本发明涉及益生菌，尤其是涉及一种具有能显著治疗便秘作用且无任何毒副作用的治疗便秘的乳酸菌组合物及其制备方法。
背景技术：
：便秘是一种常见多发性的疾病，严重影响人们的正常生活，而且往往会诱发其他疾病，例如当大便排出不畅时，过度用力屏气的话，会增加腹压，血压也同时升高，可诱发心绞痛、心肌梗死、脑出血、中风猝死等。近年来，便秘造成的心脑血管疾病发作有逐年增多的趋势；常年便秘会导致生活质量下降，健康受损，甚至引发致命的严重后果。我们国家的中医认为便秘是大便秘结不通，排便时间延长或欲大便而艰涩不畅的一种病症，主要由燥热内结、气机郁滞、津液不足和脾肾虚寒所引起。而一般以排便为主要治疗目的西药主要是泻药类药物，均存在不同程度的毒副作用与不良反映。同时，由于便秘具有反复发作的特点，在使用泻药治疗会产生耐药性，患者多难以长期接受西药治疗，而且长期吃泻药对身体损害也很大。技术实现要素：为克服现有技术的缺点，本发明目的在于提供一种具有能显著治疗便秘作用且无任何毒副作用的治疗便秘的乳酸菌组合物及其制备方法。本发明通过以下技术措施实现的，一种治疗便秘的乳酸菌组合物，包括乳酸菌组合核，所述乳酸菌组合核外包裹有包被层；所述包被层包括重量份数的成份：低聚异麦芽糖30～50、蛋白物质30～50、硝酸纤维素5～10；所述乳酸菌组合核由如下重量份数的菌株组成：嗜酸乳杆菌20～25、干酪乳杆菌10～20、鼠李糖乳杆菌20～25、副干酪乳杆菌10～20、植物乳杆菌10～20、长双歧杆菌20～30、乳双歧杆菌20～30、短双歧杆菌20～25、嗜热链球菌15～25、酪酸梭菌20～30。作为一种优选方式，所述乳酸菌组合物中嗜酸乳杆菌的含量为107～108cuf/g、干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、副干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、植物乳杆菌的含量为106～107cuf/g、长双歧杆菌的含量为107～108cuf/g、乳双歧杆菌107～108cuf/g、短双歧杆菌107～108cuf/g、嗜热链球菌107～108cuf/g、酪酸梭菌的含量为107～108cuf/g。作为一种优选方式，所述乳酸菌组合核中嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、长双歧杆菌、乳双歧杆菌、短双歧杆菌和嗜热链球菌分别经过耐猪胆盐、耐酸筛选的，能耐0.3％的猪胆盐及ph为2.5的酸性环境。作为一种优选方式，所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋白层，其中酪蛋白和乳铁蛋白的重量比为1-5：1-5。本发明还公开了一种治疗便秘的乳酸菌组合物的制备方法，包括如下步骤：(1)将嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、长双歧杆菌、乳双歧杆菌、短双歧杆菌、嗜热链球菌和酪酸梭菌分别以1ml/100ml的接种量接种至培养基中，在35℃～45℃下，培养12～24h，得到活化的乳杆菌菌种；(2)将活化的上述菌种以重量份数：嗜酸乳杆菌20～25、干酪乳杆菌10～20、鼠李糖乳杆菌20～25、副干酪乳杆菌10～20、植物乳杆菌10～20、长双歧杆菌20～30、乳双歧杆菌20～30、短双歧杆菌20～25、嗜热链球菌15～25、酪酸梭菌20～30混合后，再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中，在35℃～45℃下，培养10～12h后，离心取沉淀，在4℃～10℃下保温6～10h后，均质，得到组合菌；(3)将重量份数的：低聚异麦芽糖30～50、蛋白物质30～50、硝酸纤维素5～10加水充分混合成包被液，将组合菌加入包被液混和均匀；(4)将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化，过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合物。作为一种优选方式，所述乳酸菌组合物中嗜酸乳杆菌的含量为107～108cuf/g、干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、副干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、植物乳杆菌的含量为106～107cuf/g、长双歧杆菌的含量为107～108cuf/g、乳双歧杆菌107～108cuf/g、短双歧杆菌107～108cuf/g、嗜热链球菌107～108cuf/g、酪酸梭菌的含量为107～108cuf/g。作为一种优选方式，所述乳酸菌组合核中嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、长双歧杆菌、乳双歧杆菌、短双歧杆菌和嗜热链球菌分别经过耐猪胆盐、耐酸筛选的，能耐0.3％的猪胆盐及ph为2.5的酸性环境。作为一种优选方式，所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋白层，其中酪蛋白和乳铁蛋白的重量比为1-5：1-5。本发明具有显著治疗便秘的作用，且因为是益生菌类产品，对人体没有任何毒副作用。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。实施例1(1)菌种活化筛选出耐0.3％猪胆盐、耐ph为2.5的酸性环境的嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、长双歧杆菌、乳双歧杆菌、短双歧杆菌和嗜热链球菌，将筛选出的九种菌和酪酸梭菌分别以1ml/100ml的接种量接种至mrs培养基中，在45℃下，培养12h，得到活化的乳杆菌菌种；其中，mrs培养基的配方为：在1000ml蒸馏水中加入10g蛋白胨、8g牛肉浸粉、20g葡萄糖、4g酵母浸膏、0.05g四水硫酸锰、1ml吐温80、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、0.2g硫酸镁、2g柠檬酸二铵；(2)制备组合菌将活化的十种菌种以重量份数：嗜酸乳杆菌20g、干酪乳杆菌10g、鼠李糖乳杆菌20g、副干酪乳杆菌10g、植物乳杆菌10g、长双歧杆菌20g、乳双歧杆菌20g、短双歧杆菌20g、嗜热链球菌15g、酪酸梭菌20g混合后，再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中，在45℃下，培养10h后，以6000r/min，在5℃下，离心15min，取沉淀物，在4℃下保温6h后，均质，得到组合菌；(3)制备包被组合菌将以下重量的：低聚异麦芽糖30g、酪蛋白15g、乳铁蛋白15g、硝酸纤维素5g加水1000ml充分混合成包被液，将组合菌加入包被液混和均匀；(4)制备乳酸菌组合物将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化，过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合物。在乳酸菌组合物中乳酸菌组合物中嗜酸乳杆菌的含量为107～108cuf/g、干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、副干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、植物乳杆菌的含量为106～107cuf/g、长双歧杆菌的含量为107～108cuf/g、乳双歧杆菌107～108cuf/g、短双歧杆菌107～108cuf/g、嗜热链球菌107～108cuf/g、酪酸梭菌的含量为107～108cuf/g。实施例2筛选出耐0.3％猪胆盐、耐ph为2.5的酸性环境的嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、长双歧杆菌、乳双歧杆菌、短双歧杆菌和嗜热链球菌，将筛选出的九种菌和酪酸梭菌分别以1ml/100ml的接种量接种至mrs培养基中，在45℃下，培养12h，得到活化的乳杆菌菌种；其中，mrs培养基的配方为：在1000ml蒸馏水中加入10g蛋白胨、8g牛肉浸粉、20g葡萄糖、5g酵母浸膏、0.06g四水硫酸锰、1ml吐温80、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、0.2g硫酸镁、2g柠檬酸二铵；(2)制备组合菌将活化的四种菌种以重量份数：嗜酸乳杆菌25g、干酪乳杆菌20g、鼠李糖乳杆菌25g、副干酪乳杆菌20g、植物乳杆菌20g、长双歧杆菌30g、乳双歧杆菌30g、短双歧杆菌25g、嗜热链球菌25g、酪酸梭菌30g混合后，再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中，在35℃下，培养12h后，以4500r/min，在10℃下，离心20min，取沉淀物，在10℃下保温10h后，均质，得到组合菌；(3)制备包被组合菌将以下重量的：低聚异麦芽糖50g、酪蛋白35g、乳铁蛋白35g、硝酸纤维素10g加水1000ml充分混合成包被液，将组合菌加入包被液混和均匀；(4)制备乳酸菌组合物将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化，过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合物。在乳酸菌组合物中乳酸菌组合物中嗜酸乳杆菌的含量为107～108cuf/g、干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、副干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、植物乳杆菌的含量为106～107cuf/g、长双歧杆菌的含量为107～108cuf/g、乳双歧杆菌107～108cuf/g、短双歧杆菌107～108cuf/g、嗜热链球菌107～108cuf/g、酪酸梭菌的含量为107～108cuf/g。实施例3筛选出耐0.3％猪胆盐、耐ph为2.5的酸性环境的嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、长双歧杆菌、乳双歧杆菌、短双歧杆菌和嗜热链球菌，将筛选出的九种菌和酪酸梭菌分别以1ml/100ml的接种量接种至mrs培养基中，在45℃下，培养12h，得到活化的乳杆菌菌种；其中，mrs培养基的配方为：在1000ml蒸馏水中加入10g蛋白胨、8g牛肉浸粉、20g葡萄糖、4g酵母浸膏、0.05g四水硫酸锰、1ml吐温80、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、0.2g硫酸镁、2g柠檬酸二铵；(2)制备组合菌将活化的四种菌种以重量份数：嗜酸乳杆菌23g、干酪乳杆菌15g、鼠李糖乳杆菌23g、副干酪乳杆菌15g、植物乳杆菌15g、长双歧杆菌25g、乳双歧杆菌25g、短双歧杆菌22g、嗜热链球菌20g、酪酸梭菌25g混合后，再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中，在42℃下，培养11h后，以7000r/min，在5℃下，离心10min，取沉淀物，在4℃下保温10h后，均质，得到组合菌；(3)制备包被组合菌将重量份数的：低聚异麦芽糖35g、酪蛋白20g、乳铁蛋白20g、硝酸纤维素6g加水1000ml充分混合成包被液，将组合菌加入包被液混和均匀；(4)制备乳酸菌组合物冻干粉将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化，过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合物冻干粉。在乳酸菌组合物冻干粉中乳酸菌组合物中嗜酸乳杆菌的含量为107～108cuf/g、干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、副干酪乳杆菌的含量为106～107cuf/g、植物乳杆菌的含量为106～107cuf/g、长双歧杆菌的含量为107～108cuf/g、乳双歧杆菌107～108cuf/g、短双歧杆菌107～108cuf/g、嗜热链球菌107～108cuf/g、酪酸梭菌的含量为107～108cuf/g。下面通过临床试验用于进一步说明本发明。为表明本发明乳酸菌组合物对便秘的防治效果，经110例临床观察，从xxx医院选取已经确诊的成年便秘患者为观察对象，共150例，其中男性80例，女70例，年龄25～65岁，病程2个月至10年。患者的主要症状为轻者排便时间延长，二天以上一次，粪便干燥坚硬；重者大便艰难，干燥如栗，伴少腹胀急，神倦乏力，食欲降低。治疗组选本发明乳酸菌组合物冻干粉(按照实施例1方法制备)，二个疗程(7天一疗程)，1.5g/袋，一日二次，每次2袋，开水冲服。诊断标准(1)治愈：2天以内排便1次，便质转润，解时通畅，短期无复发。(2)有效：3天以内排便，便质转润，排便欠畅。(3)无效：症状无改善。治疗结果治疗人数治愈有效无效治愈率15014119098％结论本发明乳酸菌组合物冻干粉具有显著的治疗便秘的作用，其中治疗便秘的有效率为100％，治愈率为98％。典型病例病例1：李某某，男，50岁。症状：习惯性便秘多年，大便约7-8天一次，排便困难，虽有便意，临厕仍很费力，干结如羊粪，因长时间蹲厕努力，每次大便后都有痔疮脱出，便血，疼痛难忍(便后复位)，腹部胀满，纳差食减，曾服多种泻药排便，结果适得其反，泻过更干，并且面部经常起痘，痛苦不堪。就诊时大便四天未解，观其舌淡红苔稍黄厚，脉缓。饮用本发明乳酸菌组合物冻干粉(按照实施例1方法制备，一日二次，每次二包)，服后两天大便即通畅，后连续服用二周，大便每天一次，顺畅，饮食如常，面部起痘消失，又继续巩固服用一月，嘱其多吃蔬菜水果，多运动。半年后随访大便正常。病例2：蔡某，男，35岁。症状：便秘多年，有烟酒嗜好，嗜食肥甘。由于工作时间无常，饮食饥饱不均，经常排便时间无规律，亦无便意，致每次大便排出艰难，有时3-5天一次，有时5-7天一解，大便质硬，量多，臭秽，平时面红气粗，口臭口干，虽爱饮水小便仍黄少，腹胀腹痛，心烦易怒。观其舌红苔黄干脉滑数。服用本发明乳酸菌组合物冻干粉(按照实施例1方法制备，一日二次，每次二包)服后第一天即便意加强，临厕，排除仍困难，继服三天后，大便即排出顺畅，心情渐佳，腹胀腹痛消失。嘱其尽量坚持每天排便一次，多吃蔬菜水果，少食肥甘油腻食品，保持心情舒畅。上药继服二周，以上诸症消失，一年后随访排便正常。以上是对本发明治疗便秘的乳酸菌组合物及其制备方法进行了阐述，用于帮助理解本发明，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，任何未背离本发明原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12