用于筛选抗癌症医药组合物的多肽分子及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供至少一种多肽分子，用于检测样品中三磷酸腺苷结合盒运输蛋白抗体的含量，进而筛选出富含三磷酸腺苷结合盒运输蛋白抗体的样品，作为毒杀抗药性癌细胞的抗癌症医药组合物。
【专利说明】用于筛选抗癌症医药组合物的多化分子及其应用 【【技术领域】】
[0001] 本发明涉及一种用于筛选癌症医药组合物的多肤分子及其应用，特别是涉及一 种用于筛选H磯酸腺巧结合盒运输蛋白抗体（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)的多肤分子及其应用。 【【背景技术】】
[0002] 化学治疗烟lemotherapy)是中晚期癌症的主要治疗方法。一般而言，癌症病人在 经过一段时间的化学治疗后，虽然大多数的癌细胞都会死亡，但仍有少数未被成功毒杀的 癌细胞会留存在体内，数量约在1〇 8?1〇9之间。该些留存的癌细胞会表达大量的H磯酸 腺巧结合盒运输蛋白（ATP binding-cassette transporter, W下简称ABC运输蛋白），并将 ABC运输蛋白运送到细胞膜上，W执行排除细胞内化学治疗药物的工作。亦即，留存的癌细 胞会利用ABC运输蛋白将癌细胞内的化学治疗药物转移到细胞外，从而使化学治疗药物不 再能有效攻击该些留存的癌细胞。此即临床上所谓的癌细胞抗药性，亟待找寻化学治疗W 外的方法毒杀该些具有抗药性的癌细胞。
[0003] 文献 Sarkadi B, Homolya L, Szakdcs G, Vdradi A. Human multidrug resistance ABCB and ABCG transporters:participation in a chemoimmunity defense system. Physiol 民ev. 2006, 86 (4) : 1179-1236中提及与癌细胞抗药性有关的ABC运输蛋白，主要包括下列亚 家族（subfamily):
[0004] S鱗酸腺昔结合盒运输蛋白亚家族 B(ATP-binding cassette protein subfamily B) :例如ABCBl，又称为多重抗药性蛋白1 (multi drug resistance proteinl，简称MDRl)，亦 称为P酷蛋白（permeability glycoprotein);又例如ABCB4(又称为MDR3);另外还有例如 ABCB11，是 Pgp 的同系家族（Sister of Pgp)。
[0005] S鱗酸腺昔结合盒运输蛋白亚家族 C(ATP-binding cassette protein subfamily C) :例如 ABCCl，又称为多重抗药性相关蛋白 1 (multi drug resistance related proteinl， 简称MRP]_);又例如ABCC2,又称为多重抗药性相关蛋白2 (multi drug resistance related protein2,简称 MRP2);可能还包括 ABCC3 -6、ABCC10 - 11。
[0006] S鱗酸腺昔结合盒运输蛋白亚家族 G(ATP-binding cassette protein subfamily G):例如ABCG2,又称为双層恩抗药性蛋白（mitoxantrone resistance protein,简称MXR)， 亦称为乳癌抗药性蛋白化reast cancer resistance protein,简称BCRP)。
[0007] 美国专利US7785812揭露一种毒杀抗药性癌细胞的方法，其利用表达在抗药性 癌细胞表面的大量ABC运输蛋白进行标靴攻击。其W人为方式制造ABC运输蛋白抗体 (anti-ATP binding-cassette transporter antibody)，且利用该 ABC 运输蛋白抗体携带足 W毒杀细胞么药物，形成一抗体标靴药物。则，该抗体标靴药物藉由ABC运输蛋白抗体而结 合在抗药性癌细胞上，并W其所携带的药物在抗药性癌细胞周围进行毒杀作用。
[000引然而，无论是直接制备ABC运输蛋白抗体或是先制备ABC运输蛋白后再用W筛选 ABC运输蛋白抗体，其中制备ABC运输蛋白抗体/ABC运输蛋白的过程都必需考虑其是否能 被折叠成正确构形，制备过程中要考虑的因素既困难又复杂，使成本难w降低。此外，依现 有技术所制备的ABC运输蛋白抗体，仅能辨识一种ABC运输蛋白，难W适用于所有种类的抗 药性癌细胞。再者，现有技术利用药物对抗药性癌细胞进行毒杀，长期下来，将对身体及肾 脏造成不小的负担。 【
【发明内容】
】
[0009] 鉴于现有技术的缺陷，本发明提供一种制备简单的多肤分子，W取代结构复杂的 ABC运输蛋白，作为筛选ABC运输蛋白抗体的主要依据。
[0010] 另外，本发明提供多种多肤分子及其组合，使能筛选出含有多种ABC运输蛋白抗 体的医药组合物，从而能适用于各种不同种类的抗药性癌细胞。
[0011] 本发明亦提供一种对身体及肾脏负担较小的癌症医药组合物，W对抗抗药性癌细 胞。
[0012] 在一个较佳实施例中，本发明提供一种多肤分子，该多肤分子的氨基酸序列如 下：
[0013] 包含 SEQ ID NO ;1 序列、SEQ ID NO ;2 序列、SEQ ID NO ;3 序列、SEQ ID NO ;4 序列、 SEQ ID NO ;5序列、SEQ ID NO ;6序列W及SEQ ID NO ;7序列中之一者或其组合；或
[0014] 包含将（a)的氨基酸序列进行一个或多个氨基酸之取代、删除或添加后之一衍生 序列；其中，包含该衍生序列之一衍生多肤分子可与至少一种H磯酸腺巧结合盒运输蛋白 之抗体（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)结合。
[0015] 在一个较佳实施例中，该衍生多肤分子与该至少一种H磯酸腺巧结合盒运输蛋白 之抗体间的结合力，大于磯酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline,简称PBS ;抑7. 4)与 该至少一种H磯酸腺巧结合盒运输蛋白之抗体间的结合力。
[0016] 在一个较佳实施例中，该可被结合之至少一种H磯酸腺巧结合盒运输蛋白之抗体 系一引发癌症化学治疗抗药性之H磯酸腺巧结合盒运输蛋白之抗体。
[0017] 本发明亦提供一种多肤分子之用途，其系用于筛选出一癌症医药组合物，其中该 多肤分子之氨基酸序列如下：
[0018] 包含 SEQ ID NO ;1 序列、SEQ ID NO ;2 序列、SEQ ID NO ;3 序列、SEQ ID NO ;4 序列、 SEQ ID NO ;5序列、SEQ ID NO ;6序列、W及SEQ ID NO ;7序列中之一者或其组合；或
[0019] 包含将（a)的氨基酸序列进行一个或多个氨基酸之取代、删除或添加后之一衍生 序列；其中，包含该衍生序列之一衍生多肤分子可与至少一种H磯酸腺巧结合盒运输蛋白 之抗体（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)结合。
[0020] 在一个较佳实施例中，该被筛选之癌症医药组合物系分离自人体之一血液、一血 浆、或一血清中之至少一者。
[0021] 在一个较佳实施例中，系用于筛选出含有至少一种引发癌症化学治疗抗药性之H 磯酸腺巧结合盒运输蛋白之抗体之一癌症医药组合物。
[0022] 在一个较佳实施例中，该被筛选出之该癌症医药组合物，系可引发一免疫 细胞之抗体依赖性细胞介导的细胞毒杀作用（antibody-dependent cell-mediated c}ftotoxicity)者，W攻击一癌细胞。
[0023] 在一个较佳实施例中，该被筛选之该癌症医药组合物，系可引发一自然杀手细胞 (化化ral killer cells)之抗体依赖性细胞介导的细胞毒杀作用者，W攻击具有化学治疗 药物抗药性之一癌细胞。
[0024]本发明另外提供一种分离（或纯化）之抗体或人工生产之抗体，可与如下所述之 多肤分子结合：
[00巧]包含 SEQ ID NO ;1 序列、SEQ ID NO ;2 序列、SEQ ID NO ;3 序列、SEQ ID NO ;4 序列、 SEQ ID NO ;5序列、SEQ ID NO ;6序列、W及SEQ ID NO ;7序列中之一者或其组合之多肤分子； 或
[0026] 包含将（a)的氨基酸序列进行一个或多个氨基酸之取代、删除或添加后所衍生 之一衍生多肤分子，且该衍生多肤分子可与至少一种H磯酸腺巧结合盒运输蛋白之抗体 (anti-ATP binding-cassette transporter antibody)结合D
[0027] 在一个较佳实施例中，系可引发一免疫细胞之抗体依赖性细胞介导的细胞毒杀作 用者。
[0028] 在一个较佳实施例中，系可引发一自然杀手细胞之抗体依赖性细胞介导的细胞毒 杀作用。
[0029] 本发明更提供一种癌症药物或癌症医药组合物，包含至少一种上述之分离之抗体 或人工生产之抗体。
[0030] 在一个较佳实施例中，本发明提供一种检测方法，系W-多肤分子作为一探 针，检测一样品中之H磯酸腺巧结合盒运输蛋白之抗体（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)含量，其中该多肤分子之氨基酸序列如下：
[0031] 包含 SEQ ID NO ;1 序列、SEQ ID NO ;2 序列、SEQ ID NO ;3 序列、SEQ ID NO ;4 序列、 SEQ ID NO ;5序列、SEQ ID NO ;6序列、W及SEQ ID NO ;7序列中之一者或其组合；或
[0032] 包含将界定于（a)之氨基酸序列进行一个或多个氨基酸之取代、删除或添加后之 一衍生序列；其中，包含该衍生序列之一衍生多肤分子可与至少一种H磯酸腺巧结合盒运 输蛋白之抗体（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)结合。
[0033] 在一个较佳实施例中，系利用酵素免疫吸附法、西方墨点法、生物芯片法、磁珠分 离暨定量方式、W及其它探针检测方式之至少一者，检测该样本中之H磯酸腺巧结合盒运 输蛋白之抗体含量。
[0034] 在一个较佳实施例中，其至少包括下列步骤：
[00巧]涂覆（coating)该多肤分子至一容器中；
[0036] 去除该容器中之一第一息浮液；
[0037] 置入该样品之一适当浓度样本至该容器中；
[0038] 去除该容器中之一第二息浮液；
[0039] 置入一第二抗体；
[0040] 去除该容器中之一第H息浮液；W及
[0041] 检测该容器中之该第二抗体之含量。
[0042] 在一个较佳实施例中，该容器系96孔盘。
[0043] 在一个较佳实施例中，该样品系分离自人体之一血液、一血浆或一血清中之至少 一者。 【【专利附图】
【附图说明】】
[0044] 图1 ;系一方块流程图，表示出本案检测ABC运输蛋白抗体含量之一方法实施例。
[0045] 图2 ;系一方块流程图，表示出利用本案多肤分子纯化ABC运输蛋白抗体之一方法 实施例。 【【具体实施方式】】
[0046] 鉴于现有技术的限制及缺陷，本发明提供至少一种筛选癌症医药组合物之多肤分 子及其应用方法，系W构形简单的多肤分子筛选富含抗体的医药组合物，并透过人体固有 之机制毒杀具有抗药性之癌细胞。
[0047] 已知自然杀手细胞（化化ral killer cells ;通常被定义为CD3-CD56+亚群的淋己 细胞）在人类免疫系统上扮演对抗癌细胞的重要角色，主要系通过抗体依赖性细胞介导的 细胞毒杀作用（antibody-dependent cell-mediated c}ftotoxicity，简称 ADCC)杀死癌细 胞。详言之，当癌细胞表达ABC运输蛋白（因而具有抗药性），而被身体内或外来的ABC运 输蛋白抗体结合时，自然杀手细胞表面的CD16分子【化浊III ;系抗体固定区（化agment of constant region)之受体，会专一性结合于所有人类抗体之固定区】会辨识并结合至该ABC 运输蛋白抗体的固定区（例如IgG抗体的固定区），继而引发自然杀手细胞之抗体依赖性细 胞介导的细胞毒杀作用（ADCC作用），亦即，释放丙型干扰素（IFN-Y )等细胞因子而毒杀该 抗药性癌细胞。
[0048] 依发明人多年之经验及研究结果，认为应能揃取现有技术W ABC运输蛋白为标祀 之优点，去除需制备构形复杂之抗体/蛋白质W及利用药物毒杀之两种缺点，发展出一种 更简便、对身体负担较小之毒杀癌细胞方法。亦即，研发一种线性多肤抗原，W筛选含有多 种ABC运输蛋白抗体之医药组合物，并透过人体自然杀手细胞之自然机制攻击抗药性癌细 胞，W解决现有技术之各种问题。
[0049] W下提供利用本发明之实施例之详细说明书，W及本发明之技术及特点。然本实 施例并非用W限定本发明，任何熟悉此技术者，在不脱离本发明之精神和范围内，当可作各 种之更动与润饰。
[0050] 实施例一；ABC运输蛋白线性多肤分子的设计
[0051] 利用生物信息学方法，从各种ABC运输蛋白（系能引发化学治疗抗药性之该些ABC 运输蛋白）序列中，找寻与人类白血球抗原化uman leukocyte antigen,简称HLA ;即人类 之Major histocompatibility complex,简称MHC)有较高亲和力的序列位置。W此方法找 出的线性多肤序列较可能刚好位于ABC运输蛋白表面，而能取代ABC运输蛋白，专一性地与 ABC运输蛋白抗体结合。
[005引经过一系列的设计改良及实验筛选，研发出7种ABC运输蛋白线性多肤分子（多 肤分子一般由20?50个氨基酸组成，但不W此为限），即SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO ;2、SEQ ID NO ;3、沈Q ID NO ;4、沈Q ID NO ;5、沈Q ID NO ;6、W 及沈Q ID NO ;7。此 7 种 ABC 运输 蛋白线性多肤分子之其中一种或其组合，可与至少一种ABC运输蛋白之抗体（anti-ATP binding-cassette transporter antibody)结合，而能筛选出癌症医药组合物。尤其，此7 种ABC运输蛋白线性多肤分子之其中一种或其组合，可与至少一种引发癌症化学治疗抗药 性之ABC运输蛋白之抗体结合，W筛选出能对抗抗药性癌细胞之癌症医药组合物。
[0053] 其中，该些ABC运输蛋白线性多肤分子与该至少一种ABC运输蛋白之抗体间的结 合力，大于磯酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline,简称PBS ;抑7. 4)与该至少一种ABC 运输蛋白之抗体间的结合力。
[0054] 实施例二；制备ABC运输蛋白线性多肤分子
[00巧]W化学法合成该些ABC运输蛋白线性多肤分子，纯度须大于95%。可委巧胜肤 合成服务公司合成该些ABC运输蛋白线性多肤分子。 申请人:系委巧明欣生物科技有限公 司（地址：台北市南港区园区街3号10楼之1 ;电话；02-26557128 ;网址；http://www. missionbio. com. tw/)制备该7种ABC运输蛋白线性多肤分子。
[0056] 将合成的ABC运输蛋白线性多肤分子溶于67%的己酸中巧mg线性多肤分子/I血 之67%己酸），于-2(TC之低温冰箱中保存。
[0057] 实施例H ;筛选癌症医药组合物
[0058] 将上述7种ABC运输蛋白线性多肤分子之至少一种与样品（例如分离自人体之 一血液、一血浆、或一血清中之至少一者）混合，检测样品中ABC运输蛋白线性多肤分子暨 ABC运输蛋白抗体复合物（W下简称多肤分子暨抗体复合物）之含量。多肤分子暨抗体 复合物含量较多者，代表原样品中含有大量引发癌症化学治疗抗药性之ABC运输蛋白之抗 体，可作为癌症医药组合物，W引发自然杀手细胞之抗体依赖性细胞介导的细胞毒杀作用 (antibody-cbpendent cell-mediated 巧totoxicity)，杀死表现 ABC 运输蛋白之抗药性癌 细胞。
[0059] 其中，可利用酵素免疫吸附法巧nzyme-linked immunosorbent assay,简称EILISA) 或其它利用多肤分子为探针之检测方式（例如西方墨点法、生物芯片法、磁珠分离暨定量 方式），检测样品中ABC运输蛋白抗体之含量，W筛选适合作为癌症医药组合物之样品，尤 指W筛选含有至少一种引发癌症化学治疗抗药性之ABC运输蛋白之抗体的一种癌症医药 组合物。W下W酵素免疫吸附法为例进行详细说明：
[0060] 请参阅图1，其系一方块流程图，表示出本案检测ABC运输蛋白抗体含量之一方法 实施例。本发明一种检测ABC运输蛋白抗体含量的较佳实施方法至少包括：
[006。 步骤S1 ;涂覆（coating)多肤分子至一容器中；
[0062] 步骤S2 ;去除该容器中之一第一息浮液；
[0063] 步骤S3 ;置入一样品之一适当浓度样本至该容器中；
[0064] 步骤S4 ;去除该容器中的一第二息浮液；
[0065] 步骤S5 ;置入一第二抗体；
[006引步骤S6 ;去除该容器中的一第立息浮液；W及 [0067] 步骤S7 ;检测该容器中之该第二抗体之含量。
[006引较佳者，步骤S1中之该容器，系96孔盘，但不W此为限。W 96孔盘为例，步骤S1 系在96孔盘的一第一孔及一第二孔中，加入100 y L之ABC运输蛋白线性多肤分子，并在96 孔盘的一第H孔及一第四孔中，加入100 y L之植物性蛋白多肤分子，4C涂覆（coating) 8 小时（或 overnight)。
[0069] 其中，该ABC运输蛋白线性多肤分子及该植物性蛋白多肤分子已先W磯酸盐缓冲 液（Phosphate Buffered Saline,简称 PBS ;抑7. 4)稀释至 5 ?20 y g/mL。且该 ABC 运输蛋 白线性多肤分子系 SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO ;2、SEQ ID NO ;3、SEQ ID NO ;4、SEQ ID NO ;5、SEQ ID NO ;6、W及SEQ ID NO ;7中之至少一者或其组合。
[0070] W涂覆ABC运输蛋白线性多肤分子之该第一孔为实验组，涂覆植物性多肤分子之 该第H孔为对照组，涂覆ABC运输蛋白线性多肤分子之该第二孔为第一空白对照组，涂覆 植物性多肤分子之该第四孔为第二空白对照组。
[0071] 再则，步骤S2系去除该第一孔、第二孔、第H孔、第四孔中之第一息浮液。较佳者， 去除第一息浮液后，再W磯酸盐缓冲液（PH7. 4)清洗H次。
[0072] 此外，步骤S3中之该样品系分离自人体之一血浆（或一血液、一血清，但不W此 为限）。该适当浓度样本系该血浆（或该血液、该血清，但不W此为限）经磯酸盐缓冲液 (抑7. 4)稀释100?200倍后所制成。步骤S3中，系于该第一孔及该第H孔中加入100 uL 该适当浓度样本，该第二孔及该第四孔中则加入100 y L磯酸盐缓冲液（pH7. 4)，并于适当 温度下作用一段时间。较佳者，于室温作用2小时。
[0073] 步骤S4系去除该第一孔、第二孔、第H孔、第四孔中之第二息浮液。较佳者，去除 第二息浮液后，再W磯酸盐缓冲液（PH7. 4)清洗H次。
[0074] 步骤S5中的该第二抗体系可与人类ABC运输蛋白抗体专一性结合之抗体，例如兔 抗人免疫球蛋白 G 抗体（Anti-Human 1肖6(化 specific) antibody produced in r油bit)或山 羊抗人免疫球蛋白 G 抗体（Anti-Human 1肖6(化 specific) antibody produced in goat)。步 骤S5中，系加入例如200 uL适当浓度之该第二抗体（例如W磯酸盐缓冲液（PH7. 4)稀释 10000倍），并于适当温度下作用一段时间。较佳者，于室温作用2小时。
[00巧]步骤S6系去除该第一孔、第二孔、第H孔、第四孔中之第H息浮液。较佳者，去除 第H息浮液后，再W磯酸盐缓冲液（PH7. 4)清洗H次至五次。
[0076] 步骤S7之检测原理，系利用该第二抗体携带的一酵素，将一化合物转换为一 呈色化合物，则该第二抗体之含量与该酵素的量及呈色深浅呈正比，可藉由检测颜色深 浅而回推该第二抗体之含量。较佳者，该第二抗体携带的该酵素，可将四甲基联苯胺 (Tetramethy化enzidine，简称TMB)转换为蓝色产物。抑或是，步骤S7之检测原理，系利用 该第二抗体携带的一英光物质进行检测，藉由检测英光强度而回推该第二抗体的含量。
[0077] 于该第二抗体携带的酵素能将TMB转换为蓝色产物的实施例中，步骤S7之具体步 骤系于该第一孔、第二孔、第H孔、第四孔中加入100 y L TMB，反应20分钟，再加入50 y L2M H2SO4终止反应。W 450nm为检测波长，630nm为参考波长，测定吸光值（0D值），并计算特 异性结合指数（specific binding index,简称 SBI):
[0078] SBI =(实验组之吸光值一第一空白对照组之吸光值）/(对照组之吸光值一第二 空白对照组之吸光值）
[0079] W SBI作为筛选样品（例如分离自人体之一血液、一血浆、或一血清之至少一者， 但不W此为限）之参考数值，凡是比值大于1. 5者，可作为治疗癌症的医药组合物，用于引 导自然杀手细胞之「抗体依赖性细胞介导的细胞毒杀作用（即ADCC作用）」。
[0080] 为充分掲露利用本医药组合物之方法，依本发明人多年的经验及发明研究结果可 知，该医药组合物之剂量及方法为；每次化学疗程可输入150?300mL该医药组合物一次。
[0081] 实施例四；纯化ABC运输蛋白抗体
[0082] 请参阅图2,其系一方块流程图，表示出利用本案多肤分子纯化ABC运输蛋白抗体 之一方法实施例。
[0083] 步骤Sll ;制备带有一多肤分子之一磁珠，形成一磁珠多肤分子；
[0084] 步骤S12 ;混合该磁珠多肤分子与一样品，而得一混合液；
[0085] 步骤S13 ;将该混合液通过受有一磁力之一管柱（column);
[0086] 步骤S14 ;将一缓冲液注入该管柱中，W分离一磁珠多肤分子暨抗体复合物中的 该磁珠多肤分子及一 ABC运输蛋白抗体。
[0087] 其中，步骤 S11 中之该多肤分子系 SEQ IDN0 ;1、SEQ IDN0 ;2、SEQ IDN0 ;3、SEQ ID NO ;4、SEQ ID NO ;5、SEQ ID NO ;6、W及SEQ ID NO ;7中之至少一者。步骤Sll可委巧磁珠厂 商代为执行，例如委巧台湾圆点奈米技术股份有限公司（地址：桃园县桃园市龙寿街81巷 12 弄 2 号；电话；03-3607555 ;网址；http://www. tanbead. com/)代为执行。
[0088] 步骤S12中，该混合液中带有一磁珠多肤分子暨抗体复合物。
[0089] 执行步骤S13之过程中，该混合液中的该磁珠多肤分子暨抗体复合物会受磁力影 响而吸附在该管柱上。
[0090] 步骤S14中，该缓冲液应选用能打断该磁珠多肤分子与该ABC运输蛋白抗体之连 结关系者。若步骤S11是委巧磁珠厂商进行，则该厂商会一并提供合适的缓冲液。
[0091] W此方式纯化之ABC运输蛋白抗体，可引发自然杀手细胞之抗体依赖性细胞介导 的细胞毒杀作用，且可进一步用于制备癌症药物或制备癌症医药组合物。
[0092] 本案提供之一种用于筛选抗癌症医药组合物之多肤分子即SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO ;2、沈Q ID NO ;3、沈Q ID NO ;4、沈Q ID NO ;5、沈Q ID NO ;6、W及沈Q ID NO ;7 中之至少一 者，亦或是，一种由20?50个氨基酸组成之多肤分子，其序列包含SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO : 2、SEQ ID NO ;3、SEQ ID NO ;4、SEQ ID NO ;5、SEQ ID NO ;6、W及沈Q ID NO ;7 中之至少一者。
[0093] 应能理解的是，一种衍生多肤分子，系将界定于SEQ ID NO ;1、SEQ ID NO ;2、SEQ ID NO ;3、SEQ ID NO ;4、SEQ ID NO ;5、SEQ ID NO ;6、W及 SEQ ID NO ;7 中之序列进行一个或多个 氨基酸之取代、删除或添加后所衍生，且能与至少一种H磯酸腺巧结合盒运输蛋白之抗体 结合者，亦应包含于本案之申请专利范围内。
[0094] W上所述仅为本发明之较佳实施例，并非用W限定本发明之申请专利范围，因此 凡其它未脱离本发明所掲示之精神下所完成之各种更动或润饰等，均应包含于本案之申请 专利范围内。
【权利要求】
1. 一种多肽分子，其氨基酸序列如下： (a) 包含 SEQ ID NO :1 序列、SEQ ID NO :2 序列、SEQ ID NO :3 序列、SEQ ID NO :4 序列、 SEQ ID NO :5序列、SEQ ID NO :6序列以及SEQ ID NO :7序列中之一者或其组合；或 (b) 包含将（a)的氨基酸序列进行一个或多个氨基酸之取代、删除或添加后之一衍生 序列；其中，包含该衍生序列之一衍生多肽分子可与至少一种三磷酸腺苷结合盒运输蛋白 之抗体结合。
2. 如权利要求1所述的多肽分子，其中该衍生多肽分子与该至少一种三磷酸腺苷结合 盒运输蛋白之抗体间的结合力，大于PH7. 4的磷酸盐缓冲液与该至少一种三磷酸腺苷结合 盒运输蛋白之抗体间的结合力。
3. 如权利要求1所述的多肽分子，其中该可被结合之至少一种三磷酸腺苷结合盒运输 蛋白之抗体是一引发癌症化学治疗抗药性之三磷酸腺苷结合盒运输蛋白之抗体。
4. 一种多肽分子的用途，其用于筛选出一癌症医药组合物，其中该多肽分子之氨基酸 序列如下： (a) 包含 SEQ ID NO :1 序列、SEQ ID NO :2 序列、SEQ ID NO :3 序列、SEQ ID NO :4 序列、 SEQ ID NO :5序列、SEQ ID NO :6序列以及SEQ ID NO :7序列中之一者或其组合；或 (b) 包含将（a)的氨基酸序列进行一个或多个氨基酸之取代、删除或添加后之一衍生 序列；其中，包含该衍生序列之一衍生多肽分子可与至少一种三磷酸腺苷结合盒运输蛋白 之抗体结合。
5. 如权利要求4所述的多肽分子的用途，其中该被筛选之癌症医药组合物是分离自人 体的血液、血浆和血清中至少一者。
6. 如权利要求4所述的多肽分子的用途，其用于筛选出含有至少一种引发癌症化学治 疗抗药性之三磷酸腺苷结合盒运输蛋白之抗体之一癌症医药组合物。
7. 如权利要求6所述的多肽分子的用途，其中被筛选出之该癌症医药组合物，可引发 一免疫细胞之抗体依赖性细胞介导的细胞毒杀作用，以攻击一癌细胞。
8. 如权利要求6所述的多肽分子的用途，其中被筛选之该癌症医药组合物，可引发一 自然杀手细胞之抗体依赖性细胞介导的细胞毒杀作用，以攻击具有化学治疗药物抗药性之 一癌细胞。
9. 一种分离或纯化的抗体或人工生产之抗体，可与如下所述之多肽分子结合： (a) 包含 SEQ ID NO :1 序列、SEQ ID NO :2 序列、SEQ ID NO :3 序列、SEQ ID NO :4 序列、 SEQ IDN0 :5序列、SEQ IDN0 :6序列、以及SEQ IDN0 :7序列中之一者或其组合之多肽分子； 或 (b) 包含将（a)的氨基酸序列进行一个或多个氨基酸之取代、删除或添加后所衍生之 一衍生多肽分子，且该衍生多肽分子可与至少一种三磷酸腺苷结合盒运输蛋白之抗体结 合。
10. 如权利要求9所述的分离或纯化之抗体或人工产生之抗体，其可引发一免疫细胞 之抗体依赖性细胞介导的细胞毒杀作用。
11. 如权利要求10所述的分离或纯化之抗体或人工产生之抗体，其可引发一自然杀手 细胞之抗体依赖性细胞介导的细胞毒杀作用。
12. -种癌症药物或癌症医药组合物，包含至少一种如权利要求9所述之分离的抗体 或人工生产之抗体。
13. -种检测方法，其以一多肽分子作为一探针，检测一样品中之三磷酸腺苷结合盒运 输蛋白之抗体含量，其中该多肽分子之氨基酸序列如下： (a) 包含 SEQ ID NO :1 序列、SEQ ID NO :2 序列、SEQ ID NO :3 序列、SEQ ID NO :4 序列、 SEQ ID NO :5序列、SEQ ID NO :6序列、以及SEQ ID NO :7序列中之一者或其组合；或 (b) 包含将（a)的氨基酸序列进行一个或多个氨基酸之取代、删除或添加后之一衍生 序列；其中，包含该衍生序列之一衍生多肽分子可与至少一种三磷酸腺苷结合盒运输蛋白 之抗体结合。
14. 如权利要求13所述的检测方法，其利用酵素免疫吸附法、西方墨点法、生物芯片 法、磁珠分离暨定量方式以及其它探针检测方式之至少一者，检测该样本中之三磷酸腺苷 结合盒运输蛋白之抗体含量。
15. 如权利要求13所述的检测方法，其至少包括下列步骤： (a) 涂覆该多肽分子至一容器中； (b) 去除该容器中的第一悬浮液； (c) 置入一样品之一适当浓度样本至该容器中； (d) 去除该容器中的第二悬浮液； (e) 置入一第二抗体； (f) 去除该容器中的第三悬浮液；以及 (g) 检测该容器中之该第二抗体之含量。
16. 如权利要求15所述的检测方法，其中该容器是96孔盘。
17. 如权利要求13所述的检测方法，其中该样品是分离自人体的血液、血浆和血清中 之至少一者。
【文档编号】A61P35/00GK104513303SQ201410298474
【公开日】2015年4月15日 申请日期:2014年6月26日 优先权日:2013年9月27日
【发明者】李光辉 申请人:李光辉