司；DS-I型组织匀浆仪，上海正 慧工贸有限公司；TGL-16G-A型管式离心机，上海安亭科学仪器厂；UV-722N可见紫外分光 光度计，上海尼柯有限公司；HD型恒温水浴锅，辽阳市恒温仪器厂。
[0029] (5)实验过程：取健康昆明种小鼠40只，按体重随机分为4组，分为正常负重游泳 组，低，中，高剂量组。每天灌胃给予黄刺籽油1次，连续给予14d，末次给予受试物后，在小 鼠尾部负荷体重的5 %的铅皮，在水温为22±0. 5°C的水中游泳，观察小鼠游动状况，记录 从入水至力竭沉入水底持续9s不浮出水面的时间作为负重游泳时间。而后摘眼球取血， 收集到载有肝素钠的收集管中，3500r/min离心10min，取上清液，做血糖、尿素氮BUN、乳酸 LD、乳酸脱氢酶HDL、肌酸激酶CK等指标测定试验（结果见表1、表2);同时取得小鼠肌肉组 织，用生理盐水洗去表面血污，用滤纸吸干，组织匀浆仪进行匀浆，收集匀浆液到离心管中， 以3000rpm离心10min，吸取上清液，进行丙酮酸激酶PK、苹果酸脱氢酶PEK、琥珀酸脱氢酶 SDH、磷酸果糖激酶MDH几个能量代谢调控酶活性测定（结果见表3)。
[0030] (6)实验结果：
[0031] 表1黄刺籽油对小鼠负重游泳时间、血糖、尿素氮影响
[0033] 注：与正常组相比*p < 0· 05 ;林p < 0· 01
[0034] 机体在运动时，体内能量平衡遭到破坏，肌糖原消耗，当糖原储备耗竭时，机体将 不能维持血糖水平导致血糖的降低血糖降低，蛋白质及氨基酸的分解代谢加强。尿素氮 (BNU)是蛋白质的代谢产物，在正常生理条件下，蛋白质和氨基酸等含氮物质在分解代谢中 先脱下氨基，氨在肝脏转变为尿素，BNU经血液循环从肾脏排出体外。在长时间较大强度运 动时，BNU的变化范围明显，可用来作为评定运动量的指标。BUN与人的身体机能、疲劳程度 以及负荷量的大小呈密切正相关。通常血清尿素氮含量随运动负荷增加而升高，身体对负 荷适应性越差，则尿素氮产生越多。
[0035] 表2黄刺籽油对小鼠乳酸、乳酸脱氢酶、肌酸激酶的影响
[0036]
[0037] 注：与正常负重组相比*p < 0· 05 ;#p < 0· 01
[0038] 血乳酸水平是反映机体的有氧代谢能力和疲劳程度的重要指标，长时间的剧烈运 动将导致机体相对缺氧和糖酵解作用加快，进而产生大量的乳酸。进而影响乳酸脱氢酶和 肌酸激酶的产生。
[0039] 由表1、2可知，本发明黄刺籽油各剂量组对小鼠负重游泳后产生的各种代谢产物 有抑制作用，且呈剂量效应关系，中、高剂量组与正常组有显著性差异。
[0040] 表3黄刺籽油对小鼠组织内的糖代谢相关活性酶的影响
[0042] 提尚肌肉的有氧代谢能力和广生ATP的能力是提尚人体肌肉耐疲劳的关键，而肌 肉的有氧代谢能力和产生ATP的能力则有赖于细胞内线粒体的浓度和功能的增加。即其代 谢能力主要需要体内糖代谢维持。其中丙酮酸激酶是糖代谢过程中的关键酶。苹果酸脱氢 酶和琥珀酸脱氢酶是有氧代谢三羧酸循环中的重要代谢酶。磷酸果糖激酶是一种变构酶， 糖酵解途径中限速酶。这四种酶在糖代谢调控中起着关键调控作用。表3表明，本发明黄 刺籽油各剂量组对小鼠负重游泳后其组织内的关键糖代谢调控酶有一定的调节作用，且呈 剂量效应关系，中、高剂量组与正常组有显著性差异。
[0043] (6)实验结论：本发明可提高负重游泳小鼠后产生的各种代谢产物有抑制作用， 及其组织内的关键糖代谢调控酶有一定的调节作用，且均呈剂量效应关系，显示出对运动 产生的疲劳具有一定的治疗作用。
[0044] 实验例2黄刺籽油安全性实验评价
[0045] (1)实验药物：本发明制备所得的0.35g/软胶囊（实施例1和实施例2所得），黄 刺籽油含量40ml/kg。
[0046] (2)实验方法：取健康小鼠20只，普通级，雌雄各半，体重19±0. 5g，由甘肃中医学 院提供。将20只小鼠分为2组（A组和B组），A组10只。组每天给予实施案例1所得黄 刺软胶囊1次，给予药物浓度为40. 0ml/kg，连续给药14天。B组10只，每天给予实施案例 2所得黄刺软胶囊1次，给予药物浓度为40. 0ml/kg，连续给药14天。
[0047] (3)实验结果：小鼠给予黄刺籽油软胶囊，连续给药14天，给药后，观察小鼠的一 般症状，其活动情况，精神，体重，外观无异常现象；14天后处死解剖全部小鼠，观察主要脏 器如心、肺、脾、肝、肾、肠等组织器官有无变。因此，该黄刺籽油软胶囊产品急性毒性小，属 于实际无毒性产品，具安全服用性。
【主权项】
1. 黄刺籽油在制备抗疲劳的药物、保健品或食品中的用途。2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品是抑制乳酸、尿 素氮、肌酸激酶水平，提高乳酸脱氢酶、血糖水平的药物、保健品或食品。3. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品是提高肌肉组织 中丙酮酸激酶、苹果酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、磷酸果糖激酶活性的药物、保健品或食品。4. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品为口服剂型。5. 根据权利要求1~4任意一项所述的用途，其特征在于：所述口服剂型选自片剂、软 胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、浸膏剂或口服液。6. 根据权利要求1~5任意一项所述的用途，其特征在于：所述黄刺籽油采用压榨法、 低极性或非极性溶剂提取法或超临界CO2萃取法制备得到。7. 根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述黄刺籽油采用超临界CO2萃取法制备 得到。8. 根据权利要求6或7所述的用途，其特征在于：所述超临界CO2萃取法的具体操 作如下：将黄刺籽粉碎，过40~80目筛，装入萃取釜中，萃取时间为l-3h，萃取压力为 25-50MPa，萃取温度为30-55°C，CO2流量为I. 5-3.OSL/min;所得萃取液，过滤、干燥后，即 得黄刺籽油。9. 根据权利要求1~8任意一项所述的用途，其特征在于：所述黄刺为小檗科植物直 洋惠小藥BerberisdasystachyaMaxim. 〇
【专利摘要】本发明提供了黄刺籽油在制备抗疲劳的药物、保健品或食品中的用途。本发明研究发现，黄刺籽油对力竭游泳实验小鼠作用，对乳酸、尿素氮、肌酸激酶等均有明显的抑制作用；且对其肌肉组织中的相关能量代谢的调控酶，如丙酮酸激酶、苹果酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、磷酸果糖激酶，有一定的调节作用，且安全性良好，可应用于抗疲劳作用的食品、保健品或药物。
【IPC分类】A23L1/29, A61K36/29, A61P39/00
【公开号】CN104922179
【申请号】CN201510323181
【发明人】孟昭军, 韩丽娟, 索有瑞
【申请人】德令哈林生生物科技开发有限公司
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年6月9日