本发明涉及一种角膜保护粘弹液，属于医疗产品技术领域。
背景技术：
在眼科绝大多数手术中，如白内障、青光眼、玻璃体视网膜手术及屈光手术，都需要从暴露角膜，然后角膜上进行切口构建或者进行相关手术。然而在用开睑器固定后，由于泪液无法通过眼睑的正常闭张活动，限制了角膜上皮微绒毛的正常扩散维持角膜的湿润，因此会导致术中会出现角膜干燥，角膜受损及引起相关的术后并发症。
另外，有文献报道：由于在眼科各类手术中如白内障手术、视网膜玻璃体手术及角膜lasik手术中在角膜位置构建了切口，会引起术后术源性干眼，此类后期并发症越来越普遍，受到了眼科医生的重视。术源性干眼体征多表现为泪膜稳定性下降，角膜上皮点状破损，角膜上皮微绒毛结构受到破坏，泪膜的涂布障碍，眼睑结构破坏等等。
而目前治疗术源性干眼的主要办法就是术后采用人工泪液进行干预治疗，此类治疗方法所需时间长，费用高，且会影响患者生活质量。而在术前或者术中对角膜上皮进行保护，继而减少此类术源性干眼比例未有报告。
如何在术前及术中维持角膜的湿润，减少术后的角膜并发症成为医学上研究的热点问题。同时由于角膜是构建眼科手术切口的重要手术指标，因此如何在手术过程中保护角膜上皮功能同时维持清晰的手术视野，不影响手术开展尤为关键。所以眼科医生迫切需要一款能够在术中维持角膜湿润，同时又不会影响手术视野的产品。
在现行的眼科手术中，为了维持术中的角膜湿润，最常用的就是采用bss进行冲洗。bss学名为眼用平衡盐溶液，通常为各类无机盐如氯化钠，氯化钙，氯化镁等组成的水溶液。由于bss为无机盐组成的水溶液容易挥发，维持角膜湿润的时间很短，因此在眼科手术中特别是时间较长的眼科手术如视网膜玻璃体手术及角膜激光手术，需要大量的bss进行不断的冲洗，那么就会带来以下问题：1)bss维持的角膜湿润时间很短，手术中需要不断进行冲洗，所需求的bss量很大，成本很高。2)由于手术过程中需要不断的进行bss冲洗，手术医生就会暂停手术操作，让助手进行重新以维持角膜表面湿润，延长了手术时间及降低了手术效率，术者感觉不舒适，对助手来说也是一件非常繁琐的事情。3)由于眼科手术大多数为局麻手术，病人能够清晰地感觉到手术过程中不断地重复冲洗，极大地降低了手术过程的舒适感及术后病人对医生的依从性。4)由于大量冲洗bss，会破环角膜表面的绒状细胞，带走大量的蛋白质，破坏杯状细胞，会引起术后的角膜干燥，干眼等症状。5)bss成分为无机盐的水溶液，大量冲洗下会导致角膜表面发生折射现象，而眼科手术多位显微镜高精端手术，容易导致手术视野不清晰，医生无法精准地进行手术操作，延长手术时间。
在部分眼科手术中，眼科医生会需要更多的时间来完成手术，而bss无法满足要求，所以会使用粘弹剂来部分替代bss进行角膜保护，以维持角膜湿润。粘弹剂为一类具有粘弹性能的高分子聚合物医疗器械，是使用在眼内，起到填充前房，维持前房深度，满足手术需要，或者手术过程中保护角膜内皮细胞的作用。其具备以下2个主要特征：1)作用位置为眼内，目前市面上所有的眼用粘弹剂在cfda批准时其适用位置均为眼内，并非眼表；2)其多用在眼内维持前房空间及手术操作空间，并未提及如何应用在角膜表面维持角膜湿润剂保护角膜上皮层。粘弹剂分为内聚型和弥散型二种，其主要成分为透明质酸钠(ha)。如果将此类产品应用在眼表会导致以下问题：1)ha为高粘度稠状液体，无法有效扩散覆盖全面保护角膜，如果采用外力如手术器械进行人为扩散，则会有可能刮伤角膜。2)由于难以扩散，容易形成不均匀的厚膜，会极大地引起光线折射现象，手术视野不清晰，无法正确有效地进行眼科手术。3)由于ha粘度大，手术后期难以彻底清除，如有残留ha进入眼内则会导致短时间的眼压增高，引起继发性并发症如眼部组织受损。
技术实现要素：
为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种用于保护角膜的组合物及角膜保护粘弹液，该用于保护角膜的组合物及角膜保护粘弹液具有良好的保护效果，能够使手术视野具有较高的清晰度和亮度。
为得到上述目的，本发明首先提供了一种用于保护角膜的组合物，该角膜保护粘弹液由主体成分、渗透压调节剂、ph值调节剂和水组成，其中：
所述主体成分选自：单一的羟丙基甲基纤维素、单一的硫酸软骨素、单一的透明质酸钠、羟丙基甲基纤维素与硫酸软骨素的组合、或者羟丙基甲基纤维素与透明质酸钠的组合；其中，以该角膜保护粘弹液的质量为100％计，所述羟丙基甲基纤维素的含量为10％-30％，所述硫酸软骨素的含量为0.5％-10％，所述透明质酸钠的含量为0.2％-5％；无论单独使用还是组合使用，羟丙基甲基纤维素的含量、硫酸软骨素的含量、透明质酸钠的含量均控制在上述数值范围之内；
所述ph值调节剂包括：乳酸1％-5％、氢氧化钠0.5％-1.5％、酒石酸0-3％、枸橼酸0-5％；
该角膜保护粘弹液的渗透压为265-330mosmol/kg，ph值为6.8-7.6。
hpmc是一种非离子型纤维素醚，无臭无味，呈白色粉末状，能溶于40℃以下的水。本发明的角膜保护粘弹液以hpmc作为主体部分，能够带来以下优点：具有很好的润滑性能，化学性能稳定，不易遭受破坏；对光照射不会产生影响，不影响手术光线；生物安全性好，抗微生物性能优秀，无细胞毒性，无刺激过敏反应及增殖毒性；hpmc水溶性好，即使不慎少量进入眼内，也很容易从前房处冲洗出去，不会引起残留；具备很好的假可塑性，在ph值为3-11的范围内能够保持稳定(房水ph值为6.5-7.8)，容易与各类无机盐结合形成高渗透性粘稠液体，进而具备很多新型的应用性能如保水性、抗垂流性。
在上述角膜保护粘弹液中，优选地，在羟丙基甲基纤维素与硫酸软骨素的组合中，所述羟丙基甲基纤维素与硫酸软骨素的质量比为3:1；在羟丙基甲基纤维素与透明质酸钠的组合中，所述羟丙基甲基纤维素与透明质酸钠的质量比为3:1。
在上述角膜保护粘弹液中，优选地，所采用的羟丙基甲基纤维素的分子量为200000-300000道尔顿，其标称粘度为2500-5000mpa·s，其浓度为2wt％的水溶液的ph值为5-8。
在上述角膜保护粘弹液中，优选地，以该角膜保护粘弹液的质量为100％计，所述羟丙基甲基纤维素的含量为18％-24％，所述硫酸软骨素的含量为1％-5％，所述透明质酸钠的含量为0.5％-3％。
在上述角膜保护粘弹液中，优选地，所述渗透压调节剂包括氯化钠、氯化钾和二水合氯化钙中的一种或几种的组合；优选地，以该角膜保护粘弹液的质量为100％计，所述氯化钠的含量为3％-8％，所述氯化钾的含量为0.1％-1％，所述二水合氯化钙的含量为0.1％-0.5％。
在上述角膜保护粘弹液中，优选地，以该角膜保护粘弹液的质量为100％计，所述ph值调节剂包括：乳酸2％-3％、氢氧化钠0.8％-1.2％、酒石酸0-1％、枸橼酸0-1％。通过加入乳酸能够增加本发明角膜保护粘弹液的表面张力与弥散程度，来维持产品的湿润特性。由于其独特的配方所带来的特殊性能，本发明的角膜保护粘弹液能够快速覆盖角膜区域，提供长时间的角膜保护与维持角膜湿润，同时能够特供清晰明亮的手术视野，这是目前所有已有产品所不具备的。
在上述角膜保护粘弹液中，优选地，所述乳酸为浓度为90wt％的乳酸水溶液；优选地，所述乳酸的分子量为90.08g/mol。
在渗透成分的选择上，本发明选择无机盐(优选与生理盐水相同成分的氯化钠和/或氯化钙)形成渗透组分，同时配以乳酸进行角膜营养，促进角膜上皮细胞的自我修复(因为角膜无血管覆盖，切口自然愈合较慢)。
在上述角膜保护粘弹液中，优选地，在25±1℃、剪切速率为5s-1的条件下，该角膜保护粘弹液的动力粘度为3000-6000mpa·s。
根据本发明的具体实施方案，优选地，本发明所提供的角膜保护粘弹液可以具有以下具体组成：该角膜保护粘弹液由主体成分、渗透压调节剂、ph值调节剂和水组成；以该角膜保护粘弹液的质量为100％计，所述主体成分为羟丙基甲基纤维素，其含量为10-30％；所述ph调节剂包括浓度为90wt％的乳酸水溶液、氢氧化钠，所述浓度为90wt％的乳酸水溶液的含量为1％-5％，所述氢氧化钠的含量为0.5％-1.5％；该角膜保护粘弹液的渗透压为265-330mosmol/kg，ph值为6.8-7.6；在25±1℃、剪切速率为5s-1的条件下，该角膜保护粘弹液的动力粘度为3000-6000mpa·s。该角膜保护粘弹液是一种澄清透明、可塑性强的角膜保护粘弹液产品。
根据本发明的具体实施方案，上述角膜保护粘弹液所采用的水优选为纯净水、药用/医用级别的注射用水。
本发明的角膜保护粘弹液可以通过以下方式制备：将除hmpc之外的成分溶解于水中并搅拌均匀，同时将hmpc在70-80℃下和水混合搅拌30分钟后，将其加入含有其他成分的水溶液中，继续混合均匀36小时后，采用滤膜(0.1-2微米)进行二次重复过滤，所得到的澄清溶液在蒸汽灭菌锅内进行灭菌处理(121℃、35min)即可得到角膜保护粘弹液。
本发明所提供的角膜保护粘弹液既能够维持角膜湿润，有效保护角膜表面，同时还能够有效降低术后角膜干燥、术源性干眼等角膜相关问题的出现。本发明所提供的角膜保护粘弹液具有以下优点：能够有效快速地覆盖角膜表面，维持角膜湿润避免角膜干燥，保护角膜上皮层，并且，能够增加术者及病人手术舒适感；有一定的粘性，短时间内性质稳定，不会在短时间内挥发而影响其性能；透过率高，容易形成清晰的手术视野，不会影响手术进度；解放医生，使手术单人操作，提升手术效率；少量即可满足手术需要，降低手术费用成本，病人可以接受。而且在工艺上采用创新的高温方法制备，操作简单易控，成本低廉。综合考虑，本发明的角膜保护粘弹液是临床的优先选择。
具体实施方式
为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现对本发明的技术方案进行以下详细说明，但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。
实施例1-4
实施例1-4分别提供了一种角膜保护粘弹液，其组成如表1所示。
表1实施例1-4的角膜保护粘弹液的组成，含量以角膜保护粘弹液的质量为1000g计(单位：g)
粘度在(25±1)℃、剪切速率为5s-1的条件下测定。
制备方法：
将除hmpc之外的成分溶解于注射用水中并搅拌均匀，同时将hmpc在70-80℃下和水混合搅拌30分钟后，将其加入含有其他成分的水溶液中，继续混合均匀36小时后，采用滤膜(0.1-2微米)进行二次重复过滤，所得到的澄清溶液在蒸汽灭菌锅内进行灭菌处理(121℃、35min)即可得到角膜保护粘弹液。
实施例的角膜保护粘弹液的性能测试及安全性评价：
采用实施例1、2的角膜保护粘弹液进行产品性能测试，同时选取已上市的角膜保护剂(奥地利croma-pharmagmbh公司生产，型号：corneaprotect，比较例1)与cn105749360a中的实施例1制备的产品(比较例2)进行参数对比。进行对比的参数包括外观、渗透压、剪切粘度、不溶性微粒、细菌内毒素、眼刺激及细胞毒性。
中，眼刺激是按照gb/t16886.10-2005第10部分：刺激与迟发性超敏性反应中的方法进行，细胞毒性是按照gb/t16886.5-2008第5部分：体外细胞毒性试验中的方法进行。相关测试结果如表2所示。
表2
由性能参数的对比检测结果可以看出：实施例1、2与对比例1、2在安全性指标(眼损伤记分)及细菌内毒素上接近，均无明显的毒性反应。实施例1、2的动力粘度比对比例1的粘度要低，更具有流动性与弥散性，而与对比例2的粘度接近。
而在产品的不溶性微粒方面，实施例1、2优于对比例1、2，这能够有效减少或者降低堵塞小梁网孔径引起眼压升高的风险，降低继发性并发症的产生。
以上结果说明本发明的角膜保护粘弹液在组成及工艺上严格控制，降低风险，在性能上不低于已上市产品，并在安全性上要高于现有产品。
眼损伤判断标准依据gb/t16886标准制定，具体如表3所示。
表3
角膜保护粘弹液的光学试验
将角膜保护粘弹液滴在模拟眼球角膜上，观察期弥散性和透过性，重点考察其维持手术视野的清晰性与透亮功能。相关测试对比按照表4所示的标准进行评价：
表4
根据表1所示的标准要求，选取目前眼科手术中通常使用的角膜保护物(眼用平衡液bss、粘弹剂和角膜保护剂)与本发明实施例1、实施例2的角膜保护粘弹液进行横向比较，其中，眼用平衡液主要成分为0.9％的氯化钠生理盐水(以下简称bss)，粘弹剂采用2％的透明质酸钠(以下简称2％ha)和2％的羟丙基甲基纤维素(以下简称2％hpmc)和croneaprotect(奥地利croma-pharma公司生产，目前市场面唯一一款能够维持角膜湿润和保护角膜上皮细胞的产品，以下简称cp)。
评价方法：采集方式均用集液管吸取2滴(0.5ml)滴在眼球模型上，在显微镜下进行观察，并记录试验数据，具体如表5-9所示。
表5角膜的湿润程度
表6
由表5、表6的内容可以看出：bss在手术时间1分钟以后就无法维持角膜的湿润了，而2％的hpmc在5分钟、2％的ha在10分钟时也无法维持角膜的湿润程度了，比较例2在20分钟时的维持角膜湿润程度有所下降，而cp和本发明的角膜保护粘弹液可以在20分钟以上的时间内维持角膜湿润程度。
表7视野清晰度
由表7的内容可以看出：在维持手术视野清晰度方面，cp和本发明的角膜保护粘弹液均可维持20分钟左右的清晰手术视野，比较例2在10分钟后的手术视野的清亮度开始下降，视野出现模糊。而在25分钟的观察中，在显微镜下，本发明所对应的视野仍然清晰、透亮、光线透过性整齐，显微镜下无散射光线和不规则反射区域。而且可以看到本发明随着时间越长，视野变得越来越透亮，能够直接清晰可见眼底组织和完整红色的手术视野，这与本发明的角膜保护粘弹液的具体成分组成以及特殊性质(假可塑性)是密切相关的。
表8弥散度
由表8的内容可以看出：在弥散度方面，由于bss为水溶液，在最开始的3s内能够迅速扩散，覆盖整个角膜上皮层，但是由于其容易挥发性，在30s后角膜上皮层再次暴露在空气中。而粘弹剂(2％ha和2％hpmc)由于其内聚性和高分子量特点，流动性差，需要借助器械才能完成覆盖，而且在过程中容易产生气泡。cp与比较例2在5s时间完成角膜上皮层的覆盖，且在1分钟以上事件整个弥散性均匀，无可见气泡。本发明的角膜保护粘弹液在3s内即可完成整个角膜上皮层的覆盖，形成均匀的半球形状层，无可见气泡与微粒。
表9视野透亮性维持时间
由表9的内容可以看出：2滴bss水溶液在最开始的30s内可以提供清晰的手术视野，但是随着时间的增长，手术视野变得越来越差，需要频繁进行补充，才能维持视野的透亮性。
2滴眼用粘弹剂由于其内聚性与高分子量，容易形成不均的反射层，导致视野出现缺失与模糊，且由于其暴露时间过长出现白色斑点与沉淀物，手术视野变得模糊，无法进行。
而2滴cp在20分钟内的手术视野很透亮，但是在25分钟时边缘出现白色物质，视野出现边缘性反射性光线。而比较例2在20分钟时手术视野的清亮度出现下降，在25分钟下降比较明显，边缘出现白色斑点物。
2滴本发明的角膜保护粘弹液在整个25分钟的观察中，手术视野非常清晰透亮，符合手术要求，且无反射区光线出现。可以满足大部分眼科手术需要。
因此从以上横向对比可以看出：本发明的角膜保护粘弹液能够在角膜上皮层形成一层稳定、透明、均匀的湿润膜，维持25分钟以上的手术清晰视野，能够满足大部分眼科手术需要。比目前市面上常用的角膜保护物均要优秀。
平滑程度和弥散度的进一步比较：
取2滴样品滴在动物角膜上，在100x倍显微镜下进行观察与记录数据。记录保留时间(滴到角膜至液面破裂/出现气泡的时间)，采用滴入后角膜虹膜区的红光反射区情况做为平滑级判定，0级为平滑，1级为部分平滑，2级为不平滑。相关结果如表10所示：
表10
由表10的内容可以看出：本发明所提供的样品能够在3秒内覆盖角膜区域，形成平滑的清晰液层，同时能够提供超过20分钟的角膜保护时间，比现有产品均有明显的优势。