一种含香茶菜提取物的植物盐及其制备方法
【专利摘要】本发明提供一种含香茶菜提取物的植物盐，包括以下重量份的原料：香茶菜提取物2~4份，盐地碱蓬植物盐6~8份，所述香茶菜提取物，香茶菜总黄酮含量为5.9~6.1%，冬凌草甲素含量为0.5~0.6%，所述盐地碱蓬植物盐，钠含量为15.20~15.30%，Ca含量为2600~2700mg/kg；本发明还提供所述含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，包括层析步骤，所述层析步骤，大孔树脂吸附柱种类为HP?20型或SP?825型，柱压为0.8~1.5 MPa；本发明制备的含香茶菜提取物的植物盐，具有延长凝血时间的作用，其急性毒性小，香茶菜提取物中香茶菜总黄酮含量高。
【专利说明】
-种含香茶菜提取物的植物盐及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明设及一种含香茶菜提取物的植物盐及其制备方法，属于植物盐提取工艺技 术领域。
【背景技术】
[0002] 香茶菜属多年生草本植物，始载于《救荒本草》，多入煎剂，治疗慢性咽炎、食道癌 等，疗效确切。香茶菜显示出较明显的抗肿瘤作用，1976年W来该属植物中二祗类化合物成 为国内外学者寻求新型抗肿瘤先导化合物的焦点。近年随着新的香茶菜二祗类化合物的陆 续发现，报道了大量具有细胞毒性的香茶菜二祗类成分，目前作为抗肿瘤候选化合物的有 冬凌草甲素、毛專香茶菜甲素、大叶香茶菜庚素等，相关产品Ξ姐妹片(细叶香茶菜）、冬凌 草糖浆、片(冬凌草）、消炎利胆片(含溪黄草)等。除此之外，有报道显示香茶菜二祗类成分 尚具有较明显的抗菌作用、抗肝损伤等作用。
[0003] 食盐的食用是人类进步的重要阶梯，长期W来人类依靠海水晒盐及井盐、岩盐开 采等方法制造食盐，满足自身需求。但人类长期食用的盐类基本上是无机物，只能满足人体 自身对无机盐的需求，难W适应由于生活水平提升造成的人类对多种功能食物的需求，特 别是目前市场上食盐基本为氯化钢，过高的化+摄入对人体的血压、血脂等均有明显的负面 影响。
[0004] 基于W上情况，目前印度率先在世界上利用海蓬子生产出植物盐，据报道，运种植 物盐富含钟、巧、儀、铁等微量元素，加工过程中无需添加任何化学物质，因此堪称"天然营 养盐"。
[0005] 盐地碱蓬是一年生草本积盐植物，植物学分类为襲科（chenopodiaceae)碱蓬属 (suaeda forsk.exscop)，主要生长于海滨、湖边、荒漠等处的盐碱荒地，是一种典型的盐碱 地指示植物，在勸海沿岸及新疆、内蒙等地的盐碱地区有着广泛的分布。我国共有碱蓬属植 物20种及1个变种，常见种为灰绿碱蓬（suaeda.glanca bunge)和盐地碱蓬（S. salsalX.) Pall),产量最大的是灰绿碱蓬。目前对碱蓬属植物的研究主要集中在灰绿碱蓬、盐地碱蓬 及翅碱蓬。
[0006] 盐地碱蓬是世界上含盐量最高的草本植物之一，全盐量高达4.54%。在阴离子中， C1-占全盐的47.14%，在阳离子中，Mgh占全盐的20.04%，此外脂肪、蛋白质外，矿物质、微 量元素和维生素的含量丰富，适于进行植物盐生产开发，但目前相关部口尚未对运一问题 给予充分重视。如天津勸海沿岸地区大部分为高盐碱度的滩涂及湿地，极易适合碱蓬的生 长。长期W来，运些碱蓬自生自灭，一直没有引起人们的足够重视。
[0007] 现有技术存在W下缺陷： (1)急性毒性高； (2 )在延长凝血时间的效果上不明显； (3) 制备的含香茶菜提取物的植物盐中细菌总数多； (4) 香茶菜提取物的制备方法中，多酪的得率低。
【发明内容】
[0008] 本发明为解决W上技术问题，提供一种含香茶菜提取物的植物盐及其制备方法， W实现W下发明目的： (1) 本发明制备的含香茶菜提取物的植物盐，急性毒性小； (2) 本发明制备的含香茶菜提取物的植物盐，具有延长凝血时间的作用； (3) 本发明含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，香茶菜提取物的制备方法中，提取的 产物中细菌总数少； (4) 本发明含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，香茶菜提取物的制备方法中，多酪得 率高。
[0009] 为解决W上技术问题，本发明采用的技术方案如下： 一种含香茶菜提取物的植物盐，所述植物盐，原料包括香茶菜提取物和盐地碱蓬植物 丈h πττ. ο
[0010] W下是对上述技术方案的进一步改进： 所述植物盐，包括W下重量份的原料:香茶菜提取物2~4份，盐地碱蓬植物盐6~8份。
[0011] 所述香茶菜提取物，香茶菜总黄酬含量为5.9~6.1%，冬凌草甲素含量为0.5~0.6%。
[0012] 所述盐地碱蓬植物盐，钢含量为15.20~15.30%，Ca含量为2600~2700mg/kg。
[0013] -种含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，香茶菜提取物的制备包括层析步骤， 所述层析步骤，大孔树脂吸附柱种类为HP-20型或SP-825型。
[0014] 所述香茶菜提取物的制备包括层析步骤，所述层析步骤，洗脱用量为2~8BV。
[0015] 所述层析步骤，柱压为0.8~1.5 MPa。
[0016] 所述香茶菜提取物的制备还包括过滤步骤，所述过滤步骤，铅离子含量小于5ppb， 铁离子含量小于llppb。
[0017] 所述香茶菜提取物的制备还包括过滤步骤，所述过滤步骤，滤膜的孔径为0.06~ 1.5皿，压差为135~180邸曰。
[0018] 所述盐地碱蓬植物盐提取步骤包括酶解工艺，所述酶解工艺为，加入植物蛋白酶 保护剂，植物蛋白酶保护剂的质量百分数为2~6%。
[0019] 采用W上技术方案，本发明的有益效果为： (1)本发明含香茶菜提取物的植物盐，急性毒性小，给予大鼠双侧鼻腔滴鼻Img/ml的含 香茶菜提取物的植物盐配成的溶液1.5ml/kgbw7天，末次给药后摄食、饮水、粪便未发现异 常，体重增加为228~231g，增加百分率差异不大。
[0020] (2)本发明含香茶菜提取物的植物盐，能延长凝血时间，给予小鼠本发明Img/ml的 含香茶菜提取物的植物盐配成的溶液1.5ml/kgbw-周，末次给药化后摘眼球取血，凝血时 间为96.0~105.9s，模型组为71.6s。
[0021] (3)本发明含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，香茶菜提取物的制备方法中，提 取的产物中细菌总数少，细菌总数126~131 cfu/g。
[0022] (4)本发明含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，香茶菜提取物的制备方法中，多 酪得率高，多酪得率8.5~8.8%。
【具体实施方式】
[0023] W下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用 于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
[0024] 实施例1 一种含香茶菜提取物的植物盐 W重量份计，包括W下原料组分： 香茶菜提取物4份、盐地碱蓬植物盐6份。
[0025] 所述香茶菜提取物，性状为栋黄色粉末，无异味，烙点为247~25rC，香茶菜总黄酬 含量为5.9~6.1%，细菌总数126~131 cfu/g，冬凌草甲素含量为0.5~0.6〇/〇。
[0026] 所述盐地碱蓬植物盐，钢含量为15.20~15.30%;钟含量为3.4~3.5%;黄酬含量为 2.6~2.7mg/g; Ca含量为 2600~2700mg/kg; Fe 含量为690~700mg/kg。
[0027] 实施例2-种含香茶菜提取物的植物盐 W重量份计，包括W下原料组分： 香茶菜提取物3份、盐地碱蓬植物盐7份。
[0028] 所述香茶菜提取物，性状为栋黄色粉末，无异味，烙点为247~25rC，香茶菜总黄酬 含量为5.9~6.1%，细菌总数126~131 cfu/g，冬凌草甲素含量为0.5~0.6〇/〇。
[0029] 所述盐地碱蓬植物盐，钢含量为15.20~15.30%;钟含量为3.4~3.5%;黄酬含量为 2.6~2.7mg/g; Ca含量为 2600~2700mg/kg; Fe 含量为690~700mg/kg。
[0030] 实施例3-种含香茶菜提取物的植物盐 W重量份计，包括W下原料组分： 香茶菜提取物2份、盐地碱蓬植物盐8份。
[0031] 所述香茶菜提取物，性状为栋黄色粉末，无异味，烙点为247~25rc，香茶菜总黄酬 含量为5.9~6.1%，细菌总数126~131 cfu/g，冬凌草甲素含量为0.5~0.6〇/〇。
[0032] 所述盐地碱蓬植物盐，钢含量为15.20~15.30%;钟含量为3.4~3.5%;黄酬含量为 2.6~2.7mg/g; Ca含量为 2600~2700mg/kg; Fe 含量为690~700mg/kg。
[0033] 实施例4 一种香茶菜提取物的制备方法 包括W下步骤： (1)超声波粉碎 称取新鲜香茶菜叶片，按重量比1:50的比例用Immol/L、抑为6.8的PBS缓冲液浸泡40~ 60min，充分溶胀； 在冰浴中用功率7 50~820W的超声波超声15~19mi η进行细胞破碎，破碎至0.5~2.5皿，得 粗提物。
[0034] 所述干燥香茶菜的含水量《10%。
[0035] (2)破壁 向1份粗提物中加入0~0.4份破壁酶、0~0.1份抗氧化剂和pH值为4~7的100~4000份水， 在20~50 °C下浸泡35~65min，得破壁液； 所述破壁酶选自几下质酶、纤维素酶、多酪氧化酶和漆酶中的至少一种。
[0036] (3)层析 将破壁液通过大孔树脂吸附柱，用1~15%的丙酬、乙醇和丙醇的水溶液淋洗除去杂质， 除杂用量为柱体积的6~10倍； 所述大孔树脂吸附柱为D-101型吸附树脂柱，柱压为0.8MPa; 再用15~70%的乙醇-丙醇的水溶液洗脱，洗脱用量为柱体积的2倍(2BV)，得洗脱液。
[0037] (4)过滤 将洗脱液用累打到膜过滤器中，滤膜的孔径为0.06~1.5μπι，过滤时的压差为135~ ISOKPa，洗脱液W0.05~0.2mA的速度通过滤膜进行过滤得滤液； 所述膜过滤采用有机树脂滤膜； 膜过滤步骤后的滤液中，铅离子含量小于5ppb，铁离子含量小于llppb、铜离子的含量 小于1化pb。
[0038] 再将滤液进行真空冻干处理，得香茶菜提取物。
[0039] 下述实施例5~实施例10是对实施例4所述香茶菜提取物制备方法的优化，即：采用 实施例4的香茶菜提取物的制备方法，只改变(3)层析步骤，对大孔树脂吸附柱种类、洗脱用 量和柱压做多因素分析，采用常规方法对提取的香茶菜提取物进行各项具体物质的含量进 行测定。
[0040] 表1大孔树脂吸附柱种类、洗脱用量和柱压的多因素分析(实施例5~实施例10)
由上述多因素分析试验可知，实施例7~实施例8是优选实施例，即大孔树脂吸附柱种类 为HP-20型或SP-825型，洗脱用量为5~她V和柱压为1.2~1.3 MPa。
[0041] 实施例11 一种含香茶菜提取物的植物盐的制备方法 包括W下步骤： 一、香茶菜提取物的制备 采用实施例4的香茶菜提取物的制备方法，只改变(3)层析步骤，对大孔树脂吸附柱种 类、洗脱用量和柱压Ξ个因素，改变为大孔树脂吸附柱种类为HP-20型或SP-825型，洗脱用 量为5~她V和柱压为1.2~1.3 MPa，得香茶菜提取物。
[0042] 二、盐地碱蓬植物盐的提取 (1)酶解工艺 A、 将粉碎后的碱蓬，与水配制成料液，料液比为1:20; 加入植物蛋白酶保护剂，植物蛋白酶保护剂的质量百分数为2~6%; 优选植物蛋白酶保护剂为不被蛋白酶降解的生物大分子，如淀粉、魔芋粉或普鲁兰多 糖等； 植物蛋白酶保护剂为小分子时，可W是麦芽糊精或麦芽糖醇等； B、 用NaOH或肥1调节料液的pH值至食品用商品蛋白酶的最适pH值； C、 向料液中加入一种或一种W上的食品用商品蛋白酶，得到反应液，当一种W上的食 品用商品蛋白酶的最适pH值相差1W上时，需要分步酶解； 优选W植物蛋白原料或植物蛋白提取物的总体质量为100%计，食品用商品蛋白酶的质 量百分数为0.1%~10%; 食品用商品蛋白酶可W是木瓜蛋白酶、渡萝蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、膜糜蛋 白酶、膜蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶或Protamex(Novozymes)等单一蛋白酶或一种W上 蛋白酶的复合酶； D、 揽拌反应液至充分混合，酶解时间为12h~12化;单一蛋白酶酶解时，酶解溫度为单 一蛋白酶的最适溫度，一种W上蛋白酶同时酶解时，酶解溫度根据酶解时间内植物蛋白水 解程度最大时的溫度确定； E、 加热灭酶活，可W在100°C，维持5min~lOmin灭酶活。
[0043] (2)脱重金属 向酶解液中加入生物吸附剂，加入量为酶解液质量的0.2~0.8%，酶解液溫度控制在32 ~36°C，90巧m揽拌22~26小时； 经结晶、粉碎，得盐地碱蓬植物盐。
[0044] 所述生物吸附剂包括海藻酸钢7~9份、褐藻胶2~3份、微生物制剂4~4.8份； 所述微生物制剂包括鲁氏毛霉6 X 108个/g、藤黄微球菌2.5 X 108个/g、酿酒酵母3 X 1〇8个/g;上述微生物分别由菌种按常规培养方法培养制得； 所述鲁氏毛霉(胞/cor rot?ia/3t/s)菌种保藏号为CICC3155;藤黄微球菌(似icrococct/s 菌种保藏号为ACCC41016;酿酒酵母（SaccAaroffljces cereWsiae)菌种保藏号为 ACCC20089； 上述菌种均来自市售。
[0045] Ξ、称量 按照配方称量香茶菜提取物和盐地碱蓬植物盐。
[0046]四、混合 将称取好的香茶菜提取物和盐地碱蓬植物盐揽拌、混合均匀，制成混合粉末，得含香茶 菜提取物的植物盐。
[0047] 应用效果： 1、本发明含香茶菜提取物的植物盐急性毒性试验试验及效果 选取健康成年SD大鼠48只，体重（190±20)g，雌雄各半，随机分为空白组、溶剂组、本发 明实施例1组~实施例3组，鼻炎滴剂组，每组8只。试验前禁食约12 h，本发明实施例1组~实 施例3组将本发明实施例1~实施例3所述含香茶菜提取物的植物盐配成Img/ml的溶液W 1.5ml/kgbw给予大鼠双侧鼻腔滴鼻;溶剂组、鼻炎滴剂组同法给予相同体积蒸馈水、鼻炎滴 剂溶液，空白组不作任何处理。给药后常规饲养7 d，详细观察给药后4 h内动物的反应情 况，记录动物在饲养期间的反应情况，包括动物的外观，行为活动，精神状态，二便及其颜 色，呼吸状况，鼻、眼、口腔有无异常分泌物，体重变化，中毒反应的起始时间，严重程度等。 [004引表3急性毒性试验中各组大鼠体重的变化情况
试验结果显示，给药后溶剂组、本发明实施例1组~实施例3组大鼠均出现活动状态下 降，精神不振，并有闭眼、口腔流疲等症状;鼻炎滴剂组大鼠活动力也出现降低，5h后各组均 陆续恢复正常。空白组、溶剂组、本发明实施例1组~实施例3组、鼻炎滴剂组于给药后化先后 开始进食。7d内各组大鼠外观体征、行为活动如常，毛色光泽及呼吸频率均未见异常。摄食、 饮水、粪便等亦未发现异常。各组大鼠体重及其体重增加百分率经检验无显著性差异，各组 大鼠无一例死亡。结果表明，本发明实施例1组~实施例3组的含香茶菜提取物的植物盐对大 鼠急性毒性较小。
[0049] 、本发明含香茶菜提取物的植物盐对小鼠凝血时间的试验及效果 取雌性小鼠40只，体重18~22g，按体重随机分为5组，空白组、模型对照组、本发明实施 例1组~实施例3组。
[0050] 除空白组W外，其余各组小鼠每只皮下注射利血平0.7 mg/kg，共7天； 本发明实施例1组~实施例3组将本发明实施例1~实施例3所述含香茶菜提取物的植物 盐配成Img/ml的溶液Wl.5ml/kgbw灌胃；模型对照组将普通食盐配成Img/ml的溶液W 1.5ml/kgbw灌胃；空白组不作处理。
[0051] 连续灌胃1周，于末次给药化后摘眼球取血，滴2滴在洁净的载玻片上，从血液流出 时开始计时，30s后用针头轻挑血液，看有无血丝出现，W后每隔15s用针挑1次，从计时开始 到血丝出现的时间作为凝血时间。结果见表4。
[0052] 表4对小鼠凝血时间的影响
试验结果表明，与空白组和模型组比较，本发明实施例1组~实施例3组均能延长小鼠凝 血时间。
[0053] 除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为重量百分数，本发明所述的比例，均 为质量比例。
[0054] 最后应说明的是：W上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明， 尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可 W对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。 凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的 保护范围之内。
【主权项】
1. 一种含香茶菜提取物的植物盐，其特征在于，所述植物盐，原料包括香茶菜提取物和 盐地碱蓬植物盐。2. 根据权利要求1所述的一种含香茶菜提取物的植物盐，其特征在于，包括以下重量份 的原料:香茶菜提取物2~4份，盐地碱蓬植物盐6~8份。3. 根据权利要求1所述的一种含香茶菜提取物的植物盐，其特征在于，所述香茶菜提取 物，香茶菜总黄酮含量为5.9~6.1%，冬凌草甲素含量为0.5~0.6%。4. 根据权利要求1所述的一种含香茶菜提取物的植物盐，其特征在于，所述盐地碱蓬植 物盐，钠含量为15 · 20~15 · 30%，Ca含量为2600~2700mg/kg。5. -种含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所述香茶菜提取物的制备 包括层析步骤，所述层析步骤，大孔树脂吸附柱种类为HP-20型或SP-825型。6. 根据权利要求5所述的一种含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所述 香茶菜提取物的制备包括层析步骤，所述层析步骤，洗脱用量为2~8BV。7. 根据权利要求5所述的一种含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，柱压 为0.8~1.5 MPa。8. 根据权利要求5所述的一种含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所述 香茶菜提取物的制备还包括过滤步骤，所述过滤步骤，铅离子含量小于5ppb，铁离子含量小 于 Ilppb09. 根据权利要求5所述的一种含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所述 香茶菜提取物的制备还包括过滤步骤，所述过滤步骤，滤膜的孔径为0.06~1.5μπι，压差为 135~180KPa〇10. 根据权利要求5所述的一种含香茶菜提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，盐 地碱蓬植物盐提取步骤包括酶解工艺，所述酶解工艺为，加入植物蛋白酶保护剂，植物蛋白 酶保护剂的质量百分数为2~6%。
【文档编号】A23L33/105GK105919026SQ201610294016
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年5月3日
【发明人】王胜
【申请人】王胜