颗粒组合物和含有其的医药组合物的制作方法
【专利说明】
[0001] 本申请是2010年8月31日提出的申请号为201080038549.X的同名专利申请的 分案申请。
技术领域
[0002] 本发明涉及可以作为药物递送系统（DDS)的载体使用的颗粒组合物（例如，高分 子微团），和具有该颗粒组合物与在其中内包的药物的医药组合物（例如，高分子微团制 剂）。
【背景技术】
[0003] 相比于利用低分子化合物的以往型的医药品，利用诸如蛋白质和核酸的生物体高 分子的生物医药品，容易被酶分解或被免疫系统排除。专利文献1~4从提高生物医药品 在生物体内的稳定性的观点出发，公开了使生物体高分子内包于由脂质双层膜构成的核糖 体的DDS。
[0004] 现有技术文献
[0005] 专利文献
[0006] 专利文献1:国际公开第2001/034115号小册子
[0007] 专利文献2 :国际公开第1998/58630号小册子
[0008] 专利文献3 :国际公开第2005/092389号小册子
[0009] 专利文献4 :日本特表2001-504093
【发明内容】
[0010] 发明所要解决的课题
[0011] 在专利文献1~3中记载的以往型DDS中，通过以脂质双层膜保护作为药物的生 物体高分子，虽然能够提高药物在生物体内的稳定性，但是药物难以从载体释放。另外，这 样的以往型DDS，由于其粒径大小和构成脂质双层膜的脂质具有的电荷，从而容易被诸如 肺、肝脏和脾脏的网状内皮系统捕捉，所以有时在到达投药对象物以前会从血中被除去。在 专利文献4中记载的DDS中，通过将核糖体隐形化，可以实现防止被捕捉到这样的网状内皮 系统，但仍然有药物难以从载体释放的倾向。
[0012] 相比于使用核糖体的以往型DDS，以高分子微团作为载体的DDS能够将DDS颗粒大 幅度地小型化（例如，平均粒径IOOnm以下），该高分子微团通过由疏水性聚合物链段和亲 水性聚合物链段形成的嵌段共聚物单元构成。但是，这样的以高分子微团作为载体的DDS， 如后述的比较例所示，由于将生物体高分子保持在DDS颗粒内的作用过弱，仍然有难以将 药物适当输送到投药对象物中的情况。另外，在这样的DDS中，有时在制造后的储藏期间 中，药物也会从载体脱离。
[0013] 用于解决课题的方法
[0014] 本发明提供一种颗粒组合物，其含有具有疏水性聚合物链段和亲水性聚合物链段 的嵌段共聚物单元，多个上述嵌段共聚物单元以上述疏水性聚合物链段朝向内侧，并且上 述亲水性聚合物链片朝向外侧的状态放射状配置，该颗粒组合物还具有带电脂质，该带电 脂质带有与应该被内包的药物的电荷相反的电荷，通过与该带电脂质的静电结合将上述药 物保持在颗粒内，另一方面该带电脂质以被吸引到上述疏水性聚合物链段侧的状态配置， 从而防止颗粒外周面带有能够吸引与上述带电脂质带有相反电荷的带电性物质的电荷。
[0015] 从另一个侧面，本发明提供一种医药组合物，其具有上述颗粒组合物、和在该颗粒 组合物中内包的带有与带电脂质相反电荷的药物。发明的效果
[0016] 根据本发明，能够提供适于DDS的药物载体和利用该药物载体的医药品，该药物 载体药物保持性优异，并且能够防止生物体分子向载体表面的附着，该附着会导致妨碍药 物向投药对象物搬运。相比于以往型的DDS，这些药物载体和医药品能够向投药对象物可靠 地输送药物。
【附图说明】
[0017] 图1(a)~（C)是表示本发明的颗粒组合物和医药组合物结构的一例的示意图。
[0018] 图2是表示在试验例Ib中测得的颗粒组合物的电动电位（zetapotential)的绝 对值与在试验例Ic中测得的颗粒组合物的血中凝集度的关系的图表。
[0019] 图3是表示在试验例2b中的白蛋白-FITC荧光强度测定结果的图表。
[0020] 图4是表示在试验例5a中的电泳结果的图。
[0021] 图5是用于说明在试验例5c中测得的颗粒组合物的抗癌活性的图表。
[0022] 图6是用于说明在试验例5d中测得的颗粒组合物在血清中的凝集性的图表。
[0023] 图7是表示在试验例5b中测得的颗粒组合物的电动电位的绝对值与在试验例5d 中测得的颗粒组合物的血中凝集度的关系的图表。
[0024] 图8是用于说明在试验例5f中测得的药物的脏器转移性的图表。
【具体实施方式】
[0025] 图I(a)是表示本发明的颗粒组合物（以下，有时简称为"颗粒组合物"）结构的一 例的示意图。图1(b)是其部分放大图。颗粒组合物1含有嵌段共聚物单元2和带电脂质 3。嵌段共聚物单元2具有亲水性聚合物链段2a和疏水性聚合物链段2b，以疏水性聚合物 链段2b朝向内侧，并且亲水性聚合物链段2a朝向外侧的状态，放射状配置在颗粒组合物1 内。另外，带电脂质3带有与应该内包的药物的电荷相反的电荷，以吸引在疏水性聚合物链 段2b侧的状态配置。图1(c)是表示本发明的颗粒状医药组合物（以下，有时简称为"医药 组合物"）结构的一例的示意图。医药组合物1'具有颗粒组合物1和带有与带电脂质3相 反电荷的药物4,药物4通过与带电脂质3静电结合被保持在颗粒组合物1内。
[0026] 在本说明书中，"带电脂质"是指在生理性pH(例如pH7. 4)的水性介质中具有多于 正电荷的负电荷的阴离子性脂质，和在该水性介质中具有多于负电荷的正电荷的阳离子性 脂质。因此，在本说明书中，关于具有阳离子性基团和阴离子性基团的所谓两性带电脂质， 也根据上述基准处理。
[0027] 带电脂质3在颗粒组合物1内通过静电结合保持应该被内包的药物4。带电脂质 3只要至少在从颗粒组合物1形成的医药组合物1'的储藏环境下，带有与被内包的药物4 的电荷相反的电荷即可。由此，能够在制造后的储藏期间中在颗粒组合物1内更可靠地保 持药物4。带电脂质3和药物4优选即使以血中为代表的生理环境下（例如，pH7. 4)，也带 有相反的电荷。由此，能够更可靠地防止在向投药对象物的输送途中，药物4从颗粒组合物 1脱离。
[0028] 带电脂质3由下面的机理以吸引在疏水性聚合物链段侧2b的状态配置。颗粒组 合物1通过包括将嵌段共聚物单元2和带电脂质3悬浊在水溶液中的工序的方法形成。嵌 段共聚物单元2的疏水性聚合物链段2b因为是疏水性的，所以在水溶液中不扩散地凝集 存在。亲水性聚合物链段2a可以在水溶液中扩散并自由地运动。因此，嵌段共聚物单元2 在水溶液中，以疏水性聚合物链段2b朝向内侧，亲水性聚合物链段2a朝向外侧的放射状配 置。而且，带电脂质3因为疏水性强，相比于水或亲水性聚合物链段2a，与疏水性聚合物链 段2b的亲和性高，所以被吸引在疏水性聚合物链段2b侧，与颗粒组合物1的外周面离开配 置。由此，可以防止颗粒组合物1和医药组合物1'的外周面带有能够吸引带有与带电脂质 3相反电荷的带电性物质（例如，血中的蛋白质）的电荷。
[0029] 而且，如果这样操作悬浊在水溶液中，因为带电脂质3和嵌段共聚物单元2以混合 的状态颗粒化，所以如图1(b)所示，带电脂质3不是在颗粒组合物1的环向以连续的状态 配置，而是在颗粒组合物1的环向以介于相邻接的嵌段共聚物单元2之间的方式配置。由 此，在颗粒组合物1中，在颗粒组合物1的环向相邻接的带电脂质3之间的接触被嵌段共聚 物单元2隔断。因此，在颗粒组合物1中，在颗粒组合物1的环向相邻接的带电脂质3之间， 为形成有能够容纳嵌段共聚物单元2程度的间隙G的状态，换而言之，处于相邻接的带电脂 质3之间形成间隙G，在该间隙G中配置有嵌段共聚物单元2的状态。带电脂质3和嵌段共 聚物单元2之间的结合力小于带电脂质3之间的结合力。因此，如果相比于脂质在环向处 于被连续配置状态的以往型DDS(核糖体），在颗粒组合物1中，容易产生由带电脂质3的脱 落造成的颗粒形状崩解，其结果，就可以防止应该被内包在颗粒（载体）内的药物4被过剩 地保持。在专利文献4中记载的以DDS为代表的隐形核糖体，因为通过在形成由脂质双层 膜构成的核糖体主体后，使二嵌段共聚物附着在该主体表面而形成，所以，在环向相邻接的 脂质之间的接触没有被嵌段共聚物等隔断，脂质仍旧处于在环向连续配置的状态。
[0030] 防止颗粒组合物1和医药组合物1'的外周面带有可以吸引带电性物质的电荷的 状态，例如，能够通过从颗粒组合物1和医药组合物1'测得的电动电位的绝对值在规定值 以下的范围而确定。更具体而言，对于医药组合物1'，电动电位的绝对值希望为IOmV以下， 例如为5mV以下，或者例如为3mV以下，优选为2mV以下，更优选为ImV以下。由于在颗粒 组合物1中含有药物4,医药组合物1'的电动电位的绝对值容易低于该颗粒组合物1固有 的电动电位的绝对值。因此，对于颗粒组合物1，电动电位的绝对值希望为15mV以下，例如 为12mV以下，或者例如为6mV以下，或者例如为3mV以下，优选为2mV以下，更优选为ImV以 下。电动电位如下测定：在pH为7. 4的IOmM的HEPES缓冲溶液中，以每ImL该缓冲溶液， 颗粒组合物1或医药组合物1'所含有的带电脂质3的总量为0.Img的方式，添加颗粒组合 物1或医药组合物1'。
[0031] 在本说明书中，电动电位的绝对值作为将小数点以下四舍五入得到的数值处理。 例如，电动电位的绝对值为"2mV以下"的状态包含小于2. 5mV的状态。
[0032] 另外，如后述的实施例所示，通过控制颗粒组合物1或医药组合物1'的电动电位 的绝对值使其变低，能够防止颗粒组合物1或医药组合物r的血中凝集。更具体而言，通过 将颗粒组合物1的电动电位的绝对值控制在规定范围以下，就能够防止在血中的凝集，使 得颗粒组合物1的