本发明涉及天然药物化学
技术领域：
，特别涉及一种玫瑰茄提取物的提取方法。
背景技术：
玫瑰茄别名洛神花，为锦葵科植物玫瑰茄(hibiscussabdariffalinn)的干燥花萼。原产于美洲，生长于福建沿海高山。富含花青素、多元酚、呋喃醛、维生素c、接骨木三糖苷、柠檬酸等营养成份，这些成份具有抗氧化、清自由基、降压降脂、开胃消滞促消化、清热解暑生津止渴等作用。虽然，现有技术有玫瑰茄具有治疗肝损伤的报道，但其所做的研究仅仅停留在玫瑰茄粗提物或简单的萃取物，未进一步做深入的研究。因此，以玫瑰茄的干燥花萼为原料，开发更深入的且效果更好的具有解酒或保肝护肝作用的有效部位具有重要意义。技术实现要素：本发明的目的在于针对上述现有技术的不足，提供一种玫瑰茄提取物的提取方法，同时提供该提取方法提取得的玫瑰茄提取物，其具有有效的抗衰老作用，其可应用于药物或保健品中。本发明所采取的技术方案是：一种具有抗衰老作用的玫瑰茄提取物的提取方法，其包括如下工艺步骤：1)取玫瑰茄的干燥花萼，加乙醇水溶液进行提取，浓缩提取液得玫瑰茄醇提取物；2)将玫瑰茄醇提取物加水混悬，先用环己烷萃取1～3次，然后再用正丁醇萃取1～3次，浓缩正丁醇萃取部位；3)将经步骤2)得到的正丁醇萃取物上ods层析柱，先用1～3倍柱体积的体积分数为1～2％的甲醇洗脱除杂，再用4～6倍柱体积的体积分数为5～10％的甲醇洗脱；收集体积分数为5～10％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥，即得具有解酒及保肝护肝作用的玫瑰茄提取物。作为上述方案的进一步改进，其特征在于：步骤1)中所述的乙醇水溶液为体积分数为50～95％的乙醇水溶液。本发明优选乙醇水溶液为体积分数为50～70％的乙醇水溶液作为上述方案的进一步改进，其特征在于：步骤1)中所述的提取采用加热回流提取，提取次数为1～3次，每次的提取时间为1～2h。本发明优选提取次数为1次，每次的提取时间为2h。作为上述方案的进一步改进，其特征在于：步骤1)中玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶8～15ml。本发明优选玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶10ml。作为上述方案的进一步改进，其特征在于：步骤2)中玫瑰茄醇提取物与水的用量比为1g∶10～30ml；环己烷每次萃取过程中环己烷体积用量为水的体积用量的0.5～2倍；正丁醇每次萃取过程中正丁醇体积用量为水的体积用量的0.5～2倍。本发明优选玫瑰茄醇提取物与水的用量比为1g∶20～30ml；环己烷每次萃取过程中环己烷体积用量为水的体积用量的1～2倍；正丁醇每次萃取过程中正丁醇体积用量为水的体积用量的1～2倍。作为上述方案的进一步改进，步骤3)中所述的大孔树脂层析柱为装有ods填料的层析柱。具体地，本发明中ods层析柱中ods填料的重量用量为玫瑰茄提取物重量的30～50倍，优选为30～40倍。所述的柱体积是指用ods填料装柱后，从柱的底板到ods填料沉积表面的体积。一种由上所述的提取方法获得的具有抗衰老作用的玫瑰茄提取物。一种上所述的具有抗衰老作用的玫瑰茄提取物在药物和保健品中的应用。本发明的有益效果是：本发明提供了一种玫瑰茄提取物的提取方法，由该方法制备得到的玫瑰茄提取物具有很好的抗衰老作用。按本发明所述的ods柱层析方法能够大幅富集具有抗衰老作用的有效部位，经ods柱进一步富集有效部位得到的玫瑰茄提取物其抗衰老作用更显著。具体实施方式下面结合实施例对本发明进行具体描述，以便于所属
技术领域：
的人员对本发明的理解。有必要在此特别指出的是，实施例只是用于对本发明做进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，所属领域技术熟练人员，根据上述
发明内容对本发明作出的非本质性的改进和调整，应仍属于本发明的保护范围。同时下述所提及的原料未详细说明的，均为市售产品；未详细提及的工艺步骤或制备方法为均为本领域技术人员所知晓的工艺步骤或制备方法。实施例1一种具有解酒和护肝保肝作用的玫瑰茄提取物的提取方法，其包括如下工艺步骤：1)取玫瑰茄的干燥花萼，加体积分数为60％的乙醇水溶液进行加热回流提取，提取次数为1次，每次的提取时间为2h，其中玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶10ml，浓缩提取液得玫瑰茄醇提取物；2)将玫瑰茄醇提取物加水混悬，先用环己烷萃取1次，然后再用正丁醇萃取3次，浓缩正丁醇萃取部位，其中玫瑰茄醇提取物与水的用量比为1g∶20ml，环己烷每次萃取过程中环己烷体积用量为水的体积用量的1倍，正丁醇每次萃取过程中正丁醇体积用量为水的体积用量的1倍；3)将经步骤2)得到的正丁醇萃取物上装有ods填料的ods层析柱，所述ods层析柱中ods填料的重量用量为正丁醇萃取物重量的30倍，先用2倍柱体积的体积分数为1％的甲醇洗脱除杂，再用5倍柱体积的体积分数为10％的甲醇洗脱；收集体积分数为8％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥，即得实施例1具有抗衰老作用的玫瑰茄提取物。实施例2一种具有解酒和护肝保肝作用的玫瑰茄提取物的提取方法，其包括如下工艺步骤：1)取玫瑰茄的干燥花萼，加体积分数为60％的乙醇水溶液进行加热回流提取，提取次数为1次，每次的提取时间为2h，其中玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶10ml，浓缩提取液得玫瑰茄醇提取物；2)将玫瑰茄醇提取物加水混悬，先用环己烷萃取1次，然后再用正丁醇萃取3次，浓缩正丁醇萃取部位，其中玫瑰茄醇提取物与水的用量比为1g∶20ml，环己烷每次萃取过程中环己烷体积用量为水的体积用量的1倍，正丁醇每次萃取过程中正丁醇体积用量为水的体积用量的1倍；3)将经步骤2)得到的正丁醇萃取物上装有ods填料的ods层析柱，所述ods层析柱中ods填料的重量用量为正丁醇萃取物重量的30倍，先用2倍柱体积的体积分数为2％的甲醇洗脱除杂，再用5倍柱体积的体积分数为8％的甲醇洗脱；收集体积分数为8％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥，即得实施例2具有抗衰老作用的玫瑰茄提取物。实施例3一种具有解酒和护肝保肝作用的玫瑰茄提取物的提取方法，其包括如下工艺步骤：1)取玫瑰茄的干燥花萼，加体积分数为80％的乙醇水溶液进行加热回流提取，提取次数为1次，每次的提取时间为2h，其中玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶10ml，浓缩提取液得玫瑰茄醇提取物；2)将玫瑰茄醇提取物加水混悬，先用环己烷萃取1次，然后再用正丁醇萃取3次，浓缩正丁醇萃取部位，其中玫瑰茄醇提取物与水的用量比为1g∶20ml，环己烷每次萃取过程中环己烷体积用量为水的体积用量的1倍，正丁醇每次萃取过程中正丁醇体积用量为水的体积用量的1倍；3)将经步骤2)得到的正丁醇萃取物上装有ods填料的ods层析柱，所述ods层析柱中ods填料的重量用量为正丁醇萃取物重量的30倍，先用2倍柱体积的体积分数为1％的甲醇洗脱除杂，再用5倍柱体积的体积分数为10％的甲醇洗脱；收集体积分数为8％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥，即得实施例3具有抗衰老作用的玫瑰茄提取物。实施例4一种具有解酒和护肝保肝作用的玫瑰茄提取物的提取方法，其包括如下工艺步骤：1)取玫瑰茄的干燥花萼，加体积分数为80％的乙醇水溶液进行加热回流提取，提取次数为1次，每次的提取时间为2h，其中玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶10ml，浓缩提取液得玫瑰茄醇提取物；2)将玫瑰茄醇提取物加水混悬，先用环己烷萃取1次，然后再用正丁醇萃取3次，浓缩正丁醇萃取部位，其中玫瑰茄醇提取物与水的用量比为1g∶20ml，环己烷每次萃取过程中环己烷体积用量为水的体积用量的1倍，正丁醇每次萃取过程中正丁醇体积用量为水的体积用量的1倍；3)将经步骤2)得到的正丁醇萃取物上装有ods填料的ods层析柱，所述ods层析柱中ods填料的重量用量为正丁醇萃取物重量的30倍，先用2倍柱体积的体积分数为1％的甲醇洗脱除杂，再用5倍柱体积的体积分数为5％的甲醇洗脱；收集体积分数为8％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥，即得实施例1具有抗衰老作用的玫瑰茄提取物。对比例1一种玫瑰茄提取物的提取方法，其包括如下工艺步骤：取玫瑰茄的干燥花萼，加乙醇水溶液进行提取，浓缩提取液得玫瑰茄醇提取物；所述的乙醇水溶液为体积分数为80％的乙醇水溶液；所述的提取为加热回流提取，提取次数为1次，每次的提取时间为2h；其中玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶10ml。对比例1仅仅只是将玫瑰茄的干燥花萼用乙醇水溶液进行提取，并未进行如本发明所述的萃取以及ods柱层析步骤。对比例2一种玫瑰茄提取物的提取方法，其包括如下工艺步骤：1)取玫瑰茄的干燥花萼，加乙醇水溶液进行提取，浓缩提取液得玫瑰茄醇提取物；2)将玫瑰茄醇提取物加水混悬，先用环己烷萃取1次，浓缩环己烷取部位，得环己烷萃取物，即所述的玫瑰茄提取物；步骤1)中所述的乙醇水溶液为体积分数为80％的乙醇水溶液；步骤(1)中所述的提取为加热回流提取，提取次数为1次，每次的提取时间为2h；其中玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶10ml；步骤2)中玫瑰茄醇提取物与水的用量比为1g∶20ml；环己烷每次萃取过程中环己烷体积用量为水的体积用量的1倍。对比例2与实施例1的区别在于，对比例2取的是环己烷萃取物而实施例1采用的是经环己烷萃取除杂后再用正丁醇萃取后的正丁醇萃取物。对比例3一种玫瑰茄提取物的提取方法，其包括如下工艺步骤：1)取玫瑰茄的干燥花萼，加乙醇水溶液进行提取，浓缩提取液得玫瑰茄醇提取物；2)将玫瑰茄醇提取物加水混悬，先用环己烷萃取1次，然后再用正丁醇萃取3次，合并并浓缩正丁醇萃取部位，得正丁醇萃取物；3)将经步骤2)制备得到的正丁醇萃取物上ods层析柱，先用2倍柱体积的体积分数为2％的甲醇洗脱除杂，收集体积分数为2％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥即得所述的具有抗衰老作用的玫瑰茄提取物；步骤1)中所述的乙醇水溶液为体积分数为80％的乙醇水溶液；步骤(1)中所述的提取为加热回流提取，提取次数为1次，每次的提取时间为2h；其中玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶10ml；步骤2)中玫瑰茄醇提取物与水的用量比为1g∶20ml；环己烷每次萃取过程中环己烷体积用量为水的体积用量的1倍；正丁醇每次萃取过程中正丁醇体积用量为水的体积用量的1倍；步骤3)中ods层析柱中ods填料的重量用量为玫瑰茄提取物重量的30倍。对比例3和实施例2的区别在于，对比例3取的是为2％的甲醇洗脱部位作为玫瑰茄提取物；而实施例2取的是8％的甲醇洗脱部位作为玫瑰茄提取物。实施例41)取玫瑰茄的干燥花萼，加乙醇水溶液进行提取，浓缩提取液得玫瑰茄醇提取物；2)将玫瑰茄醇提取物加水混悬，先用环己烷萃取1次，然后再用正丁醇萃取3次，合并并浓缩正丁醇萃取部位，得正丁醇萃取物；3)将经步骤2)制备得到的正丁醇萃取物上ods层析柱，先用2倍柱体积的体积分数为2％的甲醇洗脱除杂，再用5倍柱体积的体积分数为8％的甲醇洗脱；接着用5倍柱体积的体积分数为15％的甲醇洗脱，收集体积分数为15％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥即得所述的具有抗衰老作用的玫瑰茄提取物；步骤1)中所述的乙醇水溶液为体积分数为80％的乙醇水溶液；步骤(1)中所述的提取为加热回流提取，提取次数为1次，每次的提取时间为2h；其中玫瑰茄的干燥花萼与乙醇水溶液的用量比为1g∶10ml；步骤2)中玫瑰茄醇提取物与水的用量比为1g∶20ml；环己烷每次萃取过程中环己烷体积用量为水的体积用量的1倍；正丁醇每次萃取过程中正丁醇体积用量为水的体积用量的1倍；步骤3)中ods层析柱中ods填料的重量用量为玫瑰茄提取物重量的30倍。对比例4和实施例2的区别在于，对比例4取的是为15％的甲醇洗脱部位作为玫瑰茄提取物；而实施例2取的是8％的甲醇洗脱部位作为玫瑰茄提取物。实验例1取果蝇成虫450只(雌雄各半)，分成9组，每组50只(雌雄各半)，其中第1～4组分别放入含有2重量％的实施例1～4制备得到的玫瑰茄提取物的基础饲料中饲养；第5～8组放入含有1重量％的对比例1～4制备得到的玫瑰茄提取物的基础饲料中饲养；第9组放入不含任何药物的基础饲料中饲养。早晚各观察一次，统计果蝇的死亡数和生存数，直至果蝇全部死亡，计算半数死亡时间以及平均寿命，具体结果见表1。表1.玫瑰茄提取物抗衰老试验结果实验组半数死亡时间(d)平均寿命(d)实施例1玫瑰茄提取物组26.5±7.235.3±10.5实施例2玫瑰茄提取物组31.1±7.842.5±11.2实施例3玫瑰茄提取物组30.2±7.440.1±10.9实施例4玫瑰茄提取物组30.9±7.641.5±11.0对比例1玫瑰茄提取物组24.9±6.132.3±10.1对比例2玫瑰茄提取物组24.1±5.931.1±9.8对比例3玫瑰茄提取物组25.2±6.032.5±10.8对比例4玫瑰茄提取物组25.6±6.132.8±10.4空白对照组23.9±5.830.3±8.2由表1试验数据可以看出，本发明实施例1经正丁醇萃取后得到的玫瑰茄提取物组的半数死亡时间和平均寿命与空白对照组相比，显著增加。这说明本发明实施例1经正丁醇萃取后得到的玫瑰茄提取物具有显著的抗衰老作用。从表1试验数据中还可以看出，对比例1所述的玫瑰茄醇提取物组仅仅经乙醇提取不经萃取步骤，其半数死亡时间和平均寿命与空白组相比虽然有所增加，但增加的幅度不大，这说明对比例1所述的玫瑰茄醇提取物具有抗衰老作用，但作用不明显。对比例2所述的玫瑰茄环己烷萃取物组，其半数死亡时间和平均寿命与对照组相比几乎没有什么改变，这说明玫瑰茄环己烷萃取物组并不具有明显的抗衰老作用。玫瑰茄中的具有抗衰老作用的有效部位主要分布在如实施例1所述的正丁醇萃取部位。从表1试验数据中还可以看出，实施例2～4所述的玫瑰茄提取物是在实施例1得到的正丁醇萃取物的基础上进一步通过ods柱层析富集的有效部位。试验结果显示，其半数死亡时间和平均寿命与实施例1玫瑰茄提取物组相比进一步大幅增加。这说明本发明所述的玫瑰茄提取物进一步按本发明所述的ods柱层析方法能够最大程度的富集具有抗衰老作用的有效部位，按本发明所述ods柱层析方法富集得到的玫瑰茄提取物其抗衰老效果比单纯的经正丁醇萃取效果更显著。从对比例3和4组的实验数据可以看出，其半数死亡时间和平均寿命与空白对照组相比虽然有所降低，但降低的幅度不明显；这说明在ods柱层析条件中，以2％和15％的甲醇水溶液洗脱得到玫瑰茄醇提取物能显示有抗衰老作用，但作用不明显，其作用大幅小于实施例2～4制备得到的玫瑰茄醇提取物。这进一步说明ods柱层析条件中取5～10％的甲醇洗脱部位具有最好的抗衰老作用，远远大于其他条件下洗脱得到的有效部位。上述实施例为本发明的优选实施例，凡与本发明类似的工艺及所作的等效变化，均应属于本发明的保护范畴。当前第1页12