专利名称：鹅血抗癌制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗癌制剂，具体地说是以新鲜鹅血分离的血清、血细胞分别为主要原料制成的鹅血清制剂，鹅血细胞制剂。
众所周知，恶性肿瘤是严重威胁人类生命健康的常见疾病，世界公认的难题，而改善中、晚期肿瘤症状，延长生存期是当今中、西医肿瘤治疗学重要课题之一，目前国内外从动物，植物中寻找新的抗癌方法，成份越来越受到人们的关注，其中一个重要来源主是民间抗癌动植物。乞今为止恶性肿瘤主要治疗方法是手术、放、化疗。临床实践中发现在″三大″治疗期间或治疗之后一种既能抗癌又能扶正的辅助治疗制剂是迫切需要的，然而这种具有双向功能制剂较少，虽然也有一些，但治疗效果不十分理想。
本发明是在大胆探索，认真筛选，反复论证的基础上产生的。
本发明的目的在于提供一种综合利用鹅血，具有对恶性肿癌，抗癌扶正，消化系溃疡，萎缩性胃炎等慢性疾病有辅助治疗的鹅血制剂。
本发明的解决方案基于祖国医学古今医药专著对鹅血的论述，应用现代实验手段和临床观察，经医学硕士课题，省自然基金课题专项研究完成。
实验中发现鹅血抗癌活性成份主要存在血清部分，经体外癌细胞培养，动物实验、少量临床观察，对SR(小鼠乳腺癌)、S180(肉瘤180)、Ehrlichascites cell(艾氏腹水癌)均有明显抑瘤效应，与对照组相比(P＜0.05)。对晚期肝癌，结肠癌等病人临床应用，抗癌扶正效果明显，对消化系溃疡萎缩性胃炎有明显辅助治疗效果。本发明之鹅血抗癌制剂为以鹅血分离的鹅血清制剂，和/或分离的鹅血细胞制剂。可以是任何一种药物学上所说的剂型。其中鹅血清可佐以蜂蜜液，蜂王浆作调味，抑菌，增强营养，滑润易服，并对其抗癌活性成份起滋养作用，分离的鹅血细胞及固体成份实验显示对乙酸所制大鼠胃肠粘膜损伤有明显修复作用，并在肠道中分解的代谢产物促进胃肠濡动，排出体内的有害物质，俗称体内清洗剂。配以精选出的山药、白芨、积壳、莪术、延胡索制成片剂，具有养胃生精、行气止痛、抗溃汤，抗肿瘤等增效之功。
鹅血清口服液主要原料的组成(体积)为鹅血清 50～100％蜂蜜液 10～50％蜂王浆 2～15％鹅血清口服液主要原料的最佳组成(体积)为鹅血清 65％蜂蜜液 30％蜂王浆 5％鹅血细胞片主要原料的组成(重量份)为鹅血细胞干燥粉 20～35份 山药 10～20份白芨10～15份 枳壳 5～15份莪术10～20份 延胡索 10～20份鹅血片主要原料的最佳组成(重量)为鹅血细胞干燥粉 25份 山药15份白芨15份 枳壳10份莪术10份 延胡索 10份鹅血细胞指鹅红、白、血小板细胞及固体成份鹅血抗癌制剂的生产方法是1、采血可分人工活体翅翼静脉无菌采血法和机器处死采血法，实验资料显示体重在3Kg以上青年鹅，每月可采2-3次，并可通过科学喂养增强抗癌效应；血清经过滤，血细胞自然凝固成块后，分别置于无菌容器；2、取蜂蜜，加其等容2倍无菌蒸馏水置85～95℃恒温箱半小时，趁热滤过冷至10℃以下；另取蜂王浆，置胶体磨研磨，滤过，再取对羟基苯甲酸乙酯，用乙酯溶解，加水至100ml，搅均、浓度为0.1％；3、将鹅血清、蜂蜜液、蜂王浆、对羟基苯甲酸乙酯混入搅拌容器，搅均灌装，每支5～10ml，既可得口服液，采用紫外线辐照灭菌法，低温保存。
4、取鹅血细胞凝块，在-15℃下冷冻干燥，粉碎成120细度，再取白芨、山药、枳壳、延胡索、莪术置入多功能提取罐中，煎煮2次，第1次2小时，第2次1小时，去药渣，取煎液，浓缩至相对密度为1.30(20℃)，加乙醇至含醇量为70％静置，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.33(20℃)的稠膏，用无菌器保存；5、将鹅血细胞干燥粉，药物稠膏，10％淀粉浆混均匀后制成颗粒，置入干燥箱2小时，控制水分在3.5％左右，用14目筛整粒，加适量的硬脂酸镁，压制成异形片，包薄膜衣，即可成鹅血片。
本发明组方设计特色在于抗癌，鹅血清，扶正，蜂蜜，蜂王浆；清除体内有害物质，鹅血细胞(有机体清洗剂之称)；行气、止痛、止血、抗癌、抗溃疡用清选中药；具有如下优点1、克服发了传统生饮全血法存在着易污染、难保存、服法困难、无疗程、剂量之弊以及传统法易对患者产生误导、主次难分的缺点。
2、本发明在制备过程中力图保护原料中抗癌活性成份不受破坏，少而精，易服、易吸收。
3、本发明选用药膳同源的天然动植物药为原料，即抗癌又扶正，对人体无毒无害，符合国家药政法，食品卫生法规定。
4、与白细胞介素II、香茹多糖产品对照，实验数据证明抗癌效应均优之(P＜0.05)。
5、本发明对消化系溃疡，萎缩性胃炎等慢性疾病有显著治疗作用。
6、实验资料显示本发明对实验鼠有一定的防癌作用。
图1鹅血抗癌制剂的生产工艺2实验1的座标3实验2的座标4实验3的座标5实验4的座标6实验5的座标7实验6的座标8实验7的座标9实验8的座标图实施例按下述配比原料口服液(按100支为准)鹅血清650ml、蜂蜜100克、蜂王浆50克、无菌蒸馏水280ml，对羟基甲酸乙酯0.5克。
片剂(按1000片为准)鹅血细胞干燥粉500克、山药300克、白芨300克、枳壳200克、延胡索200克、莪术200克、淀粉60克、硬脂酸镁适量。
生产方法如下先分离鹅血清，血细胞，分别集中无菌容器，其中血清经滤过。取蜂蜜、加无菌蒸馏水置85～95℃恒温箱半小时，趁热滤过，滤液冷至10℃以下；另取蜂王浆，置胶体磨研磨，滤过；再取对羟基苯甲酸乙酯；用75％乙醇溶解。加无菌蒸馏水至100ml，搅均，浓度为0.1％；将鹅血清、蜂蜜液、蜂王浆、对羟基苯甲酸乙酯混入搅拌容器，搅均灌装，每支10ml，既可得口服液，采用紫外线辐照灭菌法、低温保存。另血细胞凝块，在-15℃下冷冻干燥，粉碎成120目细度；再取山药、白芨、枳壳、延胡索、莪术置入多功能提取罐中，煎煮2次，第1次2小时，第2次1小时，去药渣，取煎液、浓缩至相对密度为1.30(20℃)，加乙醇至含醇为70％静置，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.33(20℃)的稠膏，用无菌容器保存。将鹅血细胞干燥粉，药物稠膏，10％淀粉浆混均匀后制成颗粒，置入干燥箱70℃干燥24小时，控制水分在3.5％左右，用14目筛整粒，加适量的硬脂酸镁，压制成异形片，包薄膜衣，再包装即成鹅血片。
发明者通过鹅血清对小鼠艾氏腹水癌增殖抑制系列实验，验证了鹅血清抗癌效果，实验方法，过程、结果如下材料与方法 供血鹅9只，购自湖北地区，体重2.5～5Kg，5雄4雌；药品生理盐水系武汉滨湖制药厂产品，批号970107；白细胞介素II；北京四环生物工程制品厂生产，批号970311；小牛血清中德三利生物制品厂生产，批号97041；瘤株小鼠艾氏腹水癌购自湖北省肿瘤研究所；动物昆明小鼠购自湖北省医学科学动物中心；方法在鹅翅翼静脉处常规消毒，用无菌注射器行静脉采血，其量根据治疗组鼠数而定，一般每次约5～10ML，在酒精灯火焰旁无菌区将鹅血沿壁缓慢注入无菌试管，用盖塞严，置入37℃水浴恒温箱1/2-1小时，使其凝固，取出离心(1500转/分5-10分钟)，又在无菌环境中吸出鹅血清，按实验所需剂量行小鼠腹腔注射。动物造模；抽取艾氏腹水癌细胞，加入生理盐水在显微镜下调整癌细胞浓度为1×107/mm3，0.2ml接种小鼠各组，于第二天开始治疗，对照观察；给途径腹腔注射。
观测指标1、体重法测腹水癌细胞增殖变性1)设空白对照组验证该法可行性，精确性，其结果方法可行，能大体反映细胞增殖趋势；2)先称基础体重，隔3-4天后每日称体重；3)按体重均数绘制曲线图。
2、漏斗法测腹水量1)实验中每死亡一只均解剖，置入漏斗使腹水流入刻度试管，算累计腹水量，2)若腹水称少用注射器吸；3)同步处计死计腹水量，X±SD，T检验3、生存期检测，观察逆转现象4、生存质量观察，毛色，活动度、粪便、药物反应等。
5、同步处死胸腺，脾、肝称湿重，腹水癌细胞浓度为了客观反映鹅血清能否抗癌以及其效价，作用机理，减少实验误差，特连续重复实验8次，结果如下以体重法观察小鼠Ehrlich ascites cell增殖曲线图可见，8批重复实验结果基本相同，鹅血清(GBS)组曲线相比而言较平坦，一般在5～8天(少数在14天)有差异(P＜0.05)，以后差异渐趋加大，实验观察到3～5天正是癌细胞在体内增殖高峰，之后体重呈进行性增加(癌细胞呈指数性增殖)。有趣的是曾用2组鹅血清(GBS I II)进行对照虽有个体差异，但组间不明显(P＞0.05)，并且逐渐趋向一致，表明可重复性强。鹅血清(GBS)与空白组(control)、生理盐水(NS)相比差异明显(P＜0.05)，表明用该法治疗与不治疗其结果截然不同；与白细胞介素2组进行了三批对照，其中有2批差异延迟在12天之后(P＜0.05)，表明鹅血清抗癌作用较之持久，且副作用小；与小牛血清(NBS)比较，早期抑癌作用更明显(P＜0.05)，表明鹅血清抗癌作用非是″异性蛋白″；与香菇多糖差异说明鹅血清具有抗癌与扶正的双重功能；重复实验可推知鹅血抗癌成份主要在血清中，这是继续研究的基石。
在8批重复实验中，有4批共5只小鼠经GBS治疗出现逆转现象，经分析此现象决非偶然决非个体差异或未接种引起；1、对照组无此现；2、多次重复，尽管是少数；3、文献指出，接种EAC悬液在106/ml，成功率100％；4、此逆转现象可反证(即无腹水生长持续20天以上，之后才长出腹水，生存期在35天以上)。癌出现逆转是当今梦昧以求的事。
8批实验有6批实验观察生存期，其中有5批生存期均在20天以上，有的达到平均29天，超过文献记载的11-17天，仅有一批低于对照组。
第8批实验于第12天同步处死，EAC增殖曲线，腹水量，癌细胞浓度，胸腺，脾重量与空白对照组均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)，表明GBS确有显著抗癌作用，对宿主免疫脏器有保护和促进作用。另有2只小鼠腹水量约0.2～0.4ml，镜检癌细胞浓度15～17/mm3，这对逆转现象是个较好的解释，表明用药后癌细胞数逐渐减直至消失。表1体内GBS对小鼠Ehrlich ascites cell的抗肿瘤作用组别 动物数 基础体重 剂量+疗程生存期(天) 逆转累计腹水(只) (X+SD) (天) (只)量(ml)(g) 720 730 X+SD (X+SD)GBS 8 28.25±2.12 0.2ml/只×12 2/80/8 15.25±3.536 0/89.929±2.231NS 8 29±3.21 0.2ml/只×12 0/80/8 12.375±1.419 0/89.614±3.801注第4天、第6天GBS与NS比较P＜0.05表2体内GBS对小鼠Ehrlich ascites cell的抗肿瘤作用组别 动物数 基础体重剂量+疗程生存期(天) 逆转累计腹水量(只) (X+SD)(天)(只)量(ml)(g) 720 730 X+SD (X+SD)GBS I 10 23.1±3.213 0.2ml/只×18 7/101/10 20±6.733 0/10 2.98±2.469GBSII 10 22.05±2.291 0.2ml/只×18 9/103/10 29±11.711 2/10 3.82 5±3.569NS10 22.75±0.974 0.2ml/只×18 8/103/10 25.8±9.41 80/10 8.75±5.367注第6天GBSI与NS相比P＜0.05第14天GBSI、II与NS比较P＜0.05表3体内GBS对小鼠Ehrlich ascytes cell的抗肿作用组别 动物数 基础体重 剂量+疗程 生存期(天) 逆转(g)720 730 X+SDGBS 10 33.65±4.565 0.2ml/只×81/100/101 5±3.974 0/NSNS 10 29.95±5.139 0.2ml/只×84/101/102 7±4.244 0/10注由于基础体重存在着差异，按所增体重进行比较第6、8天GBS与NS比较P＜0.05表4体内GBS对小鼠Ehrlich ascites cell的抗肿瘤作用组别 动物数 基础体重 剂量+疗程生存期(天)逆转累计腹水(只)(X±SD) (天)(只) 量(ml)(g) 720 730 X+SD(X+SD)GBS 10 16.8±1.229 0.2ml/只×14 5/103/10 27±5.418 1/10 8.49±7.87IL-II 10 18.1±1.578 0.5万/只×14 2/101/10 17±4.268 0/10 11.92±9.772NS10 18.1±2.058 0.2ml/只×14 2/101/10 20±2.264 0/10 14.35±6.788注第9天GBS与IL-II、NS比较均P＜0.05第13天GBS与IL-II、NS比较均P＜0.05表5体内GBS对小鼠Ehrlich ascites cell的抗肿瘤作用组别 动物数 基础体重 剂量+疗程 生存期(天)逆转(只)(X±SD) (天) (只)720 730GBS10 15.7±1.033 0.2ml/只×10 5/102/101/10IL-II 10 16.4±0.568 0.5万/只×10 2/101/100/10NBS10 16.5±1.130 0.2ml/只×10 1/100/100/10注第6天GBS、IL-II与S比较P＜0.05表6体内GBS对小鼠Ehrlich ascites cell的抗肿瘤作用组别 动物数 基础体重 剂量+疗程生存期(天) 逆转 累计腹水量(只) (X+SD) (天) (只) 量(ml)(g) 720 730 X+SD (X+SD)GBS 8 22.063±2.352 0.2ml/只×18 3/8 1/8 21±6.94 0/8 9.625±6.121IL-II 8 22.188±1.624 0.5万/只×18 1/8 0/8 20±5.36 0/8 17±7.186注在第14天GBS与IL-II比较P＜0.05表7 体内GBS对小鼠Ehrlich ascites cell的抗肿瘤作用组别 动物数 基础体重剂量+疗程生存期(天)逆转(只) (g) (天)(只)720 730 X±SDGBS 4 20.25±1.535 0.4ml/只×19 3/4 1/4 23±5.354 0/4Lentanin 4 23±3.5590.002mg/只×19 2/4 0/4 18±3.559 0/4注按所增长的体重进行比较GBS与Lentanind在第8天比较P＜0.05、12天比较P＜0.01表8体内GBS对小鼠Ehrlich ascites cell的抗肿瘤作用组别 动物数 基础体重 剂量+疗程 腹水量 癌细胞 胸脾重 脾重 肝重(只) (g) (天) (ml) (107/ml) (mg)(mg) (g)GBS 6 18.357±0.3ml/只×11 0.642± 97.667± 51.367±213.483± 1.367±2.304 0.549 85.645 26.147 118.397 0.398Cohtrol 6 17.714± 空白9.35± 410.53± 18.517± 59.78±1.15±2.079 2.519 214.0176.966 16.65 0.138T值 8.019 3.322 2.968 3.149 1.262P＜0.01＜0.01 ＜0.02 ＜0.02 ＜0.05注2组鼠数均为7只在第12天处死时发现各组均有一只体重保持在15g，留下观察逆转，Coutrol组那只于14天死亡，解剖腹水2ml，而GBS组那只出现逆转。GBS与Contol在第7天，11天比较分割P＜0.05、P＜0.0权利要求
1.鹅血抗癌制剂，其特征是包括以鹅血作原料分离的血清制成的制剂，和/或分离的血细胞制成的制剂。
2.如权利要求1所述鹅血抗癌制剂，其特征是鹅血清制剂是口服液。
3.如权利要求2所述鹅血抗癌制剂，其特征是鹅血清口服液的组成(体积)包括为鹅血清 50～100％蜂蜜液 10～50％蜂王浆 2～15％
4.如权利要求3所述鹅血抗癌制剂，其特征是鹅血清口服液的主要最佳组成(体积)鹅血清 65％蜂蜜液 30％蜂王浆 5％
5.如权利要求1～4所述鹅血抗癌制剂，其特征是有抗癌效应是指鹅血清，以新鲜血清最佳。
6.如权利要求1所述鹅血抗癌制剂，其特征是鹅血细胞制剂的主要原料的组成(重量份)为鹅血细胞干燥粉20～35份 山药 10～20份白芨 10～15份 枳壳 5～15份莪术 10～20份 延胡索 10～20份
7.如权利要求6所述鹅血抗癌制剂，其特征是主要原料的最佳组成(重量)为鹅血细胞干燥粉 25份山药 15份 白芨 15份枳壳10份莪术10份 延胡索 10份
8.如权利要求1、6、7所述鹅血抗癌制剂，其特征是鹅血细胞是指鹅红、白、血小板细胞及固体成份。
9.如权利要求1所述鹅血抗癌制剂，其特征是所述制剂是任何一种药物学上所说的剂型。
全文摘要
本发明涉及鹅血抗癌制剂——鹅血清制剂和/或鹅血细胞制剂。它是以新鲜鹅血为原料,分离鹅血清和血细胞。制剂包括血清佐以蜂蜜液、蜂王浆制成口服液,血细胞经低温干燥,粉碎、过目,配以山药、白芨、枳壳、延胡索、莪术精选中药经科学加工制成鹅血片。本发明配方独特,抑瘤显著,减轻化疗、放疗对宿主毒副作用,提高机体红细胞,淋巴细胞免疫能力,延长生存期,对恶性肿瘤,消化系统溃疡,萎缩性胃炎等疾病有良好辅助治疗作用,并有一定的防癌作用。本发明最大特点是经系统实验研究和临床运用论证。
文档编号A61K35/56GK1254561SQ9812167
公开日2000年5月31日 申请日期1998年11月23日 优先权日1998年11月23日
发明者李航森, 邹季, 王茹凤, 吴献群, 徐泽 申请人:湖北中医学院附属医院