一种姜黄素胶束滴眼液及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种姜黄素滴眼液，特别涉及一种姜黄素胶束滴眼液及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 我国的糖尿病患病率近几年快速增长，糖尿病已成为我国重大的公共卫生问题。 患者长期的高血糖状态导致全身各组织器官发生病变，引起严重的糖尿病相关并发症，包 括糖尿病性角膜病变。此外，糖尿病患者在角膜外伤或接受角膜手术时极易出现角膜上皮 愈合延迟甚至不愈，临床表现为持续性角膜上皮损失、反复性角膜上皮糜烂、浅层角膜溃疡 形成、继发严重角膜感染甚至失明，治疗棘手，预后差，患者的经济和精神负担严重。目前糖 尿病性角膜病变的临床治疗手段有限，因此，研究糖尿病性角膜病变新的治疗靶标和有效 防治措施具有重要的临床意义。
[0003] 糖尿病性角膜神经病变引起的角膜知觉减退为糖尿病周围神经病变的一部分，研 究表明线粒体产生过多的超氧化物是导致糖尿病所有慢性并发症的共同发病机制。多种研 究发现，氧化应激在糖尿病的发生发展中起着举足轻重的作用，慢性高血糖诱导氧化应激， 角膜和三叉神经节氧化还原水平的失衡是糖尿病发生的重要病理生理学特征。山东省眼科 研究所的研究人员开展了纠正氧化应激水平治疗糖尿病性角膜病变的研究，取得了一定的 研究成果，进一步印证了通过着眼于氧化应激治疗糖尿病性角膜病变的有效性与可行性。
[0004] 姜黄素（curcumin)是中药姜黄的主要活性成分，具有抗氧化、抗炎、清除自由基等 广泛的药理学活性，在治疗糖尿病及其并发症方面有着广阔的应用前景。但是姜黄素亲水 性和亲脂性均差，吸收差，生物利用度低，且其分子结构不稳定，限制了其临床应用，因此， 很有必要进一步探索既安全，又经济又有效的眼部治疗糖尿病性角膜病变和角膜神经病变 的姜黄素药物。公开号为104644550A的中国专利公开了一种通过壳聚糖胶束包封姜黄素 制备成滴眼液，具有稳定性好、生物利用度高的优点。但其也存在一些不足：（1)壳聚糖作 为一种多糖性高分子材料，本身并不能形成胶束，因此需要加入了大量的表面活性剂和助 表面活性剂以帮助形成壳聚糖胶束，而加入大量的表面活性剂和助表面活性剂势必引起眼 表刺激性和眼局部应用的安全隐患；（2)因壳聚糖本身并不能形成胶束，加入大量的表面 活性剂和助表面活性剂后辅助形成胶束，导致胶束的载药量低，直接导致滴眼液的主药姜 黄素浓度低，因此该发明中主药姜黄素浓度只有〇. 〇〇5%-〇. 02%，该浓度对糖尿病性角膜病 变的治疗基本上是无效的。
[0005] 山东省眼科研究所采用其已申请并获得授权的发明专利"一种环孢素A胶束滴眼 液及其制备方法"（ZL201210529616. 9)技术制备了姜黄素纳米胶束滴眼液，在治疗效果性 评价研究中，姜黄素纳米胶束眼表给药可部分纠正角膜中的氧化还原失衡，但是因胶束不 能有效靶向进入线粒体，导致治疗效果有限。此外，山东省眼科研究所在后续开发过程中， 研究发现单纯基于聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物构建的胶束且其水溶 液在贮存过程中，环孢素A会逐渐从胶束中游离出来，其水溶液在室温下的有效稳定性只 有3个月。
【发明内容】
[0006] 针对上述问题，本发明的目的是提供一种姜黄素胶束滴眼液，改善姜黄素分子稳 定性，提高滴眼给药后的药物吸收率，同时提高滴眼液的贮存稳定性。
[0007] 本发明的另外一个目的是提供上述姜黄素胶束滴眼液的制备方法。
[0008] 本发明技术构思：将姜黄素制备为滴眼液能有效提高眼局部应用的疗效，将滴眼 给药后的姜黄素进一步有效地送至线粒体，则可进一步增强疗效，但如何改善姜黄素的水 溶性，又能保证其分子稳定性，提高吸收后线粒体亚细胞器的靶向性，同时还需要提高滴眼 液的贮存稳定性是该制剂问题的难点。研究发现，采用聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚 乙二醇共聚物包合姜黄素制备成胶束并采用地喹氯铵修饰胶束，不但能解决姜黄素的水溶 性问题，提高姜黄素分子稳定性，以及提高姜黄素胶束滴眼液的贮存稳定性，还能进一步改 变药物的角膜吸收后的分布特性，有效靶向于线粒体，提高姜黄素治疗糖尿病性角膜病变 的有效性。
[0009] 本发明的技术方案：一种姜黄素胶束滴眼液，包括姜黄素为主药以及防腐剂、等渗 调节剂，其特征在于还包括聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物为药物辅料， 地喹氯铵为线粒体靶向修饰剂和稳定剂，所述姜黄素主药和聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯 酯-聚乙二醇嵌段共聚物药物辅料质量比在1:12-1:20之间，所述地喹氯铵和聚乙烯己内 酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物药物辅料质量比在1:20-1:40之间。
[0010] 所述聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物中聚乙烯己内酰胺、聚乙 酸乙烯酯、聚乙二醇三者的质量比为57:30:13,共聚物总分子量100000-120000,临界胶束 浓度为 5. 〇-15mg/L。
[0011] 本发明的滴眼液的制备方法如下：将姜黄素、地喹氯铵和聚乙烯己内酰胺-聚乙 酸乙烯酯-聚乙二醇溶解到无水乙醇中，通过40°C水浴旋转真空蒸发乙醇在容器内部均匀 成膜，再加入蒸馏水以充分洗膜，水浴超声得胶束溶液，过滤冷冻干燥后得姜黄素胶束的干 粉制剂，再分散溶解于无菌缓冲液中，使得姜黄素最终质量百分浓度为0.5%，并加入防腐 剂、pH调节剂，等渗调节剂之后无菌过滤分装即可。其中防腐剂、pH调节剂，等渗调节剂可 以按照已有技术添加。
[0012] 上述姜黄素胶束滴眼液的制备方法，制得的姜黄素胶束粒径范围在70~150nm之 间。
[0013] 上述姜黄素胶束滴眼液的制备方法，使用的缓冲液为常用磷酸盐缓冲液或硼酸盐 缓冲液，pH值为7. 4。
[0014] 本发明制备的姜黄素胶束滴眼液，使得姜黄素在水溶液中有良好的溶解性，给药 浓度可达5mg/ml，且胶束粒径小，分布范围均一，药物稳定性良好。该姜黄素滴眼液不但降 低了给药刺激性、还提高了角膜对药物的吸收、降低了给药浓度、延长了药物作用时间、减 少了给药次数、提高了患者的顺从性，具有很好的经济性。
【附图说明】
[0015] 图1是实施例1制备的0. 5%姜黄素胶束滴眼液与未用地喹氯铵修饰的0. 5%姜黄 素胶束滴眼液对糖尿病小鼠角膜损伤修复作用对比图。
[0016] 图2是对图1各组小鼠角膜上皮缺损面积定量分析图。
[0017] 图3是实施例1制备的0. 5%姜黄素胶束滴眼液与未用地喹氯铵修饰的0. 5%姜黄 素胶束滴眼液细胞毒性实验结果图。
[0018] 图4是实施例1制备的0.5%姜黄素胶束滴眼液与未用地喹氯铵修饰的0.5%姜黄 素胶束滴眼液的稳定性实验结果图。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合附图并通过具体实施例来进一步详细说明本发明。
[0020] 实施例1: 将50mg姜黄素、30mg地喹氯铵和900mg聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇 (分子量118000)置于IOOmL圆底烧瓶中，加入IOmL无水乙醇，充分溶解后，40°C水浴旋转 真空蒸发无水乙醇，得到药物和共聚物的均匀分散薄膜，然后加入蒸馏水，充分洗膜，300w 功率水浴超声lOmin，得胶束溶液。将胶束溶液过0. 22Mm微孔滤膜后，冷冻干燥得胶束粉 末。然后用IOmL硼酸盐缓冲液分散溶解胶束粉末，加入防腐剂苯扎氯铵、等渗调节剂氯化 钠，PH调节为7. 4,无菌过滤分装即可。激光粒度仪测得姜黄素胶束平均粒径为93nm，分散 指数TOI=O. 067,分散均一性良好。将该姜黄素胶束滴眼剂在室温条件下保存5个月，姜黄 素从胶束中渗漏量小于10%。
[0021] 实施例2: 将50mg姜黄素、15mg地喹氯铵和600mg聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇 (分子量100000)置于IOOmL圆底烧瓶中，加入IOmL无水乙醇，充分溶解后，40°C水浴旋转 真空蒸发无水乙醇，得到药物和共聚物的均匀分散薄膜，然后加入蒸馏水，充分洗膜，300w 功率水浴超声lOmin，得胶束溶液。将胶束溶液过0. 22Mm微孔滤膜后，冷冻干燥得胶束粉 末。然后用IOmL硼酸盐缓冲液分散溶解胶束粉末，加入防腐剂苯扎氯铵、等渗调节剂氯化 钠，PH调节为7. 4,无菌过滤分装即可。激光粒度仪测得姜黄素胶束平均粒径为81nm，分散 指数TOI=O. 069,分散均一性良好。将该姜黄素胶束滴眼剂在室温条件下保存5个月，姜黄 素从胶束中渗漏量小于10%。
[0022] 实施例3: 将50mg姜黄素、50mg地喹氯铵和1000 mg聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇 (分子量120000)置于IOOmL圆底烧瓶中，加入IOmL无水乙醇，充分溶解后，40°C水浴旋转 真空蒸发无水乙醇，得到药物和共聚物的均匀分散薄膜，然后加入蒸馏水，充分洗膜，300w 功率水浴超声lOmin