一种狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药领域，具体涉及的是一种狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂及其制备 方法与应用。
【背景技术】
[0002] 细粒棘球蝴病（Csystic echinococcusis, CE)，又名包虫病（Hydatidosis)，是细 粒棘球绦虫（Echinococcus granulosu)的中绦期幼虫寄生于牛、羊、猪、骆蛇和马等家畜 或多种野生动物或人的肝、肺等其他器官内所引起的一种人畜共患病。该病在人和动物之 间传播，狗是其终宿主，羊、牛是其中间宿主。人因误食虫卵也可成为其中间宿主，发生包虫 病。细粒棘球蝴病严重危害着人类和动物的身体健康和生命安全，是当今一个重大的公共 卫生问题。该病呈世界性广泛分布，包括欧洲、北美、南美、亚洲、非洲等一些国家都有存在， 我国的分布也极其广泛。这种病对感染动物的生长、发育、繁殖、畜产品质量和数量以及畜 牧业发展均造成严重影响。
[0003] 细粒棘球绦虫的中绦期幼虫--细粒棘球蝴多数寄生在人和动物的肝脏（将近 70% )和肺（将近30% )，还有极少数寄生在心脏、脾、肌肉等部位。细粒棘球蝴的危害主 要是分泌毒素和对脏器的机械性压迫，会使寄主产生炎症反应和过敏反应。人感染细粒棘 球蝴后，因寄生部位不同而出现的症状各异：在肝脏，常常引起肝区腹痛；在肺部，往往引 起咳嗽、血痰、胸痛；在脑部，一般引起不同程度的恶心呕吐、头疼等症状；严重时会丧失劳 动力。绵羊感染细粒棘球蝴后，死亡率较高，主要症状为毛逆立、脱毛、倒地不起。牛感染细 粒棘球蝴严重时，表现为消瘦、呼吸困难、咳嗽、产奶量下降等，剖检可见栗粒大到足球大的 细粒棘球蝴包囊在肝和/或肺组织中寄生。细粒棘球蝴病的症状轻重与细粒棘球蝴寄生的 部位、因其产生的囊肿大小、寄生的数量有很大的关系。目前关于细粒棘球蝴病的防控，较 为普遍的是采用长期给动物抗寄生虫药。
[0004] 狂犬病（Rabies)亦称恐水症，由狂犬病毒（Rabies virus)引起，是一种可怕的人 兽共患病。狂犬病的防治是我国重要的公共卫生问题之一，已纳入我国传染病管理系统法 定报告的第二类传染病。该病的死亡率极高，一旦发病，死亡率为1〇〇%。到目前为止，世界 上尚没有狂犬病的治疗方法，只能预防狂犬病的发生。所有的温血动物均易感染狂犬病，最 易感的是犬科动物和猫科动物，而犬科动物是狂犬病的主要传染源。随着社会上饲养狗的 风气盛行，不仅狗的数量大大增加，而且与人接触的机会也越来越多，因此，狂犬病的预防 工作变得极其重要。一般预防狂犬病的措施为对伤口进行适当的处理、注射狂犬疫苗和抗 狂犬病的免疫球蛋白等。
[0005] 可见，犬在狂犬病及细粒棘球蝴病的传播和流行上，是重要和主要的源头。对犬 注射狂犬病疫苗、服用抗寄生虫药，方可有效地防控这两种严重的人兽共患病。然而，常用 的抗寄生虫药为脂溶性，狂犬病疫苗为水溶性，两者无法形成均相的稳定体系，只能分别用 药。这样既增大了给药的难度又加重了兽医的工作强度，不利于狂犬病的预防和寄生虫病 的防控。所以寻找一种能在预防狂犬病的同时，又能对诸如细粒棘球绦虫、多头绦虫、泡状 带绦虫、犬复孔绦虫、线中绦虫等常见犬寄生虫进行驱虫的药物是目前在这两种疾病的防 控中所面临的重大问题。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，一方面，提供一种同时含有狂 犬病疫苗和抗寄生虫药的狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂，包括主要成份为吡喹酮、复合溶 媒和附加剂的稀释液和等体积的狂犬病弱毒苗注射液；所述稀释液中吡喹酮、复合溶媒、附 加剂的质量体积比（g:mL:mL)为（6. 93:99:1);所述狂犬病弱毒苗注射液中狂犬病弱毒苗 的浓度为1头份/mL。
[0007] 所述复合溶媒由溶媒A和溶媒B组成；溶媒A为乳酸乙酯；溶媒B选自异丙醇、丙 二醇和甘油中的一种或多种，优选异丙醇。
[0008] 所述溶媒A与溶媒B的体积比为（8 :2)-(9:1)，优选为8:2。
[0009] 所述附加剂选自吐温-80、苯甲酸、水杨酸、尿素、乌拉坦和甘油中的一种或多种， 优选为吐温-80。
[0010] 本发明的第二个方面在于提供制备上述狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂的方法，先 将吡喹酮溶于复合溶媒中，混合均匀后与所述附加剂混合均匀得到稀释液；再将狂犬病弱 毒苗由注射用水溶解得到狂犬病弱毒苗注射液；最后将稀释液与狂犬病弱毒苗注射液等体 积混合均匀，即得狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂。
[0011] 包括以下步骤：
[0012] (1)、将吡喹酮置于高压灭菌的安瓿瓶中，向其中加入复合溶媒，密封、震荡均匀， 过滤后，制成吡喹酮浓度（质量体积百分含量，g:mL)为7%的复合溶媒吡喹酮溶液；将狂 犬病弱毒苗用注射用水稀释，制成浓度为1头份/mL的狂犬病弱毒苗注射液；
[0013] (2)、取步骤（1)得到的复合溶媒吡喹酮溶液与附加剂按体积比99:1混合后，置于 高压灭菌的安瓿瓶中，密封、震荡均匀，制成稀释液；
[0014] (3)、取步骤（1)得到的狂犬病弱毒苗注射液和步骤（2)得到的稀释液等体积混合 均匀，即得到狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂。
[0015] 本发明的第三个方面在于提供一种能让狂犬病疫苗和抗寄生虫药稳定存在于同 一体系中的稀释液，主要成份包括上面提及的吡喹酮、复合溶媒和附加剂，其中，吡喹酮、复 合溶媒、附加剂的质量体积比（g :mL :mL)为（6. 93g:99mL: ImL)。
[0016] 本发明的第四个方面在于提供制备上述稀释液的方法，先将吡喹酮溶于复合溶媒 中，混合均匀后再与附加剂混合均匀，得到稀释液。
[0017] 本发明的第五个方面在于提供上述狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂或上述方法制 备得到的狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂在制备既能预防狂犬病又能驱虫的药物中的应用。
[0018] 所述驱虫是指驱除常见犬寄生虫，包括细粒棘球绦虫、多头绦虫、泡状带绦虫、犬 复孔绦虫、线中绦虫等，还包括血吸虫、华支睾吸虫、肺吸虫、姜片虫及囊虫等。
[0019] 本发明的狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂，在保证各有效成分药效的基础上，解决 了水溶性狂犬病弱毒苗与脂溶性抗寄生虫药吡喹酮稳定混合的难题。其优点是在国家对犬 进行狂犬病强制免疫的政策基础上，不仅对狂犬病进行免疫预防接种，同时也进行了一些 重要人畜共患寄生虫病及犬类和家畜共患寄生虫病的防控，并且还减少了兽医工作方面的 劳力、物力和财力的支出，其生产实际意义和应用前途非常重大。
【附图说明】
[0020] 图1所示为小鼠狂犬病毒抗体标准品的标准曲线图；
[0021] 图2所示为吡喹酮标准品的标准曲线图。
【具体实施方式】
[0022] 抗寄生虫药（antiparasitic drugs)主要是指用于灭杀、驱除和预防寄生于宿主 (人和动物）体内的各种寄生虫的药物。针对不同的寄生虫选择不同的抗寄生虫药。其中， 吡喹酮为广谱抗吸虫和绦虫药物，是一种白色或类白色结晶性粉末，适用于各种血吸虫病、 华支睾吸虫病、肺吸虫病、姜片虫病以及绦虫病和囊虫病。由于吡喹酮不溶于水，还存在首 过效应大、生物利用度低、半衰期短等缺点，因此常将其制成了脂质体、微囊等剂型口服使 用。
[0023] 目前我国生产的兽用狂犬病疫苗主要包括狂犬病灭活苗和狂犬病弱毒苗。狂犬病 弱毒苗是一种弱毒细胞冻干疫苗，为白色干粉状，说明书标注一瓶为1头份（一只动物的用 量），使用时直接用注射用水稀释后注射使用。
[0024] 临床上，目前吡喹酮药物和狂犬病疫苗均按常规单独使用，吡喹酮口服用于驱虫， 狂犬病疫苗注射用于预防狂犬病。
[0025] 本发明希望能将两种药物制成复合制剂以方便一次给药实现多重防控。复合制剂 所面临的困难是水溶性狂犬病弱毒苗与脂溶性抗寄生虫药吡喹酮难以稳定混合，为此发明 人从多种溶媒体系及助溶剂中筛选出了一种复合溶媒和附加剂，能够将不溶于水的吡喹酮 和溶于水的狂犬病弱毒苗混合，形成稳定的均相狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂。注射给动 物后，在保证各自药效的前提下，在预防狂犬病的同时，还能够对细粒棘球绦虫进行驱虫， 一举两得，提高了防控动物疾病的效率。
[0026] 以下结合具体实施例，更具体地说明本发明的内容，并对本发明作进一步阐述，但 这些实施例绝非对本发明进行限制。
[0027] 实施例中使用的手段，如无特别说明，均使用本领域常规的手段。
[0028] 实施例：狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂及制备
[0029] 本实施例用到的狂犬病弱毒苗为狂犬病活疫苗（Flury株），批号：13021，瑞普 (保定）生物药业有限