糖尿病肾病的预防和治疗的制作方法
根据35u.s.c§119(e)，本申请要求于2016年10月3日提交的美国临时申请第62/403,368号的权益，将其通过引用整体并入本文。
发明领域
本文公开的实施方案涉及糖尿病肾病(dn)；具体地，实施方案涉及在糖尿病对象中预防和治疗dn的方法。
发明背景
糖尿病肾病(dn)是肾衰竭的最常见原因，并且占接受长期肾透析和终末期肾病的患者的大约一半。这是糖尿病患者面临的最严重的并发症之一，在该患者群体中约有40％的发病率。某些风险因素显著增加了糖尿病患者发生该病况的可能性。这些包括对血糖水平的不良控制、患糖尿病的时间长度、超重和高血压(超过130/80mmhg)的存在。
用于评估肾功能的标准测试是过滤流体通过肾的流速的肾小球滤过率(gfr)的测量，以及尿液中蛋白尿的筛查。
肾小球构成肾脏的过滤系统，其允许血浆选择性超滤进尿液中。这种屏障可以自由渗透水、中小尺寸的溶质，包括分子量低于白蛋白的蛋白质，但阻止较大分子和蛋白质进入尿液。对肾小球的任何损害都会影响肾脏控制物质从血液进入尿液的能力。
肾小球的过滤装置由三层构成：有孔内皮、肾小球基底膜(gbm)和上皮足细胞。肾小球滤过屏障的功能取决于所有这三层的完整性和功能性。
在正常健康的肾脏的尿液中存在少于0.05％的血浆白蛋白。该少量白蛋白在肾小球水平过滤到尿液中，随后被近端肾小管细胞吸收并降解。残留的片段作为白蛋白片段再吸收到肾小管腔中。
与糖尿病相关的许多病理生理学元素诱导肾小球损伤，并因此导致过滤系统损伤，导致蛋白质特别是白蛋白尿排泄进尿液。因此，尿液中白蛋白水平升高是肾脏由于糖尿病受损的第一个病征。然后尿液中存在的蛋白质引起肾小管损伤和肾单位丢失。
dn分为两个主要阶段，其取决于通过肾脏损失多少白蛋白：微量白蛋白尿和大量白蛋白尿。微量白蛋白尿的特征在于流入尿液的白蛋白的量为每天30至300mg。它有时被称为初期肾病。大量白蛋白尿的特征在于流动的白蛋白的量大于每天300mg。
微量白蛋白尿通常是dn已经发展的第一个病征。然而，它不一定与进展为大量白蛋白尿和肾功能丧失有关。在大多数情况下，微量白蛋白尿可以恢复到正常白蛋白尿，但它也可能以大致相同的水平持续或进展为大量白蛋白尿。相反地，一旦发展为大量白蛋白尿，则该病症不可逆，并导致肾小球滤过率(gfr)下降至终末期肾衰竭。一旦患者处于疾病的该阶段，则肾小球的结构就会发生不可逆的损伤。
肾小球滤过屏障的破坏与肾小球中许多组织病理学变化有关。1型和2型糖尿病患者中的糖尿病肾病的结构异常是相似的。dn中最早的形态学变化是系膜扩张，这是由于系膜细胞数目增加和系膜基质合成增加以及其降解减少。足细胞和内皮细胞似乎通过增加系膜基质沉积来刺激肾小球膜细胞发生反应而在这个过程中起作用。随着疾病的进展，系膜基质和细胞继续积聚，导致肾小球基底膜增厚，并发展出许多硬化的结节(结节转化)，最终导致肾小球硬化。当这些结构性病变导致功能障碍时，它们处于非常晚期，并且目前的治疗可以减慢但不能阻止发展至终末期肾病(esrd)(mauer等，jclininvest1984，74：1143；lewis等，nengljmed1993，329：1456)。
因此，在肾小球滤过系统发生不可逆损伤以及由此出现肾病的明显病征或症状(如大量白蛋白尿和/或降低的gfr)之前，重要的是确定能够干预肾小球结构和功能破坏的早期原因的治疗策略。
目前对糖尿病肾病的治疗旨在预防或延迟疾病进展至肾衰竭，主要通过减少已知显著增加糖尿病患者发展病理的可能性的因素，如心血管疾病、对血糖水平的不良控制以及高血压。然而，尽管在过去几年中治疗总体上有所改善，但已证明这些有效性有限，正如由最终发展为糖尿病肾病的患者数量增加所证实。最近的研究集中于开发靶向被认为促进肾脏疾病进展的途径的潜在新疗法，如晚期糖基化终产物(age)、蛋白激酶c、维生素d或内皮素1的抑制剂。但是，这些潜在的替代方案疗法尚未成功转化为临床实践。
白细胞介素-8(il8；cxcl8)被认为是pmn(多形核中性粒细胞)招募的主要媒介物，并且参与多种病理，包括牛皮癣、类风湿性关节炎、慢性阻塞性肺病以及移植器官中的缺血/再灌注损伤(griffin等，archdermatol1988，124：216；fincham等，jimmunol1988，140：4294；takematsu等，archdermatol1993，129：74；liu等，1997，100：1256；jeffery，thorax1998，53：129；pesci等，eurrespirj.1998，12：380；lafer等，brjpharmacol.1991，103：1153；romson等，circulation1993，67：1016；welbourn等，brjsurg.1991，78：651；sekido等，nature1993，365，654)。il8的生物活性通过与在人pmn表面表达的属于7tm-gpcr家族的两种受体cxcr1和cxcr2相互作用而介导。
许多研究证明在微量白蛋白尿患者中尿液il8的水平增加，由此提示il8可能与至少另一种标志物如ip-10、il-6、mip-1δ或mcpl组合用于鉴定可能经历进行性肾功能衰退的微量白蛋白尿患者群体的预后方法中(tashiro等，jclinlabanal16：1-4，2002)。
瑞帕利辛(reparixin)和ladarixin是cxcr1和cxcr2的非竞争性变构抑制剂，il8的同源受体(cxcl8)，能够阻断一系列与il8信号转导相关的活性，包括白细胞招募和其他炎症反应，而不影响配体和受体之间的结合(bertini，r等，procnatacadsciusa2004，101：11791)。
瑞帕利辛是r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺的inn名称(以前称为repertaxin或df1681y)，并且其在国际申请wo0024710中首次公开。瑞帕利辛的进一步描述及其在预防糖尿病中的用途见于美国专利申请公开号：us2015/0011639。在美国专利申请公开号：us2012/0202884中描述了瑞帕利辛在减少或抑制接受胰岛细胞移植的个体中移植物排斥中的用途。然而，尚未提出或探索瑞帕利辛对糖尿病肾病的预防和治疗效果。瑞帕利辛在癌症治疗中的用途描述于wo2010/056753中。将这些专利各自的内容通过引用整体并入本文。
ladarixin是r(-)-2-[(4′-三氟甲磺酰氧基)苯基]丙酰基-甲磺酰胺钠盐的inn名称(以前称为meraxin或df2156a)。已经证明，ladarixin对cxcr1和cxcr2的抑制能够阻断和逆转小鼠中的1型糖尿病(citroa.等，diabetes2015，64：1329)。
(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(也称为df2755y)及其钠盐(也称为df2755a)是cxcr1和cxcr2触发的pmn活性的有效选择性双重抑制剂，其在wo2010/031835中首次公开，还公开了其在治疗il8依赖性病理学中的用途，如短暂性脑缺血、大疱性类天疱疮、类风湿性关节炎、特发性纤维化、肾小球肾炎以及缺血/再灌注引起的损伤。
本发明人现证明il8抑制剂在糖尿病病症下预防蛋白尿以及保护肾免受糖尿病肾病(dn)的发作和进展的治疗效力。还证明了il8参与导致肾脏疾病发作的早期组织病理学变化。
发明概述
具体地，本公开的实施方案基于瑞帕利辛在糖尿病病况下预防和/或恢复肾小球膜扩张和足细胞损伤以及防止糖尿病肾病(dn)的进一步发展和进展的治疗功效的实验证明。
因此，本公开的第一个目的是提供糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，其包括向有此需要的对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
本公开的第二个目的是提供il8抑制剂用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的用途，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
本公开的第三个目的是提供il8抑制剂在制备用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的药物中的用途，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
本公开的第四个目的是提供il8抑制剂用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟中的用途，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y))或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
本公开的第五个目的是提供治疗方法，其包括确定来自对象的尿液样品中的il8水平，并且当il8水平比参照水平高至少3倍时，向所述对象施用有效量的瑞帕利辛和/或ladarixin。
本公开的第六个目的是提供治疗高血糖症的方法，其包括对患有高血糖症的对象进行诊断，并向所述对象施用有效量的瑞帕利辛和/或ladarixin。
本发明的第七个目的是提供治疗高血糖症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的瑞帕利辛和/或ladarixin。
本公开的第八个目的是提供包含瑞帕利辛和/或ladarixin或者由瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物，其用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防或风险降低或延迟。在一实施方案中，施用包含瑞帕利辛和/或ladarixin或者由瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物，以在对象中治疗糖尿病肾病或者预防糖尿病肾病或糖尿病肾病的风险降低或者延迟糖尿病肾病的发作或进展，其中所述对象的il8水平高于2.4pg/ml。在一实施方案中，施用包含瑞帕利辛和/或ladarixin或者由瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物，以用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防或风险降低或者延迟，其中所述对象的il8水平比参照水平高3倍。
本发明的第九个目的是提供包含瑞帕利辛和/或ladarixin或者由瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物，其用于制备用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防或风险降低或延迟的药物。
本公开的第十个目的是提供包含瑞帕利辛和/或ladarixin或者由其瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物在用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防或风险降低或延迟的用途。
本公开的第十一个目的是提供包含瑞帕利辛和/或瑞帕利辛或者由瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物在制备用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防或风险降低或延迟的药物中的用途。
因此，在本发明上述各个目的的一个实施方案中，在所述方法或用途中，对象已被诊断患有糖尿病。
因此，在本发明上述各个目的的一个实施方案中，在所述方法或用途中，对象已被诊断患有1型糖尿病。
因此，在本发明上述每个目的的一个实施方案中，在所述方法或用途中，对象已被诊断患有2型糖尿病。
根据本发明上述各个目的的另一实施方案，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象具有微量白蛋白尿。
根据本发明上述各个目的的另一实施方案，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象的尿液il8水平高于il8参照标准。优选地，所述参照标准是未患任何肾病的健康个体的尿液il8水平。
根据本发明上述各个目的的另一实施方案，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象的尿液il8水平高于2.41pg/ml。
根据本发明上述各个目的的另一实施方案，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象具有高于60ml/min/1.73m2，优选高于90ml/min/1.73m2的gfr(肾小球滤过率)值。
根据本发明上述各个目的的另一实施方案，同时结合任何前述实施方案，对象在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；以及rs664514。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)测量从对象获得的样品中的il8水平；(b)将所测量的il8水平与il8参照进行比较；(c)当所测量的il8水平高于il8参照时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，其中所述il8参照是统计学显著数目的未患有任何肾病以及未患有炎性疾病的非糖尿病个体的平均尿液il8水平。
在本发明第一个目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了在对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)测量从对象获得的样品中的il8水平；(b)当所测量的il8水平高于2.41pg/ml时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明第一个目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，是用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)确定对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性(snp)中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；以及rs664514；(b)当对象具有所述snp中的至少一种时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基的化合物]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，该方法还包括测量来自对象的尿液样品中的蛋白质水平。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，该方法还包括选择具有微量白蛋白尿的对象。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，该方法还包括从对象获得尿液样品用于尿蛋白水平分析。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，该方法还包括将所测量的蛋白质水平与尿蛋白参照进行比较。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，第一参照是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的尿液样品中的蛋白质水平。
在上述任何方法或用途的一个实施方案中，对象具有正常的蛋白尿或增加的蛋白尿。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，该方法还包括测量从对象获得的样品中的il8水平。
在上述任何方法或用途的一个实施方案中，样品是尿液、血液、血清或血浆样品。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，该方法还包括将测量的il8水平与il8参照水平进行比较。
在上述任何方法或用途的一个实施方案中，il8参照水平是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的相应样品中的il8水平。
在上述任何方法或用途的一个实施方案中，il8参照水平是在未患有任何肾病或任何炎症病况的正常健康对象中获得的相应样品中的il8水平。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，该方法还包括选择其中尿液所测量的il8水平高于2.41pg/ml的对象。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，该方法还包括确定对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；以及rs664514。
附图简述
图1示出的实验数据，显示如实施例2中所述在对照小鼠(ctrl)和用瑞帕利辛(repa)处理的小鼠中24小时内测量的尿白蛋白排泄水平(μg)。
图2a示出的实验数据显示通过在对照(ctrl)、il8处理(il8)以及il8-和瑞帕利辛处理(il8瑞帕利辛)的足细胞中的鬼笔环肽染色所测量的肌动蛋白表达量。
图2b示出的实验数据显示在对照(ctrl)、il8处理(il8)以及il8和瑞帕利辛处理(il8瑞帕利辛)的足细胞中测量的以gapdhmrna表达为对照的突触足蛋白(synaptopodin)mrna表达。
图3a示出的实验数据定量患有系膜扩张(mesexp)、结节转化(nodulartransf)或肾小球硬化(sclerosis)的患者的il8表达，表示为肾小球面积的百分比。
图3b示出的实验数据显示通过定量pcr测量的对照个体以及患有2型糖尿病和dn的患者的肾小球的il8表达水平，表示为相对于对照的倍数增加。
图4示出的实验数据显示在t2d正常白蛋白尿(normo)、微量白蛋白尿(micro)、大量白蛋白尿(macro)或对照(ctrl)患者中测量的平均尿液il8水平。
图5a示出的实验数据显示患者中的平均acr值，其中il8的表达对应第一(q1)、第二(q2)、第三(q3)或第四(q4)四分位数；
图5b示出的实验数据显示具有低于(q1-q2)或高于(q3-q4)的中值的il8表达的患者中的acr值。
图6示出了显示瑞帕瑞辛起作用以防止细胞骨架重塑的机制的模型。
图7a和图7b示出的实验数据显示il8的表达在早期损伤阶段具有峰值，并且在肾实质的细胞性丧失和纤维化开始后逐渐减少。
图7c示出的实验数据显示与对照相比糖尿病样品中il8mrna表达的倍数增加。通过rt-pcr分析mrna水平。
图7d示出的实验数据显示与对照相比糖尿病样品中cxcr-1mrna表达的倍数增加。通过rt-pcr分析mrna水平。
图7e示出的实验数据显示与对照相比，糖尿病样品中cxcr-2mrna表达的倍数增加。通过rt-pcr分析mrna水平。
图8a示出的实验数据显示与正常白蛋白尿患者相比，患有微量白蛋白尿的患者显示出更高的尿液il8水平。
图8b示出的实验数据显示所有389名患者及其正常白蛋白尿和微量白蛋白尿的子集，那些在尿液中呈现il8阳性测试的患者也呈现出显著更高的acr值。
图8c示出的实验数据显示所有389名患者及其正常白蛋白尿和微量白蛋白的子集，那些在微量白蛋白尿和正常白蛋白尿组中具有阳性尿液il8测试的患者具有显著更大的gfr斜率。
图8d示出的实验数据显示所有389名患者及其正常白蛋白尿和微量白蛋白尿的子集，那些在正常和微量白蛋白尿组中高于il8中值分布的患者显示比低于中值的那些患者显著更高的acr。
图8e示出的实验数据显示所有389名患者及其正常白蛋白尿和微量白蛋白尿的子集的事件风险。
图8f示出的图表显示正常白蛋白尿和微量白蛋白子集中il8表达。
图9a示出了描绘表达il8的细胞在正常血糖和高血糖症下14天的实验数据。
图9b示出了描绘表达cxcr-1的细胞在正常血糖和高血糖症下14天的实验数据。
图9c示出了表达cxcr-2的细胞在正常血糖和高血糖症下14天的实验数据。
图10a示出的实验数据显示在指定条件下进行或未进行瑞帕利辛处理的情况下足细胞的平均细胞面积。
图10b示出的实验数据显示在指定条件下进行或未进行瑞帕利辛处理的情况下足细胞的平均细胞荧光强度。
图11a示出的实验数据显示在对照或repa处理的dndb/db糖尿病小鼠中指定时间点的体内血糖水平。
图11b示出的实验数据显示在对照或repa处理的dndb/db糖尿病小鼠中指定时间点的体内uae水平。
发明详述
除非另外说明，否则本文使用的所有技术和科学术语均具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。应当理解，本发明不限于本文所述的特定方法、方案和试剂等，因而可以改变。本文使用的术语仅出于描述具体实施方案的目的，并不意图限制本发明的范围，本发明的范围仅由权利要求限定。
分子生物学中常用术语的定义可见于：themerckmanualofdiagnosisandtherapy，第19版，mercksharp&dohmecorp.出版，2011(isbn978-0-911910-19-3)或merckmanuals.com2015数字在线版本；roberts.porter等(编辑)，theencyclopediaofmolecularcellbiologyandmolecularmedicine，blackwellscienceltd.出版，1999-2012(isbn9783527600908)；和roberta.meyers(编辑)，molecularbiologyandbiotechnology：acomprehensivedeskreference，vchpublishers，inc.出版，1995(isbn1-56081-569-8)；wernerluttmann’immunology，elsevier出版，2006；janeway’immunobiology，kennethmurphy，allanmowat，caseyweaver(编辑)，taylor&francislimited，2014(isbn0815345305，9780815345305)；lewin’genesxi，jones&bartlettpublishers出版，2014(isbn-1449659055)；michaelrichardgreen和josephsambrook，molecularcloning：alaboratorymanual，第4版，coldspringharborlaboratorypress，coldspringharbor，n.y.，usa(2012)(isbn1936113414)；davis等，basicmethodsinmolecularbiology，elseviersciencepublishing，inc.，newyork，usa(2012)(isbn044460149x)；laboratorymethodsinenzymology：dna，jonlorsch(ed.)elsevier，2013(isbn0124199542)；currentprotocolsinmolecularbiology(cpmb)，frederickm.ausubel(编辑)，johnwileyandsons，2014(isbn047150338x，9780471503385)，currentprotocolsinproteinscience(cpps)，johne.coligan(编辑)，johnwileyandsons，inc.，2005；以及currentprotocolsinimmunology(cpi)(johne.coligan，adamkruisbeek，davidhmargulies，ethanmshevach，warrenstrobe，(编辑)johnwileyandsons，inc.，2003(isbn0471142735，9780471142737)，将其内容通过引用整体并入本文；此外，除非上下文另有要求，否则单数术语应包括复数，并且复数术语应包括单数。
除非另有说明，否则使用本领域技术人员已知的标准程序实施本发明，例如michaelr.green和josephsambrook，molecularcloning：alaboratorymanual，coldspringharborlaboratorypress，coldspringharbor，n.y.，usa(2012)；davis等，basicmethodsinmolecularbiology，elseviersciencepublishing，inc.，newyork，usa(1986)；currentprotocolsinmolecularbiology(cpmb)(fredm.ausubel等编辑，johnwileyandsons，inc.)，currentprotocolsinimmunology(cpi)(johne.coligan等编辑，johnwileyandsons，inc.)，currentprotocolsincellbiology(cpcb)(juans.bonifacino等编辑，johnwileyandsons，inc.)，cultureofanimalcells：amanualofbasictechniquebyr.ianfreshney，publisher：wiley-liss；第5版(2005)，animalcellculturemethods(methodsincellbiology，vol.57，jenniep.matheranddavidbarneseditors，academicpress，1stedition，1998)，methodsinmolecularbiology，vol.180，transgenesistechniquesbyalanr.clarkeditor，第2版，2002，humanapress以及martenh.hofker和janvandeursen编辑.methodsinmeolcularbiology，vo.203，2003，transgenicmouse中的标准程序，将其全部通过引用整体并入本文。
应当理解，本发明不限于本文所述的特定方法、方案和试剂等，因而可以改变。本文使用的术语仅出于描述具体实施方案的目的，并且不意图限制本发明的范围，本发明的范围仅由权利要求限定。
除了在操作实例中或另有说明之外，本文所用的表示成分的量或反应条件的所有数字均应理解为在所有情况下均由术语“约”所修饰。当与百分数连用时，术语“约”将意为±1％。
出于描述和公开的目的，将鉴定的所有专利和出版物通过引用明确引入本文，例如这些出版物中描述的方法可以与本发明结合使用。提供这些出版物仅仅是因为它们在本申请的提交日之前的公开。这方面的任何内容都不应被解释为承认发明人无权因在先发明或任何其他原因而先于此类公开。关于日期的所有声明或关于这些文件内容的陈述均基于申请人可获得的信息，并不构成对这些文件的日期或内容的正确性的任何承认。本文所用的术语“对象”、“个体”、“患者”和“人”可互换使用以表示哺乳动物，如狗、猫、牛和马，并且优选人。
在一个实施方案中，术语“药学可接受的”意为由联邦或州政府的管理机构批准或在美国药典或其他公认的药典中列出用于动物，特别是人。具体地，它指在合理的医学判断范围内适合与人类和动物的组织接触使用而没有过多毒性、刺激性、过敏反应的那些化合物、材料、组合物和/或剂型，或与合理的利益/风险比相当的其他问题或并发症。
术语“载体”指与治疗剂一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介物。此类药物载体可以是无菌液体，例如水和油，包括石油、动物，植物或合成来源的那些，如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当静脉内施用药物组合物时，水是优选载体。盐水溶液和葡萄糖水溶液和甘油溶液也可用作液体载体，特别是对于可注射溶液而言。合适的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。如果需要，该组合物还可含有少量的润湿剂或乳化剂或ph缓冲剂。这些组合物可以采用溶液、悬浮液、乳液、片剂、丸剂、胶囊、粉末、缓释制剂等形式。该组合物可以使用传统的粘合剂和载体如甘油三酯而配制成栓剂。口服制剂可包括标准载体，如药物级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。合适的药物载体的实例描述于remington′spharmaceuticalsciences，第18版，gennaro编辑(mackpublishingco.，1990)。应使该制剂适合给药方式。
本文使用的术语“包含/包括”用于指代本发明必需的方法及其相应组分，但可开放式地包括未指明的元素，无论是必需的还是非必需的。“包含/包括”的使用表示包含而不是限制。
本文使用的术语“基本上由......组成”指给定实施方案所需的那些元素。该术语允许存在不会实质性影响本发明实施方案的基本特征和新颖特征或功能特征的元素。
术语“由......组成”指如本文所述的组合物、方法和其各自的组分，其不包括在实施方案的描述中未叙述的任何元素。
术语“糖尿病肾病(diabetickidneydisease)”、“dkd”、“糖尿病肾病变(diabeticnephropathy)”和“dn”在本文可互换使用，其指任何肾结构完整性和功能的丧失，导致某些营养素泄漏到尿液中而不是再吸收回血液中，例如蛋白质泄漏到尿液中。
术语“疾病”或“病况”在本文中可互换使用，指身体或一些器官状态的任何交替，中断或扰乱功能表现和/或引起患者或与患者接触的人诸如不适、功能障碍、痛苦甚至死亡的症状。疾病或病症也可能涉及病(distemper)、疾病(ailing)、疾病(ailment)、疾病(malady)、病症(disorder)、疾病(sickness)、疾病(illness)、疾病(complaint)或感染(affectation)。
当在治疗性或预防性治疗的背景下使用时，术语“有此需要”意为患有疾病，被诊断患有疾病或需要预防疾病，例如对于有疾病发展的风险的对象而言。因此，有此需要的对象可以是需要治疗或预防疾病的对象。
如本文所用的，在一个实施方案中，短语“预防糖尿病肾病的发作”意为停止、阻碍和/或减缓糖尿病对象或患有糖尿病病况的对象的尿液中超过30mg白蛋白的初始发生。
在另一实施方案中，在糖尿病对象或患有糖尿病病况的对象中dn的发病和dn的进展的背景下，本文使用的术语“预防/防止(prevent/prevention)”指停止、阻碍、和/或减缓与dn相关的医学病况相关的发展中的不良反应和症状的发作，如肾脏结构完整性和功能的丧失，导致某些营养素泄漏到尿液中而不是被重新吸收回血液，例如蛋白质泄漏到尿液中。
本文使用的短语“预防糖尿病肾病的进展”意为停止、阻碍和/或减缓糖尿病对象或患有糖尿病病况的对象的尿液中超过30mg白蛋白/天的持续发生/复发。
如本文所用，在一个实施方案中，术语“治疗(treat/treatment/treating)”或“改善”指治疗性治疗，其中目的是逆转、缓解、改善、抑制、减缓或停止dn和肾衰竭的进展或严重程度。如果一种或多种症状或临床标志物减少，则治疗通常是“有效的”。例如，在dn中，“有效治疗”指将排泄到尿液中的蛋白质降低至正常蛋白质/白蛋白范围并将其维持在正常范围内持续至少一周的治疗。在一个实施方案中，本文所述的治疗可以减少蛋白尿并维持蛋白质/白蛋白的正常范围持续至少2周，至少3周，至少4周，至少5周，至少6周，至少7周，至少8周，至少9周，至少10周，至少11周，至少12周，至少13周，至少14周，至少15周，至少16周，至少17周，至少18周或更长时间，例如至少20周(或5个月)，6个月或更长时间。在另一实施方案中，如果疾病的进展减慢或停止，则治疗是“有效的”。也就是说，“治疗”不仅包括症状或标志物的改善，例如il8或美国专利申请公开号：us2006/0240437中公开的其他标志物，还包括与治疗不存在的情况下预期的症状相比，症状进展或恶化的停止或至少减缓。有益或期望的临床结果包括但不限于：减轻一种或多种症状，降低疾病程度，稳定(即不恶化)疾病状态，延迟或减缓疾病进展，改善或减轻疾病状态，缓解(无论是部分还是全部)和/或降低死亡率。例如，如果病况稳定或者尿蛋白/白蛋白水平正常化，则认为治疗是有效的。术语疾病的“治疗”还包括缓解疾病的症状或副作用(包括姑息治疗)的情况。
本文使用的“il8抑制剂”或“cxcr1和/或cxcr2抑制剂”中的术语“抑制剂”指对抗由il8趋化因子与其受体或cxcr1和/或cxcr2的结合活化引发的天然存在的信号转导事件的任何合成/天然的有机或有机/无机分子。
本文使用的术语“施用”指通过导致在期望部位至少部分递送药剂/药物的方法或途径而将本文公开的il8抑制剂置于对象中。可以通过导致对象中的有效治疗的任何合适的途径施用包含本文公开的化合物的药物组合物。“施用”是指向对象口服(“po”)施用，作为栓剂施用，局部接触，静脉内(“iv”)，腹膜内(“ip”)，肌肉内(“im”)，病灶内，鼻内或皮下(“sc”)施用或缓释装置的植入，例如微型渗透泵。通过任何途径施用，包括肠胃外和透粘膜(例如口服、鼻部、阴道、直肠或经皮)施用。肠胃外施用包括例如静脉内、肌肉内、小动脉内、真皮内、皮下、腹膜内、心室内和颅内施用。其他递送模式包括但不限于脂质体制剂、静脉输注、透皮贴剂等的使用。
术语“全身施用/全身性施用”指向哺乳动物施用化合物或组合物以使化合物或组合物经循环系统递送至体内部位，包括靶向药物作用靶标部位的方法。全身施用包括但不限于口服、鼻内、直肠和肠胃外(即除了通过消化道，如肌肉内、静脉内、动脉内、透皮和皮下)施用，条件是，如本文中使用的全身施用不包括通过除经循环系统之外的方式直接向脑区域施用，如鞘内注射和颅内施用。
如本文所用，在一个实施方案中，术语“增加的蛋白尿”意为与尿蛋白参照水平相比尿液样品中蛋白质水平增加至少10％。在另一实施方案中，“增加的蛋白尿”意为尿液排泄大于30mg白蛋白/24hr天。
本文中使用的术语“增加(increased/increase)”或“升高”通常意为统计学显著量的增加；为避免疑义，术语“增加”或“增强”意为与参照水平相比增加至少10％，例如增加至少约10％，至少约为20％，或至少约30％，或至少约40％，或至少约50％，或至少约60％，或至少约70％，或至少约80％，或至少约90％，或者高至且包括100％增加，或者10-100％之间的任何增加，或者与参照水平相比增加至少约2倍，或者至少约3倍，或者至少约4倍，或者至少约5倍或者至少约10倍，或者2倍至10倍或更多之间的任何增加。
术语“减少(decrease/reduce/reduction)”、“降低(lower/lowering)”或“抑制”在本文中通常均用于表示统计学显著量的减少。例如，“减少”或“抑制(inhibit)”意为与参照水平相比减少至少10％，例如减少至少约20％，或至少约30％，或至少约40％，或至少约50％，或至少约60％，或至少约70％，或至少约80％，或至少约90％，或高至且包括100％降低(例如，与参照水平相比没有水平或不可检测的水平)，或者与参照水平相比在10-100％之间的任何降低。在标志物或症状的背景下，这些术语意为此类水平的统计学显著的降低。该降低可以是，例如至少10％，至少20％，至少30％，至少40％或更多，并且优选降低至在未患给定疾病的个体的正常范围内接受的水平。
术语“统计学显著的”或“显著的”指统计学显著性，并且通常意为两个标准偏差(2sd)或更大的差异。
术语“正常化”指尿蛋白/白蛋白水平从升高的尿蛋白/白蛋白水平到正常范围内的变化。“正常化”不仅指促进异常高的尿蛋白/白蛋白水平降低的活动，而且还指长期维持这种水平，例如对于如本文所述单一单位剂量的药物组合物施用而言至少一周。
本文使用的术语“药学可接受的”，“生理学可耐受的”及其语法变体，当它们指组合物、载体、稀释剂和试剂时，可互换使用并且表示该材料能够施用于哺乳动物或向哺乳动物施用而不产生非期望的生理作用，如恶心、头晕、胃部不适等。除非如此需要，否则药学可接受的载体将不会促进针对与其混合的药剂的免疫应答的产生。含有溶解或分散于其中的活性成分的药理学组合物的制备在本领域是众所周知的，并且不需要基于制剂进行限制。通常将此类组合物制备成可注射的液体溶液或悬浮液，但是也可以制备成适于在使用前溶解或悬浮于液体中的固体形式。制剂也可以乳化或作为脂质体组合物存在。活性成分可以与赋形剂混合，所述赋形剂是药学可接受的并且与活性成分相容且其量适合用于本文所述的治疗方法。合适的赋形剂包括例如水、盐水、葡萄糖、甘油、乙醇等及其组合。此外，如果需要，该组合物可包含少量增强活性成分的有效性辅助物质，如润湿剂或乳化剂、ph缓冲剂等。本发明的治疗组合物可包含其内组分的药学可接受的盐。药学可接受的盐包括与无机酸(如例如盐酸或磷酸)或诸如乙酸、酒石酸、扁桃酸等有机酸形成的酸加成盐(与多肽的游离氨基形成)。与游离羧基形成的盐也可以来源于无机碱，如，例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙或氢氧化铁，以及诸如异丙胺、三甲胺、2-乙基氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因等的有机碱。生理上可耐受的载体在本领域众所周知。示例性的液体载体是无菌水溶液，其除活性成分和水外不含任何物质，或者含有缓冲剂，例如生理ph值的磷酸钠、生理盐水或两者，如磷酸盐缓冲盐水。此外，水性载体可含有多种缓冲盐和诸如氯化钠和氯化钾的盐、葡萄糖、聚乙二醇和其它溶质。除了水之外，液体组合物还可以包含液相。此类另外的液相的实例是甘油、植物油(如棉籽油)和水-油乳液。本文所述方法中有效治疗具体病症或病况的活性剂的量将取决于病症或病况的性质，并且可以通过标准临床技术确定。合适的药物载体描述于该技术领域的标准参考文献remington′spharmaceuticalsciences，a.osol中。例如，通过将以重量计1.5％的活性成分溶解于0.9％氯化钠溶液中来制备适于注射施用的肠胃外组合物。
在一个实施方案中，“药学可接受的”载体不包括体外细胞培养基。
术语“持续释放”和“延长释放”以其常规意义使用，指这样的药物配制剂：在延长的时间段内提供药物的逐渐释放，例如12小时或更长时间，并且优选(尽管不是必须的)在延长的时间段内导致药物基本稳定状态的血液水平。
本文使用的术语“延迟释放”指完整地穿过胃并溶解在小肠中的药物制剂。
术语“控制释放”、“持续释放”、“延长释放”和“定时释放”旨在可互换指代药物不是立即释放的任何含药物配制剂，即使用“控制释放”配制剂，口服施用不会导致药物立即释放到吸收池中。该术语可与remington：thescienceandpracticeofpharmacy，第21版，lippencottwilliams&wilkins(2006)中定义的“非立即释放”互换使用。
本文使用的术语“亚治疗剂量”指药理学活性剂的剂量：药理学活性剂的施用剂量或在功能上不足以引发对象中预期药理学效果(例如获得镇痛、抗惊厥、抗抑郁、抗炎、抗高血压、心脏保护或器官保护效果)的对象中药理学活性剂的实际水平或者定量小于该特定药理学试剂确定的治疗剂量(例如在本领域技术人员查阅的参考文献中公开的，例如physicians′deskreference，第62版，2008，thomsonhealthcare或brunton等；goodman&gilman’sthepharmacologicalbasisoftherapeutics，第11版，2006，mcgraw-hillprofessional公开的的药理学试剂的剂量)。“亚治疗剂量”可以相对定义(即作为常规施用的药理学活性剂的量的百分比量(小于100％))。例如，亚治疗剂量可以是常规施用的药理学活性剂的量的约1％至约75％。在一些实施方案中，亚治疗剂量可以是常规施用的药理学活性剂的量的约75％、50％、30％、25％、20％、10％或更少。
如本文所使用的，在施用il8抑制剂的背景下，术语“治疗有效量”意为当向表现出糖尿病肾病的糖尿病个体或患有糖尿病病况的个体施用时，治疗效力足够，足以减少所治疗的疾病、病况或病症的一种或多种症状的发展的il8抑制剂的量或剂量(例如足以降低表现出dn的糖尿病个体尿液中的蛋白质水平的量)。
如本文所使用的，在施用il8抑制剂的背景下，术语“预防有效量”意为当向未患糖尿病肾病的糖尿病个体或者患有糖尿病病况的个体施用时，il8抑制剂的量或剂量，指足以预防dn症状发作或降低dn症状发作出现的风险的药物的量(例如足以预防糖尿病个体尿液中蛋白质水平升高的量)，即寻求预防的生物或医学事件。在许多情况下，预防有效量与治疗有效量相同。
本文使用的术语“肾病变”意为肾脏(kidney/renal)疾病disease)，也称为肾病，其中存在肾脏损伤或疾病。
如本文使用的术语“糖尿病病况”指特征为葡萄糖产生和/或利用受损的病况，并且包括糖尿病(例如1型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病)、前驱糖尿病、代谢综合征、高血糖症，葡萄糖耐受受损和空腹血糖受损。
本文使用的术语“糖尿病”指通常特征为葡萄糖的产生和利用中的代谢缺陷的疾病或病况，其导致不能维持体内适当的血糖水平。如果对象的空腹血糖水平大于125mg/dl，负载2小时后葡萄糖读数大于200mg/d1或者hba1c水平大于或等于6.5％，则对象被鉴定为患有糖尿病。
如本文所使用的，术语“前驱糖尿病”指通常特征为葡萄糖耐受受损并且通常发生在对象中糖尿病发作之前。
如果对象的空腹血糖水平大于100mg/dl但小于或等于125mg/d1，负载2小时后葡萄糖读数大于140mg/d1但小于200mg/d1或者hba1c水平大于或等于6.0％但小于6.5％，则对象被鉴定为患有前驱糖尿病。
本文使用的术语“高血糖症”指体内升高的血糖水平，其由葡萄糖的产生和利用中的代谢缺陷引起。如果对象的空腹血糖水平始终超过126mg/d1，则将对象鉴定为高血糖。
本文使用的术语“超重”指体重指数为25kg/m2或更高但小于30kg/m2的个体。
本文使用的术语“体重指数”或“bmi”指体量与身高比度量，其对个体的体重是否适合其身高进行估计。如本文所使用的，个体的体重指数计算如下：bmi＝(磅×700)/(高度(以英寸计))2或bmi＝(千克)/(高度(以米计))2
本文使用的术语“基线体重”指个体在治疗开始时的体重。
本文使用的术语“肥胖(obese/obesity)”指由于过量脂肪组织而具有30kg/m2或更高的体重指数(bmi)的个体。肥胖也可以基于体脂含量来定义：男性体脂含量大于25％或女性体脂含量大于30％。“病态肥胖”个体的体重指数大于35kg/m2。
本公开的实施方案基于瑞帕利辛和/或ladarixin在预防糖尿病肾病(dn)的发作和发展以及进展中的治疗效力的实验证明。
详细地，本发明人已在糖尿病动物模型和糖尿病患者中发现il8在肾脏中在表达的定位和时间方面特异且可重复的表达模式。事实上，从实验部分可以明显看出，发现il8在内皮细胞和足细胞中特异性表达，并且仅在系膜扩张期间以显著水平表达。相反，在随后的肾小球损伤进展为结节转化和肾小球硬化期间，观察到il8表达水平的一致降低。在糖尿病动物模型中，本发明人证明用瑞帕利辛阻断kc/cxcr2轴可防止尿液白蛋白排泄增加以及肾小系膜扩张。此外，il8显示诱导足细胞的直接损伤，这可通过施用cxcr1/2抑制剂例如瑞帕利辛来抑制。实验部分表明，il8在糖尿病肾病发作和发展的病理学最初阶段中发挥重要作用，刺激系膜扩张和足细胞损伤。在此阶段后，其表达和致病作用逐渐下降。本发明人还鉴定了对应于针对抗il8疗法响应最强的患者，优选微量白蛋白尿患者的尿液il8水平。
因此，本发明的第一个目的是用于糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，其包括向有需要的对象施用。
本公开的第二个目的是提供il8抑制剂在对象中治疗糖尿病肾病或者预防、降低风险或者延迟糖尿病肾病的发作或进展中的用途，所述il8抑制剂优选cxcrl和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcrl和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
本发明的第三个目的是提供il8抑制剂在制备用于对象中治疗糖尿病肾病或者预防、降低风险或者延迟糖尿病肾病的发作或进展的药物中的用途，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
本公开的第四个目的是提供il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，其用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，在所述方法或用途中，对象已被诊断患有糖尿病。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，在所述方法或用途中，对象已被诊断患有1型糖尿病。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，在所述方法或用途中，对象已被诊断患有2型糖尿病。
因此，例如在现实生活中，预期当个体被诊断患有糖尿病(1型或2型)时，立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以预防糖尿病肾病的发作，糖尿病肾病可以随着糖尿病病况的持续和管理/治疗而发展。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，所述对象具有正常的蛋白尿。在本发明上述各目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，对象具有增加的蛋白尿。在一个实施方案中，增加的蛋白尿是在24小时内排泄至少300mg白蛋白。在一个实施方案中，所测量的蛋白质是白蛋白。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，对象患有微量白蛋白尿。
在一个实施方案中，术语“微量白蛋白尿”指任何疾病、病症、病况或健康状态，其中尿液白蛋白以约20-200μg/分钟或约30-300mg/24小时的速率在尿液中排泄(参见，例如abbott，kc等，arch.internalmed.754∶146-153(1994)，将其教导通过引用整体并入本文)。在另一实施方案中，术语“微量白蛋白尿”指任何疾病、病症、病况或健康状态，其中白蛋白以每天30至300mg在尿液中排泄。
检测和诊断微量白蛋白尿的方法是本领域技术人员众所周知的，并且包括放射免疫测定、用乳胶体进行的免疫测定、荧光免疫测定、酶免疫测定、凝集抑制、免疫比浊测定、免疫散射比浊测定和辐射免疫扩散测定。例如us5326707；us5492834、us5385847；us5750405、us20030027216；us20030232396，将其各自的内容通过引用整体并入本天。
因此，例如当糖尿病个体被诊断患有早期糖尿病肾病时(由微量白蛋白尿的出现证明)，立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其赖氨酸盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以治疗、预防和/或延迟糖尿病个体中糖尿病肾病的进展。
在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象生物样品中的il8水平高于il8参照标准，其中所述参照标准是未患有任何肾病和炎性疾病的统计学显著数目的非糖尿病个体相应生物样品中的平均il8水平。
可以使用多种测定生物样品中的il8水平的方法。例如，通过定量rt-pcr或通过基于免疫的分析(如elisa和蛋白质印迹)来测量il8的mrna水平。例如，酶联免疫吸附测定(elisa)中il8的单克隆抗体试剂描述于美国专利n.6133426和6468532中。将这些专利各自的内容通过引用整体并入本文。
在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象的尿液il-8水平高于il8参照标准，其中所述参照标准是未患任何肾病和炎性疾病的统计学显著数目的非糖尿病个体的平均il8尿液水平。在所述任何方法或用途的一个实施方案中，升高的il8水平意为与参照il8水平相比，至少增加至少10％。在所述任何方法的其他实施方案中，升高的il8水平意为与参照il8水平相比，至少增加至少约10％，至少约20％，或至少约30％，或至少约40％，或至少约50％，或至少约60％，或至少约70％，或至少约80％，或至少约90％，或高至且包括100％增加或者10-100％之间的任何增加，或者与参照il-8水平相比，增加至少约2倍，或至少约3倍，或至少约4倍，或至少约5倍或至少约10倍，或者2倍至10倍或更高之间的任何增加。
在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象在肾脏活组织检查中il8表达水平高于il8参照标准，其中所述参照标准是来自未患有任何肾病和炎性疾病的非糖尿病个体的肾脏活组织检查中的平均il8表达水平。在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，尿液il8的参照水平是来自未患有任何肾病和炎性疾病的非糖尿病个体的平均尿液il8水平。例如，平均水平是从未患有任何肾病和炎性疾病的10-25名非糖尿病个体的群体获得的。在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，尿液中蛋白质的参照水平是来自未患有任何肾病和炎性疾病的非糖尿病个体的平均尿蛋白水平。例如，平均水平是从未患有任何肾病和炎性疾病的10-25名非糖尿病个体的群体中获得的。
例如，在现实生活中，预期当个体被诊断患有糖尿病但尚未发生糖尿病肾病时(例如在具有正常蛋白尿的情况下)，则进一步测试该个体的il8水平。当已经证明该糖尿病个体具有增加或升高的il8水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以预防糖尿病肾病的发作。此外，当糖尿病个体发展为早期糖尿病肾病时，也测试该个体的il8水平。当已表明此个体也具有增加或升高的il8水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选瑞帕利辛和/或ladarixin，以治疗、预防和/或延迟该个体中糖尿病肾病的进展。
在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象的尿液il8水平至少高于2.41pg/ml。
在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象的尿液il8水平高于2.41pg/ml并且具有微量白蛋白尿。
如以下实验部分所证明的，该尿液il8水平鉴定处于病理学阶段的患者，其中il8起关键作用，因而响应用il8抑制剂进行的治疗性治疗。
根据本发明上述各目的的另一实施方案，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象的gfr(肾小球滤过率)值高于60ml/min/1.73m2，优选高于90ml/min/1.73m2。
如在实验部分所证明的，il8在非常早期的病理学阶段具有致病作用，此时肾小球的结构损伤尚不明显并且gfr下降尚未开始。因此，上述grf值鉴定处于病理学阶段的患者，其中il8具有关键作用，因而响应用il8抑制剂进行的治疗性治疗。
如将在实验部分所讨论的，本发明人还鉴定了与糖尿病肾病的发展相关的多种cxcr1受体基因的单核苷酸多态性。
因此，在本发明上述各目的的又一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514。
在本发明上述各目的的又一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象具有高hba1c。
在本发明上述各目的的又一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象未超重或肥胖。
在本发明上述各目的的又一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象超重或肥胖。
在本发明的上述各目的的又一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，对象是人。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)测量来自对象的肾脏活组织检查中il8的表达水平；(b)将所测量的il8表达水平与参照标准进行比较；(c)当所测量的il8水平高于il8参照标准时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酸]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，其中所述参照标准是来自未患有任何肾病或炎性疾病的非糖尿病患者的肾脏活组织检查的平均il-8表达水平。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)测量对象中的尿液il8水平；(b)将所测量的il8水平与参照标准进行比较；(c)当所测量的il8水平高于il8参照标准时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，其中所述参照标准是统计学显著数目的未患有任何肾病或炎性疾病的非糖尿病患者的平均尿液il8水平。
例如，在现实生活中，预期当对象被诊断患有糖尿病但尚未发展为糖尿病肾病时，进一步测试该个体的il8水平，并将该测量的il8水平与il8参照标准进行比较。当已证明该糖尿病对象与il8参照标准相比具有增加或升高的il8水平时，立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以预防或延迟糖尿病肾病的发作。此外，当糖尿病对象发展为早期糖尿病肾病时，进一步测试该对象的il8水平，并将该所测量的il8水平与il8参照标准进行比较。当已证明该糖尿病个体相对于参照il8水平具有增加或升高的il8水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选玄子下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以治疗、预防和/或延缓该糖尿病对象中糖尿病的进展。
在本发明第一个目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或发展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)测量对象中的尿液il8水平；(b)当所测量的尿液il8水平高于2.41pg/ml时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcrl和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcrl和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明第一个目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)测量从对象获得的尿液样品中的蛋白质水平；(b)将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照标准进行比较；和(c)当所测量的尿蛋白水平高于尿蛋白参照时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其赖氨酸盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，其中所述参照是统计学显著数目的未患有任何肾病的非糖尿病个体的平均尿蛋白水平。在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，尿液中蛋白质的参照水平是来自未患有任何肾病和炎性疾病的非糖尿病个体的平均尿蛋白水平。例如，平均水平是从未患有任何肾病和炎性疾病的10-25名非糖尿病个体的群体中获得的。
在实践中，例如预期当对象被诊断患有糖尿病但尚未发展为糖尿病肾病时，进一步测试该个体的尿蛋白水平，并将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照水平进行比较。当已证明该糖尿病对象与参照相比具有增加或升高的尿蛋白水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其赖氨酸盐，其钠盐(以下称为df2755a)，以预防或延迟糖尿病肾病的发作。此外，当糖尿病对象已发展为早期dn时，进一步测试该对象的尿蛋白水平，并将该测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照水平进行比较。当已证明与尿蛋白参照水平相比该糖尿病个体具有增加或升高的尿蛋白水平时，则立即施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以预防和/或延迟糖尿病对象中糖尿病肾病的进展。
在本发明第一个目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了在对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)测量来自对象的尿液中的白蛋白排泄速率；(b)当所测量的白蛋白排泄速率为30至300mg/天时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明第一个目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)确定对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性(snp)中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514；(b)当对象具有所述snp中的至少一种时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcrl和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcrl和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在现实生活实践中，例如预期当对象已被诊断患有糖尿病但尚未发展为糖尿病肾病时，进一步测试该个体基因组的所述snp。当已经证明该糖尿病对象具有所述snp中的至少一种时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其盐，其钠盐(以下称为df2755a)，以预防或延迟dn的发作。此外，当糖尿病对象已经发展为早期糖尿病肾病时，进一步测试该个体基因组的所述snp。当已经证明该糖尿病对象具有所述snp中的至少一种时，则立即施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其钠盐(下文称为df2755a)，以预防和/或治疗和/或延迟该对象中糖尿病肾病的发作或进展。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或的方法，该方法包括：(a)确定对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性(snp)中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514；(b)测量对象中的尿液il8水平；(c)将所测量的il8水平与参照进行比较；(d)当对象具有所述snp中的至少一种，并且相对于参照具有增加的il8时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，其中所述参照是统计学显著数目的未患有任何肾病或炎性疾病的非糖尿病个体的平均尿液il8水平。
在本发明第一个目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)确定对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性(snp)中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514；(b)测量来自对象的肾脏活组织检查中的il8表达水平；(c)将所测量的il8表达水平与参照进行比较；以及(d)当对象具有所述snp中的至少一种，并且相对于参照具有增加的il8表达时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，其中所述参照是未患有肾病或炎性疾病的非糖尿病个体中的平均肾脏il8表达水平。
在实践中，例如预期当对象已被诊断患有糖尿病或患有糖尿病病况但尚未发展为dn时，进一步测试该个体基因组的所述snp，并且进一步测试该个体的il8水平，以及将所测量的il8水平与参照il8进行比较。当已证明该糖尿病对象具有所述snp中的至少一种，并且与参照il8相比具有增加或升高的il8水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以预防或延迟糖尿病肾病的发作。此外，当糖尿病对象已发展为早期糖尿病肾病时，进一步测试该个体基因组的所述snp，并且进一步测试该个体的il8水平，以及将该测量的il8水平与参照il8进行比较。当已经证明该糖尿病对象具有所述snp中的至少一种，并且证明相对于参照il-8水平具有增加或升高的il8水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以治疗、预防和/或延迟该糖尿病对象中糖尿病肾病的进展。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)确定对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性(snp)中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514；(b)测量对象中的尿蛋白水平；(c)将所测量的蛋白质水平与蛋白质参照进行比较；(d)当对象具有所述snp中的至少一种，并且尿液中的蛋白质增加时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。在一个实施方案中，该方法还包括从对象获得尿液样品用于蛋白质水平分析。在实践中，预期当对象被诊断患有糖尿病但尚未发展为dn时，进一步测试该个体基因组的所述snp，并且进一步测试该个体的尿蛋白水平，以及将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照水平进行比较。当已证明该糖尿病对象具有所述snp中的至少一种，并且证明相对于参照水平具有增加或升高的尿蛋白水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更多优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以预防或延迟dn的发作。此外，当糖尿病对象发展为早期糖尿病肾病时，进一步测试该个体基因组的所述snp，并且进一步测试该个体的尿蛋白水平，以及将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照水平进行比较。当已经证明该糖尿病对象具有所述snp中的至少一种，并且证明相对于尿蛋白参照水平具有增加或升高的尿蛋白水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以治疗、预防和/或延迟该糖尿病对象中糖尿病肾病的进展。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)测量从对象获得的样品中的il8水平；(b)将所测量的il8水平与参照进行比较；(c)测量从对象获得的样品中的蛋白质水平；(d)将所测量的蛋白质水平与蛋白质参照进行比较，以及(e)当对象尿液中的il8和蛋白质增加时，向对象施用瑞帕利辛和/或ladarixin。在一个实施方案中，用于蛋白质水平分析的样品是尿液样品。在一个实施方案中，该方法还包括从对象获得尿液样品用于蛋白质水平分析。在一个实施方案中，用于il8水平分析的样品是尿液、血清、血液或血浆样品。在一个实施方案中，该方法还包括从对象获得样品用于il8分析。在实践中，当对象被诊断患有糖尿病但尚未发展为dn时，进一步测试该个体的il8水平，并将所测量的il8水平与参照il8进行比较，并进一步测试尿蛋白水平，以及将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照水平进行比较。当已证明该糖尿病对象与参照il8相比具有增加或升高的il8水平，并且还证明相对于尿蛋白参照水平具有增加或升高的尿蛋白水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以预防或延迟dn的发作。此外，当糖尿病对象已发展为早期dn时，进一步测试该对象的il8水平，并将所测量的il8水平与il8参照进行比较，以及进一步测试尿蛋白水平，并将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照水平进行比较。当已经证明该糖尿病对象与参照il8相比具有增加或升高的il8水平，并且还证明相对于尿蛋白参照水平具有增加或升高的尿蛋白水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以治疗、预防和/或延迟该糖尿病对象中dn的进展。
在本发明第一个目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，本文提供了用于对象中糖尿病肾病的治疗或者糖尿病肾病的发作或进展的预防、风险降低或延迟的方法，该方法包括：(a)确定对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性(snp)中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514；(b)测量从对象获得的样品中的il8水平；(c)将所测量的il8水平与参照进行比较；(d)测量从对象获得的样品中的蛋白质水平；(e)将所测量的蛋白质水平与蛋白质参照进行比较，以及(f)当对象具有所述snp中的至少一种，在尿液中具有增加的蛋白质并且具有增加的il8时，向对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。在一个实施方案中，用于蛋白质水平分析的样品是尿液样品。在一个实施方案中，该方法还包括从对象获得尿液样品用于蛋白质水平分析。在一个实施方案中，用于il8水平分析的样品是尿液、血清、血液或血浆样品。在一个实施方案中，该方法还包括从对象获得样品用于il8分析。在现实生活实践中，当对象被诊断患有糖尿病但尚未发展为糖尿病肾病时，进一步测试该个体基因组的所述snp，并且进一步测试该个体的il8水平以及测试尿蛋白水平。将所测量的il8水平与参照il8进行比较，并将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照水平进行比较。当已证明该糖尿病对象具有所述snp中的至少一种，并且证明与参照il8相比具有增加或升高的il8水平，以及相对于尿蛋白参照水平具有增加或升高的尿蛋白水平时，则立即预防性施用瑞帕利辛和/或ladarixin，以预防糖尿病肾病的发作。此外，当糖尿病对象已发展为早期糖尿病肾病时，进一步测试该个体基因组的所述snp，并且进一步测试该个体的il8水平以及测试尿蛋白水平。将所测量的il8水平与参照il8进行比较，并将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照水平进行比较。当已证明该糖尿病对象具有所述snp中的至少一种，并且证明与参照il8相比具有增加或升高的il8水平，以及相对于尿蛋白参照水平具有增加或升高的尿蛋白水平时，则立即预防性施用il8抑制剂，优选cxcrl和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcrl和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，以预防和/或延迟该糖尿病对象中糖尿病肾病的进展。预期早期应用il8抑制剂将延长这些个体中终末期肾脏疾病或慢性肾衰竭的持续时间，所述il-8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，向对象施用有效量的il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[将4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时与任何前述实施方案组合，在所述方法或用途中，向对象施用与药学可接受的载体混合的有效量的il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，向对象施用包含有效量的il8抑制剂的组合物，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4)-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。优选地，所述组合物包含药学可接受的载体。优选地，所述组合物还包含至少一种其他活性分子用于糖尿病和/或代谢综合征和/或心血管疾病和/或高血压。
例如，通常使用一种药物或药物的组合来治疗糖尿病，所述药物包括磺酰脲类、氯茴苯酸类、双胍类、噻唑烷二酮类、α-葡糖苷酶抑制剂和dpp-4抑制剂。在所述任何方法的一个实施方案中，将il8抑制剂与至少一种活性分子一起施用以治疗糖尿病，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)，所述活性分子优选选自磺酰脲类、氯茴苯酸类、双胍类、噻唑烷二酮类、α-葡糖苷酶抑制剂和dpp-4抑制剂。
例如，所述至少一种其他活性分子是胰岛素、血管紧张素转换酶(ace)抑制剂、血管紧张素-ii受体拮抗剂(aiira)、降低血液hba1c的药物或药剂(例如美国专利号8440655中描述的替仑西平和舍曲林，将其内容通过引用整体并入本文)。在所述任何方法的一个实施方案中，将il8抑制剂与包括ace抑制剂、aiira、替仑西平和舍曲林的至少一种活性成分一起施用，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，将il8抑制剂与一种或多种抗糖尿病药剂联合施用，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的另一实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，将il8抑制剂与至少一种用于糖尿病和/或代谢综合征和/或心血管疾病和/或高血压的其它活性分子一起施用，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(2-)三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，全身施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，以持续释放配制剂形式施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，以亚治疗量施用il8抑制剂，优选cxcrl和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcrl和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，同时与任何前述实施方案组合，在所述方法或用途中，以治疗有效量施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在本发明上述各目的的一个实施方案中，同时结合任何前述实施方案，在所述方法或用途中，以预防有效量施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
在一个实施方案中，将il8抑制剂或其药物组合物配制为用于全身递送，所述il抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。在一个可选实施方案中，可将il8抑制剂及其药物组合物配制为递送至特定器官，例如但不限于肾脏，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。在可选实施方案中，可将il8抑制剂或其药物组合物配制为通过吸入肺的气雾剂应用，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选地选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。可选地，可将il8抑制剂或其药物组合物配制为透皮递送，例如皮肤贴剂，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。在一些实施方案中，可以肠溶性包被il8抑制剂或其药物组合物并配制为口服递送，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。在一些实施方案中，可将il8抑制剂或其药物组合物包封进脂质体或纳米颗粒中并配制为体内缓释递送，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。还预期包含il8抑制剂或其药物组合物的持续释放配制剂，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。例如，用于每周施用一次的持续释放配制剂。可选地，可将il8抑制剂或其药物组合物配制为靶向递送，例如包封进所设计的脂质体或纳米颗粒中，其以脂质体或纳米颗粒上的靶向部分为特征，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
可将il8抑制剂或其药物组合物配制并通过任何已知途径施用。例如，可以通过粘膜、肺部、局部或其他局部或全身途径(例如肠内和肠胃外)施用il8抑制剂及其组合物。可以通过任何方便的途径施用il8抑制剂，例如通过输注或弹丸式注射，通过上皮或粘膜皮肤内膜(例如口腔粘膜、直肠和肠粘膜等)吸收，并且可以与其它生物活性剂一起使用，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
施用途径包括但不限于气溶胶、直接注射、皮内、透皮(例如缓释聚合物的形式)、玻璃体内、肌肉内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内、硬膜外、局部、口服、经粘膜、颊部、直肠、阴道、透皮、鼻内和肠胃外途径。“肠胃外”指通常与注射相关的施用途径，包括但不限于眶内、输注、动脉内、囊内、心内、真皮内、肝内、器官内、肌肉内、腹膜内、肺内、脊柱内、胸骨内、鞘内、子宫内、静脉内、蛛网膜下腔、囊下、皮下、经粘膜或经气管。可以使用任何其他治疗有效的施用途径，例如输注或弹丸式注射，通过上皮或粘膜皮肤内膜吸收。在多个实施方案中，施用可以经气雾剂施用而吸入肺部，例如利用雾化。施用也可以是全身或局部的。
例如，可将il8抑制剂或其药物组合物作为适于全身递送的配制剂施用。在一些实施方案中，可将il8抑制剂或其药物组合物作为适于递送至特定器官例如但不限于肾脏的配制剂施用，所述il8抑制剂优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选cxcr1和cxcr2抑制剂，甚至更优选选自下述的化合物：r(-)-2-[(4-异丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(以下称为瑞帕利辛)或其盐，优选其赖氨酸盐；r(-)-2-[(4’-三氟甲烷磺酰氧基)苯基]-n-甲磺酰基丙酰胺(以下称为ladarixin)或其盐，优选其钠盐；以及(2s)-2-(4-{[4-(三氟甲基)-1，3-噻唑-2-基]氨基}苯基)丙酸(以下称为df2755y)或其盐，优选其钠盐(以下称为df2755a)。
此外，可将il8抑制剂或其药物组合物与生物活性剂的其他组分一起施用，如药学可接受的表面活性剂(例如甘油酯)、赋形剂(例如乳糖)、载体、稀释剂和媒介物。
可在施用用于糖尿病、代谢综合征、心血管疾病和高血压的至少一种疗法之前、同时或之后，向对象治疗性施用il8抑制剂或其药物组合物。
对于肠胃外(例如静脉内、皮下、肌肉内)施用，可将il8抑制剂或其药物组合物配制为与药学可接受的肠胃外媒介物结合的溶液、悬浮液、乳液或冻干粉末。此类媒介物的实例是水、盐水、林格氏溶液、右旋糖溶液和5％人血清白蛋白。也可以使用脂质体和非水性媒介物如固定油。媒介物或冻干粉末可以包含维持等渗性(例如氯化钠、甘露醇)和化学稳定性(例如缓冲剂和防腐剂)的添加剂。通过常规技术对配制剂进行灭菌
向对象施用的剂量将根据多种因素而变化，包括特定抑制剂的药效学特征及其施用方式和途径；接受者的大小、年龄、性别、健康、体重和饮食；所治疗的疾病症状的性质和程度、同时治疗的种类、治疗的频率和期望的效果。
通常，il8抑制剂的日剂量可以是约1至100毫克/千克体重，优选5至80毫克/千克/天。优选地，通过口服施用以每天1至5次分剂量给药或者通过连续输注5至10天的1个或多个周期给予可获得期望结果。第二次或后续施用可以是与施用于个体的初始或在先剂量相同、小于或大于的剂量。
第二次或后续施用优选在复发或者疾病或疾病症状突然发作期间或之前立即施用。例如，可以在前一次施用后约一天至30周给予第二次和后续施用。根据需要，可以向个体总共递送两次、三次、四次或更多次施用。
在配方中使用的精确剂量还将取决于施用途径以及疾病或病症的严重性，并且应根据执业医师的判断和每个患者的情况来决定。可从来自体外或动物模型测试系统的剂量-应答曲线推测有效剂量。
可以使用本文描述的方法在治疗过程中进行效力测试。在治疗开始之前，接着在治疗开始后的特定时间段，注意与具体疾病相关的许多症状的严重程度的测量。
在药剂的配方中使用的精确剂量还取决于施用途径以及疾病或病症的严重性，并且应根据执业医师的判断和每个患者的情况来决定。可从来自体外或动物模型测试系统的剂量-应答曲线推测有效剂量。
可以使用本文描述的方法在治疗过程中进行效力测试。在治疗开始之前，接着在治疗开始后的特定时间段，注意与具体疾病相关的许多症状的严重程度的测量。例如，在治疗时。
技术人员将会理解，某些因素可影响有效治疗对象所需的剂量和时间，包括但不限于疾病或病症的严重程度、在先的治疗、对象的一般健康状况和/或年龄以及存在的其他疾病。剂量水平还可以取决于肾病的程度、症状的严重程度和对象对副作用的敏感性。用治疗有效剂量治疗对象可包括单次治疗或一系列治疗。如本领域已知的，或如本文所述，il8抑制剂的有效剂量和体内半衰期的估计可以使用常规方法或基于使用合适的动物模型的体内测试进行。本领域技术人员可通过多种方式容易地确定优选剂量。
可以根据任何以下编号段落来限定本文描述的技术的一些实施方案：
[1]在需要的对象中预防糖尿病肾病的发作或糖尿病肾病(dn)的进展的方法，其包括向已被诊断患有糖尿病的所述对象施用il8抑制剂，优选cxcr1和/或cxcr2抑制剂，更优选瑞帕利辛(reparixin)和/或ladarixin。
[2]在需要的对象中预防糖尿病肾病(dn)的发作或糖尿病肾病的进展的方法，其包括向已被诊断患有糖尿病并具有升高水平的il8的所述对象施用瑞帕利辛和/或ladarixin。
[3]如段落1或2所述的方法，其中所述糖尿病是1型糖尿病(t1d)。
[4]如段落1或2所述的方法，其中所述糖尿病是2型糖尿病(t2d)。
[5]如段落1-4中任一项所述的方法，其中所述对象具有正常的蛋白尿。
[6]如段落1-4中任一项所述的方法，其中所述对象具有增加的蛋白尿。
[7]如段落1-6中任一项所述的方法，其中所述对象在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514。
[8]如段落1-7中任一项所述的方法，其还包括测量来自所述对象的尿液样品中的蛋白质水平。
[9]如段落1-8中任一项所述的方法，其还包括选择具有蛋白尿的对象。
[10]如段落1-9中任一项所述的方法，其还包括从所述对象获得尿液样品用于尿蛋白水平分析。
[11]如段落8-10中任一项所述的方法，其还包括将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照进行比较。
[12]如段落11所述的方法，其中所述尿蛋白参照是在未患任何肾病的正常健康对象中获得的尿液样品中的蛋白质水平。
[13]如段落1-12中任一项所述的方法，其还包括测量从所述对象获得的样品中的il8水平。
[14]如段落13所述的方法，其中所述样品是尿液样品。
[15]如段落13所述的方法，其中所述样品是血清、血液或血浆样品。
[16]如段落13-15中任一项所述的方法，其还包括将所测量的il8水平与il8参照进行比较。
[17]如段落16所述的方法，其中所述il8参照是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的相应样品中的il8水平。
[18]如段落1-17中任一项所述的方法，其还包括确定所述对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514。
[19]在已被诊断患有糖尿病和微量白蛋白尿的对象中预防糖尿病肾病(dn)的发作或糖尿病肾病(dn)的进展的方法，所述方法包括：
a)测量从所述对象获得的样品中il8的水平；和
b)当所测量的il8水平至少高于2.41pg/ml时，向所述对象施用瑞帕利辛和/或ladarixin。
[20]如段落19所述的方法，其中所述糖尿病是1型糖尿病(t1d)。
[21]如段落19所述的方法，其中所述糖尿病是2型糖尿病(t2d)。
[22]如段落19-21中任一项所述的方法，其中所述样品是尿液样品。
[23]如段落19-21中任一项所述的方法，其中所述样品是血清、血液或血浆样品。
[24]如段落19-23中任一项所述的方法，其中所述对象具有正常的蛋白尿。
[25]如段落19-23中任一项所述的方法，其中所述对象具有增加的蛋白尿。
[26]如段落19-25中任一项所述的方法，其中所述对象在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514。
[27]如段落19-26中任一项所述的方法，其还包括测量来自所述对象的尿液样品中的蛋白质水平。
[28]如段落19-27中任一项所述的方法，其还包括从所述对象获得尿液样品用于蛋白质水平分析。
[29]如段落19-28中任一项所述的方法，其还包括将尿蛋白水平与尿蛋白参照进行比较。
[30]如段落19-29中任一项所述的方法，其中所述尿蛋白参照是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的尿液样品中的蛋白质水平。
[31]如段落19-30中任一项所述的方法，其中所述il8参照是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的相应样品中的il8水平。
[32]如段落19-31中任一项所述的方法，其还包括确定所述对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514。
[33]在已被诊断患有糖尿病的对象中预防糖尿病肾病(dn)的发作或糖尿病肾病(dn)的进展的方法，所述方法包括：
a)测量从所述对象获得的尿液样品中的蛋白质水平；
b)将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照进行比较；和
c)当所测量的尿蛋白水平高于尿蛋白参照时，向所述对象施用瑞帕利辛和/或ladarixin。
[34]如段落33所述的方法，其中所述糖尿病是1型糖尿病(t1d)。
[35]如段落33所述的方法，其中所述糖尿病是2型糖尿病(t2d)。
[36]如段落33-35中任一项所述的方法，其中所述尿蛋白参照是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的尿液样品中的蛋白质水平。
[37]如段落33-35中任一项所述的方法，其还包括测量从所述对象获得的样品中的il8水平。
[38]如段落37所述的方法，其中所述样品是尿液样品。
[39]如段落37所述的方法，其中所述样品中是血清、血液或血浆样品。
[40]如段落33-39中任一项所述的方法，其还包括将所测量的il8水平与il8参照进行比较。
[41]如段落40所述的方法，其中所述il8参照是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的相应样品中的il8水平。
[42]如段落33-41中任一项所述的方法，其还包括确定所述对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514。
[43]在已被诊断患有糖尿病的对象中预防糖尿病肾病(dn)的发作或糖尿病肾病(dn)的进展的方法，所述方法包括：
a)确定所述对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性(snp)中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514；
b)当所述对象具有所述snp中的至少一种时，向所述对象施用瑞帕利辛和/或ladarixin。
[44]如段落43所述的方法，其中所述糖尿病是1型糖尿病(t1d)。
[45]如段落43所述的方法，其中所述糖尿病是2型糖尿病(t2d)。
[46]如段落43-45中任一项所述的方法，其中所述对象具有正常的蛋白尿。
[47]如段落43-45中任一项所述的方法，其中所述对象具有增加的蛋白尿。
[48]如段落43-47中任一项所述的方法，其还包括测量来自所述对象的尿液样品中的蛋白质水平。
[49]如段落43-48中任一项所述的方法，其还包括从所述对象获得尿液样品用于尿蛋白水平分析。
[50]如段落49所述的方法，其还包括将所测量的尿蛋白水平与尿蛋白参照进行比较。
[51]如段落50所述的方法，其中所述尿蛋白参照是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的尿液样品中的蛋白质水平。
[52]如段落43-51中任一项所述的方法，其还包括测量从所述对象获得的样品中的il8水平。
[53]如段落52所述的方法，其中所述样品是尿液样品。
[54]如段落52所述的方法，其中所述样品是血清、血液或血浆样品。
[55]如段落52-54中任一项所述的方法，其还包括将所测量的il8水平与il8参照进行比较。
[56]如段落55所述的方法，其中所述il8参照是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的相应样品中的il8水平。
[57]治疗需要治疗的对象中的糖尿病肾病(dn)的方法，所述方法包括向所述对象施用瑞帕利辛和/或ladarixin。
[58]如段落57所述的方法，其中所述对象患有1型糖尿病(t1d)。
[59]如段落57所述的方法，其中所述对象患有2型糖尿病(t2d)。
[60]如段落57-59中任一项所述的方法，其中所述对象具有升高的il8水平。
[61]如段落57-60中任一项所述的方法，其中所述对象具有正常的蛋白尿。
[62]如段落57-61中任一项所述的方法，其中所述对象具有增加的蛋白尿。
[63]如段落57-62所述的方法，其还包括测量从所述对象获得的样品中的il8水平。
[64]如段落63所述的方法，其中所述样品是尿液样品。
[65]如段落63所述的方法，其中所述样品是血清、血液或血浆样品。
[66]如段落63-65中任一项所述的方法，其还包括将测量的il8水平与il8参照进行比较。
[67]如段落66所述的方法，其中所述il8参照是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的相应样品中的il8水平。
[68]如段落57-67中任一项所述的方法，其中所述对象在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514。
[69]如段落57-68所述的方法，其还包括确定对象是否在cxcr1基因座处具有下述单核苷酸多态性中的至少一种：s13006838、rs4674308；rs4674309；rs3755042；rs7601872；和rs664514。
[70]如段落1-69中任一项所述的方法，其中所述对象的肾小球滤过率(gfr)值高于60ml/min/1.73m2。
[71]如段落70所述的方法，其中所述对象的肾小球滤过率值高于90ml/min/1.73m2。
[72]如段落1-71中任一项所述的方法，其中所述对象尿液的il8水平高于2.41pg/ml。
[73]如段落1-71中任一项所述的方法，其中所述对象测量的白蛋白排泄速率为每天30至300mg。
[74]治疗方法，所述方法包括：
a)确定对象尿液样品中il8的水平；和
b)当il8水平比参照水平高至少3倍时，向所述对象施用有效量的瑞帕利辛和/或ladarixin。
[75]如段落74所述的方法，其还包括对患有糖尿病的对象进行诊断。
[76]如段落74所述的方法，其中所述样品是尿液样品。
[77]如段落63所述的方法，其中所述样品是血清、血液或血浆样品。
[78]如段落74所述的方法，其中所述参照水平是在未患有任何肾病的正常健康对象中获得的相应样品中的il8水平。
[79]治疗高血糖症的方法，所述方法包括：
a)对患有高血糖症的患者进行诊断；和
b)向所述患者施用有效量的瑞帕利辛和/或ladarixin。
[80]治疗高血糖症的方法，所述方法包括：向有此需要的患者施用有效量的瑞帕利辛和/或ladarixin。
[81]包含瑞帕利辛和/或ladarixin或者由瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物，其用于对象中治疗糖尿病肾病或者预防或降低风险或延迟糖尿病肾病的发作或进展。
[82]包含瑞帕利辛和/或ladarixin或者由瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物，其用于制备用于对象中治疗糖尿病肾病或者预防或降低风险或者延迟糖尿病肾病的发作或进展的药物。
[83]包含瑞帕利辛和/或ladarixin或者由瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物在对象中治疗糖尿病肾病或者预防或降低风险或者延迟糖尿病肾病的发作或进展中的用途。
[84]包含瑞帕利辛和/或ladarixin或者由瑞帕利辛和/或ladarixin组成或者基本上由瑞帕利辛和/或ladarixin组成的组合物在制备用于对象中治疗糖尿病肾病或者预防或降低风险或者延迟糖尿病肾病的发作或进展的药物中的用途。
通过以下实施例进一步阐明本发明的实施方案，所述实施例不应解释为限制性的。将贯穿本申请引用的所有参考文献的内容以及附图和表格通过引用并入本文。
本领域技术人员将认识到或者能够使用不超过常规实验来确定本文所述的本发明具体实施方案的许多等同物。这些等同物旨在由以下权利要求涵盖。
将本文引用的参考文献和整个说明书通过引用并入本文。
实施例
简介
在糖尿病所带来的多种并发症中，慢性肾病(ckd)已被确定为对日常生活和经济成本负担最高的并发症。ckd增加了过早死亡和终末期肾病(esrd)的风险1。在过去的二十年中，由糖尿病导致的终末期肾病(esrd)的发病率一直在增加。在西方世界超过三分之一的患者中，糖尿病是esrd的主要原因2。新诊断的2型糖尿病(t2d)患者中，超过5％已经患有糖尿病肾病，并且另外30％至40％通常在诊断后的10年内将会发展为糖尿病肾病(dn)3，4，5。
患有t2d的患者的免疫系统发生变化。在这些患者中已经描述了升高的细胞因子、趋化因子和急性时相蛋白水平6，7；已证明免疫学特征的改变可增加细胞凋亡和组织纤维化8。与对照相比，患有1型糖尿病(t1d)的患者的尿液il8水平高6至7倍9。此外，具有白蛋白尿的t1d患者中，基线时尿液il8水平最高的那些患者肾功能衰退更快。
il8是趋化因子，其可以由白细胞如单核细胞10、t淋巴细胞、巨噬细胞11产生，或者由非白细胞群如内皮细胞12、足细胞13、近端肾小管上皮细胞14产生。该趋化因子具有两种受体cxcr-1和cxcr-2，其由白细胞如嗜中性粒细胞、单核细胞、cd8t细胞，肥大细胞、自然杀伤细胞表达，并且也由非白细胞如内皮细胞12、足细胞13、成纤维细胞11表达。
在患有糖尿病的患者中，高血糖症可以引发il8的产生，从而刺激cxcr1/2以自动和旁分泌方式表达。cxcr1/2的激活通过cxcr1/2细胞质尾部在足细胞和内皮细胞内扩散，这通过与α3β1-整合素的细胞质尾部竞争结合踝蛋白(这对于α3β1-整合素的活性是必需的；图6)来确定α3β1-整合素的失活。这种竞争性结合导致桩蛋白失活，伴随着足细胞生理结构丧失和对肾小球基底膜的粘附。cxcr1/2激活还导致mtor通路的激活，引起代谢改变和氧化损伤。总之，这些病理学改变最终导致足细胞结构和功能异常以及蛋白尿的发展(图7a-6e和图8a-7f)。本文所述的发明显示，用临床上可获得的cxcr1/2拮抗剂中和il8信号转导将降低体外足细胞病的程度和体内肾损伤的进展，并为dn提供新的治疗工具。
实施例1
在体内stz诱导的c57bl/6糖尿病小鼠的肾小球中cxcr2和kc表达逐渐增加并且定位于内皮细胞和足细胞中。
在dndb/db糖尿病小鼠的一个模型中，评估了stz诱导的c57bl/6糖尿病小鼠kc(人il8的鼠同源物)及其受体cxcr2(人cxcr2的鼠同源物)的体内表达。糖尿病在本文中定义为连续3天血糖水平＞250mg/dl。使用bdlogic血糖仪(bectondickinson，franklinlakes，nj)测量血清中的葡萄糖水平。在第7周，db/db小鼠呈现高血糖症但不是dn。c57bl/6小鼠和c57bl/6jlepdb/db获自jackson实验室(barharbor，maine)。将小鼠在无病原体环境中饲养；随意提供水和食物。所有小鼠均为雄性，并按照波士顿儿童医院和哈佛医学院的动物护理和饲养指南进行护理和使用。机构动物护理和使用委员会批准了该协议。
使用标准技术手术切除来自8周龄、12周龄和25周龄db/db小鼠的肾脏。为了进行标准光学显微镜检查，将肾脏固定在4％缓冲多聚甲醛(pfa)中，脱水并用石蜡包埋。使用axiovision软件4.3记录来自periodicacidschiff(pas)和trichrome染色的图像。使用基于axiovision分析模块(carlzeissspa，thornwood，ny)建立的的宏进行肾小球系膜基质的评估。将肾小球鉴定为目标区域(roi)，并通过颜色阈值方案突出显示系膜。然后产生二元图像，并自动计算系膜占肾小球面积的百分比。使用zeissaxioscope40fl显微镜和axiocammrc5数字摄像机(carlzeissspa)进行图像采集。使用axiovision软件4.3记录图像，并使用axiovision分析模块分析结果(carlzeissspa)。
kc和cxcr2表达在糖尿病小鼠12周龄时肾小球水平增加，并且表达在28周龄时达到峰值(数据未显示)。此外，在28周时，cxcr2和kc的表达与cd31(内皮细胞标志物)和突触足蛋白(足细胞特异性标志物)在db/dbc57bl/6糖尿病小鼠体内共定位于肾小球水平(数据未显示)。相反，获自7周(基线)龄非糖尿病c57bl/6对照小鼠的肾脏不表达cxcr2和kc。
实施例2
利用瑞帕利辛阻断kc/cxcr2轴，防止db/db小鼠中尿液白蛋白排泄(uae)增加并减轻系膜扩张。
为了评估il8阻断在dn进展中的潜在作用，用瑞帕利辛处理7周龄db/db小鼠，15mg/kg(ip)，一天两次，持续18周(直至25周龄)。简言之，将动物饲养在代谢笼(nalgene)中以在光控环境中分离排泄物和尿液，并随意提供水。样品收集管通过笼子下方并通过光控环境底部的小孔。
在第8、12和25周通过代谢笼收集来自db/db小鼠的尿液样品。根据制造商的方案使用beadlytemousemulti-cytokinebeadmasterkit(millipore，billerica，ma)来测定细胞因子il8的水平。简言之，将上清液与单独缀合il8的珠子孵育指定时间，然后与生物素化的报告分子和链霉亲和素-藻红蛋白溶液孵育30分钟。使用luminex100读数器(luminexcorporation，austin，tx)测量样品细胞因子水平。
虽然在未处理的对照小鼠中尿液白蛋白排泄增加，但在瑞帕利辛处理的小鼠中，尿液白蛋白水平随时间保持稳定(图1和图11b)，并且显著低于25周龄的对照糖尿病db/db小鼠，显示在最近时间点的显著时间-治疗相互作用(瑞帕利辛处理-25周＝211.1±24.4对比对照-25周＝353.8±99.4ug/ml，p＜0.01；图1)。在治疗组中未观察到对血糖控制的影响(图11a)。对来自上述动物的肾脏活组织切片进行组织病理学检查，并且瑞帕利辛处理显示对25周龄的db/db小鼠的肾脏具有保护作用，与对照小鼠相比，治疗的动物中系膜扩张明显减少(数据未显示)。
实施例3
il8激发引起体外应力纤维损失、皮质肌动蛋白的剂量依赖性增加以及足细胞中细胞出泡。
培养携带sv40t抗原热敏(ts58a)变体转基因的人足细胞，使其响应干扰素-γ用于增殖，并使其在33℃下生长至80％融合(指定为第0天)。然后将细胞热变至37℃，引起sv40t抗原失活和细胞复制停止。将足细胞在不同葡萄糖浓度(正常葡萄糖：5mm[ng]；高葡萄糖：30mm[hg])下培养5天。使用甘露醇作为高葡萄糖的渗透对照(甘露醇20mm+葡萄糖10mm)(图10a和图10b)。
使足细胞在圆形玻璃盖玻片(vwr，radnor，pa)上生长，用多聚甲醛固定，然后用0.3％tritonx-100(fisherscientific，waltham，ma)通透。将细胞与罗丹明鬼笔环肽(invitrogen，carlsbad，ca)一起孵育，以标记f-肌动蛋白网络并使应力纤维可视。使用标准荧光显微镜评估应力纤维形成。通过手动细胞计数评估含有完整肌动蛋白丝的细胞百分比。
在体外用100nm剂量的il8处理均引起人足细胞应力纤维损失(通过鬼笔环肽染色测量；对照对比il8，p＜0.05；图2a)、皮质肌动蛋白剂量依赖性增加、细胞出泡以及突触足蛋白c表达(对照对比il8，p＜0.05；图2b)，在ng和hg(数据未显示)条件下均如此，；后者与il8协同作用。这些数据支持il8诱导足细胞直接损伤的假设。
有趣的是，100μm剂量的瑞帕利辛处理在ng(数据未显示)和hg(数据未示出；以及图2a、图2b、图10a和图10b)中均能够挽救足细胞免于il8诱导的损伤(应力纤维的损失；皮质肌动蛋白增加；细胞出泡以及突触蛋白表达的丧失)。
实施例4
il8在患有t2d和dn的子集患者中在肾小球水平表达，并与cd-31和突触足蛋白共定位。
如上所述，通过免疫组织化学分析测量30名处于不同严重性阶段(从不太严重到越来越严重：系膜扩张；结节转化；和肾小球硬化)的2型糖尿病(t2d)和dkd的患者和来自对照个体(手术切除受癌症影响的肾脏)(数据未显示)的肾脏活组织检查中il8的表达。来自该组的组织学数据由fiorina等在2013年发表。知情同意书在患者签署之前由hospitalsancarlo(milan，italy)的机构审查委员会和/或aziendaospedalieradiparma，parma，italy的机构审查委员会批准。获得每位患者的病史记录，并由血清和尿液样品获得肾功能数据。作为对照，使用来自接受肾单侧肾切除术的肾癌患者(n＝10)未改变的肾蒂组织学样品。
将用于常规光学显微镜染色的材料在4％缓冲多聚甲醛(pfa)中固定，脱水和石蜡包埋。使用axiovision软件4.3记录来自pas和trichrome染色的图像，并且通过基于axiovision分析模块(carlzeissspa，thornwood，ny)建立的宏电子地进行系膜基质的评估。简言之，将肾小球鉴定为目标区域(roi)，通过颜色阈值程序突出显示系膜。然后产生二元图像，并将系膜自动计算为肾小球面积的百分比。使用zeissaxioscope40fl显微镜和axiocammrc5数字摄像机(carlzeissspa)进行图像采集。使用axiovision软件4.3记录图像，并使用axiovision分析模块分析结果(carlzeissspa)。抗人il8抗体获自abcam(cambridge，ma)。将每个样品40个肾小球的染色评估为每个肾小球的阳性点的数目。如图3a和图3b所示，发现了肾损伤阶段与il8表达之间的相关性。发现il8表达在早期损伤阶段达到峰值，并且在肾实质细胞性丧失和纤维化发作后逐渐减少(数据未显示；图7a和图7b)。在系膜表达期间，肾小球中il8的表达最高(数据未显示；图3a和表2)：平均gfr＝91.43±7.74ml/min/1.73m2；il8组织病理学评分：3±0.0任意单位(au))。在肾小球损伤向结节转化的进展中观察到il8染色持续减少(数据未显示；图3a和表2)：平均gfr＝62.29±6.75ml/min/1.73m2；il8组织病理学评分：1.5±0.41任意单位(au))和肾小球硬化(数据未显示；图3a；和表2：平均gfr＝48.25±8.52ml/min/1.73m2；il8组织病理学评分：0.0±0.0任意单位(au))。对照对象具有完全保全的肾小球并且不存在il8染色(数据未显示；和图3a)。
此外，对上述活组织检查进行rt-pcr显示，与对照个体相比，t2d患者中il8mrna水平上调(il8mrna：糖尿病患者对比对照：3倍增加，p＜0.05；图3b)。简言之，使用trizol试剂(invitrogen)提取来自纯化的肾小球的rna，并根据制造商的说明书使用taqman分析(lifetechnologies，grandisland，ny)进行qrtpcr分析。使用δδct方法确定标准化的表达值。将定量逆转录酶聚合酶链式反应(qrt-pcr)数据标准化为actb的表达，并计算δδct值。每名患者所有细胞群的基因表达通过单向anova统计学分析比较，然后通过bonferroni事后检验对目标群体和所有其他群体进行多重比较。还通过使用软件可用的rt2分析仪pcr阵列数据分析(qiagen)进行统计分析。未观察到cxcrl和cxcr2水平的显著差异，鉴定了可检测量的转录本(il8mrna：糖尿病对比对照，p＜0.05；图7c)。此外，il8在肾小球水平表达并与突触足蛋白(足细胞标志物)和cd-31(内皮标志物)共定位(数据未显示)。
获得的数据揭示选择性肾小球定位并与足细胞水平的突触足蛋白以及内皮水平的cd31的共表达(数据未显示)。验证图3a和图3b中所示的证据，在肾实质细胞性丧失和纤维化的发作之后，il8表达逐渐降低(数据未显示)。
实施例5
肾功能恶化的t2d患者中尿液il8水平更高。
为了确认il8是否与2型糖尿病患者(t2d)中的dkd相关，特别是尿液il8水平是否根据白蛋白尿状态改变，我们利用患有t2d的个体的joslin组。该组包括的个体患有t2d，随后进行8-12年的随访，并检查肾功能下降、蛋白尿发作和终末期肾病(esrd)。在1246名t2d患者中通过luminex测量尿液il8的基线水平，如下划分：702名正常白蛋白尿，390名微量白蛋白尿，156名大量白蛋白尿，以及25名健康对象。第一步我们评估了基线时的尿液il8水平，并发现微量白蛋白尿个体较高水平的尿液il8水平与最高水平的白蛋白尿有关。
简言之，根据制造商的方案使用
获得的数据显示，与正常白蛋白尿个体相比，具有微量白蛋白尿的患者显示出更高的尿液il8水平[il8：正常白蛋白尿＝19.69±3.70对比微量白蛋白尿＝30.28±5.42pg/ml，p＜0.001；图6a、图6b和图8a)。接下来，评估具有微量白蛋白尿(更容易发展为肾功能受损)的患者，并通过测量尿液白蛋白：肌酸酐比率(acr；mg/g)确定尿液il8浓度与肾功能丧失之间的相关性。基线时尿液il8高的患者(定义为微量白蛋白尿患者组中优于il8的中值分布)显示显著更差的肾功能[acr：q3-q4(高il8)＝101.7±13.0对比q1-q2(低il8)＝58.5±6.5mg/g，p＝0.003，图5b)。il8的中值阈值为2.41pg/ml。此外，对来自joslin组的数据进行分析；389名肾功能正常(gfr≥60ml/min)的患者和正常/微量范围内的白蛋白尿患者随访5年。计算所有患者的白蛋白：肌酸酐比率(acr：mg/g)和gfr斜率。那些在正常和微量白蛋白尿组中高于il8中值分布的患者显示显著高于来自低于中值的那些患者的acr(图8d)。在所有389名患者及其正常白蛋白尿和微量白蛋白尿的子集中，那些在尿液中呈现il8阳性测试的患者也呈现显著更高的acr值(图8b)。5年随访期间gfr斜率为1.6ml/年(iqr0.5-3.3)，并且根据fda的定义(esrd，任何原因导致的死亡或30％的肾脏功能丧失)，55名患者具有“硬肾结果”。il8值与任何所考虑的随访变量(gfr斜率，肾脏结果风险，基线蛋白尿水平)均没有定量相关性。随后，将具有阳性尿液il8测试的患者与具有阴性尿液il8测试的患者进行比较。阳性患者具有显著更大的gfr斜率(2.47±0.26对比1.81±0.16ml/min/年p＝0.036，图8c)；在微量白蛋白尿组(2.5±0.29对比1.84±0.19ml/min/年p＝0.056，图8c)和正常白蛋白尿组(2.3±0.7对比1.71±0.28ml/min/年p＝0.39，图8c)中也观察到这种趋势。
关于综合的肾脏结果，389名患者中的368名患者有有效数据；41/55个事件(74.5％)具有阳性尿液il8值。事件风险在il8阳性中为19％，对比在il8阴性患者中为9％，其中绝对风险增加10％，并且相对增加111％(χ2检验，p＝0.0096，数据未显示)。在所有对象中，那些具有il8阳性尿的患者经受事件的风险为1.33(95％c.i.1.11至1.60)(esrd，任何原因导致死亡或30％的肾功能丧失)。类似地，微量和正常白蛋白尿早期阶段的风险分别为1.29和1.76(95％c.i.1.05至1.58以及95％c.i.1.41至2.20；图8e)。
实施例6
cxcr1基因单核苷酸多态性的鉴定与dkd相关
为了评估il8-cxr1/2轴对人dn的重要性，对来自joslin肾病遗传学研究的患有t2d的个体的样品进行评估。来自该组的数据已经发表(可在dbgap获得，国家卫生研究院的万维网页面，登录号phs000302.v1.p1)。对该组中的患者进行8至12年的随访监测，并检查蛋白尿、肾功能下降和esrd。实验研究确定dn的加速进展是否与il8、cxcr1或cxcr2基因座的任何自发遗传变体存在关联。患有或未患dn的326名t2d患者进行筛选和基因分型，以评估这些基因座处的任何单核苷酸多态性(snp)是否会影响dn加速。
详细地，随机选择来自该集合的糖尿病肾病病例用于illumina人cnv370v1基因分型阵列上的全基因组基因分型(数据可在国家卫生研究院万维网页面的dbgap获得，登录号phs000302.v1.p1)(illumina，sandiego，ca)。最小等位基因频率(maf)＜0.01的质量控制度量，哈迪-温伯格假设的拒绝(p≤10-5)和缺失数据的差异率(通过病例/对照状态)的应用产生324,382个常染色体单核苷酸多态性(snp)的高质量基因型数据。来自欧洲血统的所有个体的acr和egfr数据可用于定量性状分析。使用标准病例/对照等位基因测试计算p值。给出了来自估计的肾小球滤过率的定量性状分析的p值。使用plink进行所有关联测试。snp位置参照ncbibuild36.1(3)。
对患有和未患dkd的326名t2d个体进行筛选和基因分型，以评估il8、cxcr1或cxcr2基因的任何单核苷酸多态性(snp)是否会影响dkd的发作。该群体中与dkd的最强关联发生在rs13006838(log10-p值＝1.35)，snp位于2号染色体cxcr1基因218461578位。
类似地，为了确认il8-cxcr1/2轴是否与t1d患者的糖尿病肾病(dkd)相关，我们利用了肾病遗传学(gokind)群体(n＝829；904名对照组患者(2)。在该群体中，与估计肾小球滤过率(egfr)下降的最强关联发生在cxcr1基因：(i)rs4674308(2号染色体，位置219018727)，log10-p值＝1.36；(ii)rs4674309(2号染色体，位置219022817)，log10-p值＝1.47；(iii)rs3755042(2号染色体，位置219025492)，log10-p值＝1.36；(iv)rs7601872(2号染色体，位置219028129)，log10-p值＝1.36；(v)rs664514(2号染色体，位置219038063)，log10-p值＝1.31(参见下表1)。
观察到il8和cxcr1/2基因座上的snp与dn、acr和egfr的基因型关联。与esrd进展或dn群体gfr恶化的最强关联发生在rs13006838(log10-p值＝1.35；p＝0.045)；该snp位于2号染色体cxcr1基因218461578位(表4)。该发现表明il8-cxcr1/2轴对dn向esrd演变的重要性。当gfr随着性别、年龄、体重指数、糖化血红蛋白a1c调整时，这种关联不再显著。对于cxcr2和il8，未观察到与esrd、acr或gfr进展相关的基因座。
实施例7
il8和cxcr-1/2由人足细胞表达
在体外研究人足细胞的il8、cxcr1和cxcr2表达(图9a-9c)。在正常葡萄糖(10mm[ng])或高葡萄糖(30mm[hg])中完全细胞分化后，将足细胞培养5天。将甘露醇(甘露醇20mm+葡萄糖10mm)用作高葡萄糖的渗透对照。使用本领域已知的标准技术培养永生化的足细胞系。在基础条件下检测到il8的弱表达，并且它不受培养基中葡萄糖水平的影响。相反，cxcr-1从正常至高血糖培养基由15％下降至低于5％。未检测到cxcr-2表达的显著变化(图9b和图9c)。
除非另有说明，否则本文实施例中呈现的所有体外和体内实验数据均一式三份进行。db/db小鼠的蛋白尿在10只未处理和30只处理的动物中进行。使用prism统计软件(lajolla，ca-usa)进行数据分析。通过d’agostino-pearsons检验对数据进行分类(通过中值与四分位数范围(iqr)显示连续非正态分布变量)，并使用mann-whitney检验进行分析(通过平均值和标准差显示正态分布变量)，以及用双尾配对t检验或单向anova进行分析。对于离散变量，使用χ2检验。对于所有检验，p＜0.05被认为是显著的。
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表1.与dn相关的cxcr1snp
表2.具有逐渐降低的肾小球il8表达和进行性肾脏损伤的患者中的gfr水平
表3.示例性鉴定病况列表，可用本文公开的方法对鉴定经受所列病况中的一种或其组合的对象进行治疗
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