专利名称：一种营养保健液——酶解卵白蛋白溶液的制作方法
技术领域：
本发明涉及用酶法水介蛋白质的产品及方法。
蛋是人体日常所需的食物之一，卵白蛋白是蛋中的一种透明带粘性和流动液体，每只蛋平均含蛋白质10克、脂肪0.1克、醣1.2克、钙0.059克、磷0.016克、微量铁及维生素A、微量核黄素，生理应用价值很高的肽、氨基酸组成，它具有促进生长、修补细胞等功用。卵白蛋白是白蛋白的一种，而白蛋白是一种十分重要的蛋白质，其主要功能是维持血浆胶体渗透压和增加血容量，白蛋白广泛存在于动物的血清中，例牛血清白蛋白已广泛用于细胞培养，而人血清白蛋白是血浆中含量最多的蛋白质其含量为3.8-4.8%，临床上用于治疗低白蛋白症，用于严重肝脏疾病及由低白蛋白引起的水肿和腹水，它还能激活酶和保护酶活力，大约5克白蛋白液就相当于100ml血浆或250ml全血，所以它是一种较贵重的血制品，根据测定发现卵白蛋白和人体血清白蛋白的氨基酸组成成分极为相似(表1)。卵白蛋白分子量约为37000-49000，由于分子量大不能直接被机体和皮肤吸收，必须先将它水介成氨基酸和多肽才被机体吸收。氨基酸和多肽对人体具有各种生理功能，可用它耒治疗各种疾病，例如天门冬氨酸能治疗肝脏疾病，而它的钾盐、镁盐有降压和利尿作用，谷氨酸用于妇科的功能性子宫出血，精氨酸可治疗男性不育症，赖氨酸、维生素C盐是一种食欲增进剂，组氨酸有抗溃疡和促表1 卵白蛋白与血清白蛋白氨基酸的百分组成氨基酸 卵白蛋白 血清白蛋白精氨酸 5.9 6.0组氨酸 2.6 4.8赖氨酸 6.5 12.7酪氨酸 3.7 5.5色氨酸 1.2 1.0苯丙氨酸 7.7 7.0胱氨酸 2.8 6.5蛋氨酸 5.3 1.3苏氨酸 4.0 7.1丝氨酸 8.2 7.0亮氨酸 9.9 12.0异亮氨酸 7.0 3.0缬氨酸 8.8 6.0谷氨酸 16.5 17.0天门冬氨酸 9.3 10.3甘氨酸 3.1 2.0丙氨酸 6.7 6.2脯氨酸 3.8 5.1羟脯氨酸 0 0氮 15.76 16.0硫 1.83 1.8
进细胞再生作用，胱氨酸可治疗脱发并可预防早衰，半胱氨酸有介毒作用，可防止肝坏死、抗放射作用，亮氨酸可促进生长、促进胃液分泌、酪氨酸可参加体内的甲状腺素、肾上腺素的合成。
具有生理作用的多肽如治疗侏儒症的生长激素、抗衰老和补偿免疫缺损的胸腺素，具有镇痛作用的脑啡肽。在现有的技术中常采用酸或硷的方法耒水介白蛋白，往往会发生水介后氨基酸被全部或部分的破坏，例如用酸水介白蛋白时常造成丝氨酸、酪氨酸、苏氨酸的部分破坏，色氨酸全部破坏，当用硷水介时可引起精氨酸及胱氨酸的部分及全部破坏，影响氨基酸的利用，无论用酸水介或硷水介都增加了分离纯化工作的难度并造成环境污染。
本发明目的是寻找一种天然活性物资，使原耒分子量较大的、不易被人体直接吸收的卵白蛋白，水介成一种含有易被人体吸收的多肽和氨基酸的卵白蛋白溶液，且成本低、无毒副作用，作为营养液、化妆品广泛使用。
本发明通过下列步骤完成以卵白蛋白作为原料(食品级)，用木瓜蛋白酶(药用级，海南七指岭木瓜酶厂)作为水介酶、加入蒸馏水、盐酸半胱氨酸，加毕后搅拌充分混匀在温度为30-45℃，PH3-8进行酶介，酶介时间4-8小时，仃止反应水介完毕，再加温至沸、离心除去未酶介的卵白蛋白滓渣，得上清液，测定含氮量，再加入千分子零点七的亚硫酸氢钠[(A、R.上海试剂四厂XKB-001-0804-148Ⅱ)]分装，湿热灭菌清毒即成卵白蛋白酶介溶液。
采用木瓜酶酶介卵白蛋白产生的物质稳定，所含氨基酸、多肽不被破坏。酶介白蛋白有八肽物质，分子量约为960左右，另外还表2 卵白蛋白酶介溶液中氨基酸含量天门冬氨酸 1.14mg苏氨酸 0.68mg丝氨酸 1.17mg谷氨酸 1.14mg甘氨酸 0.29mg丙氨酸 0.86mg胱氨酸 3.17mg缬氨酸 1.23mg异亮氨酸 2.68mg亮氨酸 0.34mg酪氨酸 1.44mg苯丙氨酸 2.65mg组氨酸 0.36mg赖氨酸 0.43mg精氨酸 4.80mg氨基酸总量 65.90mg/ml蛋白质含量 7.94g/ml
有一个大的肽基其分子量约为6×104。小肽和氨基酸混合物它在机体内的吸收率和速度都比单纯氨基酸佳，在正常情况下，单纯氨基酸被吸收后，在机体内还要根据需要新组合成肽和蛋白质，而小肽和氨基酸混合物可省去一部分重新组合过程，因此它们的生效价高于纯氨基酸经测定其氨基酸含量(mg/ml)在表2中显示，而它的分子量测定约为960左右。
卵白蛋白酶介溶液组成成分既稳定又天然平衡。它的理化标准如下指标 要求外观 白色或淡黄色溶液味觉 微酸、略有苦味含氮量(%) 含氮量≥0.48PH 5.0±0.5细菌总数(个/ml) ≤100个/ml大肠菌群(个/ml) ≤3个/ml致病菌(系指沙门氏菌) 无汞mg/kg ≤0.05砷mg/kg ≤0.5铅mg/kg ≤1.0卵白蛋白经木瓜蛋白酶水介后，生成氨基酸和多肽物质经小鼠饲养试验表明小鼠毛色光滑，体重增加较快，根据上海药品检验所对药品毒性试验要求对卵白蛋白酶介溶液进行急性毒性和LD50试验如下用昆明杂种小白鼠体重20g，雌雄各半，每组10只，共分为二组实验组，为用一剂量组，本试验观察七天，以最大耐受量灌胃给药1ml/只，相当于50mg/kg，每日灌胃二次，连续3天，灌后观察小白鼠的毛色、活动状态等项目，活动极好、毛色光滑、发亮，食胃旺盛。
本发明采用木瓜蛋白酶进行卵白蛋白的酶介。它的酶介条件温和，酶介后便于处理，酶介的组分稳定，便于控制，木瓜蛋白酶价廉，降低了生产成本。
木瓜蛋白酶本身是作为食品添加剂广泛使用，如美国Adoph生产的“嫩肉粉”就是用木瓜蛋白酶作为食品添加剂，木瓜蛋白酶还可以作为药用，木瓜蛋白酶十分安全，其ADI不需特殊规定，木瓜蛋白酶的LD50为12.5g/kg，属於无毒级。
下面用实施例更详细地说明本发明，应理介为实施例在任何方面不对本发明范围限制。
实施例称取卵白蛋白10kg(卵白蛋白由新鲜鸡、鸭蛋中取出)、10克木瓜蛋白酶(药用级，海南七指岭木瓜酶厂)加入12kg蒸馏水，加入盐酸半胱氨酸1克，搅拌充分混和均匀后，在温度为40℃±1℃，PH7±1反应8小时，仃止反应，水介完毕，热温至沸，离心除去未酶介的卵白蛋白滓渣，上清液测含氮量1.27g/ml，再加入亚硫酸氢钠千分之零点七，分装、高压灭菌清毒，得酶介卵白蛋白溶液。
经测定氨基酸含量如下分析前处理0.4ml+0.4ml 6%磺基水杨酸离心样品浓度上清液稀释100倍样品分析时用量0.05毫升测定结果(毫克量/每毫升)(以下数据为样品分析时用量中的各氨基酸的含量) 此液含有18种氨基酸含量为76mg/ml
权利要求
1.一种酶介卵白蛋白溶液组成其特征在于氨基酸的含量为(mg/ml) 氨基酸总量为60-76mg/ml分子量约800-960。
2.根据权利1所述的酶介卵白蛋白溶液制备方法包括A以卵白蛋白、木瓜蛋白酶、蒸馏水、盐酸半胱氨酸作为原料搅拌充分混和。B在一定温度、适合PH下进行酶介。C酶介毕加热除去未酶介的卵白蛋白滓渣。D酶介后的卵白蛋白溶液消毒
3.根据权利2所述的酶介卵白蛋白溶液制备的方法其特征在于用木瓜蛋白酶水介卵白蛋白。
4.根据权利2所述的酶介卵白蛋白溶液制备方法其特征在于酶介温度为30-45℃。
5.根据权利2所述的酶介卵白蛋白溶液制备方法其特征在于适合PH为PH3-PH8。
6.根据权利要求1所述的酶介卵白蛋白溶液其特征在于可作营养保健液或化妆品原料。
全文摘要
本发明涉及酶解卵白蛋白的方法及产品，采用木瓜蛋白酶在一定反应条件下对卵白蛋白进行酶解，经处理后产生酶解卵白蛋白溶液。酶解后的卵白蛋白溶液具有人体必须的易吸收的氨基酸及多肽。它可作为人的营养保健液和化妆品原料。
文档编号A61K35/54GK1101377SQ9311257
公开日1995年4月12日 申请日期1993年10月7日 优先权日1993年10月7日
发明者黄永昌, 王定恩 申请人:上海益人生化技术开发有限公司