用于增强免疫力的石金钱龟提取物、其制剂及制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于增强免疫力的石金钱龟提取物，它是将石金钱龟的龟肉和龟甲分别用水和乙醇进行提取，龟肉提取液和龟甲提取液分别浓缩、干燥后，按0.5-3∶1的比例混合制成的。本发明还公开了该提取物的制备方法和含有该提取物的制剂，以及该制剂的制备方法。所制得的石金钱龟提取物具有显著的增强免疫力的作用，由该提取物制得的胶囊剂含药量大，性质稳定，在正常室温条件下可贮存两年，不吸潮，不变质，口感好，服药顺应性佳，患者在服药时和服药后不会感觉到难受的腥味。
【专利说明】用于增强免疫力的石金钱龟提取物、其制剂及制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种用于增强免疫力的石金钱龟提取物，本发明还涉及该提取物的制 备方法和由该提取物制成的制剂。
【背景技术】
[0002] 免疫是指机体接触"抗原性异物"或"异己成分"的一种特异性生理反应，它是机 体在进化过程中获得的"识别自身、排斥异己"的一种重要生理功能。免疫系统对维持机体 正常生理功能具有重要意义。免疫功能低下，会对机体健康产生极为不利的影响，使多种传 染病、非传染病的发病率和死亡率提高，其中引人关注的有恶性癌症、糖尿病等。造成机体 免疫下降的原因有多种，诸如营养失衡、精神或心理因素、年龄增大、慢性疾病、药物、应激、 内分泌失调和遗传因素等。
[0003] 免疫调节药物或功能食品主要用于机体免疫功能障碍的疾病，如可增强由于肿 瘤、衰老、慢性病毒感染（肝炎、艾滋病等）造成的免疫功能低下，或抑制器官移植后排斥反 应及自身免疫性疾病时某些不正常的免疫反应。
[0004] 石金钱龟，学名黄喉拟水龟（Mauremys mutica Cantor)，两广俗称石龟，分类上隶 属龟鳖目、龟科、拟水龟属。国内主要分布于江浙、安徽、两广、海南、福建及台湾，国外分布 于越南。石金钱龟是一种食药兼用的龟类，具有观赏价值及较高的营养价值和多种医疗保 健功能，民间有可治疗癌症之说，其增强免疫力和抗肿瘤功效备受人们关注，中国古代书籍 如"神农本草"、"山海经"和"本草纲目"都有关于龟类作为药材的记载。
【发明内容】
[0005] 本发明的第一个目的是提供一种石金钱龟提取物。
[0006] 本发明的第二个目的是提供一种该提取物的制备方法。
[0007] 本发明的第三个目的是提供一种由该提取物制成的制剂。
[0008] 本发明的第四个目的是提供一种该制剂的制备方法。
[0009] -种用于增强免疫力的石金钱龟提取物，它是将石金钱龟的龟肉和龟甲分别用水 和乙醇进行提取，龟肉提取液和龟甲提取液分别浓缩、干燥后，按0.5-3 : 1的比例混合制 成的。
[0010] 本发明的石金钱龟提取物对小鼠的免疫损伤起到恢复作用，可增加免疫低下小鼠 的脾脏指数、胸腺指数、以及单核-巨噬细胞的吞噬指数，说明本发明提取物对免疫低下小 鼠的胸腺、脾脏有保护作用，能促进免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能的恢复。
[0011] 该提取物的制备方法包括以下步骤：
[0012] 1)龟肉的提取：取龟肉，加水煎煮提取1-3次，每次1-3小时，提取液合并后减压 浓缩，冷冻干燥，得凝胶状的龟肉提取物；
[0013] 2)龟甲的提取：取龟甲，用质量浓度为30-80%的乙醇溶液回流提取1-3次，每次 1-3小时，提取液合并后减压浓缩，冷冻干燥，得凝胶状的龟甲提取物；
[0014] 3)将龟肉提取物与龟甲提取物按0.5-3 : 1的比例均匀混合，即得。
[0015] 优选的制备方法是：
[0016] 1)龟肉的提取：取龟肉，加水煎煮提取3次，第一次和第二次2小时，第三次1.5小 时，提取液合并后减压浓缩，冷冻干燥，得凝胶状的龟肉提取物；
[0017] 2)龟甲的提取：取龟甲，先用质量浓度为50%的乙醇溶液回流提取2. 5小时，再用 质量浓度为80%的乙醇溶液回流提取2小时，提取液合并后减压浓缩，冷冻干燥，得凝胶状 的龟甲提取物；
[0018] 3)将龟肉提取物与龟甲提取物按2 : 1的比例均匀混合，即得。
[0019] 本发明进一步提供了一种用于增强免疫力的胶囊剂，该胶囊剂含有所述的石金钱 龟提取物，所述胶囊剂的内容物由下述重量百分比的成分组成：
[0020] 石金钱龟提取物 5-60% 淀粉 15-40% 微粉硅胶 10-30% β -环糊精 5-20%
[0021] 羟丙基甲基纤维素 2-10% 香精 0. 1-1%。
[0022] 优选的，所述胶囊剂的内容物由下述重量百分比的成分组成：
[0023] 石金钱龟提取物 40% 淀粉 29.5% 微粉硅胶 10% β -环糊精 15% 羟丙基甲基纤维素 5% 香精 0.5%。
[0024] -种制备所述胶囊剂的方法，包括以下步骤：
[0025] 1)取β _环糊精，加水，加热至70-8CTC，制成β -环糊精饱和溶液；
[0026] 2)将石金钱龟提取物溶于β -环糊精饱和溶液中，在70_80°C下搅拌0. 5-1小时， 然后将温度降至〇_5°C，使石金钱龟提取物和β-环糊精从溶液中析出；
[0027] 3)将析出的沉淀过滤，干燥，粉碎成细粉，与淀粉、微粉硅胶混匀后制粒；
[0028] 4)将羟丙基甲基纤维素制成质量浓度为0. 5-1. 5%的溶液，将颗粒用羟丙基甲基 纤维素溶液包衣，干燥后与香精混匀，最后用胶囊填充。
[0029] 本发明中所涉及的回流提取、减压浓缩、冷冻干燥、制粒、包衣等方法均为本领域 的常规操作方法。
[0030] 由于石金钱龟提取物具有强烈的刺鼻腥味，难以直接服用，即使是制成胶囊剂，药 物在胃内崩散后仍会迅速散发出强烈腥味，导致患者难以接受，服药顺应性极差。另外，由 于石金钱龟提取物含有大量的蛋白、氨基酸、多肽等物质，导致稳定性很差，极易吸潮、变 质。因此，本发明在制备胶囊时，通过加入特殊的辅料和采用特殊的工艺，较好地解决了以 上问题。首先，将石金钱龟提取物与β_环糊精饱和溶液进行搅拌，使石金钱龟提取物中的 腥味物质和小分子脂溶性成分被包合于β -环糊精的筒状结构中，从而达到掩味和提高稳 定性的作用；其次，由于微粉硅胶具有极其蓬松的结构，分子之间具有巨大的空隙，其比表 面积在70_400m/g之间，具有极强的吸附能力，在本发明中可用于防止吸潮并吸附挥发性 的腥味成分；再次，本发明还采用了薄膜包衣技术，将颗粒薄膜包衣后进一步提高了其稳定 性并掩盖了不良气味；最后，本发明还加入了香精矫味。
[0031] 本发明的有益效果是：所制得的石金钱龟提取物具有显著的增强免疫力的效果， 而且效果高于其它的龟类提取物。由该提取物制得的胶囊剂含药量大，性质稳定，在正常室 温条件下可贮存两年，不吸潮，不变质，口感好，服药顺应性佳，患者在服药时和服药后不会 感觉到难受的腥味。
【专利附图】
【附图说明】
[0032] 图1是石金钱龟提取物对正常小鼠体重的影响（i ±S，η = 10)。
[0033] 图2是石金钱龟提取物对免疫低下小鼠体重的影响（孓士S, η = 10,与模型组 比较，* 表示 P〈〇. 05, ** 表示 P〈0. 01)。
【具体实施方式】
[0034] 下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明。
[0035] 实施例1石金钱龟提取物的制备和主要成分检测
[0036] 1、石金钱龟提取物制备：取多年生石金钱龟于40°C水中15min，促使龟排尿；取 出龟，放入l〇〇°C水中热烫，至使龟完全死亡，外甲皮松；趁热剥除外层黑甲及四肢和头部 外皮，沿上下甲板线撬开龟甲，尽量不破坏其内脏；沿甲边缘剔开皮肉，去除内脏，肉与甲分 装，做好标记，内脏及外层黑甲与四肢外皮去除不要；将肉切成小块，洗去血污，于冰箱中冷 藏，贴标签；将龟甲掰成小块，洗净，常温封存。
[0037] 1.1龟肉的提取：
[0038] 将龟肉置于蒸煮锅内，加入适量蒸馏水，熬制2h，在熬制过程中，控制水温不爆沸 但一直均匀沸腾，水量淹没龟肉，至汤汁呈白色（微黄）浓稠；将汤汁趁热抽滤；抽滤后 的残渣继续加蒸馏水煮制，熬2h至汤汁浓稠，再次抽滤；抽滤后的残渣第三次熬制1. 5h 至汤汁较浓，再次抽滤。将三次的抽滤液混合，采用旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩，蒸馏温度 50_55°C，至基本无冷凝液滴下，将浓缩物倒入塑料杯中，保鲜膜封口置于4°C冷藏，得龟肉 总提取物，并盛于塑料烧杯中冻存，冷冻干燥，提取物冻成块状凝胶。
[0039] 1.2龟甲的提取：
[0040] 将龟甲尽量掰碎，洗净置于1000ml圆底烧瓶，加入500ml50%的乙醇，接冷凝管回 流煮制2. 5h ;第一次煮出液趁热抽滤，得第一次浓缩液；龟甲中加入80%乙醇，继续提取 2h;将两次提取液合并，采用旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩，得龟甲提取物，并盛于塑料烧杯中 冻存，冷冻干燥，冻成凝胶状。
[0041] 1. 3石金钱龟提取物制备
[0042] 石金钱龟提取物按龟肉提取物：龟甲提取物=2 :1比例混合均匀制得。
[0043] 2、石金钱龟提取物主要成分分析
[0044] 2. 1龟肉、龟甲提取物干燥样品的水分含量测定
[0045] 利用红外高温照射，使龟肉或者龟甲提取物中的水分蒸发，从而计算样品中的水 分含量。结果见表1。
[0046] 表1龟甲、龟肉提取物干燥样品的水分含量（, η = 3)
[0047]
【权利要求】
1. 一种用于增强免疫力的石金钱龟提取物，其特征在于：它是将石金钱龟的龟肉和龟 甲分别用水和乙醇进行提取，龟肉提取液和龟甲提取液分别浓缩、干燥后，按0.5-3 : 1的 比例混合制成的。
2. -种用于增强免疫力的石金钱龟提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 龟肉的提取：取龟肉，加水煎煮提取1-3次，每次1-3小时，提取液合并后减压浓缩， 冷冻干燥，得凝胶状的龟肉提取物； 2) 龟甲的提取：取龟甲，用质量浓度为30-80%的乙醇溶液回流提取1-3次，每次1-3 小时，提取液合并后减压浓缩，冷冻干燥，得凝胶状的龟甲提取物； 3) 将龟肉提取物与龟甲提取物按0.5-3 : 1的比例均匀混合，即得。
3. 根据权利要求2所述用于增强免疫力的石金钱龟提取物的制备方法，其特征在于包 括以下步骤： 1) 龟肉的提取：取龟肉，加水煎煮提取3次，第一次和第二次2小时，第三次1. 5小时， 提取液合并后减压浓缩，冷冻干燥，得凝胶状的龟肉提取物； 2) 龟甲的提取：取龟甲，先用质量浓度为50%的乙醇溶液回流提取2. 5小时，再用质量 浓度为80%的乙醇溶液回流提取2小时，提取液合并后减压浓缩，冷冻干燥，得凝胶状的龟 甲提取物； 3) 将龟肉提取物与龟甲提取物按2 : 1的比例均匀混合，即得。
4. 一种用于增强免疫力的胶囊剂，其特征在于含有权利要求1所述的石金钱龟提取 物，所述胶囊剂的内容物由下述重量百分比的成分组成： 石金钱龟提取物 5-60% 淀粉 15-40% 微粉硅胶 10-30% β -环糊精 5-20% 羟丙基甲基纤维素 2-10% 香精 0. 1-1%。
5. 根据权利要求4所述用于增强免疫力的胶囊剂，其特征在于所述胶囊剂的内容物由 下述重量百分比的成分组成： 石金钱龟提取物 40% 淀粉 29. 5% 微粉硅胶 10% β -环糊精 15% 羟丙基甲基纤维素 5% 香精 0.5%。
6. -种制备权利要求4所述胶囊剂的方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 取β _环糊精，加水，加热至70_80°C，制成β -环糊精饱和溶液； 2) 将石金钱龟提取物溶于β-环糊精饱和溶液中，在70-80°C下搅拌0.5-1小时，然后 将温度降至〇_5°C，使石金钱龟提取物和β-环糊精从溶液中析出； 3) 将析出的沉淀过滤，干燥，粉碎成细粉，与淀粉、微粉硅胶混匀后制粒； 4) 将羟丙基甲基纤维素制成质量浓度为0. 5-1. 5%的溶液，将颗粒用羟丙基甲基纤维 素溶液包衣，干燥后与香精混匀，最后用胶囊填充。
【文档编号】A61K35/56GK104107193SQ201410298446
【公开日】2014年10月22日 申请日期:2014年6月26日 优先权日:2014年6月26日
【发明者】张久亮 申请人:华中农业大学