本发明涉及虫粪提取物、其制备方法及在植物中的应用。
背景技术：
：食品问题是当今世界所面临的难题之一。通过提高单产或扩大种植面积、增加农业投入改造中低产田等途径来增加粮食产量都会碰到需要克服逆境限制或减轻逆境为害的问题。限制植物生长发育的逆境主要有两类：生物逆境和非生物逆境，其中生物逆境主要是病虫害，非生物逆境主要是干旱。随着人类的经济发展、人口膨胀以及生物种群的破坏，植物病虫害和水资源短缺现象日趋严重，这些因素严重地影响了农业生产和生态环境，已成为全球关注的问题，因此，寻求植物特别是农作物抗病、抗旱途径是十分必要的。目前提高植物的抗逆途径的研究主要集中在其分子机制上，以期通过找到相关的抗性基因来获得相应性状的转基因植物。然后获得转基因植物所需成本高昂，周期慢，且需要通过环境安全性评价后才能允许商业化种植。并且在转基因倍受部分群体质疑的当下，转基因植物较难获得公众在安全性方面的认可。因此，有必要开发出一种不同于以上方法来提高植物抗逆能力的方法。技术实现要素：为了克服转基因植物所需成本高昂，周期慢，且需要通过环境安全性评价后才能允许商业化种植；以及转基因植物较难获得公众在安全性方面的认可等方面的问题。本发明提供了一种不同于以上构思的提高植物抗逆能力和/或改善植物品质的方法，其包括向生长所述植物的环境中施用选自金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫产生的粪便或从所述粪便中获得的虫粪提取物。根据发明人对不同处理温度、pH条件下获得的虫粪提取物的提取产率的比较发现，在碱性条件下，利用较高的温度处理虫粪，可以获得较高的虫粪提取物的提取产率。即实际上在低于30℃的温度下，也可以获取一定提取产率的虫粪提取物。但是为了获得较高的提取产率，优选使用较高的处理温度。本发明之一提供了一种虫粪提取物的制备方法，所述虫粪提取物来源于金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫产生的粪便，其包括如下步骤：1)以含水量在3％以下的干燥粪便计，将粪便与溶剂以1：1至1：10的质量比混合后，调节pH值为8至12，温度为30℃至100℃，处理20分钟至60分钟，得到处理液；2)调节所述处理液的pH为6至8，在1℃至50℃下沉降5分钟至48小时，获得粗上清液；3)将所述粗上清液进一步进行固液分离，从而获得含有所述虫粪提取物的上清液。其中，步骤1)中使用的粪便，可以为经过干燥的粪便，也可以为未经干燥处理的粪便；并且，所述粪便可以在与溶剂混合前进行粉碎处理，也可以在与溶剂混合后进行粉碎处理。所述粪便可以使用磨球机和/或粉碎机等粉碎或者超微粉碎虫粪。在其与水混合后，还可以使用超声波进一步均质化。在一个具体实施方式中，在步骤1)中，温度可以为30℃、35℃、40℃、45℃、35℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃、90℃、95℃或100℃。在一个具体实施方式中，在步骤1)中，处理时间可以为20分钟、21分钟、22分钟、23分钟、24分钟、25分钟、26分钟、27分钟、28分钟、29分钟、30分钟、31分钟、32分钟、33分钟、34分钟、35分钟、36分钟、37分钟、38分钟、39分钟、40分钟、41分钟、42分钟、43分钟、44分钟、45分钟、46分钟、47分钟、48分钟、49分钟、50分钟、51分钟、52分钟、53分钟、54分钟、55分钟、56分钟、57分钟、58分钟、59分钟或60分钟。在一个具体实施方式中，以含水量在3％以下的干燥粪便计，将粪便与水以1：3至1：6的质量比混合后，调节pH值为9至11，温度为50℃至100℃，处理30分钟至40分钟，得到处理液。在一个具体实施方式中，以含水量在3％以下的干燥粪便计，将粪便与水以1：3至1：6的质量比混合后，调节pH值为9至11，温度为60℃至90℃，处理30分钟至40分钟，得到处理液。在一个具体实施方式中，在步骤1)中，以含水量在3％以下的干燥粪便计，将粪便与水以1：3至1：6的质量比混合后，调节pH值为9至11，温度为70℃至90℃，处理30分钟至40分钟，得到处理液。在一个具体实施方式中，在步骤2)中，调节所述处理液的pH为6.5至7.5，在15℃至40℃下沉降2小时至24小时，获得粗上清液。在一个具体实施方式中，所述溶剂为极性溶剂，优选所述溶剂为水。在一个具体实施方式中，在步骤1)中或步骤1)之前，粉碎所述粪便。在一个具体实施方式中，所述金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫选自花金龟科(Cetoniidae)、犀金龟科(Dynastidae)、黑蜣科(Passalidae)、拟锹甲科(Sinodendridae)、锹甲科(Lucanidae)、粪金龟科(Geotrupidae)、皮金龟科(Trogidae)、蜉金龟科(Aphodiidae)、斑金龟科(Trichiidae)、胖金龟科(Valgidae)、金龟科(Scarabaeidae)中的至少一种昆虫。在一个具体实施方式中，所述金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫选自白星花金龟(ProtaetiabrevitarsisLewis)、双叉犀金龟(Allomyrinadichtoma)、蜣螂(Catharsiusmolossus)中的至少一种。在一个具体实施方式中，所述粪便为金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫的幼虫和/或成虫产生的粪便。在一个具体实施方式中，所述粪便为金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫的幼虫产生的粪便。在一个具体实施方式中，在步骤3)中利用沉降离心机、斜板沉降器和斜管沉降器中的至少一种实现固液分离，以得到含有虫粪提取物的上清液。在一个具体实施方式中，在步骤3)之后还包括4)浓缩所述上清液得到含有所述虫粪提取物的浓缩上清液，或干燥所述上清液得到所述虫粪提取物干粉。如此可以减小体积，并方便储存和运输等。本申请的虫粪提取物至少以三种形式存在：I)由本申请的方法的步骤3)获得的含有虫粪提取物上清液；II)经过浓缩后获得的含有虫粪提取物的浓缩上清液；III)经完全干燥得到的虫粪提取物干粉。该虫粪提取物可以用于提高植物的抗逆能力，如提高植物的抗病害、抗虫害、抗风、抗高温、抗低温、抗旱、抗涝、抗盐、抗碱和抗氧化能力中的至少一种。其也可以改善植物的品质，例如提高植物中的维生素C含量，和/或提高植物中的胡萝卜素含量。其还可以作为植物肥料，例如植物的叶面施肥(如叶面喷施肥)使用，以提高植物产量，提高植物产量方面是本领域的技术人员容易理解的。在一个具体实施方式中，步骤1)和步骤2)的处理可以不在同一容器中进行，例如在步骤1)中，可以在有利于其处理条件的反应器中进行；而在步骤2)中，可以将步骤1)中的处理液移到沉降池等容器中进行。本发明之二提供了一种由本发明之二所述的方法制备得到的所述虫粪提取物。本发明之三提供了一种含有由本发明之二的所述虫粪提取物的组合物，所述组合物中还包括辅料。当所述虫粪提取物以液相形式存在时，根据本领域常规的选择，所述辅料可以为能够延长所述虫粪提取物储藏期的添加剂，和/或也可以为提高所述虫粪提取物在植株和/或叶片附着力的添加剂。本发明之四提供了一种如本发明之二的所述的虫粪提取物或如本发明之三的所述的组合物，在提高植物的抗逆能力和/或改善植物品质中的一种中的应用。在一个具体实施方式中，所述植物的抗逆能力包括抗病害、抗虫害、抗风、抗高温、抗低温、抗旱、抗涝、抗盐、抗碱和抗氧化能力中的至少一种。在一个具体实施方式中，所述病害包括真菌病害、细菌病害、病毒病害和线虫引起的病害中的至少一种；所述虫害包括由刺吸式口器害虫和/或咀嚼式口器害虫引起的虫害。在一个具体实施方式中，所述真菌病害包括菊科的软腐病、菌核病、霜霉病、灰霉病、叶焦病、褐斑病；葫芦科的灰霉病、疫病、白粉病、根腐病、枯萎病、菌核病、蔓枯病、苗期猝倒病、立枯病；百合科的白粉病、灰霉病、菌核病、枯萎病、炭疽病、疫病紫斑病、锈病；伞形科的猝倒病、炭疽病、斑枯病、晚疫病、软腐病、早疫病、叶斑病、菌核病、叶枯病、黑腐病、黄萎病、立枯病、心腐病、灰霉病、黑斑病、烂心病、根结线虫病、细菌性叶枯病；茄科的灰霉病、菌核病、黄萎病、根腐病、枯萎病、绵腐病、绵疫病、褐纹病、髓部坏死病、苗期猝倒病、立枯病；豆科的灰霉病、枯萎病、疫病、根腐病、菌核病；小麦纹枯病、小麦赤霉病、小麦全蚀病、小麦白粉病、小麦叶锈病、小麦雪霉叶枯病、小麦条锈病、小麦秆锈病、小麦散黑穗病；水稻纹枯病、水稻稻瘟病、水稻稻曲病、水稻白叶枯病、水稻胡麻叶斑病、水稻立枯病、水稻腐烂病、水稻恶苗病；玉米茎基腐病、玉米黑粉病、玉米丝黑穗病、玉米褐斑病、玉米炭疽病、玉米纹枯病、玉米弯孢霉叶斑病、玉米霜霉病、玉米青枯病、玉米锈病、玉米大斑病、玉米小斑病、玉米干腐病、玉米圆斑病、玉米长极链格孢黑斑病、玉米黑束病、玉米顶腐病、玉米全浊病、玉米矮花叶病毒病、玉米粗缩病；马铃薯晚疫病、马铃薯早疫病、马铃薯环腐病中的至少一种。在一个具体实施方式中，所述细菌病害包括葫芦科的细菌性溃疡病、葫芦科的细菌性角斑病、葫芦科的缘枯病、葫芦科的叶枯病、茄科的青枯病、茄科的疮痂病、茄科的软腐病、茄科的细菌性叶斑病、十字花科的白菜类软腐病、十字花科的黑腐病、十字花科的细菌性角斑病、十字花科的叶斑病、十字花科的青枯病、十字花科的环腐病、豆科的细菌性叶斑病、豆科的青枯病、豆科的细菌性疫病、豆科的晕疫病、水稻白叶枯病、水稻细菌性基腐病、水稻细菌性褐条病、水稻细菌性褐斑病中的至少一种。在一个具体实施方式中，所述刺吸式口器害虫包括蓟马(Thysanoptera)、潜叶蝇、蚜虫(Aphidoidea)、粉虱(Aleyrodidae)、飞虱(Delphacidae)、叶螨(Tetranychidae)、盲蝽蟓(Miridae)和叶蝉(Cicadellidae)中的至少一种。在一个具体实施方式中，所述刺吸式口器害虫包括烟粉虱(Bemisiatabaci)、褐飞虱(NilaparvatalugensStal)、白背飞虱(SogatellafurciferaHorvath)、灰飞虱(LaodelphaxstriatellusFallen)和红蜘蛛(Tetranychuscinnbarinus)中的至少一种。在一个具体实施方式中，所述咀嚼式口器害虫包括菜蛾(Plutellidae)、螟蛾(Pyralidae)、夜蛾(Noctuidae)和叶甲(Chrysomelidae)中的至少一种。在一个具体实施方式中，所述咀嚼式口器害虫包括小菜蛾(Plutellaxylostella)、玉米螟(Pyraustanubilalis)、二化螟(Chilosuppressalis)、棉铃虫(Helicoverpaarmigera)、甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHiibner)、烟青虫(HeliothisassultaGuenee)、斜纹夜蛾(Prodenialitura)、大猿叶甲(ColaphellusbowringiBaly)和黄曲条跳甲(Phyllotretastriolata)中的至少一种。在一个具体实施方式中，所述改善植物品质包括所述改善植物品质包括提高植物中的维生素C的含量，和/或提高植物中的胡萝卜素的含量。其中所述改善植物品质是指提高植物中某种有益成分的含量，但是对于该所述植物本身不能够产生的成分不会因为施用虫粪提取物而获得该不能产生的成分。例如虫粪提取物提高了西红柿中的维生素C的含量；又如虫粪提取物提高了胡萝卜中的胡萝卜素的含量。在一个具体实施方式中，所述植物选自农作物、蔬菜、果树和花卉中的至少一种。在一个具体实施方式中，所述植物选自十字花科、茄科、伞形科、葫芦科、百合科、豆科、菊科、锦葵科、黎科、姜科、天南星科、蔷薇科、芸香科、芭蕉科、鼠李科、壳斗科、禾本科中的至少一种。本发明之五提供了金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫产生的粪便在提高植物的抗逆能力和/或改善植物品质中的至少一种中的应用。在一个具体实施例中，所述植物的抗逆能力包括抗病害、抗虫害、抗风、抗高温、抗低温、抗旱、抗涝、抗盐、抗碱和抗氧化能力中的至少一种。在一个具体实施例中，所述病害包括真菌病害、细菌病害、病毒病害和线虫引起的病害中的至少一种。在一个具体实施例中，所述真菌病害包括菊科的软腐病、菌核病、霜霉病、灰霉病、叶焦病、褐斑病等；葫芦科的灰霉病、疫病、白粉病、根腐病、枯萎病、菌核病、蔓枯病、苗期猝倒病、立枯病等；百合科的白粉病、灰霉病、菌核病、枯萎病、炭疽病、疫病紫斑病、锈病等；伞形科的猝倒病、炭疽病、斑枯病、晚疫病、软腐病、早疫病、叶斑病、菌核病、叶枯病、黑腐病、黄萎病、立枯病、心腐病、灰霉病、黑斑病、烂心病、根结线虫病、细菌性叶枯病等；茄科的灰霉病、菌核病、黄萎病、根腐病、枯萎病、绵腐病、绵疫病、褐纹病、髓部坏死病、苗期猝倒病、立枯病等；豆科的灰霉病、枯萎病、疫病、根腐病、菌核病；小麦纹枯病、小麦赤霉病、小麦全蚀病、小麦白粉病、小麦叶锈病、小麦雪霉叶枯病、小麦条锈病、小麦秆锈病、小麦散黑穗病；水稻纹枯病、水稻稻瘟病、水稻稻曲病、水稻白叶枯病、水稻胡麻叶斑病、水稻立枯病、水稻腐烂病、水稻恶苗病等；玉米茎基腐病、玉米黑粉病、玉米丝黑穗病、玉米褐斑病、玉米炭疽病、玉米纹枯病、玉米弯孢霉叶斑病、玉米霜霉病、玉米青枯病、玉米锈病、玉米大斑病、玉米小斑病、玉米干腐病、玉米圆斑病、玉米长极链格孢黑斑病、玉米黑束病、玉米顶腐病、玉米全浊病、玉米矮花叶病毒病、玉米粗缩病等；马铃薯晚疫病、马铃薯早疫病、马铃薯环腐病等中的至少一种。在一个具体实施例中，所述细菌病害包括葫芦科的细菌性溃疡病、葫芦科的细菌性角斑病、葫芦科的缘枯病、葫芦科的叶枯病、茄科的青枯病、茄科的疮痂病、茄科的软腐病、茄科的细菌性叶斑病、十字花科的软腐病、十字花科的黑腐病、十字花科的细菌性角斑病、十字花科的叶斑病、十字花科的青枯病、十字花科的环腐病、豆科的细菌性叶斑病、豆科的青枯病、豆科的细菌性疫病、豆科的晕疫病、水稻白叶枯病、水稻细菌性基腐病、水稻细菌性褐条病、水稻细菌性褐斑病中的至少一种。在一个具体实施例中，所述虫害包括由刺吸式口器害虫和/或咀嚼式口器害虫引起的虫害。在一个具体实施例中，所述刺吸式口器害虫包括蓟马(Thysanoptera)、潜叶蝇、蚜虫(Aphidoidea)、粉虱(Aleyrodidae)、飞虱(Delphacidae)、叶螨(Tetranychidae)、盲蝽蟓(Miridae)和叶蝉(Cicadellidae)中的至少一种。在一个具体实施例中，所述刺吸式口器害虫包括烟粉虱(Bemisiatabaci)、褐飞虱(NilaparvatalugensStal)、白背飞虱(SogatellafurciferaHorvath)、灰飞虱(LaodelphaxstriatellusFallen)和红蜘蛛(Tetranychuscinnbarinus)中的至少一种。在一个具体实施例中，所述咀嚼式口器害虫包括菜蛾(Plutellidae)、螟蛾(Pyralidae)、夜蛾(Noctuidae)和叶甲(Chrysomelidae)中的至少一种。在一个具体实施例中，所述咀嚼式口器害虫包括小菜蛾(Plutellaxylostella)、玉米螟(Pyraustanubilalis)、二化螟(Chilosuppressalis)、棉铃虫(Helicoverpaarmigera)、甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHiibner)、烟青虫(HeliothisassultaGuenee)、斜纹夜蛾(Prodenialitura)、大猿叶甲(ColaphellusbowringiBaly)和黄曲条跳甲(Phyllotretastriolata)中的至少一种。在一个具体实施例中，所述改善植物品质包括提高维生素C的含量和/或提高胡萝卜素的含量。其中所述改善植物品质是指提供植物中某种有益成分的含量，但是对于该所述植物本身不能够产生的成分不会因为施用虫粪而获得该植物本身不能产生的成分。例如虫粪提高了西红柿中的维生素C的含量；又如虫粪提高了胡萝卜中的胡萝卜素的含量。在一个具体实施例中，所述金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫选自花金龟科(Cetoniidae)、犀金龟科(Dynastidae)、黑蜣科(Passalidae)、拟锹甲科(Sinodendridae)、锹甲科(Lucanidae)、粪金龟科(Geotrupidae)、皮金龟科(Trogidae)、蜉金龟科(Aphodiidae)、斑金龟科(Trichiidae)、胖金龟科(Valgidae)、金龟科(Scarabaeidae)中的至少一种昆虫。在一个具体实施例中，优选所述金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫选自白星花金龟(ProtaetiabrevitarsisLewis)、双叉犀金龟(Allomyrinadichtoma)、蜣螂(Catharsiusmolossus)中的至少一种。在一个具体实施例中，所述粪便为金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫的幼虫和/或成虫产生的粪便。在一个具体实施例中，优选所述粪便为金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫的幼虫产生的粪便。在一个具体实施例中，所述植物选自农作物、蔬菜、果树和花卉中的至少一种。在一个具体实施例中，所述植物选自十字花科、茄科、伞形科、葫芦科、百合科、豆科、菊科、锦葵科、黎科、姜科、天南星科、蔷薇科、芸香科、芭蕉科、鼠李科、壳斗科、禾本科中的至少一种。本发明之六提供了一种提高植物抗逆能力的方法，其包括向生长或生长有所述植物的环境中施用选自金龟总科(Scarabaeoidea)的昆虫产生的粪便、由本发明之一所述的方法制备得到的所述虫粪提取物(即本发明之二的虫粪提取物)，和如本发明之三所述的组合物中的至少一种。随着现代农业的兴起，传统依赖于土地的种植方式受到了不同程度的挑战，植物的种植，特别是蔬菜的种植已经在向无土化栽培方向发展，但植物生长所赖以的养分等因素仍是必不可少的。因此，所述粪便、虫粪提取物，或含有虫粪提取物的组合物除了可以施向用于种植植物的传统的土壤，还可以是无土栽培基质等用于维持所述植物用根汲取营养的基质。当然本领域的人员能够理解，向生长的植物的叶片喷施所述粪便、虫粪提取物，或含有虫粪提取物的组合物也能够达到一定的目的，因此，也可以向所述植物的叶片喷施所述粪便、虫粪提取物，或含有虫粪提取物的组合物。因此，在一个具体实施例中，生长或生长有所述植物的环境包括土壤、无土栽培基质、植物生长营养液和所述植物的叶片中的至少一种。根据不同植物的生长习性，本领域的技术人员可以较为容易的判断施用所述粪便的时期。因此，在一个具体实施例中，所述粪便在所述植物被播种前、出苗后和生长期中的至少一个阶段施用。在一个具体实施例中，优选在播种前和/或生长期施用。为了兼顾成本等方面的考虑，所述粪便并非施用越多越好，因此，在一个具体实施例中，所述粪便的施用量为100千克/亩至500千克/亩。在一个具体实施例中，优选所述粪便的施用量为200千克/亩至300千克/亩。在一个具体实施方式中，当向生长或生长有所述植物的环境中施用由本发明之二所述的方法制备得到的所述虫粪提取物和/或如本发明之三所述的组合物中的至少一种时，向所述植物的植株和/或叶片喷施。本领域的技术人员容易理解，在施用所述粪便、虫粪提取物，或含有虫粪提取的组合物之前，可以经过简单的前处理。例如可以对作为浓缩物的虫粪提取物或含有虫粪提取物的组合物进行用前稀释。选择稀释的溶剂一般为水。在本发明中所用的术语均为本领域常规定义的术语。附图说明图1不同肥料对不同植物抗病能力的影响。图2为不同肥料对不同植物抗虫能力的影响。图3为施用白星花金龟幼虫的虫粪的西红柿的长势与不施用任何肥料的西红柿的长势的对比。该图显示每亩施用100千克虫粪的西红柿。图4为不同虫粪施用量处理间的植物发病率比较，误差线表示3个重复误差范围，Y坐标值是3次重复的平均值。图5为滴灌施用虫粪提取物对植物发病率的影响，误差线表示3个重复误差范围，Y坐标值是3次重复的平均值。具体实施方式实施例1不同金龟的粪便对不同植物抗病能力的影响分别收集白星花金龟幼虫虫粪和蜣螂幼虫的虫粪，并以鸡粪有机肥为对照。在播种前半个月，按照每亩200千克的施肥量分别施用白星花金龟幼虫的虫粪、蜣螂幼虫的虫粪、鸡粪有机肥，然后分别翻地，浇水，整理耕地。在播种季播种水稻。每个处理0.1亩地，重复3个地块。所有处理进行同样管理。所有处理都不进行病原接种或者施用杀菌剂，利用病害自然发生的方法进行比较。在处理组和对照组分别随机选取5个点，每点约1平方米，收获前统计发病情况。对作物中常见病都进行统计，包括水稻纹枯病、稻瘟病、稻曲病、白叶枯病、胡麻叶斑病、立枯病、腐烂病、恶苗病等加权后作为发病率计算依据。发病率计算按照下列公式进行，发病率＝(发病植株数量/总共调查植株数)*100％。将上述处理中的水稻分别替换为玉米、小麦、西红柿、生菜、西葫芦、韭菜、芹菜和胡萝卜，其他处理条件相同。结果见图1。其中玉米中的主要病害包括玉米茎基腐病、玉米黑粉病、玉米丝黑穗病、玉米褐斑病、玉米炭疽病、玉米纹枯病、玉米弯孢霉叶斑病、玉米霜霉病、玉米青枯病、玉米锈病、玉米大斑病、玉米小斑病、玉米干腐病、玉米圆斑病、玉米长极链格孢黑斑病、玉米黑束病、玉米顶腐病、玉米全浊病、玉米矮花叶病毒病、玉米粗缩病等。小麦中的病害主要包括小麦纹枯病、小麦赤霉病、小麦全蚀病、小麦白粉病、小麦叶锈病、小麦雪霉叶枯病、小麦条锈病、小麦秆锈病、小麦散黑穗病等。西红柿中的病害主要包括灰霉病、菌核病、疫病、黄萎病、根腐病、枯萎病、绵腐病、绵疫病、褐纹病、细菌性溃疡病、细菌性疫病、青枯病、髓部坏死病、苗期猝倒病、立枯病等。生菜中的病害主要包括软腐病、菌核病、霜霉病、灰霉病、叶焦病、褐斑病等西葫芦中的病害主要包括灰霉病、疫病、白粉病、根腐病、枯萎病、菌核病、蔓枯病、苗期猝倒病、立枯病和多种细菌性病害等韭菜中的病害主要包括白粉病、灰霉病、菌核病、枯萎病、炭疽病、疫病紫斑病、锈病、病毒病等。芹菜中的病害主要包括猝倒病、炭疽病、斑枯病、晚疫病、软腐病、早疫病、叶斑病、菌核病、叶枯病、黑腐病、黄萎病、立枯病、心腐病、灰霉病、黑斑病、烂心病、根结线虫病、细菌性叶枯病等。胡萝卜中的病害主要包括白粉病、黑腐病、黑斑病、菌核病、细菌性软腐病等。统计结果见图1，从图中可以明显看出，鸡粪有机肥几乎不诱导植物抗病性，白星花金龟幼虫虫粪和蜣螂幼虫的虫粪都可以有效诱导植物抗病性。实施例2不同金龟的粪便对不同植物抗虫能力的影响在实施例1中的处理组和对照组分别随机选取5个点，每点约1平方米，每隔15天调查一次，统计虫口情况。对作物中常见刺吸式口器害虫和咀嚼式口器害虫都进行统计，包括抗刺吸式口器害虫：蚜虫、烟粉虱、稻飞虱、红蜘蛛、盲蝽蟓、蓟马、叶蝉等；咀嚼式口器害虫：小菜蛾、玉米螟、水稻二化螟、棉铃虫、甜菜夜蛾、烟青虫、斜纹夜蛾、大猿叶甲、黄曲条跳甲、潜叶蝇等。虫口加权后作为虫害发生依据。虫口减退率计算法是：虫口减退率＝(对照组虫口数量-处理组虫口数量)/对照组虫口数量。其他同实施例1。统计结果如图2，从图中可以看出，白星花金龟幼虫虫粪和蜣螂幼虫的虫粪这两种虫粪都可以有效诱导植物抗虫性。实施例3金龟的粪便的田间使用量收集白星花金龟幼虫的虫粪。以西红柿为供试植物，季末，通过统计植株发病率，分析虫粪对植物抗性诱导的适宜施用量。每个处理0.1亩，重复3个地块。播种前半个月，按照每亩0千克、50千克、100千克、300千克、400千克，分别施用白星花金龟幼虫的虫粪。其他同实施例1。结果显示，与不使用虫粪肥料相比，随着虫粪施用量增加，植株长势逐渐变好(图3)，并且发病情况降低。如图4所示，在每亩200千克之后，抗病性稳定在一个较好的水平。实施例4虫粪可溶性活性成分制备(1)收集白星花金龟幼虫的虫粪并干燥(晒干或80℃烘干皆可)，使其含水量在3wt％以下。(2)粉碎蛴螬粪便，过20目筛。(3)在反应器中放入质量比为1:4的过筛虫粪和水，用NaOH调节pH值为11，在温度90℃左右下处理40分钟。(4)将步骤(3)中的反应物料放入沉降池，降至环境温度(25℃)，利用磷酸或硝酸将酸碱度调制中性，pH7左右；沉淀2小时。(5)将粗清液泵入沉降离心机进行固液分离。(6)获得的上清液在蒸发器中浓缩到10波美度左右即可装瓶。获得的上清液也可利用干燥机干燥成干粉，使用时按需求溶解使用，提取产率以干燥后得到的干粉质量计，其占虫粪质量的35％。实施例5虫粪可溶性活性成分制备——考察虫粪与水的用量比例对提取产率的影响干燥虫粪与水的质量比如表1。其他同实施例4。表1实验编号干燥虫粪：水(质量比)提取产率(以干粉g/虫粪g计，％)5-1#1:185-2#1:3245-3#1:6315-4#1:1031实施例6虫粪可溶性活性成分制备——考察处理过程中的pH值、温度和处理时间对提取产率的影响步骤(3)中的pH值、温度和处理时间如表2。其他同实施例4。表2实施例7虫粪可溶性活性成分制备——考察不同的碱对提取产率的影响步骤(4)中的碱种类如表3。其他同实施例4。表3实验编号碱提取产率(以干粉g/虫粪g计，％)7-1#Na2CO3337-2#NaOH327-3#KOH30实施例8虫粪可溶性活性成分对不同植物抗病能力的影响按照不同作物生长要求进行耕地准备、播种。所有处理都不进行病原接种或者施用杀菌剂，利用病害自然发生的方法进行比较。以水为对照，其他管理与处理组一样。处理组利用实施例4至实施例7制得的10波美度左右的虫粪提取物分别稀释1000倍喷雾。每周喷雾一次。对照使用清水喷雾，并且喷雾频率相同。在处理组和对照组分别随机选取5个点，每点约1平方米，收获前统计发病情况。对作物中常见病都进行统计，包括水稻纹枯病、稻瘟病、稻曲病、白叶枯病、胡麻叶斑病、立枯病、腐烂病、恶苗病等加权后作为发病率计算依据。发病率计算按照下列公式进行，发病率＝(发病植株数量/总共调查植株数)*100％。将上述处理中的水稻分别替换为玉米、小麦、西红柿、生菜、西葫芦、韭菜、芹菜和胡萝卜，其他处理条件相同。其中玉米中的主要病害包括玉米茎基腐病、玉米黑粉病、玉米丝黑穗病、玉米褐斑病、玉米炭疽病、玉米纹枯病、玉米弯孢霉叶斑病、玉米霜霉病、玉米青枯病、玉米锈病、玉米大斑病、玉米小斑病、玉米干腐病、玉米圆斑病、玉米长极链格孢黑斑病、玉米黑束病、玉米顶腐病、玉米全浊病、玉米矮花叶病毒病、玉米粗缩病等。小麦中的病害主要包括小麦纹枯病、小麦赤霉病、小麦全蚀病、小麦白粉病、小麦叶锈病、小麦雪霉叶枯病、小麦条锈病、小麦秆锈病、小麦散黑穗病等。西红柿中的病害主要包括灰霉病、菌核病、疫病、黄萎病、根腐病、枯萎病、绵腐病、绵疫病、褐纹病、细菌性溃疡病、细菌性疫病、青枯病、髓部坏死病、苗期猝倒病、立枯病等。生菜中的病害主要包括软腐病、菌核病、霜霉病、灰霉病、叶焦病、褐斑病等西葫芦中的病害主要包括灰霉病、疫病、白粉病、根腐病、枯萎病、菌核病、蔓枯病、苗期猝倒病、立枯病和多种细菌性病害等韭菜中的病害主要包括白粉病、灰霉病、菌核病、枯萎病、炭疽病、疫病紫斑病、锈病、病毒病等。芹菜中的病害主要包括猝倒病、炭疽病、斑枯病、晚疫病、软腐病、早疫病、叶斑病、菌核病、叶枯病、黑腐病、黄萎病、立枯病、心腐病、灰霉病、黑斑病、烂心病、根结线虫病、细菌性叶枯病等。胡萝卜中的病害主要包括白粉病、黑腐病、黑斑病、菌核病、细菌性软腐病等。统计结果见表5，从表中可以看出，实施例4至实施例7制得的虫粪提取物对植物无害，并且可以有效诱导植物抗病性。实施例9虫粪可溶性活性成分用于滴灌增加作物抗性为了测试虫粪可溶性成分在滴灌系统中添加，对作物抗性的影响，在滴管系统中加入虫粪提取物。以水为对照，其他管理与处理组一样。处理组将10波美度左右的实施例4制得的虫粪提取物稀释2000倍稀释液进行滴灌。每周添加一次。在处理组和对照组分别随机选取5个点，每点约1平方米，收获前统计发病情况。西红柿中的病害主要包括灰霉病、菌核病、疫病、黄萎病、根腐病、枯萎病、绵腐病、绵疫病、褐纹病、细菌性溃疡病、细菌性疫病、青枯病、髓部坏死病、苗期猝倒病、立枯病等。生菜中的病害主要包括软腐病、菌核病、霜霉病、灰霉病、叶焦病、褐斑病等。西葫芦中的病害主要包括灰霉病、疫病、白粉病、根腐病、枯萎病、菌核病、蔓枯病、苗期猝倒病、立枯病和多种细菌性病害等统计结果见图5，从图中可以明显看出，虫粪提取物可以有效诱导植物抗病性。表5各实验制得提取物对植物抗病性的影响注：上表数据为各实验处理组发病率的平均值。实施例10虫粪可溶性活性成分对不同植物抗虫能力的影响在实施例8的处理组和对照组分别随机选取5个点，每点约1平方米，统计虫口情况。对作物中常见刺吸式口器害虫和咀嚼式口器害虫都进行统计，包括抗刺吸式口器害虫：蚜虫、烟粉虱、稻飞虱、红蜘蛛、盲蝽蟓、蓟马、叶蝉等；咀嚼式口器害虫：小菜蛾、玉米螟、水稻二化螟、棉铃虫、甜菜夜蛾、烟青虫、斜纹夜蛾、大猿叶甲、黄曲条跳甲、潜叶蝇等。虫口加权后作为虫害发生依据。虫口减退率计算法是：虫口减退率＝(对照组虫口数量-处理组虫口数量)/对照组虫口数量。统计结果如表6，从表中可以看出，实施例4至实施例7制得的虫粪提取物对植物无害，并且可以有效诱导植物抗虫性。表6各实验制得提取物对植物抗虫性的影响注：上表数据为各实验处理组虫口减退率的平均值。实施例11虫粪及其可溶性活性成分对作物品质的影响对实施例1和实施例8(利用实施例4制备得到的虫粪提取物的处理组)中处理的西红柿、胡萝卜分别进行维生素C、胡萝卜素、还原糖含量分析。西红柿样品制备：称取100g西红柿于榨汁机中榨汁，然后用布氏漏斗过滤，用0.1％的磷酸溶液溶解，再用超纯水稀释定容至1000ml，摇匀，然后经0.45μm微孔滤膜真空抽滤，待用。西红柿样品中维生素C含量测定：设备：LC-10Avp高效液相色谱仪；色谱柱：shimpackVPODS柱150×6.0mm(日本岛津公司)；UV2501紫外可见分光光度仪(日本岛津公司)。分析方法：采用高效液相色谱法，以超纯水为流动相，流动相的速度为1.0ml/min，紫外检测波长为267nm，柱温在25℃的条件下，分析西红柿中维生素C的含量。通过与标准样品比较，计算西红柿维生素C含量。维生素C标准样品制备：称取维生素C标准样品100mg，置于用超纯水润洗过的小烧杯中，用0.1％的磷酸溶液溶解，定容至100ml。西红柿样品中还原糖测定：采用全自动还原糖测定仪SGD-Ш型测定。费林甲液：硫酸铜35.0g，1％次甲基兰5mL，定容至1000mL。费林乙液：氢氧化钠126.4g，酒石酸甲钠117.0g，亚铁氰化钾9.4g，定容到1000mL。胡萝卜样品制备：将样品干燥破碎，过40目筛。称取1g粉末，用正己烷-乙醇-丙酮-甲苯(10∶6∶7∶7，V/V)混合提取液，静置3-4h，加入2mL40％KOH-甲醇溶液，摇匀后置于暗处25℃皂化16h，其目的是为了去除玉米中的脂类物质，避免其干扰后续色谱分析[8]。将皂化液转入分液漏斗，加30mL正己烷，振荡摇匀，再加入38mL10％硫酸钠溶液，收集上层溶液。重复处理2次，混合上层溶液，旋转蒸发，氮气吹干，用2mL甲醇溶解，待测。胡萝卜样品中胡萝卜素含量测定：分析方法：对于有标样的组分，对照标样，利用保留时间的一致性进行鉴定。参考标准样品，对样品类胡萝卜素各组分含量进行定量分析。设备：1200HPLC仪(在线真空脱气机、四元梯度洗脱泵、柱温箱、DAD、6530精确质量数四极杆-飞行时间质谱仪(6530Q-TOF))美国安捷伦科技有限公司。HPLC条件：色谱柱为YMC-C30(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱；柱温：25℃；检测器为DAD，波长450nm，流动相：A为水-MTBE-甲醇(5∶25∶75，V/V)；B为水-MTBE-甲醇(5∶85∶10，V/V)；进样量20μL；线性梯度洗脱，流速为0.6mL/min，梯度洗脱程序：0-4.5min(95％-80％A)，4.5-12.5min(80％-50％A)，12.5-18min(50％-25％A)，18-24min(25％-5％A)，24-30min(5％A)。MS条件：色谱柱流出组分进入质谱仪的流速为10μL/min；离子源：APCI+；扫描范围：m/z80-1000；毛细管电压：2500V；干燥气体：5L；雾化气体：20psi；气化温度：350℃；蒸汽温度：400℃；电晕电流：4μA。表7各组西红柿中维生素C与还原糖含量比较处理组维生素C(mg/kg)还原糖(％)虫粪29.22.9虫粪提取物28.63.1鸡粪有机肥19.32.2表8各组胡萝卜中胡萝卜素含量比较处理组α胡萝卜素(mg/kg)β胡萝卜素(mg/kg)虫粪79209虫粪提取物70213鸡粪有机肥53160当前第1页1 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