4重量％、约0.25重量％、约0.26重量％、约0.27重量％、约0.28重量％、约0.29重量％、约0.3重量％、约0.31重量％、约0.32重量％、约0.33重量％、约0.34重量％、约0.35重量％、约0.36重量％、约0.37重量％、约0.38重量％、约0.39重量％、约0.4重量％、约0.41重量％、约0.42重量％、约0.43重量％、约0.44重量％、约0.45重量％、约0.46重量％、约0.47重量％、约0.48重量％、约0.49重量％、约0.5重量％、约0.51重量％、约0.52重量％、约0.53重量％、约0.54重量％、约0.55重量％、约0.56重量％、约0.57重量％、约0.58重量％、约0.59重量％、约0.6重量％、约0.61重量％、约0.62重量％、约0.63重量％、约0.64重量％、约0.65重量％、约0.66重量％、约0.67重量％、约0.68重量％、约0.69重量％、约0.7重量％、约0.71重量％、约0.72重量％、约0.73重量％、约0.74重量％、约0.75重量％、约0.76重量％、约0.77重量％、约0.78重量％、约0.79重量％、约0.8重量％、约0.81重量％、约0.82重量％、约0.83重量％、约0.84重量％、约0.85重量％、约0.86重量％、约0.87重量％、约0.88重量％、约0.89重量％、约0.9重量％、约0.91重量％、约0.92重量％、约0.93重量％、约0.94重量％、约0.95重量％、约0.96重量％、约0.97重量％、约0.98重量％、约
0.99重量％、约I重量％、约1.1重量％、约1.2重量％、约1.3重量％、约1.4重量％、约
1.5重量％、约1.6重量％、约1.7重量％、约1.8重量％、约1.9重量％或约2重量％的一种或多种抗氧化剂。
[0047]治疗方法
[0048]本文公开的组合物和制剂可以用于治疗脂肪肝疾病。在一个实施方案中，脂肪肝疾病是非酒精性脂肪肝疾病。在另一实施方案中，脂肪肝疾病是非酒精性脂肪性肝炎。在一个实施方案中，方法包括每天一次、每天两次、每天三次或每天三次以上向受试者施用如本文所公开的药物组合物。
[0049]如本文所用，“治疗”疾病、病症或病状至少部分包括:(I)预防疾病、病症或病状，即使得在暴露于或易患所述疾病、病症或病状，但是还没有经历所述疾病、病症或病状或显示其症状的哺乳动物中不会产生所述疾病、病症或病状的临床症状；(2)抑制疾病、病症或病状，即停滞或减慢所述疾病、病症或病状或其临床症状的发展；或者(3)缓解疾病、病症或病状，即，使得所述疾病、病症或病状或其临床症状消退。关于给定疾病或病症，术语“预防”意指:预防疾病开始发展，如果没发生什么，那么预防疾病或病症在可能易患所述病症或疾病，但是还没有被诊断为患有所述病症或疾病的受试者中发生，和/或如果已经存在的话，那么预防疾病/病症进一步发展。
[0050]如本文所用的“有效量”是指赋予受试者以治疗效果所需的活性组合物的量。如本文所用的“治疗有效量”是指将在一定程度上缓解所治疗的疾病、病症或病状的一种或多种症状的所施用药剂或化合物的足够量。在一些实施方案中，结果是疾病的征兆、症状或原因减少和/或缓解，或生物系统的任何其它所需变化。例如，在一些实施方案中，用于治疗用途的“有效量”是使病征在临床上显著减轻而无不当的不良副作用所需的包括如本文所公开的化合物的组合物的量。在一些实施方案中，在任何个别案例中，适当的“有效量”都使用技术如剂量递增研究来确定。术语“治疗有效量”包括例如防治有效量。在其它实施方案中，本文所公开的化合物如式(A)或式(I)化合物的“有效量”是有效实现所需药理学作用或治疗性改善而无不当的不良副作用的量。在其它实施方案中，应了解由于受试者的代谢、年龄、体重、一般状况、所治疗的病状、所治疗的病状的严重度以及处方医师的判断有变化，因此“有效量”或“治疗有效量”在受试者之间不同。在本文中，术语“药学上可接受的”意指所讨论的物质不会对受试者产生不可接受的毒性或与组合物的其它组分的相互作用。
[0051]不加以进一步描述，相信本领域的普通技术人员可以使用前述描述和以下说明性实施例来制备和利用本公开的药剂并且实践所要求保护的方法。提供以下工作实施例以有助于实践本公开，并且不将所述实施例视为以任何方式限制本公开的其余部分。
[0052]实施例
[0053]本研究的目的是考查15-0HEPA和EPA在非酒精性脂肪性肝炎的STAM模型中的作用。
[0054]方案
[0055]从在日本公司(JapanInc.)的 Charles River Laboratories (日本神奈川)获得无病原体的怀孕15天的C57BL/6小鼠。在雄性小鼠中通过在出生后单次皮下注射链唑霉素(STZ) (Sigma,USA)并且在4周龄(第28±2天)之后随意喂食高脂膳食(HFD ;CLEA)日本，日本)来建立NASH。在5周龄(第35±2天)时在起始治疗之前日将小鼠随机化到5组中，每组8只小鼠。
[0056]在治疗阶段，每天测量个别的体重以及临床行为征兆和存活率。
[0057]群组:
[0058]第I组(媒介物):向八只NASH小鼠从5周龄到9周龄每天一次口服施用体积为10mL/kg的媒介物[橄榄油]。
[0059]第2组(50mg/kg 15-0HEPA):向八只NASH小鼠从5周龄到9周龄每天一次口服施用剂量为50mg/kg的补充有15-0HEPA的媒介物。
[0060]第3组(500mg/kg 15-0HEPA):向八只NASH小鼠从5周龄到9周龄每天一次口服施用剂量为500mg/kg的补充有15-0HEPA的媒介物。
[0061]第4组(500mg/kg EPA):向八只NASH小鼠从5周龄到9周龄每天一次口服施用剂量为500mg/kg的补充有EPA的媒介物。
[0062]第5组(阳性对照物):向八只NASH小鼠从5周龄到9周龄每天一次口服施用剂量为10mg/kg的补充有替米沙坦的纯水。
[0063]在9周龄时，将所有小鼠都处死并且记录以下数据；
[0064]?个别肝脏重量
[0065]?肝与体重的比率
[0066]使用HE染色对肝切片进行组织病理学分析(以估算NAFLD活性评分)。对于HE染色，从预固定于鲍音液(Bouin' s solut1n)中的肝组织石蜡块切下切片，并且用利利-迈尔氏苏木精(Lillie-Mayer, s Hematoxylin) (Muto Pure Chemicals, Japan)和伊红溶液(ffako Pure Chemical Industries)进行染色。根据克莱纳准则(criteria of Kleiner)(Kleiner DE 等，Hepatology, 2005 ；41:1313)计算 NAFLD 活性评分(NAS)。
[0067]使用邦费罗尼多重比较检验(Bonferroni Multiple Comparison Test)进行统计检验。P值< 0.05便视为统计上显著。
[0068]结果
[0069]图1.1示出了任何实验组都没有明显的体重变化。
[0070]图L 2示出了仅15-0HEPA治疗组(500mg/kg)和阳性对照物(替米沙坦)的肝脏重量与媒介物对照物相比有明显减小。
[0071]图2.1和2.2示出了仅在15-0HEPA(500mg/kg)和阳性对照物(替米沙坦)组中，与媒介物对照物相比NAS有明显减小。
【主权项】
1.15-0HEPA，其用于治疗脂肪肝病症。2.根据权利要求1所述的用于所述用途的15-0HEPA，其中所述脂肪肝病症选自非酒精性脂肪肝疾病和非酒精性脂肪性肝炎。3.根据权利要求1或2所述的用于所述用途的15-0HEPA，其中所述15_0册?4包含(:1-(:5烧基酯。4.根据任何前述权利要求所述的用于所述用途的15-0HEPA，其中所述15-0HEPA呈药物组合物的形式。5.根据权利要求4所述的用于所述用途的15-0HEPA，其中所述药物组合物进一步包含药学上可接受的赋形剂。6.根据权利要求4或5所述的用于所述用途的15-0HEPA，其中所述药物组合物是口服药物组合物。7.根据任何前述权利要求所述的用于所述用途的15-0HEPA，其中所述15-0HEPA占所有所存在的脂肪酸的至少约90重量％。8.根据任何前述权利要求所述的用于所述用途的15-OHEPA，其中不存在大量的任何其它ω-3脂肪酸。9.根据任何前述权利要求所述的用于所述用途的15-ΟΗΕΡΑ，其中不存在其它ω-3脂肪酸。10.根据任何前述权利要求所述的用于所述用途的15-ΟΗΕΡΑ，其中存在约50mg至约3000mg 的所述 15-OHEPA。
【专利摘要】本发明涉及通过施用15-OHEPA来治疗脂肪肝病症如非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)以及其后遗症的组合物、制剂和方法。
【IPC分类】A61K31/557, A61P1/16
【公开号】CN105120872
【申请号】CN201480006443
【发明人】J·罗维, K·达菲, J·克莱麦克斯
【申请人】尊贵科学有限公司
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2014年1月24日
【公告号】CA2897343A1, EP2762143A1, EP2762143B1, US20150224076, WO2014118097A1