张，心肌纤维之间中度水肿，间质明显炎性细胞浸润(图4D)。

MpPgFF对急性心肌缺血大鼠血清心肌酶的影响

与正常组相比，模型组大鼠血清中CK、LDH含量显著升高(P＜0.01)，表示大剂量ISO可导致心肌细胞缺血损伤。与模型组比较，组合物高、中剂量组血清LDH、CK含量均明显降低(P＜0.05)。提示组合物具有改善心肌细胞损伤，减轻心肌缺血的作用。复方丹参滴丸组血清LDH、CK也显著降低(P＜0.01)。结果见表5。

表5 MpPgFF对心肌缺血大鼠血清CK和LDH的影响(n＝10)

与正常组比较：^△P<0.05，^△△P<0.01；与模型组比较：^★P<0.05，^★★P<0.01；

MpPgFF对急性心肌缺血大鼠氧化应激反应的影响

表6结果表明，与正常组比较，模型组大鼠心肌组织中MDA含量显著升高，SOD含量显著下降(P＜0.01)，GSH-PX活力显著下降(P＜0.05)，表示该模型大鼠心肌组织氧化应激反应增强，脂质过氧化产物增加。与模型组相比，MpPgFF高、中剂量组MDA含量明显降低，同时SOD含量、GSH-PX活力明显升高。提示MpPgFF抗心肌缺血的同时能明显提高心肌对抗脂质过氧化反应能力。实施例2和实施例3的提取物MpPgFF具有与实施例1的提取物类似的活性。

表6 MpPgFF对心肌缺血大鼠心肌组织SOD、MDA和GSH-PX的影响(n＝10)

与正常组比较：^△△P<0.01；与模型组比较：^★P<0.05，^★★P<0.01。