专利名称：一种靶向抗癌转移化学药物padm及制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于化学药物领域，本发明涉及一种靶向Cath印sin B (Cat B)抗癌转移的化合物PADM(Ac-Phe-Lys-PABC-ADM · HCl)，同时涉及该靶向治疗药物的制备方法，还涉及其在治疗胃癌腹膜转移癌中的应用，PADM在胃癌腹膜转移癌裸鼠模型中能高效抑制腹膜转移癌形成，并显著降低毒副作用，具有开发成治疗胃癌腹膜转移癌及其它高表达Cat B恶性肿瘤药物的应用价值。
背景技术：
胃癌是最常见的全球性恶性肿瘤，尤其是发展中国家，在男性肿瘤患者中胃癌发生率和死亡率分列第二和第三，女性患者中发生和死亡率均列第四。在我国，胃癌死亡率位列各大肿瘤第三位。胃癌综合防治与人民群众的生命健康息息相关。早期胃癌可以通过根治性手术治疗得要很好的治疗。但在我国，由于缺少必要的早期筛查计划，且公众自我预防意识不足，约80%的胃癌患者在确诊或手术探查时已经发生重要脏器，尤其是腹腔内种植转移。传统胃癌治疗方法包括手术治疗、局部放疗、辅助化疗等，这些方案在一定程度上能够延长患者生存期。但国际合作研究，包括INT-0116试验、 MAGIC试验以及ACTS-GC试验均表明，单纯手术治疗或手术联合术前或术后放化疗，不能够控制腹腔内复发转移。MAGIC试验表明含有蒽环类抗癌药物如阿霉素(AdriamycimADM)的化疗方案对胃癌有效。阿霉素作为一种重要的传统化疗药物，毒副作用严重，主要包括心脏毒性、骨髓抑制、肝脏毒性等，临床应用严重受限。国内外大量研究表明组织蛋白酶B(Cath印sin B，Cat B)与胃癌等恶性实体瘤侵袭转移密切相关。Cat B具有以下主要特性，即主要分布于恶性肿瘤细胞胞浆及包膜表面，在肿瘤侵袭前锋部位含量最高，而正常组织细胞表达水平极低或不表达，同时Cat B能够特异酶解特定修饰肽段Wre-Lys。本发明即基于Cat B的特性，在ADM分子上合成添加一段Cat B特异酶解修饰基，形成新药 PADM(Ac-Phe-Lys-PABC-ADM 'HCl)。PADM本身不具细胞杀伤能力，在外周血中稳定，对正常或不表达Cat B细胞无(低)毒副作用；而在肿瘤组织尤其在肿瘤侵袭前锋部位，大量高活性Cat B特异酶解修饰肽段释放大量ADM分子；ADM被肿瘤细胞摄取，从而实现靶向杀伤肿瘤细胞的目的。通过化学合成修饰ADM分子形成PADM，其具有靶向作用于Cat B,发挥抗癌及癌转移作用，有望改善胃癌患者生存质量，控制复发转移，延长患者生存期。
发明内容
本发明的目的是在于提供了一种靶向作用于Cat B的抗癌转移化学药 PADM(Ac-Phe-Lys-PABC-ADM 'HCl)。PADM易于合成，在血液中稳定存在，在肿瘤组织中能够发挥高效杀伤肿瘤细胞并抗癌转移，同时显著降低毒副作用。PADM对高表达Cat B恶性肿瘤组织具有靶向杀伤作用，具备阿霉素高效抗癌功能，避免了阿霉素严重心脏毒性。
本发明的另一个目的是在于提供了一种靶向抗癌转移化学药物PADM的制备方法。该方法操作方便易行，条件稳定，易于生产和制备高纯度PADM。操作方便，经济适用，具有很好的靶向抗癌能力。本发明的再一个目的是在于提供了一种靶向抗癌转移化学药物PADM在胃癌腹膜转移癌治疗中的用途，PADM在胃癌腹膜转移癌裸鼠模型中能高效抑制腹膜转移癌形成，与传统阿霉素相比，显著降低毒副作用。为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施一种靶向抗癌转移化学药物PADM，其具体分子式为C52H59N5O16. HC1，其具体结构为 Ac-Phe-Lys-PABC-ADM · HCl，经过纯化分析得到高纯度PADM盐酸盐。结构为
权利要求
1. 一种靶向抗癌转移化学药物PADM，其分子式为C52H59N5016.HC1，结构为
2.根据权利要求1所述的一种靶向抗癌转移化学药物PADM，其特征在于，所述的结构式为Ac-Wie-Lys-PABC。
3.权利要求1所述的一种靶向抗癌转移化学药物PADM的制备方法。其步骤是(1) Fmoc-Lys芴甲氧羰基-赖氨酸在500ml三颈反应瓶中加入Fmoc-Lys盐酸盐、无水二氯甲烷、二异丙基乙胺和三甲基氯硅烷，将此混合物加热至80°C回流并保持1小时，然后将混合物冷却至4°C，尔后加入二异丙基乙胺31ml，3. Ieq和4_甲氧基三苯甲基氯18. 29g, 1. 05eq，将反应混合物在25°C下搅拌15小时，溶剂蒸发后，将残留物用pH = 5缓冲溶液、7』C 和盐水洗涤3次，然后用硫酸纳干燥、过滤，蒸发后得到浅黄色粉末状产品；O) Lys赖氨酸在250ml圆底三颈反应瓶内加入第一步的中间体Fmoc-Lys (MMT)、二氯甲烷和乙腈，然后再加入二乙胺，反应混合物在25°C下搅拌2小时，蒸馏除去溶剂，残留物用热乙腈洗涤，然后加入特丁基甲醚处理，固体产物用二氯甲烷和甲醇溶解1 1得到一混合溶液；(3)Ac-Phe-Lys乙酰基-苯丙胺酰基-赖氨酸在一个250ml的三颈圆底烧瓶内加入水和1，2- 二甲氧基乙烷，于氮气保护下加入上一步反应产物Lys和氢氧化锂，然后在搅拌中加入Ac-Phe-OSu溶液70ml 1，2- 二甲氧基乙烷，反应混合物搅拌4小时成为一均相溶液，反应进行到18小时后，蒸发至干，残留物用乙酸乙酯提取，用pH = 4缓冲溶液洗涤，再用水和盐水洗涤，干燥浓缩后产生浅黄色固体产物；(4)Ac-Phe-Lys-PABOH乙酰基-苯丙胺酰基-赖氨基-对氨基苯甲醇在一个250ml三颈圆底烧瓶中加入Ac-Phe-Lys、二氯甲烷和特丁基二碳酸酯，于氮气保护下再加入吡啶，反应混合物在25°C下搅拌15分钟后，加入对氨基苯甲醇，反应混合物在25°C下搅拌18小时后，蒸发溶剂至干，残留物在高真空下干燥后，用特丁基甲醚处理，固体产物用特丁基甲醚连续洗涤5次；(5)Ac-Phe-Lys-PAB-PNP乙酰基-苯丙胺酰基-赖氨基-对氨基苯甲氧基-对硝基苯碳酸酯在氮气保护下，往一个250ml三颈圆底烧瓶中加入Ac-Phe-Lys-PABOH、二对硝基苯碳酸酯和新鲜分子筛，尔后在25°C下再加入二氯甲烷和二异丙基乙胺，反应混合物在25°C 下搅拌18小时，尔后过滤除去固体杂质，滤液蒸干后于高真空下干燥6小时，粗产品经重结晶进一步纯化，固体产物经过滤，洗涤；(6)Ac-Phe-Lys-PABC-ADM乙酰基-苯丙胺酰基-赖氨基-对氨基苄氧羰基-阿霉素 在氮气保护下，往一个250ml三颈圆底烧瓶内加入Ac-Phe-Lys (MMT)-PABC-PNP、阿霉素盐酸盐、二甲基甲酰胺、二异丙基乙胺，反应混合物在25°C下搅拌4 后，在加入400ml乙酸乙酯，有机相用水洗涤4次，然后蒸发至干，粗产品经层析柱纯化二氯甲烷甲醇为20 1 到15 1，得到桔黄色固体产品；(7)Ac-Phe-Lys-PABC-ADM -HCl乙酰基-苯丙胺酰基-赖氨基-对氨基苄氧羰基-阿霉素盐酸盐在氮气保护下往一个250ml三颈圆底烧瓶中加入1. 89g Ac-Phe-Lys-PABC_ADM、 茴香醚和二氯甲烷，反应混合物在25°C下搅拌中加入二氯醋酸，反应混合物在搅拌2小时后倒入乙酸乙酯中，然后在搅拌2小时，所得桔黄色固体经过滤后再用乙酸乙酯洗涤5次， 固体粗产品溶解在甲醇中，所得溶液经过离子交换树脂住，所含产品组分离后蒸发至干，残留物经二氯甲烷处理后经过滤得到最终产品。
4.权利要求1所述的一种靶向抗癌转移化学药物PADM在制备治疗或预防胃癌腹膜转移癌药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种靶向抗癌转移化学药物PADM及制备方法和用途，其具体结构为Ac-Phe-Lys-PABC-ADM·HCl，经过纯化分析得到高纯度PADM盐酸盐。步骤是(1)Fmoc-Lys(MMT)，(2)Lys(MMT)，(3)Ac-Phe-Lys(MMT)，(4)Ac-Phe-Lys(MMT)-PABOH，(5)Ac-Phe-Lys(MMT)-PAB-PNP，(6)Ac-Phe-Lys(MMT)-PABC-ADM，(7)Ac-Phe-Lys-PABC-ADM·HCl，残留物经二氯甲烷处理后经过滤得到最终产品。一种靶向抗癌转移化学药物PADM在制备治疗或预防胃癌腹膜转移癌药物中的应用。简单易行，工艺稳定，产率比较高，PADM具有高效抗癌功能。
文档编号C07K1/18GK102504013SQ20111030092
公开日2012年6月20日 申请日期2011年9月28日 优先权日2011年9月28日
发明者李雁, 洪亚平, 瑞蒙德.费斯通, 邵丽华 申请人:李雁