量比为鳄鱼肉:食品级胰蛋白酶粉剂=I: (0.38%?0.50% )，加入食品级胰蛋白酶粉剂混合均匀，在37°C恒温条件下酶解，时间为4h?6h ;
[0067]I.5)升温至100°C沸水浴，时间为lOmin，使酶失活；
[0068]I.6)将酶失活的酶解液冷却至室温，用离心分离器分离；
[0069]I.7)用200目滤布过滤，回收上清液；
[0070]I.8)在50°C恒温条件下用旋转蒸发器蒸发回收上清液至黏稠体；
[0071]I.9)在冷冻干燥室冷冻干燥黏稠体，冷冻干燥室的温度曲线为_30°C保持3h、0°C保持10h、30°C保持1h?15h，总计时间为23h?28h，制得鳄鱼多肽；
[0072]再按照组分及其质量百分比如下:
[0073]鳄鱼多肽97% ；
[0074]食品级纳米氧化锌3%，
[0075]将鳄鱼多肽与食品级纳米氧化锌配位络合，络合条件:料液比为1: (4?5)，pH为5.5，温度为70 °C，络合时间为30min ；
[0076]2)将络合反应后的溶液静置冷却至常温；
[0077]3)加入3倍的浓度为95%的乙醇进行至少一次的洗涤、沉降和离心分离，制得鳄鱼多肽-纳米氧化锌络合沉淀物；
[0078]4)在冷冻干燥室冷冻干燥鳄鱼多肽-纳米氧化锌络合沉淀物，冷冻干燥室的温度曲线为_30°C保持2h、0°C保持8h、30°C保持8h?1h，总计时间为18h?20h，制得鳄鱼多肽-纳米氧化锌络合颗粒物；
[0079]5)采用国产原子力显微镜通过离心沉降法制备样品，进行质控分析，纳米颗粒尺度为1nm?10nm的合格品即为纳米化鳄鱼多肽粉。
[0080]本【具体实施方式】制得的鳄鱼多肽酶解液中蛋白质的水解度为:50%以上；鳄鱼多肽-纳米氧化锌配合反应的配合率为:90% ;鳄鱼纳米化多肽的得率为10%以上。
[0081]【具体实施方式】二
[0082]一种鳄鱼纳米化多肽，其组分及其质量百分比同【具体实施方式】一，制备方法也基本同【具体实施方式】一，区别在于:
[0083]I)络合时间为40min ；
[0084]I.2)体积比为鳄鱼肉:水=1:2.5(m3/m3)；
[0085]I.3)降低温度至55 °C恒温维持，调节pH为7.8 ;
[0086]I.4)质量比为鳄鱼肉:食品级胰蛋白酶粉剂=1:0.40%，酶解时间为5h ；
[0087]5)采用瑞士 Nanosurf公司出品的原子力显微镜通过离心沉降法制备样品。
[0088]本【具体实施方式】制得的鳄鱼多肽酶解液中蛋白质的水解度为:60%以上；鳄鱼多肽-纳米氧化锌配合反应的配合率为:90% ;鳄鱼纳米化多肽的得率为15%以上。
[0089]【具体实施方式】三
[0090]一种鳄鱼纳米化多肽，其组分及其质量百分比同【具体实施方式】一，制备方法也基本同【具体实施方式】一，区别在于:
[0091]I)络合时间为30min ;
[0092]I.2)体积比为鳄鱼肉:水=1:2.0(m3/m3)；
[0093]I.3)降低温度至55 °C恒温维持，调节pH为7.5 ;
[0094]I.4)质量比为鳄鱼肉:食品级胰蛋白酶粉剂=1:0.38%，酶解时间为5h ；
[0095]本【具体实施方式】制得的鳄鱼多肽酶解液中蛋白质的水解度为:53% ;鳄鱼多肽-纳米氧化锌配合反应的配合率为:91% ;鳄鱼纳米化多肽的得率为10%。
[0096]以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下做出若干等同替代或明显变型，而且性能或用途相同，都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。
【主权项】
1.一种鳄鱼纳米化多肽，是一种小分子鳄鱼多肽-纳米氧化锌络合物，其特征在于: 其组分及其质量百分比如下: 鳄鱼多肽96%?98%; 食品级纳米氧化锌 余量； 所述鳄鱼多肽是去除脂肪组织的鳄鱼肉用胰蛋白酶水解所得的小分子鳄鱼多肽，分子量分布范围主要集中在100Da?1500Da ； 所述食品级纳米氧化锌是粒径为1nm?10nm的白色细微颗粒且经过安全性评价可安全食用的氧化锌。
2.如权利要求1所述的鳄鱼纳米化多肽，其特征在于: 其组分及其质量百分比如下: 鳄鱼多肽97% ； 食品级纳米氧化锌 3%。
3.—种鳄鱼纳米化多肽的制备方法，包括鳄鱼多肽的制备方法，其特征在于: 依次有以下步骤: 1)按照组分及其质量百分比如下: 鳄鱼多肽96%?98%; 食品级纳米氧化锌 余量； 将鳄鱼多肽与食品级纳米氧化锌配位络合，络合条件:料液比为1: (4?5)，pH为5?6，温度为70°C?80°C，时间为30min?40min ； 2)将络合反应后的溶液静置冷却至常温； 3)加入3倍的浓度为95%的乙醇进行至少一次的洗涤、沉降和离心分离，制得鳄鱼多肽-纳米氧化锌络合沉淀物； 4)在冷冻干燥室冷冻干燥鳄鱼多肽-纳米氧化锌络合沉淀物，冷冻干燥室的温度曲线为-30 °C保持2h、O °C保持8h、30 °C保持8h?1h，总计时间为18h?20h，制得鳄鱼多肽-纳米氧化锌络合颗粒物； 5)质控分析，纳米颗粒尺度为1nm?10nm的合格品即为纳米化鳄鱼多肽粉。
4.如权利要求3所述的鳄鱼纳米化多肽的制备方法，其特征在于: 所述鳄鱼多肽制备方法，依次有以下子步骤: I.D取清洗并去除脂肪组织的鳄鱼肉，剪成碎块； I.2)按体积比为鳄鱼肉:水=1: (2?3) (m3/m3)，加水混合后，置100°C沸水浴，时间为 30min ； I.3)取出处理液匀浆，降低温度至37°C?55°C恒温维持，调节pH为7.5?8.5，制得鳄鱼肉水解底物； I.4)按质量比为鳄鱼肉:食品级胰蛋白酶粉剂=1: (0.38%?0.50% )，加入食品级胰蛋白酶粉剂混合均匀，在37°C恒温条件下酶解，时间为4h?6h ; I.5)升温至100°C沸水浴，时间为lOmin，使酶失活； I.6)将酶失活的酶解液冷却至室温，用离心分离器分离； I.7)用200目滤布过滤，回收上清液； I.8)在50°C恒温条件下用旋转蒸发器蒸发回收上清液至黏稠体； I.9)在冷冻干燥室冷冻干燥黏稠体，冷冻干燥室的温度曲线为-30 °C保持3h、O °C保持10h、30°C保持1h?15h，总计时间为23h?28h，制得鳄鱼多肽。
5.如权利要求3所述的鳄鱼纳米化多肽的制备方法，其特征在于: 所述步骤I)的组分及其质量百分比如下: 鳄鱼多肽97% ； 食品级纳米氧化锌3%。
6.如权利要求3所述的鳄鱼纳米化多肽的制备方法，其特征在于: 所述步骤5)的质控分析是采用国产或瑞士 Nanosurf公司出品的原子力显微镜通过离心沉降法制备样品。
7.如权利要求4所述的鳄鱼纳米化多肽的制备方法，其特征在于: 所述步骤I.I)的碎块是体积为Icm3?2cm 3的碎块。
【专利摘要】本发明公开了一种鳄鱼纳米化多肽，其组分及其质量百分比如下：鳄鱼多肽96％～98％，食品级纳米氧化锌余量。还公开了一种鳄鱼纳米化多肽的制备方法，依次有以下步骤：1)将鳄鱼多肽与食品级纳米氧化锌配位络合；2)冷却；3)洗涤、沉降和离心分离；4)冷冻干燥；5)质控分析。其结构和生物活性更稳定，提高了蛋白质和锌的生物学效价及营养价值，具有阻止淀粉样蛋白生成和沉积，预防神经炎性斑块形成，从而达到预防或延缓老年痴呆的病程进展的功能，还具有抗氧化、抗疲劳、增强免疫力、提高脑细胞的活性、增强记忆力和思维能力的功能，非常适用于开发预防高血压、心脑血管疾病、老年痴呆症等慢性疾病产品，以及进行营养治疗的新型原料。
【IPC分类】A61P9-00, A61P37-04, A61P39-00, A61P25-28, A61K47-48, A61P9-12, A61K38-01, A61P9-10, A61P3-02, A61P25-00, A61P39-06
【公开号】CN104667253
【申请号】CN201510053314
【发明人】郑文岭, 张晓松, 莫丽春
【申请人】深圳市大鳄生物科技股份有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年2月2日