本发明涉及药物生产
技术领域：
，具体涉及一种墨旱莲草有效成分的制备方法和应用。
背景技术：
：墨旱莲草属于一年生草本，高10～60cm，全株被白色粗毛，折断后流出的汁液数分钟后即呈蓝黑色，茎直立或倾状，呈绿色或红褐色，叶互生，椭圆状披针形或线状披针形，长3～10cm，宽0.5～2.5cm，全缘或有细齿，基部渐狭，无柄或有短柄。墨旱莲草具有滋补肝肾，凉血止血的功能，可用于治疗牙齿松动、须发早白、眩晕耳鸣、腰膝酸、阴虚血热、吐血和外伤出血，具有很高的药用价值。目前，对墨旱莲草有效成分的提取方法较为简单，大多经乙醇提取一次后，洗脱得到有效成分，提取率比较低，浪费了很多有效成分，且墨旱莲草经提取后剩下的茎叶剩余物大多都会直接扔掉，而造成浪累，鉴于此，有必要研究一种墨旱莲草有效成分的制备方法。技术实现要素：为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种可快速提取墨旱莲草中的有效成分，提高提取率，且提取的有效成分制备的防脱发剂具有很好的防脱发作用的墨旱莲草有效成分的制备方法。为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：墨旱莲草有效成分的制备方法，包括以下制备步骤：s1、清洗：选择植株高度为50~60cm的墨旱莲草，放入清水中洗清三遍，洗净后取出浸泡于加有营养液的纯净水中，浸泡2~3h，取出后捣碎，得到原料茎叶；s2、粗提：将质量分数为60~75%的乙醇和丙酮分别加入至提取锅中，再加入浸泡过的原料茎叶，加热回流3~4h，得到提取液ⅰ和原料茎叶剩余物ⅰ，冷却后，将提取液ⅰ保存至冷却罐中，待用；s3、第二次提取：将质量分数为80~85%乙醇和乙酸乙酯加入至提取锅中，再加入原料茎叶剩余物ⅰ，缓慢升温加热，回流3~4h，提取1~2次，得到提取液ⅱ和原料茎叶剩余物ⅱ，将提取液ⅰ和提取液ⅱ混合，减压浓缩得到浓缩液；s4、萃取：先用乙醚萃取浓缩液2~3次，萃取时间为15~25min，再用四氯化碳萃取浓缩液2~3次，萃取时间为10~15min，得到萃取液；s5、洗脱：将萃取液加于大孔吸附树脂色谱柱上，按质量分数35~50%乙醇、甲醇和水的顺序作为洗脱剂进行第一次洗脱，洗脱剂的流速为15~25ml/min，得到洗脱液ⅰ；然后按质量分数60~80%乙醇、乙腈和水的顺序作为洗脱剂对洗脱液ⅰ进行第二次洗脱，洗脱剂的流速为20~30ml/min，得到洗脱液ⅱ，洗脱液ⅱ经减压浓缩后即为墨旱莲草的有效成分。优选地，前述步骤s1中，营养液、纯净水和墨旱莲草的质量比为（5～10）：（35～45）：（10～15），其中，营养液由以下组分按质量份组成：硝酸钾25～30份、尿素15～20份、叶酸22～25份、硫酸镁12～18份、硫酸铜5～9份、磷酸二氢钾6～15份、柠檬酸铁1～3份和硼酸5～7份。再优选地，前述步骤s2中，乙醇、丙酮和原料茎叶的质量比为（45~50）：（21~34）：（12~16）。更优选地，前述步骤s3中，乙醇、乙酸乙酯和原料茎叶剩余物ⅰ的质量比为（20~30）：（15~25）：（10~12）。进一步优选地，前述步骤s4中，乙醚与浓缩液的体积比为（2～6）：(1～3)。具体地，前述步骤s5中，萃取液、质量分数35~50%乙醇、甲醇和水的体积比为（6~9）：（22～36）：(14～23)：(11～13)，洗脱液ⅰ、质量分数60~80%乙醇、乙腈和水的体积比为（3~6）：（20～35）：(16～20)：(8～10)。前述的墨旱莲草有效成分的应用，其用于制备防脱发剂。优选地，前述防脱发剂由以下组分按质量份组成：墨旱莲草有效成分12~16份、三聚磷酸铵15~18份、丙二醇22~26份、原料花10~15份、原料茎叶剩余物ⅱ8~10份、甘油12~17份、山梨醇5~10份、侧柏叶6~9份、何首乌4~7份、沉香醇3~8份、白兰香精2~4份和去离子水20~26份。再优选地，前述原料花由以下方法制得：将采摘好的墨旱莲草的花蕾晒干后，与金银花的花蕾混合捣碎，得到原料花，其中，墨旱莲草的花蕾和金银花的花蕾的质量比为（22~35）：（8~16）。本发明的有益之处在于：本发明的墨旱莲草有效成分的制备方法简单、生产成本低、可操作性强，可快速提取墨旱莲草中的有效成分，并提高了提取率，且提取的有效成分制备的防脱发剂具有很好的防脱发、生发和乌发作用；墨旱莲草在捣碎之前先浸泡在营养液中，可有效锁住其中的有效成分，避免有效成分在后续处理过程中的流失；在制备防脱发剂的过程中，使用了提取墨旱莲草有效成分过程中产生的原料茎叶剩余物ⅱ，充分利用了其中剩余的有效组分，避免原料的浪费，降低了生产成本，也减去了对原料茎叶剩余物ⅱ的处理过程。具体实施方式以下结合具体实施例对本发明作具体的介绍。实施例1墨旱莲草有效成分的制备方法，包括以下制备步骤：s1、清洗：选择植株高度为50cm的墨旱莲草，放入清水中洗清三遍，洗净后取出浸泡于加有营养液的纯净水中，浸泡2h，取出后捣碎，得到原料茎叶；其中，营养液、纯净水和墨旱莲草的质量比为5：35：10，营养液由以下组分按质量份组成：硝酸钾25份、尿素15份、叶酸22份、硫酸镁12份、硫酸铜5份、磷酸二氢钾6份、柠檬酸铁1份和硼酸5份。s2、粗提：将质量分数为60%的乙醇和丙酮分别加入至提取锅中，再加入浸泡过的原料茎叶，加热回流3h，得到提取液ⅰ和原料茎叶剩余物ⅰ，冷却后，将提取液ⅰ保存至冷却罐中，待用；其中，乙醇、丙酮和原料茎叶的质量比为45：21：12；s3、第二次提取：将质量分数为80%乙醇和乙酸乙酯加入至提取锅中，再加入原料茎叶剩余物ⅰ，缓慢升温加热，回流3h，提取1次，得到提取液ⅱ和原料茎叶剩余物ⅱ，将提取液ⅰ和提取液ⅱ混合，减压浓缩得到浓缩液；其中，乙醇、乙酸乙酯和原料茎叶剩余物ⅰ的质量比为20：15：10；s4、萃取：先用乙醚萃取浓缩液2次，萃取时间为15min，再用四氯化碳萃取浓缩液2次，萃取时间为10min，得到萃取液；其中，乙醚与浓缩液的体积比为2：1；s5、洗脱：将萃取液加于大孔吸附树脂色谱柱上，按质量分数35%乙醇、甲醇和水的顺序作为洗脱剂进行第一次洗脱，洗脱剂的流速为15ml/min，得到洗脱液ⅰ；然后按质量分数60%乙醇、乙腈和水的顺序作为洗脱剂对洗脱液ⅰ进行第二次洗脱，洗脱剂的流速为20ml/min，得到洗脱液ⅱ，洗脱液ⅱ经减压浓缩后即为墨旱莲草的有效成分；其中，萃取液、质量分数35%乙醇、甲醇和水的体积比为6：22：14：11，洗脱液ⅰ、质量分数60%乙醇、乙腈和水的体积比为3：20：16：8。墨旱莲草有效成分的应用，其用于制备防脱发剂。防脱发剂由以下组分按质量份组成：墨旱莲草有效成分12份、三聚磷酸铵15份、丙二醇22份、原料花10份、原料茎叶剩余物ⅱ8份、甘油12份、山梨醇5份、侧柏叶6份、何首乌4份、沉香醇3份、白兰香精2份和去离子水20份。其中，原料花由以下方法制得：将采摘好的墨旱莲草的花蕾晒干后，与金银花的花蕾混合捣碎，得到原料花，墨旱莲草的花蕾和金银花的花蕾的质量比为22：8；原料茎叶剩余物ⅱ由墨旱莲草有效成分的制备过程中的步骤s3中制得。实施例2本实施例的制备方法与实施例1相同，具体区别在于具体工艺条件的不同，包括以下制备步骤：s1、清洗：选择植株高度为60cm的墨旱莲草，放入清水中洗清三遍，洗净后取出浸泡于加有营养液的纯净水中，浸泡3h，取出后捣碎，得到原料茎叶；其中，营养液、纯净水和墨旱莲草的质量比为10：45：15，营养液由以下组分按质量份组成：硝酸钾30份、尿素20份、叶酸25份、硫酸镁18份、硫酸铜9份、磷酸二氢钾15份、柠檬酸铁3份和硼酸7份。s2、粗提：将质量分数为75%的乙醇和丙酮分别加入至提取锅中，再加入浸泡过的原料茎叶，加热回流4h，得到提取液ⅰ和原料茎叶剩余物ⅰ，冷却后，将提取液ⅰ保存至冷却罐中，待用；其中，乙醇、丙酮和原料茎叶的质量比为50：34：16；s3、第二次提取：将质量分数为85%乙醇和乙酸乙酯加入至提取锅中，再加入原料茎叶剩余物ⅰ，缓慢升温加热，回流4h，提取2次，得到提取液ⅱ和原料茎叶剩余物ⅱ，将提取液ⅰ和提取液ⅱ混合，减压浓缩得到浓缩液；其中，乙醇、乙酸乙酯和原料茎叶剩余物ⅰ的质量比为30：25：12；s4、萃取：先用乙醚萃取浓缩液3次，萃取时间为25min，再用四氯化碳萃取浓缩液3次，萃取时间为15min，得到萃取液；其中，乙醚与浓缩液的体积比为6：3；s5、洗脱：将萃取液加于大孔吸附树脂色谱柱上，按质量分数50%乙醇、甲醇和水的顺序作为洗脱剂进行第一次洗脱，洗脱剂的流速为25ml/min，得到洗脱液ⅰ；然后按质量分数80%乙醇、乙腈和水的顺序作为洗脱剂对洗脱液ⅰ进行第二次洗脱，洗脱剂的流速为30ml/min，得到洗脱液ⅱ，洗脱液ⅱ经减压浓缩后即为墨旱莲草的有效成分；其中，萃取液、质量分数50%乙醇、甲醇和水的体积比为9：36：23：13，洗脱液ⅰ、质量分数80%乙醇、乙腈和水的体积比为6：35：20：10。墨旱莲草有效成分的应用，其用于制备防脱发剂。防脱发剂由以下组分按质量份组成：墨旱莲草有效成分16份、三聚磷酸铵18份、丙二醇26份、原料花15份、原料茎叶剩余物ⅱ10份、甘油17份、山梨醇10份、侧柏叶9份、何首乌7份、沉香醇8份、白兰香精4份和去离子水26份。其中，原料花由以下方法制得：将采摘好的墨旱莲草的花蕾晒干后，与金银花的花蕾混合捣碎，得到原料花，墨旱莲草的花蕾和金银花的花蕾的质量比为（22~35）：（8~16）；原料茎叶剩余物ⅱ由墨旱莲草有效成分的制备过程中的步骤s3中制得。实施例3本实施例的制备方法与实施例1相同，具体区别在于具体工艺条件的不同，包括以下制备步骤：s1、清洗：选择植株高度为55cm的墨旱莲草，放入清水中洗清三遍，洗净后取出浸泡于加有营养液的纯净水中，浸泡2.5h，取出后捣碎，得到原料茎叶；其中，营养液、纯净水和墨旱莲草的质量比为7：40：12，营养液由以下组分按质量份组成：硝酸钾27份、尿素18份、叶酸23份、硫酸镁15份、硫酸铜7份、磷酸二氢钾10份、柠檬酸铁2份和硼酸6份。s2、粗提：将质量分数为68%的乙醇和丙酮分别加入至提取锅中，再加入浸泡过的原料茎叶，加热回流3.5h，得到提取液ⅰ和原料茎叶剩余物ⅰ，冷却后，将提取液ⅰ保存至冷却罐中，待用；其中，乙醇、丙酮和原料茎叶的质量比为47：28：14；s3、第二次提取：将质量分数为83%乙醇和乙酸乙酯加入至提取锅中，再加入原料茎叶剩余物ⅰ，缓慢升温加热，回流3.5h，提取1次，得到提取液ⅱ和原料茎叶剩余物ⅱ，将提取液ⅰ和提取液ⅱ混合，减压浓缩得到浓缩液；其中，乙醇、乙酸乙酯和原料茎叶剩余物ⅰ的质量比为25：20：11；s4、萃取：先用乙醚萃取浓缩液2次，萃取时间为20min，再用四氯化碳萃取浓缩液2次，萃取时间为12min，得到萃取液；其中，乙醚与浓缩液的体积比为4：2；s5、洗脱：将萃取液加于大孔吸附树脂色谱柱上，按质量分数42%乙醇、甲醇和水的顺序作为洗脱剂进行第一次洗脱，洗脱剂的流速为20ml/min，得到洗脱液ⅰ；然后按质量分数70%乙醇、乙腈和水的顺序作为洗脱剂对洗脱液ⅰ进行第二次洗脱，洗脱剂的流速为25ml/min，得到洗脱液ⅱ，洗脱液ⅱ经减压浓缩后即为墨旱莲草的有效成分；其中，萃取液、质量分数42%乙醇、甲醇和水的体积比为7：29：18：12，洗脱液ⅰ、质量分数70%乙醇、乙腈和水的体积比为5：28：18：9。墨旱莲草有效成分的应用，其用于制备防脱发剂。防脱发剂由以下组分按质量份组成：墨旱莲草有效成分14份、三聚磷酸铵16份、丙二醇24份、原料花13份、原料茎叶剩余物ⅱ9份、甘油15份、山梨醇7份、侧柏叶8份、何首乌5份、沉香醇6份、白兰香精3份和去离子水23份。其中，原料花由以下方法制得：将采摘好的墨旱莲草的花蕾晒干后，与金银花的花蕾混合捣碎，得到原料花，墨旱莲草的花蕾和金银花的花蕾的质量比为29：12；原料茎叶剩余物ⅱ由墨旱莲草有效成分的制备过程中的步骤s3中制得。对比例1本对比例与实施例1中的制备步骤大致相同，具体区别在于步骤s1中，未将墨旱莲草浸泡于营养液中。对比例2本对比例与实施例1中的制备步骤大致相同，具体区别在于步骤s1中，无步骤s3和s4，且防脱发剂的组分中无原料茎叶剩余物ⅱ。对比例3本对比例的防脱发剂由以下组分按质量份组成：三聚磷酸铵16份、丙二醇24份、甘油15份、山梨醇7份、侧柏叶8份、何首乌5份、沉香醇6份、白兰香精3份和去离子水23份。防脱发试验分别取实施例1、实施例2、实施例3、对比例1、对比例2和对比例3中制得的防脱发剂，进行防脱发实验。试验组设定为男性受试者，每组30名（不同年龄段的受试者人数相同），试验期8个月，前2个月设定为试样无涂敷期，后6个月设定为试样涂敷期，在试样涂敷期，将防脱发剂每次5ml涂敷于头皮，试验期间每隔2日洗发并回收脱落的头发，对10天内脱落的头发根数进行统计，由该根数算出每次洗发脱落的头发根数；经计算，前2个月最后一周的平均值为176根/次，后6个月最后一周平均值如下表：实施例1实施例2实施例3对比例1对比例2对比例3平均值（根/次）727968112128139根据实验结果可知，受试者使用由实施例1、实施例2和实施例3中提取的墨旱莲草有效成分制得的防脱发剂6个月以后，脱发现象得到了显著的改善，脱发数量减少到了正常范围，而使用对比例1、对比例2和对比例3的防脱发剂以后，虽然脱发数量有所降低，但是并未降到正常范围，说明本发明的制备方法可有效提取墨旱莲草中的有效成分，提高了提取率，且用本法提取的墨旱莲草的有效成分制备的防脱发剂具有很好的防脱发效果。在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，上述实施例不以任何形式限制本发明，凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。当前第1页12