专利名称：一种虫草素的提取方法
技术领域：
本发明涉及有效成分的提取方法，具体涉及虫草素的提取方法。
背景技术：
虫草素(cordyc印in)又称3’ -脱氧腺苷、虫草品、蛹虫草菌素、虫草头孢菌丝体、3-脱氧酰苷、冬虫夏草素、冬虫夏草菌素。
虫草素是北虫草中(尤其是核苷类)主要活性成分，也是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗生素。
虫草素(Cordyc印in)是腺苷的类似物，分子式=CltlH13N5O3,分子量251. 24，碱性， 针状或片状结晶，熔点230°C -231°C，最大吸收波长为259. Onm。
1951年,德国的Cunningham等从北虫草的培养滤液中分离发现虫草素。
上个世纪六十年代起，虫草素的合成与提取，在国内外科技界就引起了广泛关注与重视。虽然我国在1964年曾有过人工合成虫草素的报道，但未曾看到继续深入研究的报生口 ο
在20世纪70年代虫草素就被发现有抑制肿瘤，抗疟原虫和抑制mRNA翻译的作用；九十年代研究发明，添加腺苷脱氨酶抑制剂对其抗肿瘤活性的表达起着重要作用，虫草素的研究从而获得突破性进展；美国1997年开始将虫草素用于一期临床实验，治疗急性前 B和前T淋巴细胞白血病患者；虫草素还表现出极强的抗真菌，抗HTV-I型病毒和选择性抑制梭菌属细菌活性。
虫草素的作用机理虫草素能干扰细胞RNA和DNA的合成，抑制不正常细胞(癌细胞)的分裂，并能作为区别细胞中不同的RNA聚合酶的工具，具有修复基因，保护生命体遗传密码的特殊功效，现在虫草素在美国作为抗癌，抗病毒新药，已经进入三期临床。因为其功效较突出，对市场其需求旺盛，目前其价格相当昂贵，达每克数万元。
综合分析国内外公开的专利和文献可知，目前获得虫草素的主要方法有有机合成，从人工培养的蛹虫草子实体中提取，从人工液态培养的冬虫夏草或蛹虫草菌丝体中提取，从子实体采收后长满菌丝体的蛹虫草固体培养基残基中提取等。
目前，虫草素提取的方法主要有
乙醇浸泡，乙醇回流提取CN00130376. 7公开了从虫草中提取虫草素的方法，包括干燥粉碎，浸泡，回流提取，回收乙醇，加水沉淀，过滤，上离子换柱，收集洗脱液，浓缩，冷藏、结晶，过滤，正丁醇结晶，虫草结晶。
水浸泡，乙醇提取或水提醇沉CN02109887. 5公开一种复合虫草素的提取方法及中药制剂，将冬虫夏草菌粉用水浸泡8-14小时，加50-70%的乙醇进行提取，或用水煎醇沉法提取，过滤取药液，浓缩回流乙醇，上离子柱洗脱除掉杂质，收集洗液进行再浓缩为原体积的30%，(TC冷藏24小时，析出结晶，用正丁醇重结晶，得复合虫草素。
水浸泡，过大孔吸附树脂柱CN200710170485. 9公开了一种虫草素的分离纯化方法，该方法采用蛹虫草固体干燥培养基为原料，用NKA-II型大孔树脂柱和C18柱进行纯化，最后用蒸馏水进行反复重结晶。
醇冷渗、醇超声波提取，上离子交换柱CN200710122409. O涉及一种从蛹虫草中提取精制虫草素和虫草多糖的方法，该方法包括以下步骤将蛹虫草粉末以冷渗法提取过滤，滤渣与乙醇混合，超声波辅助提取、离心，上清液浓缩、醇析。醇析上清液减压浓缩、洗脱，洗脱液浓缩结晶，用正丁醇重结晶，得到精制虫草素；醇析沉淀进行酶解脱蛋白处理、离心，上清液浓缩、洗脱，流出液浓缩、醇析，冷冻干燥后得到精制多糖。
水浸泡，醇超声提取CN200910037874. 3涉及一种从蛹虫草子实体中提取有效成分虫草素的方法，包括以下步骤蛹虫草子实体干燥、粉碎后加水浸泡；在粘稠状溶液中加入95%乙醇，利用超声波辅助提取，提取结束后，过滤，收集滤液，将滤饼进行第二次醇沉和超声处理，合并收集多次滤液；在一定条件下减压浓缩无乙醇味，得浓缩液；取浓缩液用盐酸或硫酸溶液调PH至酸性；上离子交换柱用氨水洗脱除掉杂质，收集洗脱液进行再浓缩， 冷藏析出晶体，用正丁醇重结晶，得到虫草素。
与水用超声波提取、上大孔吸附树脂柱CN200910026113. 8提供了一种蛹虫草中虫草素提取纯化方法，该方法包括以下步骤将蛹虫草原料粉碎后以料水比I : 20比例加水混合，进行超声波提取，将提取液离心过滤上大孔树脂柱，吸附流速I. 8BV/hr ;以15%甲醇水溶液为洗脱剂洗脱树脂柱，用旋转蒸发器在温度60°C下减压浓缩洗脱液，制得虫草素浓缩物；另有CN201110004151. O也公开了采用超声波提取虫草素的方法。
现有技术制备虫草素时间周期长、有效成分提取不完全，制备的虫草素含量比较低，成本特别高，工艺重现性比较差。
微波/光波组合法是天然产物提取中一种非常有发展潜力的新型技术具有设备简单，适用范围广，提取效率高，重现性好，省时间，节省试剂，污染小等特点。
目前，微波/光波组合法除主要用于环境样品预处理外，还用于生化，食品，工业分析和天然产物提取等领域。
但在国内，微波/光波组合法提取技术用于天然药物提取的研究报道还比较少。 微波/光波组合法提取的原理是在微波场中，不同物质的吸收微波能力的差异，使得被处理体中的某些区域或某些组分被选择性的加热，从而使得被提取物质能够快速从被处理物体中分离，进入介电常数较小，微波吸收能力相对差的提取剂中。同时微波/光波组合法透入被处理物体时，能使被处理物体内部，外部几乎同时被加热升温，内外加热均匀一致，形成热源体状态，大大缩短了常规加热中的热传导时间。
直到目前为止，尚未见到微波/光波在虫草素提取方面的报道。发明内容
本发明的目的是克服现有技术的问题，而提供一种虫草素的新的提取方法。
本发明提供的一种虫草素的提取方法，该方法包括以下步骤虫草素发酵液减压浓缩，然后分别在微波和光波组合下超声提取，得到的提取液分离纯化，即得。
所述虫草素的提取方法中
所述虫草素发酵液采用现有的方法对虫草素进行发酵得到的，也可以采用以下方法制备在发酵罐中加入培养基，灭菌后接入菌种，接种量10%，发酵条件为22°C，150r/ min, pH6_7,使菌种在液体中悬浮生长,培养时间为6d,虫草素含量达到O. 5%以上，即得虫草素发酵液；所述发酵培养基为液体培养基，培养基中各成分的重量百分比为蔗糖4.0%、玉米汁 3. 0%、麸皮 3. 0%、全脂牛奶粉 I. 0%, VB O. 01%, KH2P041%、MgSO4O. 05%。目前虫草菌的品种很多，为了使得发酵培养液中虫草素含量增加，必须选择适宜的虫草菌，条件是纯度高、无杂菌、无老化、感染力强、适应范围广的菌种。所述微波和光波下超声提取是指在微波炉中55%微波和45%光波组合、福射功率为800W的条件下超声提取4-10min ；提取液分离纯化包括以下步骤离心、醇沉，离心，过大孔吸附树脂柱、高效液相色谱纯化。其中 所述两个离心步骤中两次离心的速度可以相同也可以不同离心的转速为4000-6000r/min，离心的时间为 10_30min ；所述过大孔吸附树脂柱步骤为以O. 5_3BV/h流速上样吸附，用3-5倍柱体积的蒸馏水洗脱杂质，再用浓度为20-30%的乙醇以2-6BV/h的流量洗脱1-5小时，收集乙醇洗脱液，即可；所述高效液相色谱纯化条件色谱柱为Kromasil 100-25, C18,4. 6mmX250mm ;流动相为甲醇-水体积比为15:85流速lmL/min ;检测波长为260nm。优选地，所述虫草素的提取方法，包括以下步骤I)取虫草素发酵液，减压浓缩至原液的1/3-1/5倍，在微波炉中55%微波和45%光波组合、辐射功率为800W的条件下超声提取4-10min，将得到的提取液离心，离心速度为4000-6000r/min,离心时间为10-30min,收集上清液；2)步骤I)中得到的上清液减压浓缩至原体积的1/3-1/6，用浓缩液体积3_5倍的无水乙醇沉淀，过夜，离心速度为4000-6000r/min，离心时间为10_30min，收集上清液；3)将步骤2)收集到的上清液过大孔树脂柱，以O. 5-3BV/h流速上样吸附，用3_5倍柱体积的蒸馏水洗脱杂质，再用浓度为20-30%的乙醇以2-6BV/h的流量洗脱I. 5-3. 5小时,收集乙醇洗脱液；4)将步骤3)得到的乙醇洗脱液用高效液相色谱纯化，然后将收集到的纯化液浓缩，再用高效液相色谱纯化，再重复2-5次上述浓缩、纯化步骤，收集到的纯化液浓缩至干，即得虫草素。进一步优选，所述虫草素的提取方法包括以下步骤I)将虫草素发酵液减压浓缩至原液体积的1/3倍,在微波炉中55%和微波45%光波组合、辐射功率为800W的条件下辐射超声提取4min，离心，收集上清液；2)将步骤I)得到的上清液减压浓缩到原体积的1/5，浓缩液用3倍体积无水乙醇沉淀，过夜，然后收集上清液，5000r/min离心15min得到虫草素上清液；3)将步骤2)得到的虫草素上清液过AB-8型大孔树脂柱，以lBV/h流速上样吸附，用4倍柱体积的蒸馏水洗脱杂质，再用20%的乙醇以4BV/h的流量洗脱2小时，收集乙醇洗脱液；4)然后将乙醇洗脱液用高效液相色谱纯化洗脱液，其中高效液相色谱条件为色谱柱为Kromasil 100-25，C18，4. 6mmX 250mm ;流动相为甲醇-水体积比为15:85流速ImL/min ;检测波长为260nm ;检测温度为30°C,收集虫草素峰流出液；
5)将虫草素峰流出液减压浓缩至其体积的1/3，然后采用步骤3)的高效液相色谱纯化；然后再减压浓缩、高效液相色谱纯化，即重复上述步骤3次，将最终得到的纯化液减压浓缩至干，即得。所述方法中所述减压浓缩采用旋转 蒸发仪浓缩；在步骤2)还可以包括活性炭吸附杂质的过程，具体为用等量的活性炭混匀，摇床振摇12h，过滤除色素。所述大孔吸附树脂柱选自AB-8型大孔树脂柱。本发明提供的虫草素的提取方法，具有以下优点I、选用的虫草菌感染力强，菌种有较强的生命力，能对昆虫迅速感染得病死亡的品种；适应范围广，特别是对环境湿度变化和其它杂菌感染要有一定的抵抗能力的品种。2、将虫草菌的发酵培养液进行浓缩、微波提取，再浓缩，醇沉，离心，其中离心的目的是除去虫草多糖等醇不溶的杂质；通过高效液相色谱的不同纯化，将虫草素提取液中的甲醇、水及其他杂质去除，最终得到虫草素的纯品。2、采用常规的超声波提取，提取时间长，虫草素的提取率低，仅为69% ；本发明采用微波/光波辅助提取北虫草的虫草素。不同微波/光波组合方式的对比得出，55%微波和45%光波组合，辐射功率为800W的条件下辐射超声效果较好，虫草素的提取率为81%，较单纯的溶剂浸提提取率增加了 12%，而且大大缩短了时间消耗。与传统的提取方法相比，微波/光波组合提取提高了提取率，节省了提取时间，在天然产物有效成分提取方面有很广阔的前景。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。虫草素发酵液的制备所述虫草素发酵液可市售购买获得，本发明为了保证其原料的可控性，采用以下方法制备发酵培养基为液体培养基，培养基中各成分的重量百分比为蔗糖4.0%、玉米汁
3.0%、麸皮 3. 0%、全脂牛奶粉 I. 0%, VB 0. 01%, KH2PO41%、MgSO4O. 05%。具体发酵方法为在发酵罐中加入培养基，灭菌后接入菌种，接种量10%，发酵条件为22°C，150r/min，pH6_7，使菌种在液体中悬浮生长，培养时间为6d，虫草素含量达到
0.5%以上，即得虫草素发酵液。发酵液中虫草素的含量的质控指标采用液相色谱法测定，具体色谱条件为色谱柱为Kromasill00-25, C18,4. 6_X 250mm ;流动相为甲醇-水体积比为15:85，流速lmL/min ;检测波长为260nm ;检测温度为30°C。实施例I :虫草素的提取方法I、将在虫草素发酵液用旋转蒸发仪减压浓缩至原液体积的1/3倍，在微波炉中55%微波和45%光波组合、辐射功率为800W的条件下提取8min，提取液离心，5000转离心速度及时间lOmin，收集上清液；
2、将步骤I得到上清液上旋转蒸发仪，减压浓缩到原体积的1/5，然后用浓缩液3倍体积的无水乙醇沉淀，过夜，然后收集上清液，用5000r/min离心15min，收集上清液，然后用等量的活性炭混匀，摇床振摇12h，过滤除色素，得到虫草素上清液；3、将步骤2得到的虫草素上清液过AB-8型大孔树脂柱，以lBV/h流速上样吸附，用4倍柱体积的蒸馏水洗脱杂质，再用20%的乙醇以4BV/h的流量洗脱2小时，收集乙醇洗脱液；4、然后将乙醇洗脱液用高效液相色谱纯化，其中高效液相色谱条件为色谱柱为Kromasil 100-25, Cl8,4. 6mmX 250mm ;流动相为甲醇-水体积比为 15:85 流速 lmL/min ;检测波长为260nm ;检测温度为30°C，收集虫草素峰流出液，分析型HPLC检测纯度为83. 5，纯度达出口标准；5、将步骤4得到的虫草素峰流出液上旋转蒸发仪，减压浓缩至虫草素峰流出液体积的三分之一，所得虫草素峰浓缩液采用步骤3中的高效液相色谱进一步纯化，色谱条件同前，收集虫草素峰二次流出液，分析型HPLC检测纯度为99. 84%，纯度达对照品标准。 6、将步骤5得到的虫草素峰二次流出液上旋转蒸发仪，减压浓缩至虫草素峰二次流出液体积的三分之一，所得的虫草素峰二次浓缩液上步骤3所述的高效液相色谱，色谱条件同前，收集虫草素峰三次流出液，分析型HPLC检测纯度为99. 99% ；7、将步骤6得到的虫草素峰三次流出液上旋转蒸发仪，减压浓缩至虫草素峰三次流出液体积的三分之一，所得浓缩液真空冷冻干燥后成虫草素冻干粉纯品IOg (收率为87. 7%) o实施例2 :虫草素的提取方法I、将虫草素发酵液按浓缩比例减压至原液的1/5倍在微波炉中55%微波和45%光波组合、辐射功率为800W的条件超声提取5min，提取液离心，离心速度5000r/min及时间为IOmin,收集上清液；2、将步骤I得到的上清液上旋转蒸发仪，减压浓缩到原体积的1/5，然后用浓缩液3倍体积的无水乙醇沉淀，过夜，然后收集上清液，将上清液5000r/min离心15min，然后用等量的活性碳混匀，摇床振摇12h，过滤除色素，得虫草素上清液；3、将步骤2得到的虫草素上清液过AB-8型大孔树脂柱，以0. 5BV/h流速上样吸附，用5倍柱体积的蒸馏水洗脱杂质，再用30%的乙醇以3BV/h的流量洗脱3. 5小时，收集乙醇洗脱液；4、将乙醇洗脱液用高效液相色谱纯化，高效液相色谱条件为色谱柱为Kromas i 1100-25, C18, 250mm X 4. 6mm ;流动相为甲醇:水=15:85 ;流速 lmL/min ;检测波长为260nm ;检测温度为30°C。收集虫草素峰流出液，分析型HPLC检测纯度为84. 5%，纯度达出口标准；5、将步骤4得到的虫草素峰流出液上旋转蒸发仪，减压浓缩至虫草素峰流出液体积的三分之一，所得浓缩液采用步骤4中的高效液相色谱进一步纯化，色谱条件同前，收集虫草素峰二次流出液，分析型HPLC检测纯度为95. 6%，纯度达对照品标准；6、将步骤5得到的虫草素峰二次流出液上旋转蒸发仪，减压浓缩至虫草素峰二次流出液体积的三分之一，所得浓缩液第三次上步骤3所述的高效液相色谱，色谱条件同前，收集虫草素峰三次流出液，分析型HPLC检测纯度为99. 9%，纯度达标准品标准；
7、将步骤6得到的虫草素峰三次流出液上旋转蒸发仪，减压浓缩至虫草素峰三次流出液体积的三分之一，所得浓缩液喷雾干燥后成虫草素冻干粉纯品9. 5g (收率为83. 32%)。实施例3 :虫草素的提取方法I、将虫草素发酵液上旋转蒸发仪减压浓缩至原液体积的1/5倍，在微波炉中55%微波和45%光波组合、辐射功率为800W的条件下辐射超声提取lOmin，提取液离心，离心速度4000r/min,离心时间为20min,收集上清；2、将步骤I得到的上清液上旋转蒸发仪，减压浓缩到原体积的1/5，然后用浓缩液3倍体积的无水乙醇沉淀，过夜，然后收集上清液，将上清液6000r/min离心lOmin，收集上清液，然后用等量的活性碳混匀，摇床振摇12h，过滤除色素，得虫草素上清液；3、将步骤2得到的虫草素上清液过AB-8型大孔树脂柱，以0. 5BV/h流速上样吸附，用5倍柱体积的蒸馏水洗脱杂质，再用25%的乙醇以5BV/h的流量洗脱I. 5小时，收集 乙醇洗脱液；4、将步骤3得到乙醇洗脱液用高效液相色谱纯化，中高效液相色谱条件为色谱柱为 Kromasi1100-25, C18, 250mmX 4. 6mm ;流动相为甲醇:水=15:85 ;流速 lmL/min ;检测波长为260nm ;检测温度为30°C。收集虫草素峰流出液，分析型HPLC检测纯度为84. 5%，纯度达出口标准；5、将步骤4得到的虫草素峰流出液上旋转蒸发仪，减压浓缩至虫草素峰流出液体积的三分之一，所得浓缩液采用步骤4中的高效液相色谱进一步纯化，色谱条件同前，收集虫草素峰二次流出液，分析型HPLC检测纯度为95. 6%，纯度达对照品标准；6、将步骤5得到的虫草素峰二次流出液上旋转蒸发仪，减压浓缩至虫草素峰二次流出液体积的三分之一，所得浓缩液第三次上步骤3所述的高效液相色谱，色谱条件同前，收集虫草素峰三次流出液，分析型HPLC检测纯度为99. 9%，纯度达标准品标准；7、将步骤6得到的虫草素峰三次流出液上旋转蒸发仪，减压浓缩至虫草素峰三次流出液体积的三分之一，所得浓缩液喷雾干燥后成虫草素冻干粉纯品9. 7g (收率是为85. 07%)。对比例I :虫草素的提取方法参考CN200910026113. 8的虫草素提取方法，方法采用本发明的实施例1，其中的超声提取方法采用CN200910026113. 8的方法，即超声频率90khz进行超声波提取，提取温度为60°C，提取时间为30分钟。实验例收率和纯度比较根据最终制得的成品的重量比较实施例1-3和对比例中的收率，然后采用HPLC检测得到的虫草素产品的纯度，结果见表1，其中HPLC检测方法具体为色谱柱为Kromasil 100-25, C18,4. 6_X250mm ;流动相为甲醇-水体积比为15:85流速lmL/min ;检测波长为260nm ;检测温度为30°C。表I :实施例1-3和对比例的收率及含量比较
I收率(％)~I纯度(％)
权利要求
1.一种虫草素的提取方法，其特征在于，该方法包括以下步骤虫草素发酵液减压浓缩，然后分别在微波和光波组合下超声提取，得到的提取液分离纯化，即得。
2.根据权利要求I所述的提取方法，其特征在于，所述微波和光波下超声提取是指在微波炉中55%微波和45%光波组合、辐射功率为800W的条件下超声提取4-10min。
3.根据权利要求I所述的提取方法，其特征在于，提取液分离纯化包括以下步骤:离心、醇沉，离心，过大孔吸附树脂柱、高效液相色谱纯化。
4.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，所述两个离心步骤中离心的转速为 4000-6000r/min,离心的时间为 10_30min。
5.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，所述过大孔吸附树脂柱步骤为以 O. 5-3BV/h流速上样吸附，用3-5倍柱体积的蒸馏水洗脱杂质，再用浓度为20-30%的乙醇以2-6BV/h的流量洗脱1-5小时，收集乙醇洗脱液，即可。
6.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，所述高效液相色谱纯化条件色谱柱为 Kromasil 100-25, C18,4. 6_X 250mm ;流动相为甲醇-水体积比为 15:85 流速 lmL/min ； 检测波长为260nm。
7.根据权利要求I所述的提取方法，其特征在于，所述虫草发酵液的发酵方法为在发酵罐中加入培养基，灭菌后接入菌种，接种量10%，发酵条件为22°C，150r/min，pH6_7，使菌种在液体中悬浮生长，培养时间为6d，虫草素含量达到O. 5%以上，即得虫草素发酵液；所述发酵培养基为液体培养基，培养基中各成分的重量百分比为蔗糖4. 0%、玉米汁3. 0%、麸皮 3. 0%、全脂牛奶粉 I. 0%, VB O. 01%, KH2PO41%、MgSO4O. 05%。
8.根据权利要求1-7任一项所述的提取方法，其特征在于，所述提取方法，包括以下步骤1)取虫草素发酵液，减压浓缩至原液的1/3-1/5倍,在微波炉中55%微波和45%光波组合、辐射功率为800W的条件下超声提取4-10min，将得到的提取液离心，离心速度为 4000-6000r/min,离心时间为10-30min,收集上清液；2)步骤I)中得到的上清液减压浓缩至原体积的1/3-1/6，用浓缩液体积3-5倍的无水乙醇沉淀，过夜，离心速度为4000-6000r/min，离心时间为10_30min，收集上清液；3)将步骤2)收集到的上清液过大孔树脂柱，以O.5-3BV/h流速上样吸附，用3-5倍柱体积的蒸馏水洗脱杂质，再用浓度为20-30%的乙醇以2-6BV/h的流量洗脱I. 5-3. 5小时， 收集乙醇洗脱液；4)将步骤3)得到的乙醇洗脱液用高效液相色谱纯化，然后将收集到的纯化液浓缩，再用高效液相色谱纯化，再重复2-5次上述浓缩、纯化步骤，收集到的纯化液浓缩至干，即得虫草素。
9.根据权利要求8所述的提取方法，其特征在于，提取方法包括以下步骤1)将虫草素发酵液减压浓缩至原液体积的1/3倍,在微波炉中55%和微波45%光波组合、辐射功率为800W的条件下辐射超声提取4min，离心，收集上清液；2)将步骤I)得到的上清液减压浓缩到原体积的1/5，浓缩液用3倍体积无水乙醇沉淀， 过夜，然后收集上清液，5000r/min离心15min得到虫草素上清液；3)将步骤2)得到的虫草素上清液过AB-8型大孔树脂柱，以lBV/h流速上样吸附，用 4倍柱体积的蒸馏水洗脱杂质,再用20%的乙醇以4BV/h的流量洗脱2小时，收集乙醇洗脱液；4)然后将乙醇洗脱液用高效液相色谱纯化洗脱液，其中高效液相色谱条件为色谱柱为 Kromasi1100-25, C18,4. 6mmX 250mm ;流动相为甲醇-水体积比为 15:85 流速 1mT,/miη ； 检测波长为260nm ;检测温度为30°C，收集虫草素峰流出液；5)将虫草素峰流出液减压浓缩至其体积的1/3，然后采用步骤3)的高效液相色谱纯化；再减压浓缩、高效液相色谱纯化，即重复上述步骤3次，将最终得到的纯化液减压浓缩至干，即得。
10.根据权利要求8所述的提取方法，其特征在于，在步骤2)还包括活性炭吸附杂质的过程，具体为步骤I)中得到的上清液减压浓缩至原体积的1/3-1/6，用浓缩液体积3-5倍的无水乙醇沉淀，过夜，离心速度为4000-6000r/min，离心时间为10_30min，用等量的活性炭混匀，摇床振摇12h，过滤除色素。
全文摘要
本发明涉及一种虫草素的提取方法，该方法包括以下步骤虫草素发酵液减压浓缩，然后分别在微波和光波组合下超声提取，得到的提取液进一步分离纯化，即得。与传统的提取方法相比，本发明提供的提取方法提高了提取率，节省了提取时间，增加了纯度。
文档编号C07H1/08GK102936271SQ20121045882
公开日2013年2月20日 申请日期2012年11月14日 优先权日2012年11月14日
发明者王智森, 高飞 申请人:石家庄藏诺生物股份有限公司