本发明涉及双歧四联活菌组合物的新应用，属于医药技术领域。
背景技术：
根据idf(国际糖尿病联盟)统计，糖尿病患者总人口数量为9840万，神经性病变为70％，其中糖尿病的发病率为60％，即全国糖尿病患者便秘的总人口数为4100万人口，其中城市人口中糖尿病患者便秘的总人数为2200万。临床上治疗糖尿病药降糖药物大多为磺酰脲类促胰岛素分泌剂、双胍类、α-葡萄糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂、二肽基肽酶-4抑制剂、胰高血糖素样肽-1类似物等，这些药物会产生一些副作用，如低血糖、消化道反应(腹胀、腹泻)、过敏、肝功能异常、皮疹等。
糖尿病是一种因体内胰岛素绝对或相对不足所导致的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢综合症。糖尿病人伴随肠道菌群失调及炎症反应从而产生便秘。肠道菌群失调导致宿主体内g-比例升高，肠道通透性增加或者肠道菌群移位，机体通过产生和吸收更多的毒素激活胰岛的低度慢性炎症反应，炎症可以通过多种途径导致胰岛β细胞结构受损与功能障碍，促进β细胞凋亡，引起胰岛素分泌不足；炎症还能引起内皮细胞结构和功能异常，导致胰岛素在人体组织细胞中出现转运障碍，不能发挥正常作用而引起胰岛素抵抗。
目前有文献报道干酪乳杆菌具有降血糖的功效，文献中报道的益生菌能达到降血糖功效作用需摄入108个-109个活菌，甚至更高。
中国发明专利cn01108353.0公开了一种“双歧杆菌四联活菌片”，由婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽胞杆菌四种菌种组成。
每克药片中各菌粉的含量分别为：婴儿双歧杆菌5.0×106个；嗜酸乳杆菌为2.5×106个；粪肠球菌2.5×106个；蜡样芽孢杆菌2.5×105个。
该四种菌保藏在中国微生物保藏管理委员会普通生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2000年6月20日，保藏编号：婴儿双歧杆菌0460.1、嗜酸乳杆菌0460.2、粪肠球菌0460.3、蜡样芽孢杆菌0460.4。
该专利中记载：该“双歧杆菌四联活菌片”可以补充人体肠道的正常生理细菌，恢复体内的微生态平衡。临床研究表明，该“双歧杆菌四联活菌片”对成人急性腹泻、慢性腹泻、成人便秘、小儿急性腹泻等有良好的疗效。
但专利即相关文献均未提及该组合物对糖尿病患者的血糖及糖化血红蛋白和糖化白蛋白具有降低作用。
技术实现要素：
本发明提供了一种双歧四联活菌组合物的新应用，特别是一种双歧四联活菌组合物在制备辅助降血糖、辅助降糖化血红蛋白和辅助降糖化白蛋白的药品或保健食品或食品中的应用。
双歧四联活菌组合物在制备辅助降血糖药物或保健食品或食品中的应用，所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌。
双歧四联活菌组合物在制备适用于ii型糖尿病患者的辅助降血糖药物或保健食品或食品中的应用，所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌。
双歧四联活菌组合物在制备适用于合并胰岛素患者的辅助降血糖药物或保健食品或食品中的应用，所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌。
双歧四联活菌组合物在制备辅助降低糖化白蛋白药物或保健食品或食品中的应用，所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌。
双歧四联活菌组合物在制备辅助降低糖化血红蛋白药物或保健食品或食品中的应用，所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌。
优选地，以上所述应用中，每克所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌1.0×106个-1.0×108个，嗜酸乳杆菌为1.0×106个-1.0×108个，粪肠球菌1.0×106个-1.0×108个，蜡样芽孢杆菌1.0×105个-1.0×107个。
更优选地，以上所述应用中，每克所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌5.0×106个；嗜酸乳杆菌为2.5×106个；粪肠球菌2.5×106个；蜡样芽孢杆菌2.5×105个。
本发明所述婴儿双歧杆菌的菌种保藏号为婴儿双歧杆菌0460.1；所述嗜酸乳杆菌的菌种保藏号为嗜酸乳杆菌0460.2；所述粪肠球菌的菌种保藏号为粪肠球菌0460.3；所述蜡样芽孢杆菌的菌种保藏号为蜡样芽孢杆菌0460.4。
以上所述应用中，所述双歧四联活菌组合物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂中的任意一种。
本发明还提供了一种含有双歧四联活菌组合物的辅助降糖药物或保健食品，所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌；所述辅助降糖药物或保健食品的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂中的任意一种。
优选地，以上所述应用中，所述每克所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌1.0×106个-1.0×108个，嗜酸乳杆菌为1.0×106个-1.0×108个，粪肠球菌1.0×106个-1.0×108个，蜡样芽孢杆菌1.0×105个-1.0×107个。
更优选地，以上所述应用中，每克所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌5.0×106个；嗜酸乳杆菌为2.5×106个；粪肠球菌2.5×106个；蜡样芽孢杆菌2.5×105个。
本发明还提供了一种含有双歧四联活菌组合物的辅助降糖食品，所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌，嗜酸乳杆菌为，粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌。
优选地，所述每克所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌1.0×106个-1.0×108个，嗜酸乳杆菌为1.0×106个-1.0×108个，粪肠球菌1.0×106个-1.0×108个，蜡样芽孢杆菌1.0×105个-1.0×107个。
更优选地，每克所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌5.0×106个；嗜酸乳杆菌为2.5×106个；粪肠球菌2.5×106个；蜡样芽孢杆菌2.5×105个。
本发明所述双歧杆菌四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、蜡样芽孢杆菌。
每克组合物中各菌粉的含量分别为：婴儿双歧杆菌5.0×106个；嗜酸乳杆菌为2.5×106个；粪肠球菌2.5×106个；蜡样芽孢杆菌2.5×105个。
其中，四种菌保藏在中国微生物保藏管理委员会普通生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2000年6月20日，保藏编号：婴儿双歧杆菌0460.1、嗜酸乳杆菌0460.2、粪肠球菌0460.3、蜡样芽孢杆菌0460.4。
所述婴儿双歧杆菌，菌种保藏号为婴儿双歧杆菌0460.1；保藏地点为位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所普通微生物中心，保藏日期为2000年6月20日；
所述嗜酸乳杆菌，菌种保藏号为嗜酸乳杆菌0460.2；保藏地点为位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所普通微生物中心，保藏日期为2000年6月20日；
所述粪肠球菌，菌种保藏号为粪肠球菌0460.3；保藏地点为位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所普通微生物中心，保藏日期为2000年6月20日；
所述蜡样芽孢杆菌，菌种保藏号为蜡样芽孢杆菌0460.4；保藏地点为位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所普通微生物中心，保藏日期为2000年6月20日。
目前常用的降糖药物有磺酰脲类促胰岛素分泌剂、非磺酰脲类促胰岛素分泌剂、双胍类、α-葡萄糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂、肽基肽酶-4抑制剂、胰高血糖素样肽-1类似物等。糖尿病患者服用这些药物会出现低血糖、消化道反应、过敏反应等不良反应症状。
双歧杆菌四联活菌组合物发挥辅助降血糖的机制为：粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌属于需氧菌，婴儿双歧杆菌和嗜酸乳杆菌属于厌氧菌，双歧杆菌四联活菌组合物进入人体肠道后，粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌消耗肠道中的氧气，为婴儿双歧杆菌和嗜酸乳杆菌提供厌氧环境并促进婴儿双歧杆菌和嗜酸乳杆菌的生长，婴儿双歧杆菌从而使肠道群达到平衡状态，快速恢复肠道菌群平衡，肠道菌群平衡使肠道通透性降低，机体炎症降低，糖耐量异常得到缓解，从而达到降低血糖水平、糖化血红蛋白及糖化白蛋白水平的功能。
本发明有益效果：
本发明双歧四联活菌组合物目前在临床应用上主要用于消化科，产品适应症用于治疗与肠道菌群失调相关的腹泻、便秘、功能性消化不良。本发明发现了双歧四联活菌组合物的一种新用途，将含有双歧杆菌四株菌组合物从消化科室的应用逐渐拓展到内分泌科室的应用，对糖尿病患者的血糖及糖化血红蛋白和糖化白蛋白具有辅助降低的作用，可以用于制备适用于治疗ii型糖尿病患者、合并胰岛素患者的辅助降血糖药物或保健食品或食品。本发明双歧四联活菌组合物用于制备辅助降血糖药物，成分无害，对身体无副作用。
本发明使用婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌四种菌粉制备成组合物，其中婴儿双歧杆菌1.0×106个-1.0×108个，嗜酸乳杆菌为1.0×106个-1.0×108个，粪肠球菌1.0×106个-1.0×108个，蜡样芽孢杆菌1.0×105个-1.0×107个，本发明不仅发现婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌四种菌粉制备的组合物可达到降低血糖、糖化血红蛋白和糖化白蛋白功效，而且还发现只需较低数量级的以上四种菌的组合物就能达到降低血糖、糖化血红蛋白和糖化白蛋白功效。
附图说明
图1为两组治疗前后糖化白蛋白的变化。
具体实施方式
为阐明本发明双歧四联活菌组合物对血糖、降糖化血红蛋白和降糖化白蛋白的效果，本实施例通过动物实验及临床实验对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。
本发明所述双歧杆菌四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、蜡样芽孢杆菌。
每克所述双歧四联活菌组合物包含婴儿双歧杆菌5.0×106个；嗜酸乳杆菌为2.5×106个；粪肠球菌2.5×106个；蜡样芽孢杆菌2.5×105个。
其中，四种菌保藏在中国微生物保藏管理委员会普通生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2000年6月20日，保藏编号：婴儿双歧杆菌0460.1、嗜酸乳杆菌0460.2、粪肠球菌0460.3、蜡样芽孢杆菌0460.4。
所述婴儿双歧杆菌，菌种保藏号为婴儿双歧杆菌0460.1；保藏地点为位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所普通微生物中心，保藏日期为2000年6月20日；
所述嗜酸乳杆菌，菌种保藏号为嗜酸乳杆菌0460.2；保藏地点为位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所普通微生物中心，保藏日期为2000年6月20日；
所述粪肠球菌，菌种保藏号为粪肠球菌0460.3；保藏地点为位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所普通微生物中心，保藏日期为2000年6月20日；
所述蜡样芽孢杆菌，菌种保藏号为蜡样芽孢杆菌0460.4；保藏地点为位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所普通微生物中心，保藏日期为2000年6月20日。
双歧杆菌四联活菌组合物中包含婴儿双歧杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌，并且组合物中还可以添加符合药典规定的一种或几种辅料，双歧杆菌四联活菌组合物中的活性成分为婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽胞杆菌，以上四种活菌活性成分可以制成片剂，颗粒剂，胶囊剂，散剂等任意剂型，具体组合物制备成何种剂型不会对辅助降血糖功效产生影响，本实施例动物实验中为了方便灌胃小鼠，将以上述四种菌的混合菌粉制备成溶液进行以下动物实验，并且以双歧杆菌四联活菌片为例进行以下临床实验证明双歧四联活菌组合物可以起到辅助降血糖的作用。
双歧杆菌四联活菌组合物的制备方法如下：
(1)散剂制备方法：四种菌株经发酵培养、冻干制备成菌粉，四种菌粉过60目筛网；辅料按一定比例称量后进行过筛处理；将过筛处理的辅料先加入批混机中进行批混，然后加入混合菌粉。四种冻干粉与辅料在混匀机中混匀后放料，利用包装机进行包装后获得成品。
(2)颗粒剂的制备方法：四种菌株经发酵培养、冻干制备成菌粉，四种菌粉过60目筛网；辅料按一定比例称量后进行过筛处理；将过筛后的辅料及菌粉加入造粒机中进行造粒。造粒完成后利用包装机进行包装后获得成品。
(3)胶囊剂的制备方法：四种菌株经发酵培养、冻干制备成菌粉，四种菌粉过60目筛网；辅料按一定比例称量后进行过筛处理；将过筛处理的辅料先加入批混机中进行批混，然后加入混合菌粉。四种冻干粉与辅料在混匀机中混匀后放料，利用胶囊填充机将混合后的原辅料装进胶囊，包装后获得成品。
(4)片剂的制备方法：四种菌株经发酵培养、冻干制备成菌粉，四种菌粉过60目筛网；辅料按一定比例称量后进行过筛处理；将过筛处理的辅料先加入批混机中进行批混，然后加入混合菌粉。四种冻干粉与辅料在混匀机中混匀后放料，利用压片机进行压片后获得成品。
1动物试验设计及方法
表1动物试验设计及方法
2人体实验总体设计及方法
以下实施案例所涉及的缩略语解释如下：
akp(alkalinephosphatase)碱性磷酸酶；alt(alanineaminotransterase)丙氨酸氨基转移酶；ast(aspartateaminotransferase)天门冬氨酸氨基转移酶；cr(creatinine)肌酐；crf(casereportform)病历报告表；fas(fullanalysisset)全分析数据集；hb(hemoglobin)血红蛋白；plt(platelet)血小板；pps(per-protocolset)符合方案数据集；rbc(redbloodcell)红细胞；ss(satetyset)安全性数据集；wbc(whitebloodcell)白细胞；tbil(totalbilirubin)总胆红素；ggt(γ-glutamyltranspeptadase)谷氨酰转肽酶；bun(ureanitrogen)尿素氮；bfi(bowelfunctionindex)肠功能指数；pac-sym(patientassessmentofconstipationsymptom)便秘患者症状自评量表；csbms(completespontaneousbowelmovements)完全自发排便情况；sbms(spontaneousbowelmovements)自发排便情况；pgic(patient-reportedglobalimpressionofchange)患者对变化的总体印象量表。
2.1试验设计
采用随机、双盲、安慰剂平行对照、多中心临床研究。
2.2病例数量及分组
总病例数选定为240例；6个中心。病人为患ii型糖尿病且具有便秘症状的患者。
2.3随机方法
采用分层区组随机方法。
(1)借助sas9.4统计软件包procplan过程，采用区组随机的方法，产生每个适应症受试者所接受处理(试验药和对照药)的随机安排，既列出随机编码表。
(2)病例数分配：各个中心所分配的受试者药物编号是随机的，本次试验共6个中心，各中心按设定的规则，即组长单位为首，参加单位各中心按名称汉语拼音的首字母排序，用sas软件包产生《中心编码随机数字表》，得到各中心的随机编码。各个中心在分配药物时按编号依次发放。
3病例选择标准
3.1纳入病例标准
以下任一项不满足者，不可参与本试验：
(1)符合糖尿病诊断标准，属2型糖尿病者，病程≥1年；
(2)筛选时糖化血红蛋白(hba1c)≥7％，且≤12％；
(3)符合慢性便秘诊断标准，病程≥6个月；
(4)18～70周岁(包括18和70周岁)，男女不限；
(5)自愿签署书面知情同意书。
3.2排除标准
具备以下任一项者，不可参与试验：
(1)i型糖尿病，妊娠期糖尿病等其他特殊类型糖尿病患者；或糖尿病血糖控制不稳定(空腹血糖>11.1mmol/l)；
(2)有糖尿病酮症酸中毒或高渗性非酮症糖尿病昏迷史者；
(3)器质性便秘，如肠道疾病、内分泌和代谢性疾病(糖尿病除外)；神经系统疾病、肌肉疾病等引起的便秘；
(4)药物性便秘，如抗抑郁药、钙拮抗剂、利尿剂、拟交感神经药、含铝或钙的抗酸药、钙剂、铁剂、止泻药等引起的便秘；
(5)胃肠道疾病，如结肠炎、肠系膜淋巴结炎，有肠道手术史者；
(6)近2周内使用过可能影响临床结果评价的药物或方法，如：抗生素(β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类等)；微生态活菌制剂(枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊、双歧杆菌乳杆菌三联活菌片、酪酸梭菌肠球菌三联活菌片等)；渗透性泻药(硫酸镁、乳果糖等)；蒽醌类(大黄类、芦荟、番泻叶等)；促进胃肠动力药物(胃复安、吗丁啉、西沙比利)等；
(7)过去6个月内有心肌梗塞或脑中风史，或存在严重的心血管疾病及风险者，包括不稳定性心绞痛、心力衰竭或有危及生命的心律失常等；
(8)肝、肾功能异常者(即alt或ast大于正常值上限1.5倍；肌酐大于正常值)，或正在接受透析治疗者；
(9)患有严重的高血压疾病，药物控制后依旧收缩压≥160mmhg，舒张压＞90mmhg或有低血压(静息坐位血压)＜90/50mmhg)的患者；
(10)精神病患者、酒精依赖者或有药物滥用史者；
(11)哺乳期妇女、妊娠妇女及服药期间或服药停止后3个月内准备生育者；
(12)过敏体质或既往对多种药物过敏者，或对试验所用药物成分过敏的患者；
(13)试验前3个月参加过其他临床研究者；
(14)研究者认为不宜参与本研究的其他患者。
4研究药物及治疗方法
4.1试验用药
(1)试验药：双歧杆菌四联活菌片，国药准字s20060010。主要成分：婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、蜡样芽胞杆菌，规格：0.5g/片，贮藏：2～8℃避光保存和运输，有效期：18个月。
(2)对照药：双歧杆菌四联活菌片模拟剂，与双歧杆菌四联活菌片外观，颜色等完全一致但不含药物成分。主要成分：药用辅料，贮藏：2～8℃避光保存和运输，有效期：18个月。
上述双歧杆菌四联活菌片药物均由杭州远大生物制药有限公司生产。
4.2给药方案
(1)试验组(简称a组)：基础治疗+双歧杆菌四联活菌片，口服，一日3次，每次3片，餐后用温开水送服，需与基础治疗药物分开服用，间隔15分钟。连续服用8周。
(2)对照组(简称b组)：基础治疗+双歧杆菌四联活菌片模拟剂，口服，一日3次，每次3片，餐后用温开水送服，需与基础治疗药物分开服用，间隔15分钟。连续服用8周。
4.3研究周期
治疗期4周，随访期8周。
4.4基础治疗
采用糖尿病常规治疗，口服药物或注射胰岛素控制血糖，并根据实际情况可采取个体化治疗方案，同时进行健康教育及调整生活方式(包括进行糖尿病知识教育、心理疏导、饮食控制、适量运动等。饮食应注意三餐定时定量，少食脂肪含量高的食物，多食粗粮及含纤维素较多的蔬菜，多饮水、运动以及建立良好的排便习惯)。尽量控制空腹血糖≤7mmol/l，餐后2h血糖≤10mmol/l，在研究中不应改变基础治疗方案及剂量。
5疗效评价
5.1疗效指标评价
糖化白蛋白及糖化血红蛋白
5.2安全性评价
(1)一般体检项目：生命体征(心率、呼吸、体温、血压)及体格检查(包括全身检查、腹部检查和肛门直肠指检，腹部检查时应特别注意有无腹部压痛、腹部包块等)；
(2)实验室指标：血常规(rbc、hb、wbc、plt)、肝功能(alt、ast、akp、tbil、ggt)、肾功能(cr、bun)、尿常规、糖化白蛋白、糖化血红蛋白、心电图；
(3)不良事件：不良事件、严重不良事件和不良反应发生率。
6疗效评价标准
6.1主要疗效指标
糖化白蛋白及糖化血红蛋白：比较试验组和对照组，组内、组间的数值差异。
6.2次要疗效指标
糖化白蛋白的变化；亚组分析(以12周时糖化血红蛋白的变化值作为疗效指标，采用分层分析的方法进行探索bmi以25kg/m2、糖尿病病程8年、基线空腹血糖8mmol/l进行分层分析)；降糖效果的稳定性分析：降糖的稳定性＝2周、4周、8周三次血糖检查值的标准差。
6.3安全性评价标准
无：安全，无任何不良反应；
轻度：比较安全，如有不良反应，不需做任何处理，可继续用药；
中度：有安全性问题，有中等程度的不良反应，做处理后可继续给药；
重度：因严重不良反应终止试验。
7动物实验结果
7.1不同实验组空腹血糖变化情况
表2不同实验组空腹血糖变化比较(均数±标准差，mmol/l)
从表2中可以看出，给小鼠灌胃含有四种菌粉的菌悬液，随着灌胃时间的延长，实验组小鼠空腹血糖值呈下降趋势，到第五周时，实验组中正常剂量组小鼠空腹血糖值从14.36±0.12mmmol/l降低到6.67±0.09mmmol/l；实验组中高剂量组小鼠空腹血糖值从14.26±0.05mmmol/l降低到6.73±0.09mmmol/l；实验组中低剂量组小鼠空腹血糖值从14.30±0.14mmmol/l降低到6.63±0.05mmmol/l。由此说明，婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌四种菌粉组合物具有降低糖尿病小鼠空腹血糖的功能。
7.2不同实验组糖化血红蛋白变化比较
表3不同实验组糖化血红蛋白变化比较(均数±标准差，％)
从表3中可以看出，给小鼠灌胃含有四种菌粉的菌悬液，随着灌胃时间的延长，实验组小鼠糖化血红蛋白值呈下降趋势，到第五周时，实验组中正常剂量组小鼠糖化血红蛋白值从5.33±0.09降低到3.86±0.05；实验组中高剂量组小鼠糖化血红蛋白值从5.26±0.05降低到3.83±0.05；实验组中低剂量组糖化血红蛋白值从5.23±0.05降低到4.03±0.05。由此说明，婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌四种菌粉组合物具有降低糖尿病小鼠糖化血红蛋白的功能。
7.3不同实验组糖化白蛋白变化比较
表4不同实验组糖化白蛋白变化比较(均数±标准差，％)
从表4中可以看出，给小鼠灌胃含有四种菌粉的菌悬液，随着灌胃时间的延长，实验组小鼠糖化白蛋白值呈下降趋势，到第五周时，实验组中正常剂量组小鼠糖化白蛋白值从11.27±0.09降低到9.17±0.05；实验组中高剂量组小鼠糖化白蛋白值从11.23±0.05降低到9.20±0.05；实验组中低剂量组糖化白蛋白值从11.23±0.05降低到9.23±0.05。由此说明，婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌四种菌粉组合物具有降低糖尿病小鼠糖化白蛋白的功能。
7.4不同实验组胰岛素水平变化比较
表5不同实验组胰岛素变化比较(均数±标准差，miu/l)
从表5中可以看出，给小鼠灌胃含有四种菌粉的菌悬液，随着灌胃时间的延长，实验组小鼠胰岛素水平值呈上升趋势，到第五周时，实验组中正常剂量组小鼠胰岛素水平值从1.23±0.05升高到3.37±0.05；实验组中高剂量组小鼠胰岛素水平值值从1.23±0.05升高到3.47±0.05；实验组中低剂量组小鼠胰岛素水平值从1.27±0.05升高到3.27±0.05。由此说明，婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌四种菌粉组合物具有促进糖尿病小鼠胰岛素分泌的功能，从而达到降低糖尿病小鼠血糖的作用。
8临床试验结果
8.1入组及完成情况
表6两组患者基线资料(均数±标准差)
表7两组患者基线资料
8.2主要疗效指标-糖化血红蛋白和糖化白蛋白指标
表8治疗前后糖化白蛋白的变化(fas)
从表8结果可以得出，在治疗期间服用双歧四联活菌片，实验组与对照组相比，实验组随时间的延长，患者糖化白蛋白的量相对基线水平呈下降趋势。实验组糖化白蛋白降低的量远大于对照组。由此说明双歧四联活菌片可以糖尿病人糖化白蛋白的水平。
表9治疗前后糖化白蛋白的变化(pps)
从表9结果可以得出，在治疗期间服用双歧四联活菌片，实验组与对照组相比，实验组随时间的延长，患者糖化白蛋白的量相对基线水平呈下降趋势。实验组糖化白蛋白降低的量远大于对照组。由此说明双歧四联活菌片可以糖尿病人糖化白蛋白的水平。
综合表8和表9结果可以得出，针对糖化白蛋白的的变化fas集与pps集的统计结果大致相同，可以验证双歧四联活菌片对降低糖尿病患者糖化白蛋白的水平具有较好的效果。
表10治疗前后糖化血红蛋白的变化(fas)
从表10结果可以得出，在治疗期间服用双歧四联活菌片，实验组与对照组相比，实验组随时间的延长，患者糖化血红蛋白的量相对基线水平呈下降趋势。由此说明双歧四联活菌片可以降低糖尿病人糖化血红蛋白的水平。
表11治疗前后糖化血红蛋白的变化(pps)
从表11结果可以得出，在治疗期间服用双歧四联活菌片，实验组与对照组相比，实验组随时间的延长，患者糖化血红蛋白的量相对基线水平呈下降趋势。由此说明双歧四联活菌片可以降低糖尿病人糖化血红蛋白的水平。
综合表10和表11结果可以得出，针对糖化血红蛋白的的变化fas集与pps集的统计结果大致相同，可以验证双歧四联活菌片对降低糖尿病患者糖化白蛋白的水平具有较好的效果。
8.3次要疗效指标
(1)糖化白蛋白的变化：fas分析结果表明，试验组与对照组基线期糖化白蛋白的值分别为：21.38±5.74％和21.93±6.51％；治疗后4周，分别为20.08±6.05％和20.58±7.30％；治疗后8周分别为19.07±5.56％和20.83±8.74％，试验组服药8周后变化趋势最为明显；治疗后12周，两组分别为19.03±5.19％和19.36±6.14％。由此说明，双歧杆菌四联活菌片对糖化血红蛋白具有降低作用，从而具有辅助降低糖尿病人血糖的作用。(见图1)
(2)亚组分析：从表12中可以看出在基线期bmi≥25kg/m2，糖尿病病程小于8年，空腹血糖小于8mmol/l和基线时使用胰岛素治疗的受试者，试验组比对照组在12周时糖化血红蛋白较基线的下降趋势更明显，由此说明，双歧杆菌四联活菌片具有辅助降血糖的功效。
表12治疗前后糖化血红蛋白的变化亚组分析
(3)降糖效果的稳定性分析(降糖的稳定性＝2周、4周、8周三次血糖检查值的标准差)：结果表明试验组降糖稳定性(2.02±2.77mmol/l)与对照组(2.77±5.51mmol/l)相比结果表明对照组的数据较试验组更离散。由此说明，双歧杆菌四联活菌片具有辅助降血糖的功效。
8.4安全性指标
治疗前后生命体征变化，包括体温、心率、呼吸、收缩压、舒张压和实验室检查指标，包括红细胞、白细胞、血红细胞、血小板、尿白细胞、尿红细胞、尿蛋白、alt、ast、alp、tbil、ggt、bun、cr等指标正常。
以上临床研究表明，本发明双歧杆菌四联活菌片能够辅助降低糖尿病患者血糖，尤其是ii型糖尿病患者或/和合并胰岛素患者，本发明双歧杆菌四联活菌片能够辅助降低血糖、降低降糖化血红蛋白和降低降糖化白蛋白。
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。