一种用于制备护胃发酵产物的培养基及制备方法与流程

[0001]
本发明涉及一种用于制备护胃发酵产物的培养基及制备方法。


背景技术：

[0002]
利用生物发酵技术制备生物制品，是克服利用野生资源生物量受限的最佳途径和实现有用代谢物开发利用的基础。和传统子实体栽培相比，通过液体发酵制备次生代谢产物，生产周期短、代谢产物易于控制、可实现规模化生产。
[0003]
中国专利文献cn104000192a公开了一种缓解压力及调节肠胃的功能食品及其二步发酵制备方法，该方法包括：以含调节肠胃的天然组分为药性培养基质，接种猴头菇液体菌种进行双向固体发酵制备具有调节肠胃功能的药性菌质；以药性菌质为原料，粉碎后添加酵母粉、谷氨酸钠、水制成发酵培养基，接种乳酸菌进行液体深层发酵生产缓解压力的γ-氨基丁酸，制备同时具有缓解压力和调节肠胃功能的发酵液；采用发酵液，制备成不同剂型的缓解压力及调节肠胃的功能食品。该发明方法制备的缓解压力及调节肠胃的功能食品以猴头菇菌质和γ-氨基丁酸配伍同时具有缓解压力及调节肠胃功能，市场前景广阔，此外该制备方法稳定，适合大规模生产。该发明的主要目的是发酵生产缓解压力的γ-氨基丁酸，从而猴头菇具有调节肠胃功能，γ-氨基丁酸具有缓解压力功效，二者配伍具有缓解压力和调节肠胃的功能。
[0004]
中国专利文献cn102172270a公开了一种调理保健胃肠的多糖冲剂，通过以下步骤制备完成：a.猴头菇发酵以麦芽汁为发酵培养基，麦芽汁的糖度为5-20度，采用猴头菇细胞作为菌种，麦芽汁与猴头菇细胞接种量的重量份配比为99-90∶1-10，发酵温度25～30℃，调ph值4～7，发酵时间12～48小时；b.通过膜过滤浓缩获得猴头菇多糖浓缩液，采用陶瓷膜过滤器，孔径为0.2um；c.在干燥室内将猴头菇多糖浓缩液经雾化后，在与热空气的接触中，使水分迅速汽化，得到猴头菇多糖粉；进风温度155～185℃，排风温度80～100℃，排风压力100～150pa，雾化频率25hz；d.将猴头菇多糖粉5～15重量份与山楂粉5～15重量份，菊粉5～25重量份，低聚果糖粉45～65重量份，低聚木糖粉5～15重量份充分混匀即获得多糖冲剂成品。其是以麦芽汁为发酵培养基，采用猴头菇细胞作为菌种，发酵培养，得到猴头菇多糖粉。猴头菇多糖与山楂粉、菊粉、低聚果糖和低聚木糖复配得到的配方具有独特的同时调理胃肠功效，是新型的保健固体饮品。
[0005]
中国专利文献cn102389540a公开了一种健脾胃葡萄糖酸钙口服液，包含中药原汁液、葡萄糖酸钙和第三配方；所述中药原汁液的各原料药为：焦山楂300～700g、大枣100～300g、炒麦芽50～120g、茯苓30～100g、丁香30～100g、山药10～60g、陈皮10～40g、沙棘10～40g、蜂蜜10～40g；将该原料药煎煮后的溶液中加入葡萄糖酸钙，并加入其它配方：蔗糖、柠檬酸、氯化钠、山梨酸钾、甜蜜素、维生素、健康糖。该发明中的锌、铁易被机体吸收。不仅能充分补充人体必需的微量元素，而且能促进体内蓄积有害元素铅的排泄，具有良好的治疗功效。虽然该发明加入了丁香、山药和沙棘，但并不是作为中药原汁液主要的成分，且也不是作为培养基使用。


技术实现要素：

[0006]
有鉴于此，为解决上述技术问题，本发明的目的在于提出一种用于制备护胃发酵产物的培养基及制备方法，通过使用该培养基的发酵培养，制备出的护胃发酵产物对乙醇诱导的胃炎胃溃疡有明显的保护作用。
[0007]
所采用的技术方案为：
[0008]
本发明的一种用于制备护胃发酵产物的培养基，按重量份计，由如下组分组成：沙棘果浆10-15份，丁香提取物10-15份，山药细粉10-15份，竹菌、树舌灵芝和薄皮纤孔菌提取物3-5份，姜黄细粉1-2份，低聚半乳糖3-6份，水80-100份。
[0009]
进一步地，所述沙棘果浆是通过如下方法制备的：将鲜沙棘去梗，剔除烂果，水洗、沥干后进行压榨取汁。
[0010]
进一步地，所述丁香提取物是通过如下方法制备的：将丁香粉碎后，加入20-30倍重量的水，在40-50℃的摇床中震荡提取10-14小时，离心后得上清液，上清液经减压浓缩后，真空冷冻干燥，得到丁香提取物。
[0011]
进一步地，所述竹菌、树舌灵芝和薄皮纤孔菌提取物是通过如下方法制备的：分别将竹菌、树舌灵芝和薄皮纤孔菌粉碎，按重量比1∶0.5∶1比例混合，加入20-30倍重量的20vol％的乙醇溶液，在40-50℃的摇床中震荡提取10-14小时，过滤后得到上清液，上清液减压浓缩后，真空冷冻干燥后，得到竹菌、树舌灵芝和薄皮纤孔菌提取物。
[0012]
在上述技术方案中，沙棘果浆的作用在于，沙棘果浆对胃溃疡有良好的促进愈合作用，沙棘果浆中的β-谷甾醇-β-d-葡萄糖甙为抗胃溃疡的有效成分，能有效地保护胃粘膜及抑制胃酸分泌，使胃粘膜受损程度降低，沙棘果浆还有抗炎生肌、促进组织再生、促进溃疡愈合的作用。
[0013]
在上述技术方案中，丁香提取物的作用在于有增加胃液分泌、抗胃溃疡、止泻、利胆，抗炎、镇痛、抗缺氧、抗凝血、抑菌作用。
[0014]
在上述技术方案中，山药细粉具有护胃养胃的作用，并能为猴头发酵提供碳源。
[0015]
姜黄细粉起到缓解胃痛的作用。
[0016]
竹菌提取物常用于咽喉炎、胃炎、胃溃疡、扁桃体炎等的治疗，在护胃发酵产物中起到抗胃炎，胃溃疡的作用。树舌灵芝提取物和薄皮纤孔菌提取物具有治疗胃炎胃溃疡的作用。
[0017]
低聚半乳糖(galactooligosaccharides，gos)是一种具有天然属性的功能性低聚糖，低聚半乳糖是人体肠道中双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌等有益菌极好的营养源和有效的增殖因子，可以改善人体肠道的消化吸收功能。
[0018]
本发明的一种护胃发酵产物的制备方法，包括如下步骤：
[0019]
(1)将活化后的猴头菌种接种于种子液体培养基中进行猴头发酵培养3-7天，得到猴头液体种子液；
[0020]
(2)向上述所述的培养基中，先接入占所述培养基的体积为2％-5％的所述猴头液体种子液，在温度24-27℃条件下培养5-8天，发酵结束，发酵液经真空冷冻干燥，得到护胃发酵产物。
[0021]
进一步地，步骤(1)中，所述种子液体培养基按重量份计，由如下组分组成：马铃薯20份，葡萄糖2份，硫酸镁0.05份，磷酸二氢钾0.02份。
[0022]
进一步地，步骤(1)中，所述猴头菌种选自常山猴头99。
[0023]
在上述技术方案中，利用猴头菇液体发酵将活性物质有机结合或重组，猴头菇本身具有健脾养胃，治疗胃溃疡，慢性胃炎等消化道疾病的功能。
[0024]
本发明的一种护胃发酵产物,其是由上述所述的制备方法制备得到的。
[0025]
综上，本发明的有益效果在于，
[0026]
(1)通过发酵将发酵培养液中的营养成分和有效成分更好的进行生物降解、转化和重组，有助于提高最终产品的护胃活性。
[0027]
(2)制备的猴头菌发酵产物对乙醇诱导的胃炎胃溃疡有明显的保护作用。
附图说明
[0028]
图1为小鼠胃组织的病理切片图谱。
[0029]
图中，ethanol表示乙醇。发酵物表示护胃发酵产物。
具体实施方式
[0030]
下面通过具体的实施例对本发明进行详细说明，但这些例举性实施方式的用途和目的仅用来例举本发明，并非对本发明的实际保护范围构成任何形式的任何限定，更非将本发明的保护范围局限于此。
[0031]
实施例1
[0032]
一种用于制备护胃发酵产物的培养基，由如下重量份的原料制成：
[0033]
沙棘果浆10份
[0034]
丁香提取物10份
[0035]
山药细粉10份
[0036]
竹菌、树舌灵芝和薄皮纤孔菌提取物3份
[0037]
姜黄细粉1份
[0038]
低聚半乳糖3份
[0039]
水80份。
[0040]
该护胃发酵产物的制备方法，包括如下步骤：
[0041]
s1.将活化后的猴头菌种接种于种子液体培养基中进行猴头发酵培养3-7天，得到猴头液体种子液；
[0042]
s2.向上述的培养基中先接入占培养基的体积为2％-5％的猴头液体种子液，在温度24-27℃条件下培养5-8天，发酵结束，发酵液经真空冷冻干燥，得到护胃发酵产物。
[0043]
实施例2
[0044]
一种用于制备护胃发酵产物的培养基，由如下重量份的原料制成：
[0045]
沙棘果浆12份
[0046]
丁香提取物12份
[0047]
山药细粉10份
[0048]
竹菌、树舌灵芝和薄皮纤孔菌提取物4份
[0049]
姜黄细粉2份
[0050]
低聚半乳糖3份
[0051]
水90份。
[0052]
该护胃发酵产物的制备方法，包括如下步骤：
[0053]
s1将活化后的猴头菌种接种于种子液体培养基中进行猴头发酵培养3-7天，得到猴头液体种子液；
[0054]
s2向上述的培养基中先接入占培养基的体积为2％-5％的猴头液体种子液，在温度24-27℃条件下培养5-8天，发酵结束，发酵液经真空冷冻干燥，得到护胃发酵产物。
[0055]
实施例3
[0056]
一种用于制备护胃发酵产物的培养基，由如下重量份的原料制成：
[0057]
沙棘果浆15份
[0058]
丁香提取物15份
[0059]
山药细粉10份
[0060]
竹菌、树舌灵芝和薄皮纤孔菌提取物5份
[0061]
姜黄细粉2份
[0062]
低聚半乳糖3份
[0063]
水100份
[0064]
该护胃发酵产物的制备方法，包括如下步骤：
[0065]
s1将活化后的猴头菌种接种于种子液体培养基中进行猴头发酵培养3-7天，得到猴头液体种子液；
[0066]
s2向上述的培养基中先接入占培养基的体积为2％-5％的猴头液体种子液，在温度24-27℃条件下培养5-8天，发酵结束，发酵液经真空冷冻干燥，得到护胃发酵产物。
[0067]
实施例4
[0068]
动物实验
[0069]
icr小鼠50只，体重18－22g，随机分为模型对照组、铝碳酸镁片(图1中用碳酸镁铝表示)阳性对照组(0.78g/kg)及选择实施例1-3任一的护胃发酵产物三剂量组(3.5、1.75、0.875g/kg)，每组10只，按10ml/kg体重分别灌胃给予相应的药物，每天1次，连续8天，模型对照组灌胃等体积的蒸馏水。末次给药前禁食不禁水24h，末次给药后2h无水乙醇(图1中用ethanol表示)0.1ml/只灌胃造模，造模后1h颈椎脱臼处死小鼠，开腹后切下全胃，沿胃大弯剪开，用冰盐水轻轻冲洗胃粘膜表面的污物，用滤纸吸干、除尽胃粘膜表面的粘液等，将部分胃组织匀浆并离心，取上清液低温冷冻保存样品。取另一部分胃甲醛固定，he染色，进行病理学观察。
[0070]
实验结果
[0071]
实验结果参见表1和图1。
[0072]
表1为护胃发酵产物对无水乙醇致小鼠胃粘膜损伤型胃溃疡胃组织中总sod活性的影响(x
±
s，n＝10)。
[0073]
表1
[0074][0075]
注：*p<0.05，**p<0.01(与模型对照组比较)
[0076]
由表1可以看出，护胃发酵产物显著提高小鼠胃组织的sod活性，高剂量的护胃发酵产物显著降低小鼠胃组织的mda含量，结果显示了很强的护胃活性。
[0077]
由图1可以看出，乙醇可引起小鼠黏膜肿胀，粘膜下层白细胞浸润，出血性损伤，上皮细胞缺失，而护胃发酵产物可使胃损伤得到很大程度的缓解。
[0078]
上文所列出的一系列的详细说明仅仅是针对本发明的可行性实施例的具体说明，它们并非用以限制本发明的保护范围，凡未脱离本发明技艺精神所作的等效实施例或变更均应包含在本发明的保护范围之内。