苦地丁提取物及其组合物和减肥用途及制剂的制作方法

本发明涉及民族药领域，具体地说，涉及一种蒙药苦地丁及其药理用途和制剂，尤其涉及一种蒙药苦地丁提取物及其组合物和减肥用途和制剂。

背景技术：

苦地丁，蒙古语药名为《地格达》，是罂粟科(papaveraceae)植物地丁紫堇(corydalisbungeanaturcz)的全草。主要分布于甘肃、陕西、山西、山东、河北、辽宁、吉林、黑龙江、四川等地。味苦，性寒、钝、糙、轻、燥，是蒙医常用苦味药材及特色药；具有清热解毒，锁脉，杀菌消肿，调血等功效。用于流行感冒，热性瘟疫，血热头痛，伤热，肠热，肝胆热，牙痛，急慢性肝炎，痢疾，脓肿等病症。然而，目前通常用的提取工艺中所需要的原料量多，产物少并且以浸膏形式存在，这不仅不利于原材料的保护也不利于保存。因此，本领域技术人员渴望得到一种提取工艺简单、提取物产率高并且最终产物保存时间长的提取方法，不仅有利于保护现有苦地丁资源，而且便于产物的保存。

肥胖发生的基本原理是食物摄入超过能量消耗，而决定食物摄入量的主要因素是胃容受性(gastricaccommodation)的大小和胃排空的速率，其中胃容受性是指胃在一定时间内所能容纳食物的能力。因此，胃肠运动在控制饱腹感、能量代谢、脂肪合成过程中具有重要调节作用，进而实现控制体重及防治肥胖症。

蒙医理论认为肥胖体质具有腻的基本特性，属于“协日”和“巴达干”相对过剩的病症。苦味药性是蒙药理论基础六味中的一味，由水和气元素产生，具有寒、轻、钝、糙等基本特性，并具有燥、腻、消脂的作用，可以增强胃肠动力的功能。此外，苦味感受器来寻找一种苦味味觉作为人类最基本的感知食物和控制饮食的感官功能，在调节食欲、能量代谢以及防治肥胖作用中研究甚少或者不够深入。目前市场上常用减肥药物主要靠调节摄食与饱食中枢神经来抑制食欲进而达到瘦身的效果。但是长期服用此类减肥药可引起厌食、失眠、精神不振、抑郁等严重副作用。

因此本发明通过研究蒙药苦地丁，提供了一种提取工艺简单、提取物产率高并且最终产物保存时间长的提取物及组合物，并且还提供了苦地丁提取物及组合物在减肥中的用途；因为苦地丁提取物的减肥机制是通过苦味物质激活胃肠道苦味受体，减缓胃排空和肠道运动，从而增加饱腹感及能量代谢，最终实现减肥的功效，因此减少了主要通过调节中枢神经来抑制食欲而达到减肥作用所引起的副作用，例如引起厌食、失眠、精神不振、抑郁等。

技术实现要素：

本发明的目的之一是提供一种蒙药苦地丁提取物；

本发明的目的之二是提供一种蒙药苦地丁提取物的组合物；

本发明的目的之三是提供一种蒙药苦地丁提取物及其组合物在减肥中的应用。

本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明中苦地丁提取物，其特征在于，提取方法包括：

(1)将苦地丁全草切成小段后装入圆底烧瓶中；

(2)向小段苦地丁中加入2-12倍体积的50-75％乙醇浸泡过夜；

(3)将圆底烧瓶的接口和冷凝管连接后注水，将电热套温度设置为65-70℃，回流提取1-4次，每次1-4小时，合并提取液；

(4)合并提取液后进行喷雾干燥，既得苦地丁提取物。

前述的苦地丁提取物，其特征在于，包括：

(1)将苦地丁全草切成小段后装入圆底烧瓶中；

(2)向小段苦地丁中加入10倍体积的75％乙醇浸泡过夜；

(3)将圆底烧瓶的接口和冷凝管连接后注水，将电热套温度设置为68℃，回流提取3次，每次2小时；

(4)合并提取液后进行喷雾干燥，既得苦地丁提取物。

前述的苦地丁提取物，其特征在于，提取时圆底烧瓶瓶底装入石子，用锡纸封口，喷雾干燥条件包括：进风温度为150-200℃，优选地180℃；出风温度为80-130℃，优选地，110℃。

经检测，前述的苦地丁提取物主要含有：紫堇灵、普托品、紫堇萨明、黄连碱、氧化血根碱、去甲血根碱、紫堇萨明、去氢碎叶紫堇碱、黄连碱、氧化血根碱、去甲血根碱、6-丙酮基二氢血根碱、6-丙酮基二氢血根碱等成分。

前述的苦地丁提取物，其特征在于，所述的提取物在减肥中的应用。

前述的苦地丁提取物，其特征在于，所述的提取物在减肥药物、保健食品、功能性食品中的应用。

包含前述的苦地丁提取物的组合物，其特征在于，所述的组合物，包括苏里南苦木(quassiaamara)、龙胆(gentianascabrabunge)、艾草(artemisiaargyi)和苦地丁(corydalisbungeanaturcz)。

前述的苦地丁组合物，其特征在于，所述的组合物在减肥中的应用。

前述的苦地丁组合物，其特征在于，所述的组合物在减肥药物、保健食品、功能性食品中的应用。

前述的苦地丁提取物或组合物的制剂，本领域技术人员根据现有的技术提示将组合物制备为相应剂型。

为了观察苦地丁提取物的减肥功效，本发明以wistar大鼠为肥胖模型，对前述的苦地丁提取物进行梯度浓度进行减肥功效实验，分为正常组，模型组，阳性对照组，苦地丁提取物低剂量组、苦地丁提取物中剂量组和苦地丁提取物高剂量组；给药第6周，每周测量一次体重和进食量。实验结束后，用10％水合氯醛麻醉处死大鼠，分别测算lee’s指数、胃排空率、小肠推进率等指标观察苦地丁提取物的减肥功效。

本发明的有益之处在于：提供了一种提取工艺简单、提取物产率高并且最终产物保存时间长的提取物，及其组合物；并且还提供了苦地丁提取物及其组合物在减肥中用途，因为苦地丁提取物的减肥机制是通过苦味物质激活胃肠道苦味受体，减缓胃排空和肠道运动，从而增加饱腹感及能量代谢，最终实现减肥的功效，因此减少了目前主要通过调节中枢神经来抑制食欲而达到减肥作用的产品所引起的副作用，例如引起厌食、失眠、精神不振、抑郁等。

附图说明

图1表示的是苦地丁提取物的hplc-tof-ms图谱。

具体实施方式

下面通过实施例来描述本发明的实施方式，对于本领域的技术人员应当认识到，这些具体的实施例仅表明为了达到本发明的目的而选择的实施技术方案，并不是对技术方案的限制。根据本发明的教导，结合现有技术对本发明技术方案的改进是显然的，都属于本发明保护的范围。

实施例1苦地丁提取物的制备

称取4kg苦地丁切段后装入10000ml圆底烧瓶，10倍量75％乙醇浸泡过夜，瓶底装入石子防止爆沸，用锡纸封口防止挥发。第二天将圆底烧瓶与接口和冷凝管连接后注水，将电热套温度设置为68℃，回流提取3次，每次2小时，合并提取液后使用实验型喷雾干燥机进行喷雾干燥，喷雾干燥机参数设置：

进风温度设置：180℃，实际温度：180℃，出风温度设置：110℃，实际温度：68～90℃，风机设定：55.00，通针设定：5.0，蠕动泵设定：60.0，干燥速率大约为1500ml/h，待提取液全部进入后，关闭机器，取下收集瓶收集粉末，即得：苦地丁提取物黄褐色粉末203.8g，出粉率：5.1％。

保存于干燥器中备用。

经检验，苦地丁提取物中主要含有：紫堇灵、普托品、紫堇萨明、黄连碱、氧化血根碱、去甲血根碱、紫堇萨明、去氢碎叶紫堇碱、黄连碱、氧化血根碱、去甲血根碱、6-丙酮基二氢血根碱、6-丙酮基二氢血根碱等成分

实施例2蒙药苦地丁提取物对高脂高能量诱导肥胖大鼠的减肥作用

1、实验目的建立高脂高能量饮食诱导肥胖大鼠模型，连续灌胃给予不同浓度的苦地丁提取物，观察对小鼠减肥功效的影响。

2、实验材料

2.1动物：wistar大鼠，4～5周龄，体重180g～220g，购于辽宁长生，许可证号：scxk(辽)2015-0001。饲养于内蒙古民族大学蒙医药学院实验动物房，温度20±5℃，湿度40％～50％，光照条件10h/天，自由饮食饮水。实验对动物的处理方法符合中华人民共和国科学技术部颁发的《关于善待实验动物的指导性意见》的相关要求。

2.2仪器电热套(kdm调温型，10000ml)、实验型喷雾干燥机(yc-015，上海雅程)

2.3受试药物苦地丁提取物，颜色黄褐色粉末，保存于干燥容器中。配置浓度苦地丁提取物低剂量组(0.18g/kg)、苦地丁提取物中剂量组(0.9g/kg)、苦地丁提取物高剂量组(1.8g/kg)。

2.4阳性对照药物奥利司他，rocheproductsptylimitedabn70000132865,0.03g/kg。

2.5高脂高能量饮食诱导肥胖大鼠模型的建立

将72只wistar大鼠，适应性饲养1周后，除正常饮食(n＝12)组外的大鼠喂高脂高能饲料(成分：糖类25％，猪油20％，普通饲料55％)。每天给新鲜饲料，每周称大鼠体重和剩余食量并计算每周进食量，10周末后，将高脂饮食组大鼠体重高于正常饮食组体重平均值20％为肥胖症模型大鼠建立成功。

3、统计学分析

采用graphpad7.04软件进行统计学分析。全部数据以x±s表示，多组间样本均数比较采用单因素方差分析，结果图表采用graphpad7.04软件。以p＜0.05为差异有统计学意义，p＜0.01为差异有趋势。

实施例3蒙药苦地丁提取物对高脂高能量诱导肥胖大鼠的减肥作用

在大鼠肥胖模型建立成功的基础上，对苦地丁提取物进行梯度浓度减肥功效实验，分为正常组，模型组，阳性组(奥利司他，rocheproductsptylimitedabn70000132865,0.03g/kg)，苦地丁低剂量组(0.18g/kg)、苦地丁中剂量组(0.9g/kg)、苦地丁高剂量组(1.8g/kg)。饲养条件和方法与筛选实验一致。给药第6周，每周一次测量体重和进食量，实验结果见表1。

表1蒙药苦地丁提取物对高脂饮食诱导肥胖大鼠的体重及进食量的影响

由表1可见，由实施例1制得的苦地丁提取物高、中、低剂量组均具有降低体重的作用，说明苦地丁提取物高、中、低剂量组均具有减肥作用。另外，高、中、低剂量组的进食量均减少，说明苦地丁提取物高、中、低剂量组具有增强饱腹感的作用。

饲养6周后实验结束，用10％水合氯醛麻醉处死大鼠，测算以下指标：

3.2.1lee’s指数

测大鼠体长(鼻尖至肛门长度)计算lee’s指数，计算公式如下：

lee’s指数＝1000*体重(g)^3/体长(cm)。lee’s指数是评价成年肥胖模型大鼠肥胖程度的重要指标。

肾周脂肪、肠道周围脂肪和睾丸周围脂肪是大鼠脂肪沉积的几种主要形式。

实验结果见表2和表3。

表2苦地丁对肥胖大鼠的lee’s指数和肾周脂肪沉积的影响

由表2可见，由实施例1制得的苦地丁提取物高和低剂量组均具有降低lee’s指数的作用，说明苦地丁提取物高和低剂量组均具有减肥作用。但是与模型组比较，苦地丁高、中、低剂量组对肾周脂肪沉积均无显著作用。

表3苦地丁对肥胖大鼠睾周脂肪和肠周脂肪沉积的影响

与肾周脂肪相同，肠道周围脂肪和睾丸周围脂肪是大鼠脂肪沉积的几种主要形式。表3可见，苦地丁提取物对睾周脂肪沉积无明显作用。而对肠周脂肪而言，苦地丁高、中剂量组均具有显著降低脂肪沉积作用，说明苦地丁提取物主要降低的了肥胖大鼠的肠道周围沉积的脂肪。但对肾周围和睾丸周围脂肪沉积没有作用。

实施例4胃排空率

将各组大鼠禁食12h，不禁水，于次日给予1h食量(每只大鼠15g)，1h后记录剩余食量，并计算1h摄食量(1h摄食量＝15g-1h后剩余食量，m1)。处死后迅速摘取胃组织，用滤纸擦干，称重得胃全重(m2)。然后沿胃小弯侧剪开胃体，用去掉胃内容物，擦干称重得胃净重(m3)，胃全重减去胃净重为2h胃内食物残余量。2h后胃排空率的计算公式如下所述:

胃排空量＝100％-(m2-m3/m1)×100％。

由于本实验与小肠推进实验同时进行，摄食量等于喂食食物重量加碳末重量。实验结果见表3。

实施例5小肠推进率

实验前大鼠禁食12h，自由饮水，每只大鼠灌胃10％活性炭末混悬液，30min后处死并立即剖开腹腔，取出自幽门至直肠末端的全部肠管，平铺于kreb液中，在无张力状态测量碳末前沿至幽门的距离与小肠的全长，两者比值即为小肠推进率，计算公式如下：

小肠推进率(％)＝碳末前沿至幽门的距离/小肠全长×100％

实验结果见表4。

表4苦地丁对肥胖大鼠胃排空和小肠推进作用的影响

由表3可见，与模型组相比，苦地丁提取物高、中、低剂量组均可以显著降低肥胖大鼠的胃排空率，但对小肠动力指数用无明显作用。通过这些发现我们推断，苦地丁提取物可能通过减缓胃排空率，延长食物在胃肠道中的通过时间，增加饱腹感，从而达到降低进食量和总体重的作用。

经动物实验结果表明，本发明对肥胖大鼠具有有减肥及降低食欲的作用。在6周的给药实验过程中，苦地丁高中低剂量组(分别为1.8g/kg，0.9g/kg，0.18g/kg)均具有显著降低肥胖大鼠体重的作用。其次，苦地丁提取物高中低(分别为1.8g/kg，0.9g/kg，0.18g/kg)剂量组对肥胖大鼠的食欲具有显著抑制作用(表1)。另外，实验结果还显示苦地丁高中低剂量组均可以显著降低胃排空率(表4)。对脂肪沉积，苦地丁提取物在中剂量和高剂量时对肠道周边脂肪具有显著降低作用。