一种预稀释真空采血管及测量血小板数目的方法与流程

本发明属于医疗器械
技术领域：
，具体涉及一种预稀释真空采血管及测量edta依赖性假性血小板减少症患者血小板数目的方法。
背景技术：
：edta依赖性假性血小板减少症(edta-dependentpseudo-thrombocytopenia，edta-ptcp)的发病率在0.09％～0.21％之间，edta依赖性假性血小板减少症，是由于使用edta来抗凝静脉全血后，用血液细胞分析仪检测患者血小板数目，出现随着时间的延长，血小板数目明显下降的现象，而患者本身无血小板数目明显减少，所伴随的临床症状和体征，使用别的方法复检血小板数目，血小板数目正常的现象，故称为假性血小板减少症。edta依赖性假性血小板减少症病例，占所有假性血小板减少病例的90％以上，由于edta依赖性假性血小板减少症发生概率小，无特定人群，并且采用全自动血液细胞分析仪连续重复检测血样，血小板数目非常接近；现有全自动血液细胞分析仪检查血常规，如果有血小板聚集，虽然会在全自动血液细胞分析仪的diff通道的散点图中出现异常散点，全自动血液细胞仪会有报警提示，但是报警提示的准确度较差；加之检验科工作人员,又不熟悉edta依赖性假性血小板减少症患者真实的临床情况，导致假性减少的血小板数目对检验科医生和临床医生都有很大的欺骗性。临床上，血小板数目的危急值和正常参考值之间范围跨度过大，从30×109到125×109/l，血小板减低容易导致患者出现自发性颅内出血、手术伤口渗血等现象，临床上edta依赖性假性血小板减少症患者，90％以上是中老年住院患者，多合并心脑血管及呼吸道、肿瘤、自身免疫等疾病，所以较低的血小板数目，蕴含着更大的医疗风险，极易驱使临床医生对edta依赖性假性血小板减少症患者，做出输注血小板、暂停手术、进行骨髓穿刺检查等诊疗行为，严重影响患者的身体健康，浪费了宝贵的血液资源，加剧医患关系的紧张，诱发医疗纠纷和医疗事故的发生。检验科在日常工作中迫切需要，一种操作简单结果准确可靠的复检edta依赖性假性血小板减少症患者血小板计数的方法。引发edta依赖性假性血小板减少症患者，血小板聚集的自身抗原(ag)，隐藏在血小板膜糖蛋白gpiib结构中，在体外室温情况下，抗凝剂(钙离子螯合剂)可以直接诱发血小板膜糖蛋白gpiib结构发生改变，暴露出隐藏在糖蛋白gpiib结构中的自身抗原(ag)，暴露出来的血小板自身抗原(ag)，被患者体内存在的抗血小板自身抗体(ab)识别并结合后，诱导血小板膜上的gpiib/iiia受体结构发生改变，活化并暴露出纤维蛋白原受体，血液中存在的纤维蛋白原直接桥连血小板，导致血小板在体外发生聚集，随着时间的延长，血小板聚集体越来越大，所以血小板数目明显下降。edta依赖性假性血小板减少症，是抗凝剂(钙离子螯合剂)诱发的、血小板自身抗原抗体启动的、血液中纤维蛋白原及血小板膜上纤维蛋白原受体直接参与的，体外室温长时间放置条件下出现的一种异常现象，所以edta依赖性假性血小板减少症患者，95％以上出现在住院患者中。查阅相关文献，经过验证能纠正edta依赖性假性血小板减少症患者，体外由抗凝剂(钙离子螯合剂)诱发的血小板聚集，保证血小板数目检测准确可靠的方法，主要有以下三种：第一、使用含200μl3.2％的枸橼酸钠抗凝剂的蓝头盖真空采血管，或者添加有200μl的硫酸阿米卡星注射液的含3.8mgedtak2抗凝剂的紫头盖真空采血管，采集静脉血，使用全自动血液细胞分析仪全血模式，检测血小板数目的方法。具体的操作流程是，使用含200μl的3.2％的枸橼酸钠抗凝剂的蓝头盖真空采血管，或者添加有200μl的硫酸阿米卡星注射液的含3.8mgedtak2抗凝剂的紫头盖真空采血管，重新采集静脉血，使用全自动血液细胞分析仪全血模式进行血常规检测，取得血小板数目的方法。使用含200μl的3.2％含枸橼酸钠抗凝的蓝头盖真空采血管，采血复检血小板数目的方法，有操作简单，血小板计数重复性好，采血过程封闭，工作人员不接触血液的优点，在检验科的日常工作中使用的最多。但是edta依赖性假性血小板减少症患者的血液，在含200μl3.2％枸橼酸钠抗凝剂的蓝头盖真空采血管中，血小板普遍存在轻度聚集的现象，在片尾部可见大的血小板聚集块，严重影响血小板数目检测结果的准确性。在添加200μl硫酸阿米卡星注射液的含3.8mgedtak2的紫头盖真空采血管中，部分edta依赖性假性血小板减少症患者的血小板，仍然存在聚集，聚集后血小板的体积和光学参数与白细胞接近，容易干扰白细胞计数及分析，导致血常规报告中的血小板和白细胞数目及分析准确性下降，延误医生对患者的治疗和诊断。紫头盖真空采血管内添加的硫酸阿米卡星注射液为液体制剂，性质不稳定，使用时需要临时加入，加入后需要用注射器给采血管抽真空，操作较繁琐，临床上使用的相对较少。同时因为3.2％枸橼酸钠抗凝剂和阿米卡星注射液均是液体制剂，均为200μl，装入采血管内部的血液被枸橼酸钠抗凝剂和阿米卡星注射液稀释，使用全血模式检测后，检测结果必须手工乘上采血量体积校正因子n进行校正，所述采血量体积校正因子n＝v2/v3，其中v2为向所述真空采血管中通入静脉血液后采血管内溶液的总体积，v3为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的实际体积，v3＝v2-0.2，所述体积单位均为ml，采血量体积校正因子n的单位为1。因为普通真空采血管没有明显准确的刻度，导致真空采血管通入血液后的总体积无法准确测量判读，尤其是真空采血管通入血液后的总体积不到或者超过真空采血管2ml的标签刻度线时，就无法计算采血量体积校正因子，导致血小板数目无法得到准确校正，导致使用含200μl3.2％的枸橼酸钠抗凝剂的蓝头盖真空采血管，或者添加有200μl的硫酸阿米卡星注射液的含3.8mgedtak2抗凝剂的紫头盖真空采血管，采集静脉血，使用全自动血液细胞分析仪全血模式，检测edta依赖性假性血小板减少症患者血小板数目的方法，有操作简单的优点，血小板数目检测重复性好，但是准确性较差的缺陷。第二、采集末梢血，使用全自动血液细胞分析仪预稀释的模式检测血常规，获取血小板数目的方法。具体的操作流程为，取一个干净的离心管，加入180μl血细胞分析专用的稀释液，常规消毒edta依赖性假性血小板减少症患者无名指后，用微量采血吸管采集20μl的末梢全血，迅速的注入盛有180μl血细胞稀释液的离心管中，盖好盖子后混匀，静止3分钟后，30分钟内，使用全自动血液细胞分析仪预稀释的模式检测血常规，获取血小板数目的检测结果。采集末梢血，使用预稀释的模式检测血小板数目，有纠正血小板假性聚集，较使用含200μl3.2％枸橼酸钠抗凝剂的蓝头盖真空采血管，和添加有200μl硫酸阿米卡星注射液的含有3.8mgedtak2抗凝剂的紫头盖真空采血管更为彻底的优点，但是随着时间的延长，少部分患者仍然存在血小板聚集的情况，分析原因是专用的血细胞稀释液中含有edtak2抗凝剂，edtak2抗凝剂仍然会诱发血小板膜上的gpiib糖蛋白构象发生改变，暴露出隐藏在gpiib糖蛋白中的自身抗原(ag)，这些自身抗原(ag)，被患者体内存在的抗血小板自身抗体(ab)识别并结合后，诱导血小板膜上的gpiib/iiia受体结构发生改变，活化暴露出纤维蛋白原受体，并同血液中存在的纤维蛋白原直接相连，导致血小板在体外发生聚集，随着时间的延长，血小板聚集体越来越大。由于同一厂家、同一型号、同一批产品、同一桶微量采血吸管，他们之间都存在一定的差异，导致使用微量采血吸管，采集末梢全血的采血量准确性差，重复性低。末梢全血容易受组织液、皮肤表面残留物质的稀释和干扰，采集的血液不能准确全面的代表患者体内血液的真实状态。规范的末梢血采集，对操作人员技术操作有严格的要求，离心管盛装稀释液密封性较差，提前配制稀释液中的水分容易挥发，灰尘容易进入离心管内，干扰血小板数目的检测，检验科日常使用离心管盛装稀释液是临用前加注的，导致使用离心管盛装稀释液，采集末梢血的方式不能在住院部的护士中推广使用。采集末梢血，使用全自动血液细胞分析仪预稀释模式检测血常规，获取edta依赖性假性血小板减少症患者血小板数目的方法，由于受到末梢血没有静脉血有身体真实状态代表性、使用微量采血吸管采集血量的准确性差、部分患者血小板仍然会在专用稀释液中聚集的多种缺陷，导致采集末梢血，使用全自动血液细胞分析仪预稀释的模式检测血常规，获取血小板数目的方法在临床上使用的很少。第三、采集末梢血，使用显微镜目视计数血小板数目的方法。具体的操作流程为，常规消毒患者无名指指尖，用微量采血吸管采集患者20μl末梢全血，注入盛有380μl1％的草酸铵稀释液的试管中，混匀待完全溶血后，再混匀1分钟，用玻璃棒取上述混匀后的血小板悬液1滴，充入血细胞计数板的计数池内，静止10～15分钟，使血小板下沉，用显微镜的高倍镜头，计数血细胞计数板计数池，中央大方格四角和中央共五个中方格内血小板数，再乘以109/l，既为患者每升血液中的血小板数目。《全国临床检验操作手册》推荐使用位相显微镜目视计数血小板，结果会更准确，效果会更佳。使用位相显微镜目视计数血小板数目的方法，是血小板计数的传统参考方法，但是此方法对操作人员及设备均有很高的要求，一般实验室无位相显微镜，使用普通光学显微镜目视计数血小板数目，存在容易受血细胞计数板计数池中杂质和灰尘干扰，保存在草酸铵稀释液中的血小板，随着放置时间的延长，会发生自发性溶解，导致计数结果下降，必须在1小时内完成计数，时间越短越好，显微镜目视计数法计数血小板数目，受到技术误差和固有误差的影响，导致显微镜目视计数血小板数目的方法重现性差，同一个工作人员、同一台显微镜，同一份样本，前后多次计数的变异系数达10％～25％，现在已经不是血小板计数的参考方法。同时由于同一厂家、同一型号、同一批产品、同一桶微量采血吸管，他们之间都存在一定的差异，导致使用微量采血吸管采集末梢全血的准确性低，所以采集末梢血，使用显微镜目视计数血小板数目的方法存在种种缺陷，不能满足临床医生和患者对检验报告准确及时的要求，同时检验科的工作人员习惯使用自动化的设备，对目视计数法计数血小板数目纯手工操作的方法有抵触，同时显微镜目视计数法只能计数血小板数目，其它的血细胞无法计数，血小板其他的参数也不能测量，不能出具完整的血常规报告，患者存在再次采血的可能，导致此方法在日常工作中使用的很少。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供了一种预稀释真空采血管。该预稀释真空采血管结构简单，具有精准的刻度线，内装有9ml氯化钠注射液或复方电解质注射液，用来稀释静脉全血，防止抗凝剂(钙离子螯合剂)诱发暴露血小板膜上gpiib糖蛋白中的自身抗原(ag)；通过的大比例稀释静脉血液，来降低预稀释真空采血管内血溶液中凝血因子的浓度，增大凝血因子之间的距离，抑制凝血因子的相互链式激活，阻止血液的凝固；再通过采血管上的精密刻度，保证采集静脉血液血量的准确可靠；通过使用静脉血，杜绝采集末梢血时，组织液及皮肤表面残留物质对血液的稀释和干扰、对血小板、对凝血因子的活化；通过真空采血的方式，简化操作，防止开放式采集血液对操作者和环境的污染。为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种预稀释真空采血管，包括管体和用于密封所述管体的管塞，所述管塞的外侧设置有管帽，密封后的管体为真空状态，其特征在于，所述管体的外壁上设置有从用于标注管体容积的刻度线，所述刻度线表示的刻度值从9ml到10.5ml，最小分度值为0.1ml，所述管体内装有9ml的氯化钠注射液或复方电解质注射液，所述氯化钠注射液的浓度为9g/l，所述复方电解质注射液中各原料的浓度为：氯化钠5.26g/l、葡萄糖酸钠5.02g/l、醋酸钠3.68g/l、氯化钾0.37g/l、氯化镁0.30g/l。上述的一种预稀释真空采血管，其特征在于，所述管体的外径为0.8cm～2cm，长度为5cm～35cm。上述的一种预稀释真空采血管，其特征在于，所述管体的外径为1cm～1.5cm，长度为10cm～20cm。上述的一种预稀释真空采血管，其特征在于，所述管体为玻璃管或pet塑料管。另外，本发明还提供了一种利用上述预稀释真空采血管，配合全自动血液细胞分析仪，测量edta依赖性假性血小板减少症患者血小板数目的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：步骤一、给edta依赖性假性血小板减少症患者的胳膊上绑上止血带，寻找静脉血管，常规消毒后，将采血针的一端针头刺入患者静脉血管中，待回血后，将采血针的另一端针头刺穿预稀释真空采血管的管塞，向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液，然后迅速拔掉插在管塞上的采血针针头，再迅速颠倒5～8次混匀，得到稀释后的血液，步骤二、利用全自动血液细胞分析仪，对步骤一中得到的稀释后的血液进行检测，得到血小板数目的检测值，所述血小板数目的检测值乘以采血量体积校正因子u，得到血小板数目的真实值；所述全自动血液细胞分析仪采用预稀释模式检测，所述采血量体积校正因子u＝v1/v，其中v1为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的标准体积，v1的取值为1ml；v为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的实际体积，并且v的取值满足：0.5ml≤v≤1.5ml。上述的方法，其特征在于，步骤一中向所述预稀释真空采血管中通入1ml的静脉血液。本发明与现有技术相比具有以下优点：1、本发明的预稀释真空采血管内，直接加有用来稀释血液的氯化钠注射液或复方电解质注射液，相比现有的专用真空采血管，不需要二次添加，直接加入到真空采血管内，避免二次操作；同时采血管上具有精确的刻度值，方便检测人员读取血液的加入量，计算血液的稀释比例，测取精确的血小板检测值。预先注入的9ml氯化钠注射液或复方电解质注射液，用于稀释静脉血液，无需添加任何抗凝剂(钙离子螯合剂)或者药物等拮抗剂，即可达到阻止edta依赖性假性血小板减少症患者，体外由抗凝剂(钙离子螯合剂)诱发的血小板聚集，纠正由抗凝剂诱发的血小板聚集，所产生的血小板数目的检测误差，保证血常规检测时血小板数目的准确可靠，同时也保证白细胞数目及分类结果的准确可靠。2、本发明的预稀释真空采血管主要用于阻止edta依赖性假性血小板减少症患者的血小板在采血时，体外由抗凝剂(钙离子螯合剂)诱发的血小板聚集现象，保证使用全自动血液血细胞分析仪预稀释模式检测血常规时，获取准确的血小板数目，并且整个采血过程操作简单，易于推广。3、本发明通过精确控制氯化钠注射液或复方电解质注射液的体积，使其用作稀释液稀释静脉血液，一次性地向预稀释真空采血管中通入0.5ml～1.5ml的血液，混匀后采用全自动血液细胞分析仪的预稀释模式，对稀释后的血液进行检测，检测结果需要乘以采血量体积校正因子u，才能得到血小板数目的真实值，保证了测试结果的准确性，并实现一次粗略采血，即可得到准确的血小板数目，对于采血人员的专业技术要求降低，更能提高采血精度，但是采血人员尽量每次的采血的体积均为1ml，该采血量对应的采血量体积校正因子为1，全自动血液细胞分析仪的血小板数目的检测值就等于血小板数目的真实值。4、本发明采用全自动血液细胞分析仪的预稀释模式检测，血小板数目检测结果的重复性好，速度快，准确度高，易于进行质量控制，符合医学检验专业质量规范要求，满足临床医生患者对检验报告准确及时的服务要求。5、本发明利用预稀释真空采血管采集并稀释静脉血，使用全自动血液细胞分析仪测定血小板数目，同时分析仪还可检测所有的血常规项目，获取全面的血常规信息，使用氯化钠注射液或复方电解质注射液作为稀释液，检测成本低廉，对环境无毒无害，检测剩余的血液通过含氯消毒液浸泡的方式就可无害化处理。6、本发明通过真空采血管静脉采血的方式，实现血液封闭采集，不污染环境和操作人员，符合感染控制要求；对人员设备没有特殊要求，工作人员易于接受，纠正edta依赖性假性血小板减少症患者，体外由抗凝剂(钙离子螯合剂)诱发的血小板聚集完全彻底，保证血常规检测时血小板数目的准确可靠，从而该测量方法在临床上得以真正使用；同时本发明的预稀释真空采血管可以加工成商品，可以大范围的推广使用，尤其是可以在住院部的护士中使用，大大提高了检验科的工作效率，缩短血常规检验报告的出具时间。下面通过附图和实施例对本发明的技术方案作进一步的详细说明。附图说明图1是本发明的预稀释真空采血管的结构示意图。图2是患者1采用对比例1的采血方法制备的血涂片在显微镜下的图像。图3是患者1采用对比例2的采血方法制备的血涂片在显微镜下的图像。图4是患者1采用对比例3的采血方法制备的血涂片在显微镜下的图像。图5是患者1采用实施例1的采血方法制备的血涂片在显微镜下的图像。附图标记说明：1—管体；2—管帽；3—管塞；4—刻度线。具体实施方式实施例1如图1所示，所述预稀释真空采血管包括管体1和用于密封所述管体1的管塞3，所述管塞3的外侧设置有管帽2，密封后的管体1为真空状态，所述管体1的外壁上设置有从用于标注管体1容积的刻度线4，所述刻度线4表示的刻度值从9ml到10.5ml，最小分度值为0.1ml，所述管体1内装有9ml的氯化钠注射液或复方电解质注射液，所述氯化钠注射液的浓度为9g/l。本实施例中，采用氯化钠注射液作为稀释液，检测成本低廉，现有的技术中，也并未有相关记载说明氯化钠注射液，可用于真空采血管中的血液稀释，稀释后的血液血细胞计数在4小时内结果稳定，检测后的真空采血管可以清洗后反复使用，节约资源，保护环境。本实施例中，所述管体1的外径为1.3cm，长度为16cm。本实施例中，所述管体1为玻璃管，玻璃管成本低，便于产业化。实施例2本实施例中，与实施例1的不同之处是：所述管体1的外径为2cm，长度为5cm。本实施例中，其余部分的结构和连接关系均与实施例1相同。实施例3本实施例中，与实施例1的不同之处是：所述管体1的外径为1.25cm，长度为15cm。本实施例中，其余部分的结构和连接关系均与实施例1相同。实施例4本实施例中，与实施例1的不同之处是：所述管体1装有9ml的复方电解质注射液，所述复方电解质注射液中各原料的浓度为：氯化钠5.26g/l、葡萄糖酸钠5.02g/l、醋酸钠3.68g/l、氯化钾0.37g/l、氯化镁0.30g/l。本实施例中，所述管体1的外径为0.8cm，长度为35cm，管体1的长度高，刻度线之间距离比较稀疏，方便查看刻度值。本实施例中，所述复方电解质注射液也可作为稀释液，得到的检测结果精确度相比现有的检测方法得到的结果更精确。本实施例中，所述管体1为塑料管，采用塑料管的底部可制成平面结构，塑料管克服玻璃管中盛液时液体表面具有的凹液面，当血液通入预稀释真空采血管之后，稀释的血样为红色，不能分辨处凹液面的最低处，导致读取数据出现恒定负偏差的弊端。本实施例中，其余部分的结构和连接关系均与实施例1相同。实施例5本实施例中，与实施例4的不同之处是：所述管体1的外径为1cm，长度为20cm。本实施例中，其余部分的结构和连接关系均与实施例1相同。实施例6本实施例中，与实施例5的不同之处是：所述管体1的外径为1.5cm，长度为10cm。本实施例中，其余部分的结构和连接关系均与实施例1相同。实施例7利用实施例1的预稀释真空采血管配合全自动血液细胞分析仪测量血小板数目的方法，该方法包括以下步骤：步骤一、给edta依赖性假性血小板减少症患者的胳膊上绑上止血带，寻找静脉血管，常规消毒后，将采血针的一端针头刺入患者静脉血管中，待回血后，将采血针的另一端针头刺穿预稀释真空采血管的管塞3，向所述预稀释真空采血管中通入1ml的静脉血液，然后迅速拔掉插在管塞3上的采血针针头，再迅速颠倒混匀5次，得到稀释后的血液；步骤二、利用全自动血液细胞分析仪，选择预稀释模式，对步骤一中得到的稀释后的血液进行检测，得到血小板数目的检测值，所述血小板数目的检测值，乘以采血量体积校正因子u，最后得到血小板数目的真实值；所述全自动血液细胞分析仪采用预稀释模式，所述采血量体积校正因子u＝v1/v，其中v1为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的标准体积，v1为1ml，v为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的实际体积，并且v为1ml，所述采血量体积校正因子u的单位为1，对照表1，u的取值为1，血小板数目的检测值既为血小板的真实值。表1采血量体积校正因子u与v关系对应表v0.50.60.70.80.911.11.21.31.41.5u21.671.431.251.1110.910.830.770.710.67本实施例中，在向所述预稀释真空采血管中通过静脉血液时，检测人员应严格遵守读数常规，在读数时，需将所述预稀释真空采血管竖直放置，眼睛平视刻度线，待添加的血液使采血管内的溶液的上表面与刻度线相切时，迅速拔掉插在采血管橡皮塞上的采血针头，停止采血并颠倒混匀，保证采血量的准确性，进而保证血小板数目检测结果的精确性。同时需要注意玻璃管作为预稀释真空采血管时，当血液通入预稀释真空采血管之后，稀释的血样为红色，不能分辨出凹液面的最低处，假如以10ml刻度线作为静脉血液采集量的停止线，会导致采血量出现恒定负偏差，不足1ml。采血后的液面只能观察到凹液面的最高处，经过试验验证为保证1ml的精准采血量，预稀释真空采血管采血后的液面必须与10.2ml刻度线相切。本实施例的测量血小板的方法，也可用于测量血常规中的其他项目，并且测量准确。实施例8利用实施例1的预稀释真空采血管配合全自动血液细胞分析仪测量血小板数目的方法，该方法包括以下步骤：步骤一、给假性血小板减少症患者的胳膊上绑上止血带，寻找静脉血管，常规消毒后，将采血针的一端针头刺入患者静脉血管中，待回血后，将采血针的另一端针头刺穿预稀释真空采血管的管塞3，向所述预稀释真空采血管中通入1.2ml静脉血液，然后迅速拔掉插在管塞3上的采血针针头，再迅速颠倒混匀5次，得到稀释后的血液，步骤二、利用全自动血液细胞分析仪，选择预稀释模式，对步骤一中得到的稀释后的血液进行检测，得到血小板数目的检测值，所述血小板数目的检测值乘以采血量体积校正因子u，最后得到血小板数目的真实值；所述血液分析仪采用预稀释模式检测，所述采血量体积校正因子u＝v1/v，其中v1为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的标准体积，v1为1ml，v为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的实际体积，并且v为1.2ml，所述采血量体积校正因子u的单位为1，对照表1，u的取值为0.83。所述预稀释真空采血管需要竖直放置，采血时，眼睛平视刻度线，待添加的血液使采血管内的溶液的上表面与刻度线相切时，迅速拔掉插在采血管橡皮塞上的采血针头，停止采血，保证采血量的准确性，进而保证血小板数目检测结果的精确性。本实施例的测量血小板的方法，也可用于测量血常规中的其他项目，并且测量准确。实施例9利用实施例1的预稀释真空采血管配合全自动血液细胞分析仪测量血小板数目的方法，该方法包括以下步骤：步骤一、给edta依赖性假性血小板减少症患者的胳膊上绑上止血带，寻找静脉血管，常规消毒后，将采血针的一端针头刺入患者静脉血管中，待回血后，将采血针的另一端针头刺穿预稀释真空采血管的管塞3，向所述预稀释真空采血管中通入0.8ml静脉血液，然后迅速拔掉插在管塞3上的采血针针头，再迅速颠倒混匀5次，得到稀释后的血液，步骤二、利用全自动血液细胞分析仪，选择预稀释模式，对步骤一中得到的稀释后的血液进行血常规检测，得到血小板数目的检测值，所述血小板数目的检测值乘以采血量体积校正因子u，最后得到血小板数目的真实值；所述全自动血液细胞分析仪采用预稀释模式检测，所述采血量体积校正因子u＝v1/v，其中v1为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的标准体积，v1为1ml，v为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的实际体积，并且v为0.8ml，所述采血量体积校正因子u的单位为1，对照表1，u的取值为1.25。所述预稀释真空采血管需要竖直放置，采血时，眼睛平视刻度线，待添加的血液使采血管内的溶液的上表面与刻度线相切时，迅速拔掉插在采血管橡皮塞上的采血针头，停止采血，保证采血量的准确性，进而保证血小板数目检测结果的精确性。本实施例的测量血小板的方法，也可用于测量血常规中的其他项目，并且测量准确。对三位患者在同一时刻分别采用实施例7、实施例8和实施例9的方法测试血液中的血小板数目，测试结果如表2所示。表2三位患者分别采用实施例7、实施例8和实施例9的方法测试血液中的血小板数目的测试结果由表2可知，同一患者采用实施例7、实施例8和实施例9中的方法检测到的血小板数目基本相同，说明不同的采血量全自动血液细胞分析仪血小板数目的检测结果，通过采血量体积校正因子u的校正就能得到的准确的结果，结果有很好的再现性。实施例10利用实施例1的预稀释真空采血管配合全自动血液细胞分析仪测量血小板数目的方法，该方法包括以下步骤：步骤一、给edta假性血小板减少症患者的胳膊上绑上止血带，寻找静脉血管，常规消毒后，将采血针的一端针头刺入患者静脉血管中，待回血后，将采血针的另一端针头刺穿预稀释真空采血管的管塞3，向所述预稀释真空采血管中通入0.5ml静脉血液，然后迅速拔掉插在管塞3上的采血针针头，再迅速颠倒混匀8次，得到稀释后的血液；步骤二、利用全自动血液细胞分析仪，选择预稀释模式，对步骤一中得到的稀释后的血液进行检测，得到血小板数目的检测值，所述血小板数目的检测值乘以采血量体积校正因子u，最后得到血小板数目的真实值；所述血液分析仪采用预稀释模式，所述采血量体积校正因子u＝v1/v，其中v1为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的标准体积，v1为1ml，v为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的体积，并且v为1ml，所述采血量体积校正因子u的单位为1，对照表1，u的取值为1，全自动血液细胞分析仪的血小板数目检测值既为血小板数目的真实值。所述预稀释真空采血管需要竖直放置，采血时，眼睛平视刻度线，待添加的血液使采血管内的溶液的上表面与刻度线相切时，迅速拔掉插在采血管橡皮塞上的采血针头，停止采血，保证采血量的准确性，进而保证血小板数目检测结果的精确性。本实施例的测量血小板的方法，也可用于测量血常规中的其他项目，并且测量准确。实施例11利用实施例1的预稀释真空采血管配合全自动血液细胞分析仪测量血小板数目的方法，该方法包括以下步骤：步骤一、给edta假性血小板减少症患者的胳膊上绑上止血带，寻找静脉血管，常规消毒后，将采血针的一端针头刺入患者静脉血管中，待回血后，将采血针的另一端针头刺穿预稀释真空采血管的管塞3，向所述预稀释真空采血管中通入1.5ml静脉血液，然后迅速拔掉插在管塞3上的采血针针头，再迅速颠倒混匀8次，得到稀释后的血液；步骤二、利用全自动血液细胞分析仪，选择预稀释模式，对步骤一中得到的稀释后的血液进行检测，得到血小板数目的检测值，所述血小板数目的检测值乘以采血量体积校正因子u，最后得到血小板数目的真实值；所述血液分析仪采用预稀释模式，所述采血量体积校正因子u＝v1/v，其中v1为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的标准体积，v1为1ml，v为向所述预稀释真空采血管中通入静脉血液的体积，并且v为1ml，所述采血量体积校正因子u的单位为1，对照表1，u的取值为1，全自动血液细胞分析仪的血小板数目检测值既为血小板数目的真实值。所述预稀释真空采血管需要竖直放置，采血时，眼睛平视刻度线，待添加的血液使采血管内的溶液的上表面与刻度线相切时，迅速拔掉插在采血管橡皮塞上的采血针头，停止采血，保证采血量的准确性，进而保证血小板数目检测结果的精确性。本实施例的测量血小板的方法，也可用于测量血常规中的其他项目，并且测量准确。对比例1给edta假性血小板减少症患者的胳膊上绑止血带，寻找静脉血管，常规消毒皮肤后，将采血针的一端针头刺入患者血管，见回血后，将采血针的另一端针头刺穿edtak2抗凝管，然后将血液采集到含3.8mgedtak2抗凝剂的真空采血管的2ml的标志线处，然后迅速的拔掉插在管塞上的采血针头，迅速的颠倒混匀5次真空采血管内的血液，然后采用血液分析仪上的全血模式对血液进行检测，测试出患者血液中血小板数目，得到21例edta依赖性假性血小板减少症患者血小板纠正方法1的血小板检测值。对比例2给edta假性血小板减少症患者的胳膊上绑止血带，寻找静脉血管，消毒皮肤后，将采血针的一端针头刺入患者血管，见回血后，将采血针的另一端针头刺穿装有200μl3.2％的枸橼酸钠抗凝剂的真空采血管，将血液采集到抗凝管的2ml的标志线处，然后迅速的拔掉插在采血管橡皮塞上的采血针头，迅速的颠倒混匀5次真空采血管内的血液，然后采用血液分析仪上的全血模式对血液进行检测，测试出患者血液中血小板数目检测值，血小板数目的检测值乘上采血量体积校正因子1.11，得到21例edta依赖性假性血小板减少症患者血小板纠正方法2的血小板真实值.对比例3给edta假性血小板减少症患者的胳膊上绑止血带，寻找静脉血管，常规消毒皮肤后，将采血针的一端针头刺入患者血管，见回血后，将采血针的另一端针头刺穿含3.8mgedtak2抗凝管，该edtak2抗凝管内预先添加有200μl的硫酸阿米卡星注射液，然后将血液采集到edtak2抗凝管的2ml的标志线处，然后迅速的拔掉插在管塞上的采血针头，迅速的颠倒混匀5次真空采血管内的血液，然后采用血液分析仪上的全血模式对血液进行检测，测试出患者血液中血小板数目检测值，检测值乘上采血量体积校正因子1.11，得到21例edta依赖性假性血小板减少症患者血小板纠正方法3的血小板真实值。将21位患者同时采用实施例7、对比例1、对比例2和对比例3的方法对患者的血液中的血常规进行测试，血小板数目的测试结果如表3所示。表321位患者采用实施例7、对比例1、对比例2和对比例3的的方法测得的血小板数目检测结果由表3结合图2、图3、图4和图5可知，edta依赖性假性血小板减少症现象，作为一种在室温下由抗凝剂(钙离子螯合剂)引发的，体外血小板聚集现象，不但是只有edta可以诱发、其他抗凝剂如枸橼酸钠也可以引起血小板聚集、也有报道指出草酸钠、枸橼酸右旋糖、肝素等抗凝剂(钙离子螯合剂)也可以引起血小板聚集成团，导致血小板数目假性减少。其中，edta螯合钙离子的能力最强，所以诱发的血小板聚集最为严重；枸橼酸钠抗凝剂螯合钙离子的能力较edta差，枸橼酸钠抗凝管较edta抗凝管纠正血小板假性聚集的效果理想，但是血小板仍然存在轻度的聚集，聚集的程度较edta抗凝血聚集的程度有明显的下降，但是在涂片的尾部可见的血小板呈大块聚集，影响血小板数目的准确性；添加200μl阿米卡星注射液的含有3.8mg的edtak2抗凝剂的紫头盖真空采血管，对假性血小板减少症的聚集纠正的效果也不理想，抑制血小板聚集的效果较差，患者仍然存在血小板聚集的情况，而且此次试验使用得硫酸阿米卡星是10mg/l的高浓度，也无法有效纠正edta在体外诱发的血小板聚集，使用添加硫酸阿米卡星的edta抗凝管纠正抗凝剂诱发的血小板聚集效果也不理想，添加硫酸阿米卡星的edta抗凝管，纠正体外由抗凝剂(钙离子螯合剂)诱发的血小板假性聚集是患者依赖性的，不是剂量依赖性。使用含200μl的3.2％的枸橼酸钠抗凝剂的真空采血管，或者添加有200μl的硫酸阿米卡星注射液的含3.8mgedtak2抗凝剂的真空采血管采集静脉血，纠正检测edta依赖性假性血小板减少症患者，血小板在体外由抗凝剂(钙离子螯合剂)诱发的血小板聚集，存在纠正血小板体外聚集不彻底、血小板数目检测不准确的缺陷，为了更好的达到纠正血小板体外聚集的效果，文献建议对此类患者的抗凝血标本进行37℃的保温，防止抗血小板自身抗体(ab)在室温下和糖蛋白gpiib中的自身抗原(ag)结合，但是在日常工作中从病房到检验科将血标本温度一直保持在37℃，操作起来很困难，有可能影响到使用含200μl的3.2％的枸橼酸钠抗凝剂的真空采血管，或者添加有200μl的硫酸阿米卡星注射液的含3.8mgedtak2抗凝剂的真空采血管纠正血小板假性聚集的效果。使用本发明的预稀释真空采血管辅助制备检测血样用来检测假性血小板减少症患者血小板，因为不使用抗凝剂，从源头上杜绝抗凝剂诱发血小板膜糖蛋白gpiib的中的自身抗原(ag)的暴露活化；同时采集静脉血，防止组织液中组织因子对血小板和凝血因子的激活，以及对血液的稀释；用1:10的大比例稀释的方法，加大凝血因子之间距离，阻断凝血因子之间的链式激活，起到抗凝的作用；同时稀释也降低血小板自身抗体(ab)的浓度，减弱与血小板膜糖蛋白gpiib的中的自身抗原(ag)的反应强度；最终彻底阻止血小板模上gpiib/iiia受体纤维蛋白原受体的活化表达，阻断血小板在体外由抗凝剂诱发的聚集现象。通过精密刻度保证采血量的精准可控，操作简单，安全便捷；全自动血液分析仪的预稀释模式保证血小板数目检测结果的重复可靠；本发明的的预稀释真空采血管的采血方法具有操作简单，检测血小板数目可靠，重复性好，成本低廉，经济性好，具备充分的商品化条件，对纠正edta依赖性假性血小板减少症患者，血小板在体外的聚集完全彻底消除，检测血常规时血小板数目准确可靠，对人员设备没有要求，便于大范围推广使用。以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制。凡是根据发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变化，均仍属于本发明技术方案的保护范围内。当前第1页12